專利名稱：魚(yú)類良種選育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種魚(yú)類良種選育方法，屬于動(dòng)物繁殖技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
大口黑鱸(Micropterus salmoides)俗稱加州鱸，又名大嘴鱸，黑鱸，屬于鱸形目， 太陽(yáng)魚(yú)科，是一種純淡水的廣溫性肉食性魚(yú)類。大口黑鱸原產(chǎn)于北美洲淡水水域，后引入英國(guó)、法國(guó)、西非、巴西、菲律賓等國(guó)及香港、臺(tái)灣等地區(qū)養(yǎng)殖，其養(yǎng)殖水域幾乎遍布全球。大口黑鱸從二十世紀(jì)80年代初引入我國(guó)內(nèi)地后，已推廣到全國(guó)許多省市，成為我國(guó)特種水產(chǎn)品之一。大口黑鱸肉質(zhì)堅(jiān)實(shí)細(xì)嫩、肉味鮮美、清香、營(yíng)養(yǎng)豐富，價(jià)格較高，十分暢銷。大口黑鱸易馴化、適應(yīng)性強(qiáng)、病害少、易起捕，既可池塘單養(yǎng)、網(wǎng)箱單養(yǎng)，也可在親魚(yú)塘中混養(yǎng)，并能有效地控制魚(yú)塘中的野雜魚(yú)，是值得大力推廣的優(yōu)良品種。1983年從臺(tái)灣引進(jìn)大陸以來(lái)，大口黑鱸的養(yǎng)殖得到蓬勃發(fā)展，目前全國(guó)的產(chǎn)量超過(guò)16萬(wàn)噸，其中江蘇地區(qū)養(yǎng)殖量占35-40%。從1983年引進(jìn)至今，大口黑鱸的種質(zhì)一直沒(méi)有得到更新，選育工作也沒(méi)有開(kāi)展。 隨著大口黑鱸養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大，很多苗種場(chǎng)在利益的驅(qū)動(dòng)下，不注重苗種種質(zhì)問(wèn)題。受近親繁殖等因素影響，大口黑鱸苗種質(zhì)量明顯下降，生長(zhǎng)性狀出現(xiàn)退化，已經(jīng)給養(yǎng)殖戶造成不小的經(jīng)濟(jì)損失，因此迫切需要開(kāi)展大口黑鱸育種研究，選育出優(yōu)良新品系，以適應(yīng)大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展需要。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明目的在于提供一種魚(yú)類良種選育方法，從而選育出抗病、高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的適合我國(guó)淡水養(yǎng)殖環(huán)境的大口黑鱸品種。為了達(dá)到以上目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一種魚(yú)類良種選育方法，包括以下步驟
a.親魚(yú)的選擇在所有親魚(yú)中，選出活潑、遺傳性好、體重大于平均體重15-20%的親魚(yú)，作為進(jìn)行繁殖的親本；
b.親本配組對(duì)雌雄親本進(jìn)行配組，每組中雌雄親本的比例為2:1；
c.親本標(biāo)記對(duì)每尾親本進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記，每尾親本具有獨(dú)立的標(biāo)記號(hào)；
d.構(gòu)建家系親本性腺成熟后，對(duì)親本進(jìn)行人工注射激素溶液，雌雄親本采用人工授精獲得受精卵，進(jìn)行孵化、培育，每一對(duì)親本的后代分別飼養(yǎng)，建立家系，不同家系的飼養(yǎng)密度保持相同；自親本子代的重量達(dá)到50g至養(yǎng)成的過(guò)程中，對(duì)不同家系中的每尾魚(yú)進(jìn)行標(biāo)記， 每個(gè)個(gè)體具有獨(dú)立的標(biāo)記號(hào)，每個(gè)個(gè)體具有獨(dú)立的標(biāo)記號(hào)，然后混合養(yǎng)在同一池塘中，養(yǎng)殖期間不斷淘汰，剩余家系作為下一代選育的基本家系；
e.良種選育在夏花階段對(duì)各基本家系分別進(jìn)行優(yōu)選，在1齡魚(yú)階段對(duì)各基本家系在夏花階段選出的親魚(yú)分別進(jìn)行優(yōu)選，在2齡魚(yú)階段對(duì)各基本家系在1齡魚(yú)階段選出的親魚(yú)分別進(jìn)行優(yōu)選，最后從各基本家系成魚(yú)中挑選出活潑、遺傳性好、體重大于平均體重15-20% 的親魚(yú)，作為進(jìn)行下一代繁殖的親本，重復(fù)步驟b至步驟d，繼續(xù)進(jìn)行選育。夏花指春季孵化的魚(yú)苗，經(jīng)過(guò)20 30天飼養(yǎng)后在夏季出池的魚(yú)種；1齡魚(yú)指將夏花經(jīng)過(guò)3 5個(gè)月的飼養(yǎng)，稱為1齡魚(yú)；2齡魚(yú)指將1齡魚(yú)種再飼養(yǎng)一年即為2齡魚(yú)。