專利名稱：蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合體菌液在海參育苗中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種細(xì)菌的應(yīng)用，特別涉及蛭弧菌游泳體和蛭 質(zhì)體混合體菌液在海參育苗中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
海參(Apostichopusjaponicus)，屬海參綱(Holothurioidea)，以海底藻類和浮游
生物為食。海參全身長(zhǎng)滿肉刺，廣布于世界各海洋中。海參同人參、燕窩、魚(yú)翅齊名， 是世界八大珍品之一。海參不僅是珍貴的食品，也是名貴的藥材。現(xiàn)代研究表明，海參 具有提高記憶力、延緩性腺衰老，防止動(dòng)脈硬化、糖尿病以及抗腫瘤等作用。近年來(lái)，隨著城鄉(xiāng)居民生活水平的不斷提高以及醫(yī)療保健意識(shí)的增強(qiáng)，海參的 消費(fèi)需求不斷上升，價(jià)格不斷上漲，由此帶動(dòng)了海參養(yǎng)殖的興起，海參養(yǎng)殖已成為繼對(duì) 蝦養(yǎng)殖之后又一新的海水養(yǎng)殖熱點(diǎn)。現(xiàn)在我國(guó)每年生產(chǎn)的海參商品苗已突破億枚，居世 界榜首。由于種苗數(shù)量的逐漸提高，規(guī)模的不斷擴(kuò)大也出現(xiàn)許多問(wèn)題急待加以解決追 求利潤(rùn)最大化導(dǎo)致近親繁殖、親體小型化、病害猖獗；無(wú)序大量使用抗生素造成海參體 內(nèi)藥物殘留，品質(zhì)下降；近親育苗，降低了苗種的生存力；按目前的生產(chǎn)工藝，多數(shù)育 苗場(chǎng)用水量大，水不經(jīng)處理直接入海，嚴(yán)重污染環(huán)境。蛭弧菌是寄生于其他細(xì)菌，并能導(dǎo)致宿主細(xì)菌裂解的一類細(xì)菌。比一般細(xì)菌 小，能通過(guò)細(xì)菌濾器，有類似噬菌體的作用。蛭弧菌的生活史可分為脫離宿主細(xì)菌、具 有鞭毛、自由游泳的游泳體狀態(tài)和在宿主細(xì)菌內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育的蛭質(zhì)體狀態(tài)。用蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體的混合制劑作為用于海參育苗的微生物制劑，對(duì)育苗 水體和餌料進(jìn)行處理，可有效裂解消除水體中可能產(chǎn)生海參參苗病害的細(xì)菌，兼具游泳 體起效快，活力強(qiáng)和蛭質(zhì)體制備、保存容易，殺菌作用時(shí)間更久和環(huán)境耐受力更強(qiáng)的優(yōu) 點(diǎn)。從而克服了抗生素濫用帶來(lái)的副作用和常規(guī)消毒劑殘留等問(wèn)題。同時(shí)在蛭質(zhì)體發(fā)育 期間，所入侵的宿主雖已無(wú)活性，但蛭弧菌并不改變宿主細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)，使原宿主仍 具有抗原作用，因此不影響宿主的免疫原性，可刺激生物體，產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)。故蛭 質(zhì)體形式是潛在的疫苗在育苗過(guò)程中有提高苗種的免疫力的功能。蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合制劑一方面能夠裂解水體中的(潛在)致病菌，凈 化水體，減少換水頻率和換水量，另一方面蛭弧菌能改善養(yǎng)殖生物腸道環(huán)境，提高免疫 力，促進(jìn)幼苗發(fā)育和生長(zhǎng)，提高苗種成活率。到目前為止，尚無(wú)對(duì)海參育苗過(guò)程中使用蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合制劑的研 究報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服已有方法的不足，提供蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合體菌 液在海參育苗中的應(yīng)用方法，能有效控制病害發(fā)生，提高苗種質(zhì)量和育苗成功率，減少 育苗過(guò)程中污水的排放。
