一種提高魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種提高魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑及其制備方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 由于環(huán)境保護(hù)意識(shí)不強(qiáng)，中國(guó)許多水質(zhì)都遭到污染，需要有效治療，改善水質(zhì)。目 前大多采用包括網(wǎng)欄、沉淀、過(guò)濾、工程性措施等物理方法，只能清除一些可見的懸浮物 (糞便、殘餌等）。藥物消毒等化學(xué)方法可以有效去除部分有害物質(zhì)，但如果處理操作不當(dāng)， 很可能會(huì)出現(xiàn)藥物的毒、副作用與耐藥性的產(chǎn)生，需要尋找副作用小的改善水質(zhì)的藥劑。
[0003] 另一方面，由于水質(zhì)遭到污染，許多魚類的生存現(xiàn)狀堪憂，提高魚類免疫力非常緊 迫。目前常用的是在飼料中添加部分糖類物質(zhì)或者幾種滅活疫苗等措施，但是，飼料添加劑 使用不當(dāng)，造成水體內(nèi)飼料過(guò)剩，會(huì)污染養(yǎng)殖水體；部分滅活疫苗的研制，耗時(shí)長(zhǎng)，造價(jià)高， 且對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)存在一定的風(fēng)險(xiǎn)，需要尋找副作用小的提高魚類免疫力的藥劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種提高副作用小的魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑 及其制備方法和用途。
[0005] 本發(fā)明提高魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑，它是以中藥為原料，經(jīng)益生菌發(fā) 酵制備而成，其中，所述中藥包括如下重量配比的組分：枸杞子13~20份、甘草3-10、五倍 子13~40份、黃芪6~10份。
[0006] 優(yōu)選地，所述中藥包括如下重量配比的組分：枸杞子14~17份、甘草4-6、五倍子 14~36份、黃芪6~7份。
[0007] 其中，所述益生菌的用量為中藥重量的1~3%。
[0008] 所述益生菌包括如下重量配比的組分：嗜酸乳桿菌1~3份，唾液乳桿菌1~3 份，枯草芽孢桿菌1~3份，短小芽孢桿菌1~3份。優(yōu)選地，所述益生菌包括如下重量 配比的組分：嗜酸乳桿菌0. 063~0. 09份，唾液乳桿菌0. 010~0. 030份，枯草芽孢桿菌 0· 021~0· 077份，短小芽孢桿菌0· 010~0· 053份。
[0009] 其中，所述益生菌包括如下重量份的組分：嗜酸乳桿菌0. 063~0. 09份，唾液乳 桿菌0. 010~0. 030份，枯草芽孢桿菌0. 021~0. 077份，短小芽孢桿菌0. 010~0. 053 份。
[0010] 它是由如下方法制備得到：
[0011] (1)按配比稱取中藥和益生菌；
[0012] (2)原料處理：將中藥粉碎，加入中藥重量35%的麥麩和7~10倍重量的水，混 勻，50~70°C恒溫水浴lOmin，用7層紗布或者8層紗布過(guò)濾，得濾渣；
[0013] (3)制備菌懸液：在益生菌中加入3倍重量的水，混勻，得菌懸液；
[0014] (4)發(fā)酵：將步驟⑵的濾渣與步驟⑶的菌懸液混勾，密封，在37°C條件下培養(yǎng) 24h〇
[0015] 其中，所述劑型固體制劑或者液體制劑。優(yōu)選地，所述固體制劑為散劑。
[0016] 本發(fā)明提高魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑的制備方法，它包括如下操作步 驟：
[0017] (1)按配比稱取中藥和益生菌；
[0018] (2)原料處理：將中藥粉碎，加入中藥重量35%的麥麩和7~10倍重量的水，混 勻，50~70°C恒溫水浴lOmin，用7層紗布或者8層紗布過(guò)濾，得濾渣；
[0019] (3)制備菌懸液：在益生菌中加入3倍重量的水，混勻，得菌懸液；
[0020] (4)發(fā)酵：將步驟⑵的濾渣與步驟⑶的菌懸液混勾，密封，在37°C條件下培養(yǎng) 24h〇
[0021] 本發(fā)明還提供了前述中藥微生物發(fā)酵制劑在制備提高魚類免疫力的藥品中的用 途。
[0022] 本發(fā)明還提供了前述中藥微生物發(fā)酵制劑在制備改善水質(zhì)的藥品或者日化用品 中的用途。
[0023] 本發(fā)明中藥微生物發(fā)酵制劑可以提高魚類免疫力。
[0024] 綜上，本發(fā)明中藥微生物發(fā)酵劑可以改善水質(zhì)，同時(shí)能夠提高魚體免疫力，促進(jìn)水 產(chǎn)動(dòng)物健康成長(zhǎng)，且本發(fā)明中藥微生物發(fā)酵劑的主要成分是嗜酸乳桿菌等益生菌和中藥， 副作用小，臨床應(yīng)用前景良好。