進(jìn)一步地，步驟a和步驟e中，運(yùn)用微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行遺傳檢測(cè)確定遺傳性能的優(yōu)劣。微衛(wèi)星標(biāo)記又稱為短串聯(lián)重復(fù)序列或簡(jiǎn)單重復(fù)序列，是均勻分布于真核生物基因組中的簡(jiǎn)單重復(fù)序列，由2 6個(gè)核苷酸的串聯(lián)重復(fù)片段構(gòu)成。重復(fù)單位的重復(fù)次數(shù)在個(gè)體間呈高度變異性并且數(shù)量豐富，因此微衛(wèi)星標(biāo)記可以區(qū)別個(gè)體間差異。微衛(wèi)星位點(diǎn)通常通過(guò) PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)電泳分析并根據(jù)大小分離等位基因進(jìn)行檢測(cè)。更進(jìn)一步地，步驟b和步驟d中，采用PIT電子標(biāo)記對(duì)每尾親本進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記。PIT 電子標(biāo)記是一種封裝在玻璃管內(nèi)的射頻芯片，每個(gè)芯片帶有獨(dú)立的序號(hào)信息，芯片通過(guò)注射器植入動(dòng)植物體內(nèi)，通過(guò)讀卡器讀出芯片序號(hào)信息來(lái)區(qū)分一個(gè)群體內(nèi)的不同個(gè)體。進(jìn)一步地，步驟d中的激素溶液為絨毛膜HCG、絨毛膜促性腺激素類似物L(fēng)RH-A和地歐酮DOM的混合物。更進(jìn)一步地，激素溶液的注射劑量為雌魚(yú)親本每千克體重注射絨毛膜 800 士 100UI、絨毛膜促性腺激素類似物10 士 2 μ g、地歐酮10 士 ang，雄魚(yú)親本每千克體重注射絨毛膜400 士 50UI、絨毛膜促性腺激素類似物5 士 1 μ g、地歐酮5 士 lmg。進(jìn)一步地，步驟d中所述的人工授精包括以下步驟擠壓雌魚(yú)的腹部采集成熟卵， 保存在低溫下；人工擠壓雄魚(yú)，擠出精液；立即混合成熟的精子和卵，進(jìn)行攪拌。 優(yōu)選地，步驟e中的在夏花階段對(duì)各基本家系分別進(jìn)行優(yōu)選，其方法為在魚(yú)苗長(zhǎng)至3士0. 5cm時(shí)，將大個(gè)體篩選出來(lái)，保持魚(yú)苗個(gè)體大小一致，測(cè)量魚(yú)苗的全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體寬和體重，選擇各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)秀的，根據(jù)需要決定數(shù)量。更優(yōu)地，步驟e中的在1齡魚(yú)和2齡魚(yú)階段對(duì)各基本家系分別進(jìn)行優(yōu)選，其方法為測(cè)量魚(yú)苗的全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體寬和體重，選擇各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)秀的，根據(jù)需要決定數(shù)量。優(yōu)選地，步驟e中，最后每個(gè)家系成魚(yú)所選用作為親本的數(shù)量為1至3尾。本發(fā)明通過(guò)采用以上技術(shù)方案，通過(guò)對(duì)養(yǎng)殖大口黑鱸建立家系，開(kāi)展大口黑鱸家系間的交配，選育出優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的適合我國(guó)養(yǎng)殖環(huán)境的大口黑鱸新品種。
具體實(shí)施例方式下面對(duì)本發(fā)明的較佳實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)闡述，以使本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特征能更易于被本領(lǐng)域技術(shù)人員理解，從而對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍做出更為清楚明確的界定。一種魚(yú)類良種選育方法，包括以下步驟