本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下方案實(shí)現(xiàn)蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用，所述蛭弧菌混合體菌液為蛭弧菌蛭質(zhì) 體菌液和游泳體菌液混合。 所述蛭弧菌蛭弧菌為蛭弧菌(Bdellovibrio sp.) BDMOl于2008年4月28日保藏于 中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCCNO M208066。所述蛭弧菌混合體菌液為蛭質(zhì)體菌液與游泳體菌液按細(xì)菌數(shù)1 1混合。所述蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用是將飼料在蛭弧菌混合體菌液中浸 泡 15-45min。所述蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用是在水體中添加蛭弧菌混合體菌 液，使水體中蛭弧菌混合體濃度為IO1 107pfo/mL。本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果1、本發(fā)明所述蛭弧菌混合制劑兼具游泳體起效快，活力強(qiáng)和蛭質(zhì)體制備、保存 容易，殺菌作用時(shí)間更久和環(huán)境耐受力更強(qiáng)，且可作為潛在疫苗的優(yōu)點(diǎn)，效果更好。2、本發(fā)明所述蛭弧菌混合制劑在海參的應(yīng)用中安全性好。蛭弧菌通過(guò)裂解而消除致病菌的方法是生物方法，綠色、安全、無(wú)污染。蛭弧 菌可侵染、裂解宿主細(xì)菌的特性使之適合作為抑制或清除生物體及其環(huán)境中致病菌的生 物凈化因子，且其在裂解完宿主細(xì)菌后，會(huì)因饑餓而自動(dòng)消亡，從而克服了抗生素濫用 帶來(lái)的副作用?，F(xiàn)有的研究表明蛭弧菌對(duì)海參無(wú)毒性作用，對(duì)人類無(wú)致病性。3、所述蛭弧菌混合制劑可有效提高種苗免疫力蛭弧菌混合制劑可調(diào)節(jié)參苗自身的菌系，維護(hù)腸道系統(tǒng)環(huán)境，促進(jìn)免疫系統(tǒng)的 發(fā)育，增強(qiáng)苗種的體質(zhì)，方案于實(shí)際實(shí)施中各項(xiàng)免疫指標(biāo)的測(cè)定均高于使用傳統(tǒng)的方 法，且游泳體和蛭質(zhì)體混合制劑中的蛭質(zhì)體所攜帶的宿主氣單胞菌雖已無(wú)活性，但免疫 原性并未被破壞，故可發(fā)揮疫苗的作用。4、本發(fā)明方案可有效減少換水、倒池的次數(shù)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)在幼體培育期無(wú)需換 水，在稚參的培育期最長(zhǎng)可達(dá)20天不換水倒池，減少了污水的排放，降低對(duì)環(huán)境的影 響，是一種綠色、環(huán)保、低碳的節(jié)水型新育苗技術(shù)。


圖1為實(shí)施例育苗試驗(yàn)后免疫因素一酸性磷酸酶(Acid phosphatase, ACP)結(jié)果圖2為實(shí)施例育苗試驗(yàn)后免疫因素一堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AKP)
結(jié)果
