專利名稱：：青花菜的增殖方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及青花菜的增殖方法。
背景技術(shù)：
：現(xiàn)有技術(shù)中，青花菜(Brassicaoleraceavar.italica)的增殖方法一般為如下兩種1、使用出芽培養(yǎng)基進(jìn)行擴繁，此方法是從青花菜植株的基部產(chǎn)生新的芽點，利用芽點增殖；2、自然增殖。自然增殖的速度很慢，一般不作為專門的增殖方式。出芽培養(yǎng)基增殖方法中，出芽培養(yǎng)基含有Ag+，Ag+會對植株產(chǎn)生一定的毒害作用，如抑制植株生長、形成畸形植株，并且這種影響很難評估，可能對后繼實驗產(chǎn)生不利的影響。因此，需要一種安全且快速的青花菜增殖方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個目的是提供一種青花菜(Brassicaoleraceavar.italica)的增殖方法。本發(fā)明所提供的青花菜(Brassicaoleraceavar.italica)的增殖方法，包括如下步驟1)將青花菜植株去根，將去根后的青花菜植株記作去根的青花菜植株；2)將所述去根的青花菜植株接入增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至所述去根的青花菜植株長出根和頂芽，將得到的植株記作具有根和頂芽的青花菜植株；3)將所述具有根和頂芽的青花菜植株去除頂芽，繼續(xù)培養(yǎng)，至植株的葉片基部長出芽點，將此時期的植株記作具芽點的青花菜植株；4)將所述具芽點的青花菜植株中的所述芽點切下，并接種于生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至得到青花菜幼苗。上述方法中，所述步驟1)中，所述青花菜植株為下胚軸長度為3cm-7cm的青花菜植株；所述下胚軸長度具體為3cm、5cm或7cm。一般選取生長旺盛的、具有根、莖、葉的完整青花菜植株進(jìn)行擴繁，一般下胚軸長度3-7cm的植株即是生長旺盛的植株。上述方法中，所述步驟2)和3)中，所述具有根和頂芽的青花菜植株中，所述根的長度為lcm-3cm，具體為2cm、lcm或3cm；上述方法中，所述步驟3)和4)中，所述具芽點的青花菜植株中，所述芽點的長度為1.52.5cm且所述芽點具有2片真葉；所述芽點的長度為1.5cm、2.0cm或2.5cm。上述方法中，所述增殖培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向每1LMS培養(yǎng)基中添加40g蔗糖、10g瓊脂和0.lmgIAA，調(diào)節(jié)PH至6.2，得到所述增殖培養(yǎng)基；所述生根培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向每1LMS培養(yǎng)基中添加30g蔗糖、8g瓊脂和0.lmglAA,調(diào)節(jié)PH至6.2，得到所述生根培養(yǎng)基。上述方法中，所述步驟2)、驟3)和驟4)中，所述培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX。上述方法中，所述培養(yǎng)過程中使用的容器設(shè)有透氣部分；所述透氣部分由孔徑為0.1微米的透氣膜構(gòu)成；所述透氣膜的材質(zhì)是聚四氟乙烯；所述步驟2)、步驟3)和步驟4)中的培養(yǎng)包括透氣的步驟，所述透氣是通過所述透氣部分實現(xiàn)的；所述步驟2)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例為4cm2250ml；所述步驟3)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例為8cm2250ml；所述步驟4)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例由0cm2250ml逐漸變至4cm2250ml。所述步驟4)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例由0cm2250ml逐漸變至4cm2250ml的方式為每3天增加一次透氣部分面積，每次增加的透氣部分面積與所述容器的比例為lcm2250ml。本發(fā)明青花菜的增殖方法，首先對青花菜植株進(jìn)行腋芽催芽，再用芽進(jìn)行繁殖，從而實現(xiàn)擴繁。青花菜植株本身是沒有腋芽的，本發(fā)明是通過組織培養(yǎng)的技術(shù)催生出腋芽，進(jìn)而進(jìn)行快速繁殖的。