a.親魚(yú)的選擇收集200對(duì)大口黑鱸，采用本實(shí)驗(yàn)室開(kāi)發(fā)的微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)這些大口黑鱸進(jìn)行了遺傳分析，分析結(jié)果顯示，這些魚(yú)具有較高的遺傳多樣性。然后從中優(yōu)選出行動(dòng)活潑、遺傳性能好，體重大于平均體重15 20%的100對(duì)親魚(yú)作為備選親本。b.親本配組對(duì)雌雄親本進(jìn)行配組，每組中雌雄親本的比例為2:1。c.親本標(biāo)記采用PIT電子標(biāo)記對(duì)每尾親本進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記，每尾親本具有獨(dú)立的標(biāo)記號(hào)。d.構(gòu)建家系親本性腺成熟后，對(duì)親本進(jìn)行人工注射激素溶液，雌雄親本采用人工授精獲得受精卵，自孵化至育苗、魚(yú)種培育和1齡魚(yú)培育，每一對(duì)親本的后代分別飼養(yǎng)，建立家系，不同家系的飼養(yǎng)密度保持相同；自大口黑鱸子代重量達(dá)到50g至養(yǎng)成的過(guò)程中，對(duì)不同家系中的每尾親本進(jìn)行PIT電子標(biāo)記，每個(gè)個(gè)體具有獨(dú)立的標(biāo)記號(hào)，然后混合養(yǎng)在同一池塘中，養(yǎng)殖期間不斷淘汰，剩余60個(gè)家系作為下一代選育的基本家系。其中，用于催熟的激素溶液為絨毛膜HCG、絨毛膜促性腺激素類似物L(fēng)RH-A和地歐酮DOM的混合物，其注射劑量為雌魚(yú)親本每千克體重注射絨毛膜800士 100UI、絨毛膜促性腺激素類似物10 士 2yg、地歐酮10 士 ang，雄魚(yú)親本每千克體重注射絨毛膜400 士 50UI、絨毛膜促性腺激素類似物5 士 1 μ g、地歐酮5 士 lmg。人工授精包括以下步驟擠壓雌魚(yú)的腹部采集成熟卵，保存在低溫下；人工擠壓雄魚(yú)，擠出精液；立即混合成熟的精子和卵，進(jìn)行攪拌。e.良種選育在大口黑鱸生長(zhǎng)的夏花、1齡魚(yú)、2齡魚(yú)階段是家系選育的關(guān)鍵時(shí)期， 進(jìn)行優(yōu)選
①夏花生長(zhǎng)階段的優(yōu)選首先選擇魚(yú)苗活力強(qiáng)，游動(dòng)正常，無(wú)畸形的家系作為選擇家系，培育至夏花階段，測(cè)量魚(yú)苗的全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體寬和體重，從中篩選出個(gè)體較大、體色較好的10000尾左右進(jìn)行繼續(xù)培養(yǎng)；
②1齡魚(yú)階段的優(yōu)選大口黑鱸在長(zhǎng)至50g時(shí)進(jìn)行一次選擇，測(cè)量魚(yú)苗的全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、 體寬和體重，篩選出個(gè)體較大、體色較好的5000尾左右進(jìn)行標(biāo)記養(yǎng)殖；
③2齡魚(yú)階段的優(yōu)選養(yǎng)殖至2齡對(duì)大口黑鱸家系運(yùn)用同樣的篩選方法，從60個(gè)家系中挑選個(gè)體較大、行動(dòng)活潑400-500對(duì)大口黑鱸。采用微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行遺傳檢測(cè)后，挑選 100-200對(duì)遺傳性能好的作為備用親魚(yú)，其中每個(gè)家系所選用作為親本的數(shù)量為1至3尾， 然后配組、育苗，繼續(xù)進(jìn)行選育，每次淘汰的大口黑鱸用于生產(chǎn)或銷售。雌雄魚(yú)的交配，按照1條雄魚(yú)隨機(jī)地與2條雌魚(yú)交配的原則，這2條雌魚(yú)的后代為同父異母的半同胞家系。在進(jìn)行正常選育的過(guò)程中，要盡量避免半同胞或全同胞家系等親緣關(guān)系近的大口黑鱸交配，從而防止近交衰退。本實(shí)施例中所述的方案適用于有較大規(guī)模的良種場(chǎng)或國(guó)家良種基地進(jìn)行大口黑鱸的良種選育。以上實(shí)施方式只為說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn)，其目的在于讓熟悉此項(xiàng)技術(shù)的人了解本發(fā)明的內(nèi)容并加以實(shí)施，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，凡根據(jù)本發(fā)明精神實(shí)質(zhì)所做的等效變化或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種魚(yú)類良種選育方法，包括以下步驟a.親魚(yú)的選擇在所有親魚(yú)中，選出活潑、遺傳性好、體重大于平均體重15-20%的親魚(yú)，作為進(jìn)行繁殖的親本；b.親本配組對(duì)雌雄親本進(jìn)行配組，每組中雌雄親本的比例為2:1；c.親本標(biāo)記對(duì)每尾親本進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記，每尾親本具有獨(dú)立的標(biāo)記號(hào)；d.構(gòu)建家系親本性腺成熟后，對(duì)親本人工注射激素溶液，雌雄親本采用人工授精獲得受精卵，進(jìn)行孵化、培育，每一對(duì)親本的子代分別飼養(yǎng)，建立家系，不同家系的飼養(yǎng)密度保持相同；自親本子代的重量達(dá)到50g至養(yǎng)成的過(guò)程中，對(duì)不同家系中的每尾魚(yú)進(jìn)行標(biāo)記，每個(gè)個(gè)體具有獨(dú)立的標(biāo)記號(hào)，然后混合養(yǎng)在同一池塘中，養(yǎng)殖期間不斷淘汰，剩余家系作為下一代選育的基本家系；e.