[0025] 以下結(jié)合附圖和實(shí)施例的【具體實(shí)施方式】再對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì) 說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。在不脫離本發(fā)明上述 技術(shù)思想情況下，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段做出的各種替換或變更，均應(yīng)包括 在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
【附圖說(shuō)明】
[0026] 圖1鯉魚水池氨氮含量的變化情況
[0027] 圖2鯉魚水池亞硝酸鹽變化情況
[0028] 圖3鯉魚水池溶解氧含量的變化情況
[0029] 圖4鯉魚水池硫化物含量的變化情況
[0030] 圖5鯉魚水池 pH值變化情況
【具體實(shí)施方式】
[0031] 實(shí)施例1本發(fā)明中藥微生物發(fā)酵制劑的制備
[0032] I. 1材料及儀器
[0033] 中草藥：枸杞子17份，甘草4份，五倍子36份，黃苗7份，均重約為2. 5g ;麥 麩2. 9g，蒸餾水92. 3g，益生菌：嗜酸乳桿菌0. 063g，唾液乳桿菌0. 030g，枯草芽孢桿菌 0.077g，短小芽孢桿菌0.053g。植物粉碎機(jī)，水浴鍋，恒溫培養(yǎng)箱。
[0034] 1. 2.方法
[0035] 將四種中草藥70°C烘干4h，混合后用植物粉碎機(jī)粉碎，倒入錐形瓶，加入35%混 合中草藥重量麥麩約2. 9g和7倍中草藥與麥麩混合重量蒸餾水約92. 3g，混合均勻，70°C恒 溫水浴lOmin，再用8層紗布過(guò)濾除去43g的蒸餾水。將四種益生菌分別混合入一個(gè)EP管 里，加入3倍益生菌重量的雙蒸水約0. 6g，制成菌懸液。將菌懸液加入裝有中草藥的錐形瓶 中，用封口膜封住瓶口，再蓋上棉塞，置恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37°C恒溫培養(yǎng)24h，每隔4h將錐形瓶 置于37 °C水浴鍋內(nèi)輕搖Imin。
[0036] 以下通過(guò)試驗(yàn)例具體說(shuō)明本發(fā)明的有益效果
[0037] 實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明中藥微生物發(fā)酵制劑在鯉魚養(yǎng)殖中的應(yīng)用
[0038] 復(fù)方制劑：實(shí)施例1制備的中藥微生物發(fā)酵劑。
[0039] 一、實(shí)驗(yàn)方法
[0040] 1. 1試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理
[0041] 試驗(yàn)共設(shè)計(jì)4個(gè)處理對(duì)照組、A組（復(fù)方發(fā)酵制劑組）、B組（溫和氣單胞菌加復(fù) 方發(fā)酵制劑組）、c組（溫和氣單胞菌組），試驗(yàn)魚均重為50g的鯉魚60尾，隨機(jī)分成四組， 放入4個(gè)不同處理的水族箱（0. 68mX0. 48mX0. 35m)中，有效體積為114L。試驗(yàn)前水池充 分曝氣除碌7d，鯉魚飼料馴化7d，正式試驗(yàn)從2014年11月6日開始，共31d。每天投喂3 次，時(shí)間為8:30、13:30、18:30，連續(xù)投喂16(1，第16-25(1之內(nèi)不投喂，第26日投喂1(1，后期 均不投喂益生菌。按照復(fù)方制劑篩選時(shí)用藥劑量比例，設(shè)置投菌量為16X106個(gè)/ml。試驗(yàn) 期間，平均水溫（20±2)，每隔3d換1/3水，不吸污，除測(cè)定水樣的2h前不充氣外，其他時(shí)間 連續(xù)充氧。
[0042] 1 · 2水樣的收集和分析
[0043] 分別在試驗(yàn)的5、8、12、14、16、26、31d的下午18 :00定點(diǎn)0. 25m水深處采取水樣， 每次采集水樣地點(diǎn)相同。取水樣前2h停止充氣，且將養(yǎng)殖水體充分混合均勻。采集水樣 200ml，于4000r/min，離心5min，取上清液。采用pH-3C酸度計(jì)測(cè)定養(yǎng)殖水體中的pH值； 采用碘量法測(cè)定水體中溶氧含量；采用水楊酸法測(cè)定水體中氨氮含量；采用重氮-偶合法 測(cè)定水體中亞硝酸鹽含量；采用DH)法測(cè)定水體中的硫化物含量。
[0044] 1. 3鯉魚血清生理生化指標(biāo)的測(cè)定
[0045] 試驗(yàn)第5、12、16、26、31天測(cè)定鯉魚各種免疫指標(biāo)。每次從每組挑選體重均勻的 6尾魚，用1.0 ml注射器尾靜脈取血，室溫靜置2h，待其凝血后用冷凍離心機(jī)4°C，4000rpm 離心10min，分離血清，將血清分為3份，0. 2ml用于測(cè)定堿性磷酸酶（AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)、總超氧化物歧化酶（T-SOD)、過(guò)氧化氫酶（CAT)、總抗氧化能力（T-AOC)。
[0046] 采用試劑盒測(cè)定鯉魚血清AKP、ACP、T-SOD、CAT、T-AOC活性。
[0047] 1. 4統(tǒng)計(jì)分析