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于 此。實(shí)施例1蛭弧菌混合制劑的制備蛭弧菌蛭質(zhì)體菌液優(yōu)選通過(guò)以下方法制備接種0.5mL 106CfU/mL嗜水氣單胞菌 (Aeromonas hydrophila,購(gòu)于廣東省微生物所菌種保藏中心，編號(hào)GIM1.172)于IOOmL營(yíng) 養(yǎng)肉湯(蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，蒸餾水lOOOmL，pH 7.4)液體培養(yǎng)基中，28°C培養(yǎng) 20h，培養(yǎng)液經(jīng) 6000rpm 離心 20min 后，沉淀用 5mL DNB (dilute nutrient broth) 液體培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)肉湯0.8g，酪蛋白酸水解物0.5g，酵母精提物O.lg，溶于IOOOmL蒸 餾水中，pH值為7.4)懸浮，后加入至IOOmL DNB中，接入ImL 1 X 103pfu/mL蛭弧菌 BDFM05, 28°C培養(yǎng)48h，培養(yǎng)液經(jīng)7000rpm離心20min后，去除含蛭弧菌游泳體的上 清液，沉淀用ImL DNB液體培養(yǎng)基懸浮，得到ImL蛭弧菌蛭質(zhì)體菌液，濃度為108pfo/mL。蛭弧菌游泳體菌液的制備方法為將蛭弧菌蛭質(zhì)體制備方法中的含蛭 弧菌游泳體的上清液經(jīng)16000rpm離心20min后，沉淀用ImL DNB液體培養(yǎng)基 懸浮，得到ImL蛭弧菌游泳體菌液，經(jīng)OD600nm測(cè)定(LYSIS OF VIBRIOS BY BDELLOVIBRIO-AND-LIKE ORGANISMS (BALOs) ISOLATED FROM MARINE ENVIRONMENT[J],Journal of FoodSafety, 2008，28(2) 220-235.)，濃度為 108pfo/mL。所述蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合制劑按蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體菌數(shù)1 1比例混合。實(shí)施例2蛭弧菌混合制劑在海參育苗中的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)實(shí)施地點(diǎn)山東某海參養(yǎng)殖場(chǎng)，育苗種類仿刺參又名灰參1.親參采捕自然海區(qū)采捕。采捕時(shí)間海水底層水溫達(dá)到15 16°C時(shí)，親參 產(chǎn)卵前5天集中采捕。選擇體長(zhǎng)20cm以上，體重250g以上、性腺指數(shù)10%以上、無(wú)損 傷的個(gè)體作親參。2.親參蓄養(yǎng)蓄養(yǎng)密度15只/m3，蓄養(yǎng)的水溫16 18°C，蓄養(yǎng)時(shí)間5天，在蓄養(yǎng)池中進(jìn)行。 蓄養(yǎng)池中的水經(jīng)過(guò)精細(xì)過(guò)濾。在水中加入蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合菌液，使培育池中 的蛭弧菌濃度達(dá)到IO1NlO7PfoAnI^短期蓄養(yǎng)過(guò)程不投餌，不換水，每天早晚利用虹吸 作用清理池中的糞便等污物。暫養(yǎng)期間，每日清晨吸底檢查是否有卵，以免漏掉，如僅見(jiàn)少量產(chǎn)卵可棄掉。3.產(chǎn)卵孵化與幼體培育受精采用混合受精方式。為保證受精質(zhì)量，防止精液過(guò)多，需及時(shí)將過(guò)多的雄 參(已見(jiàn)排精的個(gè)體)挑出并移入另外的水池中。親參產(chǎn)卵受精后及時(shí)將親參移出，并 用過(guò)濾海水洗卵，直到池水變清為止，再向池中加入濃度為IO1 IO7PiVmL的蛭弧菌混 合制劑，受精卵直接在蓄養(yǎng)池中孵化。受精卵的孵化密度為5個(gè)/mL，孵化水溫為20°C。孵化期間每隔0.5h用攪水 耙將池水上、下翻動(dòng)一次，翻水時(shí)應(yīng)不留死角且不能向一個(gè)方向旋轉(zhuǎn)，以避免將胚體旋 向池中心聚集。胚體孵出后，必要時(shí)可給予充氣。4.幼體培育當(dāng)胚胎發(fā)育到小耳幼體時(shí)，要進(jìn)行選育。將上浮的幼體移入培育池內(nèi)繼續(xù)培 養(yǎng)。