專利名稱：植酸酶微生物菌制劑及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種植酸酶微生物菌制劑。
背景技術(shù)：
增加土壤中有益微生物的數(shù)量，可以提高土壤肥力，如劉麗麗等人公開出版的著作《Soil Fertilily》(美國Nova出版社，2009 紐約)所述。通過增加土壤有益微生物的數(shù)量來提升土壤肥力的方法是一種發(fā)展綠色生態(tài)農(nóng)業(yè)的方法，是我國應(yīng)大力發(fā)展和扶持的方法。因為我國是世界上使用化肥、農(nóng)藥數(shù)量最多的國家。廣施化肥不僅造成了土壤污染，還加重了水體的富營養(yǎng)化污染，甚至影響到地下水和空氣。超高量施用化肥也破壞耕地的土壤結(jié)構(gòu)。降低農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)，病蟲害發(fā)生率提高。同時，化肥生產(chǎn)的超常發(fā)展，加速了礦質(zhì)資源的耗竭。日漸成為威脅農(nóng)業(yè)生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的一大問題。正確引導(dǎo)農(nóng)民合理調(diào)整施肥結(jié)構(gòu)、研制推廣肥效明顯無污染的新型肥料，以實現(xiàn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)增產(chǎn)增收、改善農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)、恢復(fù)和提高土壤可持續(xù)生產(chǎn)能力，是當(dāng)前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展方向。劉麗麗等人在2006年(植酸酶分泌菌株的篩選研究，天津師大學(xué)報，26(2)19-22 ；ISSN 1671-1114/CN 12-1337/N)公開報道了利用涂平板法從耕層土壤中篩選出了3株能分泌植酸酶和淀粉酶的芽孢桿菌(Bacillus)菌株。其中Bacillus Lip_3菌株，在植酸酶檢測培養(yǎng)基中水解圈直徑與菌落直徑比，即D/d的值最高。Bacillus Lip_3菌株回接土壤，具有提升土壤肥力，為植物生長發(fā)育提供磷營養(yǎng)，提高植物產(chǎn)量的作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供了一種植酸酶微生物菌制劑及制備方法。本發(fā)明可以促進(jìn)植物生長和提高作物的產(chǎn)量，具有可觀的經(jīng)濟效益和社會效益。本發(fā)明提供的一種植酸酶微生物菌制劑包括Bacillus Lip-3菌株，發(fā)酵培養(yǎng)基，Bacillus Lip-3 菌的濃度為 2 IOxlO8 個 /mL。發(fā)酵培養(yǎng)基各成分配比為牛肉膏0.3 0.5%，蛋白胨0.5 1.5%，NaCl 0. 4 0. 6%。本發(fā)明提供的一種植酸酶微生物菌制劑的制備方法包括如下步驟1)從組成為牛肉膏0.3%、蛋白胨1%、NaCl 0. 5%、瓊脂粉1. 5%和pH 7. 0 7. 2的斜面培養(yǎng)基的菌種上挑取一接菌環(huán)Bacillus Lip-3菌體接入50ml的液體培養(yǎng)基(牛肉膏0. 3%，蛋白胨1%，NaCl 0.5%，pH 7. 0 7. 2)中，37°C震蕩培養(yǎng)12h，即為種子液?？梢杂么朔ɡ^續(xù)擴大種子液。2)以6 10%的接種量將種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30 37°C發(fā)酵罐通氣培養(yǎng)2 6d，獲得植酸酶微生物菌劑。發(fā)酵培養(yǎng)基的各成分配比為牛肉膏0. 3%，蛋白胨1%，NaClO. 5%。培養(yǎng)基組成牛肉膏0. 3%，蛋白胨1%，NaCl 0. 5%, pH 7. 0 7. 2。Bacillus Lip-3 的濃度2 IOxlO8 個菌 /mL。所述的植酸酶微生物菌制劑與禽糞、農(nóng)作物秸稈制成的植酸酶生物肥料，可直接施用于農(nóng)作物。本發(fā)明提供了一種植酸酶微生物菌制劑用作植物生長調(diào)節(jié)劑，可促進(jìn)植物生長和提高作物產(chǎn)量，植酸酶微生物菌制劑能夠明顯促進(jìn)植株的生長發(fā)育，提高品質(zhì)。植酸酶微生物菌制劑用于農(nóng)業(yè)大棚的各種蔬菜瓜果的栽培，如黃瓜、西紅柿、小白菜、豆角、茄子、生菜、油麥菜、絲瓜、辣椒、油菜、甜瓜、草莓、葡萄等；用于大田作物，如玉米、小麥、大豆、甘蔗等；用于果樹，如桃樹、梨樹、棗樹、蘋果樹等。特別是對上海青的生長有促進(jìn)作用以及對黃瓜、西紅柿具有顯著的增產(chǎn)效果，具有可觀的經(jīng)濟效益和社會效益。


