專利名稱：一種深紅蟲草及利用其制備卵孢菌素的方法和其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一株蟲草屬菌株-深紅蟲草 (Cordycepscardinalis)C033及利用該菌株發(fā)酵制備真菌毒素卵孢菌素(oosporein)的方法。本發(fā)明還涉及上述深紅蟲草C033作為生物防治劑的應(yīng)用和作為生物防治劑的活性成份。
背景技術(shù)：
生物防治是指利用有益生物及其代謝產(chǎn)物和基因產(chǎn)品等控制有害生物的方法。生物防治具有許多優(yōu)于化學(xué)防治的特點，如對人畜安全，不污染環(huán)境，不會(或較少)產(chǎn)生抗性，以及由于僅殺傷或抑制防治對象，因此，能參與生態(tài)環(huán)境的調(diào)控，保持生態(tài)平衡，有利于農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展，提高經(jīng)濟效益、社會效益和生態(tài)效益，發(fā)展前景廣闊。1971年建立了生物防治國際組織(International Organization for Biological Control，I0BC)，并在世界各大區(qū)設(shè)立地區(qū)分部。此后世界生物防治發(fā)展極為迅速，在宏觀決策上，發(fā)達國家已將生物防治技術(shù)作為緩解當(dāng)今世界所面臨的五大危機的戰(zhàn)略決策之一。真菌殺蟲劑、真菌殺菌劑等新型生物農(nóng)藥在病蟲害防治中也顯示出良好的應(yīng)用前景。國際生防組織(IOBC)使用黃綠綠僵菌防治沙漠蝗蟲，美國引進舞毒蛾噬蟲霉防治舞毒蛾，巴西使用金龜子綠僵菌防治甘薯沫蟬等，均取得了顯著效果。哈茨木霉T39已在以色列、希臘等國家登記，主要用于防治灰霉病。我國開展真菌生物農(nóng)藥制劑的研究開發(fā)已有30 多年的歷史，其中主要以研究球孢白僵菌(Beaurevia bassiana)為主。木霉菌劑也已開發(fā)成功，主要用于防治各種作物的霜霉病，具有較為理想的效果和應(yīng)用前景。本發(fā)明涉及的化合物卵孢菌素結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示
權(quán)利要求
1.深紅蟲草(Cordyc印Scardinalis)C033，保藏編號為CCTCC NO :M 2010256。
2.一種制備卵孢菌素的方法，其特征在于，卵孢菌素是從權(quán)利要求1所述的深紅蟲草 (Cordyceps cardinalis)C033的發(fā)酵培養(yǎng)物中分離制備得到的。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備卵孢菌素的方法，其特征在于，所述的從權(quán)利要求1所述的深紅蟲草(Cordyc印s cardinalis) C033的發(fā)酵培養(yǎng)物中分離制備得到卵孢菌素，包括以下步驟(1)制備深紅蟲草(Cordyc印scardinalis)C033的發(fā)酵培養(yǎng)物；(2)將發(fā)酵培養(yǎng)物的發(fā)酵液和菌絲體分離，取發(fā)酵液，向發(fā)酵液中加入不與水混溶的有機溶劑萃取，獲得萃取液；(3)向萃取液中加入堿性水溶液進行反萃取，得到反萃取液；(4)向反萃取液中加入酸性溶液至析出沉淀，分離出沉淀，得到卵孢菌素粗品；(5)用堿性水溶液溶解粗品，再加入酸性溶液至析出沉淀，分離出沉淀；(6)重復(fù)步驟(5)數(shù)次，以去除雜質(zhì)，收集沉淀，用蒸餾水洗滌，干燥后即得卵孢菌素純品 O
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備卵孢菌素的方法，其特征在于，所述的不與水混溶的有機溶劑為氯仿或乙酸乙酯或其混合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備卵孢菌素的方法，其特征在于，所述的步驟C3)和步驟 (5)的堿性水溶液為lmol/L的氫氧化鈉溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備卵孢菌素的方法，其特征在于，所述的步驟(4)和步驟 (5)的酸性溶液為濃鹽酸。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備卵孢菌素的方法，其特征在于，所述的步驟(1)制備深紅蟲草(Cordyc印s cardinalis)C033的發(fā)酵培養(yǎng)物包括以下步驟挑取深紅蟲草 (Cordycepscardinalis) C033的菌絲接種于種子培養(yǎng)基中，在、120r/min條件下培養(yǎng)3 天，獲得種子液，再將種子液以10%的接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，在、120r/min條件下培養(yǎng)7天，獲得深紅蟲草(Cordyc印s cardinalis) C033的發(fā)酵培養(yǎng)物，所述的種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基配方相同，其配方按總質(zhì)量分?jǐn)?shù)100 %計，包含葡萄糖5 %，蛋白胨1 %，KNO3 0. 2%, MgSO4 0. 2%, CaCl2 0. 01%, (NH4)3Ρ04 · 3H20 0.02%，余量為水。
8.權(quán)利要求1所述的深紅蟲草(Cordyc印scardinalis)C033作為生物防治劑的應(yīng)用。
9.一種生物防治劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1所述的深紅蟲草(Cordyc印s cardinal i s) C033作為活性成份。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種深紅蟲草及利用其制備卵孢菌素的方法和其用途。深紅蟲草(Cordyceps cardinalis)C033，于2010年9月29日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)，地址中國，武漢，武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCC NOM 2010256。從該蟲草菌的發(fā)酵培養(yǎng)物中能制備出卵孢菌素。該制備方法具有培養(yǎng)條件溫和、培養(yǎng)基配置簡單易行、發(fā)酵時間短、提取步驟簡單、使用有機溶劑少、產(chǎn)物得率高等優(yōu)點，能夠比較方便解決研究或應(yīng)用卵孢菌素所需的原料問題。該蟲草菌還能夠作為生物防治劑的活性成份，為研究和開發(fā)新的生物防治劑提供了候選菌種。
文檔編號A01G1/04GK102168108SQ201010594470
公開日2011年8月31日 申請日期2010年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月17日
發(fā)明者李義勇, 李冬利, 王磊, 章衛(wèi)民, 陳玉嬋 申請人:廣東省微生物研究所