培育池中的海水為經(jīng)砂濾的海水，池中添加蛭弧菌混合制劑使池中的蛭弧菌濃度為 IO1 107pfu/mL，幼體布池密度約為0.5個(gè)/mL。孵化36小時(shí)后，即投餌。餌料主要為天然的牟氏角毛藻。藻類的日投餌量在 初耳幼體期為1.5萬(wàn)細(xì)胞/mL，中耳幼體期為2萬(wàn) 3萬(wàn)細(xì)胞/mL，大耳幼體期為4萬(wàn) 5萬(wàn)細(xì)胞/mL。每日分3次投喂，每次投餌量的標(biāo)準(zhǔn)以投餌1小時(shí)后大多數(shù)幼體滿胃即 可，下次投餌要接近半胃為準(zhǔn)。所有投喂的餌料需事先用濃度為IO1 107pfu/mL的蛭 弧菌混合制劑泡30min。幼體培育期間全部使用二級(jí)砂濾水。本階段不換水、倒池，但要及時(shí)利用虹吸 作用或吸底器清除池底污物5.稚參的采集和培育當(dāng)幼體25%發(fā)育至蹲形幼蟲(chóng)時(shí)，即可投放稚波紋板做附著基，附著基投放前用 20mg/L的高錳酸鉀溶液浸泡2天，再用過(guò)濾海水沖洗干凈。洗刷干凈后放入餌料池中供 自然海水中存在的底棲硅藻附著。經(jīng)過(guò)20天，在附著基上面附著一層天然的底棲硅藻， 即投放使用。使用前用水沖去附著基上的污物，再放入濃度為IO1 107pfu/mL的蛭弧 菌混合制劑中浸泡30min。每平方米投放60片波紋板，呈60°斜放，以便投餌時(shí)承接餌 料。體長(zhǎng)2mm以前的稚參，以附著基上的底棲硅藻為主食。隨著稚參的增長(zhǎng)，及時(shí) 補(bǔ)充新的底棲硅藻及鼠尾藻磨碎液。當(dāng)稚參體長(zhǎng)達(dá)2mm時(shí)，以鼠尾藻磨碎液為餌料，每 日投喂4次，每次20 30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞單位。投放的所有餌料均需要放入濃度為IO1 IO7PiVmL的蛭弧菌游混合制劑中泡 3 Omin ο育苗期間隨時(shí)觀察溫度，及時(shí)清除池底部的沉淀物及水表面的雜物。參照水體 情況可設(shè)不同的換水周期，試驗(yàn)結(jié)果表明最長(zhǎng)可達(dá)20天不換水，每次換水時(shí)注入二級(jí) 砂濾水，換水完畢后需施加蛭弧菌混合制劑，使水體中的蛭弧菌濃度達(dá)到IO1 107pfo/
mLo根據(jù)稚參生長(zhǎng)狀況，可提前移出已達(dá)出苗規(guī)格2cm的稚參，分期出池，以利個(gè) 體小的迅速生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分A.B.C.D四大組，其中A組(對(duì)照)按現(xiàn)有的工廠化生產(chǎn)方法實(shí)施。
B組(蛭弧菌混合制劑浸泡飼料)B1.1 B1.4 全程用IO1PfuAnL蛭弧菌混合制劑浸泡所有餌料， 別每隔5天、10天、15天、20天換水一次。B2.1 B2.4 全程用103pfu/mL蛭弧菌混合制劑浸泡所有餌料， 別每隔5天、10天、15天、20天換水一次。B3.1 B3.4 全程用105pfu/mL蛭弧菌混合制劑浸泡所有餌料， 別每隔5天、10天、15天、20天換水一次。B4.1 B4.4 全程用107pfu/mL蛭弧菌混合制劑浸泡所有餌料， 別每隔5天、10天、15天、20天換水一次。C組(蛭弧菌混合制劑潑灑于水體)用蛭弧菌混合制劑均勻潑灑于水體中，使 水體中的蛭弧菌濃度達(dá)到設(shè)定要求。濃度和換水間隔設(shè)置同B組。D組(蛭弧菌混合制劑潑灑于水體中和浸泡餌料)用蛭弧菌混合制劑均勻潑灑 于水體中和浸泡所有餌料，濃度和換水間隔設(shè)置同B組。
稚參培育期分 稚參培育期分 稚參培育期分 稚參培育期分