圖1上海青植株含磷量的測定結(jié)果。圖2上海青植株含氮量的測定結(jié)果。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，實施例僅為解釋性的，決不意味著它以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實施例1植酸酶微生物菌制劑的獲得方法一從斜面培養(yǎng)基(牛肉膏0.3%，蛋白胨1%，NaCl 0. 5%，瓊脂粉1. 5%，pH 7. 0 7.2。)的菌種上挑取一接菌環(huán)Bacillus Lip_3菌體(由本實驗篩選并保存，可以出售)接入50ml液體培養(yǎng)基(牛肉膏0. 3%，蛋白胨l%，NaCl 0. 5%,pH 7. 0 7. 2)中，37°C震蕩培養(yǎng)12h，即為種子液。500ml三角瓶加入300ml培養(yǎng)基(牛肉膏0. 3%，蛋白胨l%，NaC室10.5%, pH 7.0 7. 2)，以10%的接種量將種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，于37°C震蕩培養(yǎng)。獲得植酸酶微生物菌劑。實施例2植酸酶微生物菌制劑的獲得方法二以10%的接種量將Bacillus Lip_3菌的種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30°C發(fā)酵罐通氣培養(yǎng)4d。獲得植酸酶微生物菌劑。實施例3植酸酶微生物菌制劑的肥料取發(fā)酵罐通氣培養(yǎng)的Bacillus Lip_3菌體與雞糞、作物秸稈混合?；旌媳壤鼴acillus Lip-3菌體發(fā)酵液10%，雞糞50%，作物秸稈40%。固體發(fā)酵30d。獲得植酸酶生物肥料。 實施例4植酸酶微生物菌制劑的肥料取發(fā)酵罐通氣培養(yǎng)的Bacillus Lip_3菌體與豬糞、作物秸稈混合?；旌媳壤鼴acillus Lip-3菌體發(fā)酵液10%，豬糞50%，作物秸稈40%。固體發(fā)酵30d。獲得植酸酶生物肥料。實施例5植酸酶微生物菌制劑的肥料取發(fā)酵罐通氣培養(yǎng)的Bacillus Lip_3菌體與豬糞、雞糞、作物秸稈混合?；旌媳壤?Bacillus Lip-3菌體發(fā)酵液10%，豬糞30%，雞糞30%，作物秸稈30%。固體發(fā)酵30d。獲得植酸酶生物肥料。實施例6植酸酶微生物菌制劑對上海青苗期生長的影響1)實施例材料和方法
(1)供試土壤供試土壤采自天津師范大學(xué)生物科技園，其特性如下。土壤類型鹽化潮土 ；pH 7. 6 ；全氮(g/kg) :0. 94 ；速效磷(mg/kg) :5. 30 ；速效鉀(mg/kg) 106 ；有機質(zhì)(% ) 2. 94 ；含水率(% ) 8. 87。(2)植物種子上海青的學(xué)名是Brassica chinensis L.。商品名是上海青。種子購于南京市秋田種業(yè)研究所。(3)植酸酶微生物菌制劑(以實施例方法一獲得)(4)上海青植株葉綠素含量的測定丙酮提取法。操作步驟參見文獻(xiàn)(①宋冶軍，紀(jì)重光.現(xiàn)代分析儀器與測試方法[M],西安西北大學(xué)出版社，1994.②吳月燕，汪財生，吳秋峰.陰雨環(huán)境中葡萄的某些光合生理特性[J].園藝學(xué)報，2005，32 (32) :387-391.)。(5)上海青植株全氮含量的測定采用凱氏定氮法，以凱氏定氮儀進(jìn)行測定。儀器設(shè)備晟聲20孔石墨模塊自動消化裝置S20A型和晟聲全自動定氮儀K06C型。(6)上海青植株全磷含量的測定操作步驟參見張志良.植物生理學(xué)實驗指導(dǎo)(第4版)，高等教育出版社，ISBN 9787040272765,2010 年。(7)實驗設(shè)計將土壤按IOkg/盆分裝(盆高26. 0cm，上口直徑為25. 0cm，下口直徑為22. Ocm)。每盆播種20粒，出苗7d后間苗至10株/盆，植酸酶微生物菌劑施于種子正下方10 20cm處，植酸酶微生物菌劑用量為300kg/畝，不施加任何菌劑或有機肥或化肥為空白對照，每個處理7次重復(fù)。定時定量澆水。盆栽培養(yǎng)30d后收獲，分別測量株高，鮮重，生物量，葉綠素含量，植株含氮量，植株含磷量。