[0048] 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17. O軟件進(jìn)行單因子方差（ANOVA)分析，并用Duncan進(jìn)行組 間多重比較，結(jié)果均以平均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示，顯著性差異為0. 05。
[0049] 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0050] 1對(duì)水質(zhì)的影響
[0051] 1. 1鯉魚水池氨氮含量的變化情況
[0052] 表1鯉魚水池氨氮含量的變化情
[0053]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種提高魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑，其特征在于：它是以中藥為原料，經(jīng) 益生菌發(fā)酵制備而成，其中，所述中藥包括如下重量配比的組分：枸杞子14~17份、甘草 4-6、五倍子14~36份、黃苗6~7份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于：所述益生菌的用量為中藥重量的1~
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制劑，其特征在于：所述益生菌包括如下重量配比的組分：嗜 酸乳桿菌0. 06~0. 10g，唾液乳桿菌0.0 l~0. 04g,枯草芽孢桿菌0. 02~0. 08g,短小芽 抱桿菌〇? 01~〇? 06g。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制劑，其特征在于：所述益生菌包括如下重量配比的組分：嗜 酸乳桿菌0. 063~0. 09份，唾液乳桿菌0. 010~0. 030份，枯草芽孢桿菌0. 021~0. 077 份，短小芽孢桿菌0. 010~0. 053份。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1~4任意一項(xiàng)所述的制劑，其特征在于：它是由如下方法制備得到： (1) 按配比稱取中藥和益生菌； (2) 原料處理：將中藥粉碎，加入中藥重量35%的麥麩和7~10倍重量的水，混勻， 50~70°C恒溫水浴lOmin，用7層紗布或者8層紗布過(guò)濾，得濾渣； (3) 制備菌懸液：在益生菌中加入3倍重量的水，混勻，得菌懸液； ⑷發(fā)酵：將步驟⑵的濾渣與步驟⑶的菌懸液混勾，密封，在37°C條件下培養(yǎng)24h。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1~5任意一項(xiàng)所述的保健品或藥物組合物，其特征在于：所述劑型 固體制劑或者液體制劑。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的保健品或藥物組合物，其特征在于：所述固體制劑為散劑。
8. 權(quán)利要求1~7任意一項(xiàng)所述提高魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑的制備方法， 其特征在于：它包括如下操作步驟： (1) 按配比稱取中藥和益生菌； (2) 原料處理：將中藥粉碎，加入中藥重量35%的麥麩和7~10倍重量的水，混勻， 50~70°C恒溫水浴lOmin，用7層紗布或者8層紗布過(guò)濾，得濾渣； (3) 制備菌懸液：在益生菌中加入3倍重量的水，混勻，得菌懸液； ⑷發(fā)酵：將步驟⑵的濾渣與步驟⑶的菌懸液混勾，密封，在37°C條件下培養(yǎng)24h。
9. 權(quán)利要求1~8任意一項(xiàng)所述中藥微生物發(fā)酵制劑在制備提高魚類免疫力的藥品中 的用途。
10. 權(quán)利要求1~8任意一項(xiàng)所述中藥微生物發(fā)酵制劑在制備改善水質(zhì)的藥品或者日 化用品中的用途。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種提高魚類免疫力的中藥微生物發(fā)酵制劑，它是以中藥為原料，經(jīng)益生菌發(fā)酵制備而成，其中，所述中藥包括如下重量配比的組分：枸杞子14～17份、甘草4-6、五倍子14～36份、黃芪6～7份。本發(fā)明中藥微生物發(fā)酵劑可以改善水質(zhì)，同時(shí)能夠提高魚體免疫力，促進(jìn)水產(chǎn)動(dòng)物健康成長(zhǎng)，且本發(fā)明中藥微生物發(fā)酵劑的主要成分是嗜酸乳桿菌等益生菌和中藥，副作用小，臨床應(yīng)用前景良好。
【IPC分類】A61P37-04, A23K1-00, A61K8-99, A61K35-747, A61K35-64, A61K35-742, A61K8-97, A23K1-14, A61K36-815, A23K1-18, A61K8-98
【公開號(hào)】CN104855703
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510185496
【發(fā)明人】王利, 李雪峰
【申請(qǐng)人】西南民族大學(xué)
【公開日】2015年8月26日
【申請(qǐng)日】2015年4月17日