免疫指標(biāo)測(cè)定1.酸性磷酸酶(ACP)與堿性磷酸酶(AKP)活力的測(cè)定制備粗酶提取液。育苗實(shí)驗(yàn)結(jié)束，每組隨機(jī)取仿刺參幼苗6只用冰凍雙蒸水 (4pH 7.0)沖洗干凈，用吸水紙吸干水分后，準(zhǔn)確稱取組織質(zhì)量，按質(zhì)量體積比1 9 加入0.86%的冷生理鹽水，在液氮中研磨成勻漿狀，分裝于1.5mL的離心管中，4°C， 12000r/min離心lOmin，取上清液，加入9倍體積冷生理鹽水，制成粗酶提取液。4°C保 存，并于24h內(nèi)分析完畢。堿性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)活性均采用Krazel(1982)磷酸苯二鈉 法，以每克組織蛋白在37°C與磷酸苯二鈉分別作用15min和30min，產(chǎn)生Img酚為一個(gè) 酶活力單位。2.感染實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)束后，感染試驗(yàn)于預(yù)先消毒的盛有50L砂濾海水(鹽度29 30%。)的透明 水族箱中進(jìn)行，以工廠化生產(chǎn)的A組作為對(duì)照組，其他(B-D)組為實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照和實(shí)驗(yàn) 各組，每組隨機(jī)取海參苗40頭，平均分成兩個(gè)平行系列。按實(shí)施例1中的方法制備嗜水 氣單胞菌(Aeromonas hydrophila，購(gòu)于廣東省微生物所菌種保藏中心，編號(hào)GIM1.172)菌 液，之后投入到對(duì)照和實(shí)驗(yàn)組的養(yǎng)殖水體中，使水體中的嗜水氣單胞菌濃度達(dá)到IO7Cfu/ mL。試驗(yàn)水溫保持在18 20°C，充氣培養(yǎng)。人工感染后，記錄刺參的體表變化、運(yùn) 動(dòng)、攝食及死亡情況連續(xù)觀察7d，最終計(jì)算成活率，采用相對(duì)存活率(RelativePercentage Survival, RPS)計(jì)算式RPS(% ) = (1-免疫組死亡率/對(duì)照組死亡率)X 100%水質(zhì)檢測(cè)水質(zhì)檢測(cè)項(xiàng)目包括色臭味，酸堿度，氨態(tài)氮，亞硝酸鹽氮，硫化物。其 中pH用數(shù)字式pH計(jì)測(cè)定(分辨率O.OlpH)，氨態(tài)氮用次溴酸納氧化法法測(cè)定 (GB12763.4-91)；亞硝酸鹽氮用重氮-偶氮光度法測(cè)定(GB12763.4-91)；硫化物用對(duì)氨 基二甲基苯胺光度法(亞甲藍(lán)法)(GB16489-96)。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果成活率、RPS結(jié)果如表1所示，ACP、AKP結(jié)果見(jiàn)圖1，圖2。從表1和圖1、
2可以看出，實(shí)驗(yàn)組B，C，D無(wú)論是育苗成功率還是各項(xiàng)免疫指標(biāo)均好于對(duì)照A組，由 此表明本方案用蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合制劑進(jìn)行海參育苗可提高稚參的成活率和免 疫力，優(yōu)于現(xiàn)有生產(chǎn)模式培育出的育苗質(zhì)量。比較實(shí)驗(yàn)組B/C/D，可知B組成活率最高可達(dá)54.1%，感染實(shí)驗(yàn)的PRS最高 可達(dá)51%，但包括ACP、AKP在內(nèi)均要略低于C組。D組成活率最高可達(dá)68.8%，RPS 可達(dá)62%，均高于B，C兩組，ACP，AKP的數(shù)據(jù)同樣如此，表明用蛭弧菌同時(shí)處理餌 料和水體可更有效地提高稚參的成活率和免疫力。從各組組內(nèi)的對(duì)比可知，各項(xiàng)指標(biāo)的數(shù)據(jù)隨著蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合制劑 濃度的升高而升高，但換水周期對(duì)其的影響不顯著。因此，在實(shí)際生產(chǎn)中，換水周期可 設(shè)為20天一次。如此，既可降低能耗和勞動(dòng)力，又可減少排污，保護(hù)環(huán)境。水質(zhì)檢測(cè)結(jié)果各組均符合《漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》(GB 11607-1989)和《無(wú)公害食品 海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)》(NY5052-2001)標(biāo)準(zhǔn)。