2)結(jié)果與分析(1)植酸酶微生物菌劑對上海青生長的影響上海青培養(yǎng)30d后收獲，分別測量株高，鮮重，生物量，見表1。結(jié)果表明，植酸酶微生物菌劑對上海青的株高、地上鮮重、地下鮮重、地上生物量、地下生物量都有一定的促進(jìn)作用，但程度不同。在株高方面，植酸酶微生物菌劑處理的上海青平均株高為15. 33cm，顯著高于空白對照；在上海青地上部分鮮重方面，植酸酶微生物菌劑處理的平均地上鮮重為3. Mg，顯著高于空白對照；在上海青地下部分鮮重方面，植酸酶微生物菌劑處理的地下鮮重最大為0. 88g，顯著高于空白對照；在地上生物量方面，上海青的地上生物量為0. 583g，顯著高于空白對照；在地下生物量方面，植酸酶微生物菌劑處理的上海青也顯著高于空白對照。由此可見，植酸酶微生物菌劑對上海青的生長有一定的促進(jìn)作用。表1植酸酶微生物菌劑對上海青生長的影響結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種植酸酶微生物菌制劑，其特征在于它包括Bacillus Lip-3菌株，發(fā)酵培養(yǎng)基，Bacillus Lip-3 菌的濃度為 2 IOxlO8 個 /mL。
2.按照權(quán)利要求1所述的植酸酶微生物菌制劑，其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)基各成分配比為牛肉膏0. 3 0. 5%，蛋白胨0. 5 1. 5%, NaCl 0. 4 0. 6%。
3.—種權(quán)利要求1所述的植酸酶微生物菌制劑的制備方法，其特征在于它包括如下步 驟1)從組成為牛肉膏0.3%、蛋白胨l%、NaCl 0. 5%、瓊脂粉1. 5%和pH 7. 0 7. 2的斜面培養(yǎng)基的菌種上挑取一接菌環(huán)Bacillus Lip-3菌體接入50ml的液體培養(yǎng)基中，37°C震蕩培養(yǎng)12h，即為種子液；2)以6 10%的接種量將種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30 37°C發(fā)酵罐通氣培養(yǎng)2 6d，獲得植酸酶微生物菌劑。
4.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)基的各成分配比為牛肉膏 0. 3%，蛋白胨 1%，NaCl 0.5%。
5.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的液體培養(yǎng)基組成牛肉膏0.3%，蛋白胨 1%，NaCl 0. 5%, pH 7. 0 7. 2。
6.按照權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的獲得的植酸酶微生物菌劑中BacillusLip-3 的濃度2 IOxlO8 個菌 /mL。
7.—種權(quán)利要求1所述的植酸酶微生物菌制劑與畜禽糞、農(nóng)作物秸稈制成的植酸酶生物肥料。
8.權(quán)利要求1所述的植酸酶微生物菌制劑的應(yīng)用，其特征在于用作植物生長的調(diào)節(jié)劑。
9.按照權(quán)利要求8所述的的應(yīng)用，其特征在于用作上海青、黃瓜、西紅柿植物生長的調(diào)節(jié)劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植酸酶微生物菌制劑。它包括Bacillus Lip-3菌株，發(fā)酵培養(yǎng)基，Bacillus Lip-3菌的濃度為2～10x108個/mL。發(fā)酵培養(yǎng)基各成分配比為牛肉膏0.3～0.5％，蛋白胨0.5～1.5％，NaCl 0.4～0.6％。本發(fā)明可促進(jìn)植物生長和提高作物產(chǎn)量，提高品質(zhì)。用于農(nóng)業(yè)大棚的各種蔬菜瓜果的栽培，如黃瓜、西紅柿、小白菜、豆角、茄子、生菜、油麥菜、絲瓜、辣椒、油菜、甜瓜、草莓、葡萄等；用于大田作物，如玉米、小麥、大豆、甘蔗等；用于果樹，如桃樹、梨樹、棗樹、蘋果樹等。特別是對上海青的生長有促進(jìn)作用以及對黃瓜、西紅柿具有顯著的增產(chǎn)效果，具有可觀的經(jīng)濟效益和社會效益。
文檔編號A01N63/00GK102382782SQ20111031246
公開日2012年3月21日 申請日期2011年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月17日
發(fā)明者劉麗麗, 陳立新 申請人:天津師范大學(xué)