良種選育在夏花階段對(duì)各所述的基本家系分別進(jìn)行優(yōu)選，在1齡魚(yú)階段對(duì)各基本家系在夏花階段選出的魚(yú)種分別進(jìn)行優(yōu)選，在2齡魚(yú)階段對(duì)各基本家系在1齡魚(yú)階段選出的魚(yú)種分別進(jìn)行優(yōu)選，最后從各基本家系成魚(yú)中挑選出活潑、遺傳性好、體重大于平均體重 15-20%的親魚(yú)，作為進(jìn)行下一代繁殖的親本，重復(fù)步驟b至步驟d，繼續(xù)進(jìn)行選育。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于步驟a和步驟e中，運(yùn)用微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行遺傳檢測(cè)確定遺傳性能的優(yōu)劣。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于步驟b和步驟d中，采用PIT 電子標(biāo)記對(duì)每尾親本進(jìn)行個(gè)體標(biāo)記。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于步驟d中所述的激素溶液為絨毛膜HCG、絨毛膜促性腺激素類似物L(fēng)RH-A和地歐酮DOM的混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于所述的激素溶液的注射劑量為雌魚(yú)親本每千克體重注射絨毛膜800士 100UI、絨毛膜促性腺激素類似物10士2yg、 地歐酮10士ang，雄魚(yú)親本每千克體重注射絨毛膜400士50UI、絨毛膜促性腺激素類似物 5士 lyg、地歐酮 5士 lmg。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于步驟d中所述的人工授精包括以下步驟擠壓雌魚(yú)的腹部采集成熟卵，保存在低溫下；人工擠壓雄魚(yú)，擠出精液；立即混合成熟的精子和卵，進(jìn)行攪拌。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于步驟e中所述的在夏花階段對(duì)各基本家系分別進(jìn)行優(yōu)選，其方法為在魚(yú)苗長(zhǎng)至3士0. 5cm時(shí)，將大個(gè)體篩選出來(lái)，保持魚(yú)苗個(gè)體大小一致，測(cè)量魚(yú)苗的全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體寬和體重，選擇各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)秀的，根據(jù)需要決定數(shù)量。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于步驟e中所述的在1齡魚(yú)和 2齡魚(yú)階段對(duì)各基本系分別進(jìn)行優(yōu)選，其方法為測(cè)量魚(yú)苗的全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體寬和體重，選擇各項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)秀的，根據(jù)需要決定數(shù)量。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的魚(yú)類良種選育方法，其特征在于步驟e中，最后每個(gè)家系成魚(yú)所選用作為親本的數(shù)量為1至3尾。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種魚(yú)類良種選育方法，包括以下步驟a．親魚(yú)的選擇；b．親本配組；c．親本標(biāo)記；d．構(gòu)建家系；e．良種選育。本發(fā)明通過(guò)采用以上技術(shù)方案，通過(guò)對(duì)養(yǎng)殖大口黑鱸建立家系，開(kāi)展大口黑鱸家系間的交配，選育出優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的適合我國(guó)養(yǎng)殖環(huán)境的大口黑鱸新品種。
文檔編號(hào)A01K61/00GK102349462SQ20111025137
公開(kāi)日2012年2月15日 申請(qǐng)日期2011年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月30日
發(fā)明者宣云峰, 徐海華, 王榮泉 申請(qǐng)人:吳江市水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司