但Al組的氨態(tài)氮，亞硝態(tài)氮，硫化物測(cè)定值均高于試驗(yàn)組B、C、D的。其中，A組氨態(tài)氮的檢測(cè)結(jié)果為0.322mg/L，B/C/D組 均《0.231mg/L ；亞硝態(tài)氮A組檢測(cè)結(jié)果為0.018mg/L，B/C/D組均《0.015mg/L ；硫 化物A組檢測(cè)結(jié)果為0.108mg/L，B/C/D組均《0.10lmg/L。由此可見(jiàn)，無(wú)論在水中還是在飼料中添加濃度為IO1 107pfu/mL的蛭弧菌游 泳體和蛭質(zhì)體混合制劑，5 20天換水一次，均能提高海參的免疫力和成活率，凈化水 質(zhì)，促進(jìn)參苗生長(zhǎng)。在水中和飼料中同時(shí)添加蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合菌液，效果更佳。表1稚參各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果
權(quán)利要求
1.蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用，其特征在于所述蛭弧菌混合體菌液為 蛭弧菌蛭質(zhì)體菌液和游泳體菌液混合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述蛭弧菌蛭質(zhì)體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用，其特征在于所述 蛭弧菌蛭弧菌為蛭弧菌(Bdellovibrio sp.) BDMOl于2008年4月28日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng) 物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCCNO M 208066。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用，其特征在于所述 蛭弧菌混合體菌液為蛭質(zhì)體菌液與游泳體菌液按細(xì)菌數(shù)11混合。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用，其特征在于所述 蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用是將飼料在蛭弧菌混合體菌液中浸泡15-45min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用，其特征在于所述 蛭弧菌混合體菌液在海參養(yǎng)殖中的應(yīng)用是在水體中添加蛭弧菌混合體菌液，使水體中蛭 弧菌混合體濃度為IO1 107pfo/mL。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合制劑在海參育苗中的應(yīng)用，通過(guò)在水體和飼料中添加蛭弧菌游泳體和蛭質(zhì)體混合菌液實(shí)現(xiàn)，具體包括育苗設(shè)施與水質(zhì)條件，親參采捕，親參蓄養(yǎng)，產(chǎn)卵孵化與幼體培育，采苗和稚參培育，關(guān)鍵技術(shù)是在水體中添加濃度為10～107pfu/mL的蛭弧菌混合制劑，和/或同時(shí)飼料也用濃度為10～107pfu/mL的混合制劑浸泡30min，應(yīng)用本發(fā)明平均育苗成活率達(dá)到50％以上，并且能有效改善水質(zhì)，實(shí)驗(yàn)表明最長(zhǎng)可長(zhǎng)達(dá)20天不換水，節(jié)約成本，人力，大大提高了經(jīng)濟(jì)效益，且育苗成活率高、苗種質(zhì)量好、節(jié)水節(jié)能、綠色低碳。
文檔編號(hào)A23K1/16GK102017904SQ20101026841
公開(kāi)日2011年4月20日 申請(qǐng)日期2010年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月31日
發(fā)明者孫麗瀅, 蔡俊鵬 申請(qǐng)人:華南理工大學(xué)