實驗證明，本發(fā)明方法的增殖周期短，增值率高，且得到的青花菜幼苗的成活率高。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明方法在不使用含有Ag+的出芽培養(yǎng)基的情況下，便可實現(xiàn)增殖，無需引入Ag+，避免了Ag+對植株后期的生長產(chǎn)生抑制，消除了Ag+對轉(zhuǎn)化株潛在的影響因素，消除了Ag+的重金屬毒害。本發(fā)明方法適用于轉(zhuǎn)基因青花菜的增殖，使后期轉(zhuǎn)化株和對照株的對比結(jié)果更加可信。本發(fā)明方法在青花菜的增殖領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。圖1為透氣孔1/2部分敞開的情況。圖2為透氣孔全部敞開的情況。圖3為透氣孔由完全封閉至1/2部分敞開的情況。具體實施例方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。下述實施例中使用的青花菜植株均是按照如下方法培養(yǎng)得到的青花菜品種青秀(購自北京嘉禾種業(yè)有限公司)的種子經(jīng)75%酒精處理30秒，再經(jīng)2%的次氯酸鈉溶液處理5分鐘，然后接入經(jīng)高溫滅菌的1/2MS培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至得到下胚軸長度為3cm-7cm的青花菜植株。下述各實施例中，均是將培養(yǎng)基置于玻璃蘭花瓶中，將材料接種于培養(yǎng)基中，將帶有培養(yǎng)材料的玻璃蘭花瓶放入培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)的；培養(yǎng)過程中，需要的時候用透氣膜封住瓶口。所用的玻璃蘭花瓶購自北京振泰園藝設(shè)施有限公司。玻璃蘭花瓶口直徑為5cm，其體積為250ml，該玻璃蘭花瓶的蓋子上具有透氣孔和透氣膜(廠家固定于玻璃蘭花瓶瓶蓋上)，透氣孔的面積與玻璃蘭花瓶內(nèi)容積的比為8cm2250ml，所述透氣膜的材質(zhì)是聚四氟乙烯，所述透氣膜的孔徑為0.1微米。透氣膜可以阻擋空氣中細(xì)菌進(jìn)入且能調(diào)節(jié)透氣孔敞開大小。透氣膜就是玻璃蘭花瓶與外界空氣接觸的部分(即透氣部分)。下述實施例中使用的MS培養(yǎng)基組成如下MS培養(yǎng)基的溶劑是水、溶質(zhì)如表1所示。表1.MS培養(yǎng)基的溶質(zhì)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</table>實施例1、青花菜增殖增殖培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向ILMS培養(yǎng)基中添加40g蔗糖、IOg瓊脂和0.ImgIAA,混勻，并調(diào)節(jié)其pH值至6.2，得到增殖培養(yǎng)基；121.3攝氏度，1520分鐘高壓滅菌。生根培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向ILMS培養(yǎng)基中添加30g蔗糖和8g瓊脂，混勻，并調(diào)節(jié)其PH值至6.2，得到生根培養(yǎng)基；121.3攝氏度，1520分鐘高壓滅菌。一、增殖以下胚軸7cm長的青花菜植株作為增殖起始材料。增殖步驟具體如下1)在超凈臺中，將下胚軸7cm長的青花菜植株去根，將去根后的青花菜植株記作去根的青花菜植株；2)將去根的青花菜植株接入增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至去根的青花菜植株長出2cm長的根，將得到的植株記作具有根和頂芽的青花菜植株；其中，培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX。從接入培養(yǎng)基至長出2cm長的根，此過程需要7天。此培養(yǎng)過程中，使透氣孔的1/2部分被敞開，且敞開部分由透氣膜覆蓋(即透氣部分面積與玻璃蘭花瓶的比例為4cm2250ml)(如圖1所示)。3)在超凈臺中，將步驟2)得到的具有根和頂芽的青花菜植株去除頂芽，繼續(xù)培養(yǎng)，至植株的大多數(shù)葉片基部長出2.Ocm長且具2片真葉的芽點，將此時期的植株記作具芽點的青花菜植株；其中，繼續(xù)培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX，且使玻璃蘭花瓶內(nèi)的透氣良好，具體方法是將透氣孔全部敞開，且敞開部分由透氣膜覆蓋，即將透氣孔旋轉(zhuǎn)敞開到透氣膜與空氣接觸面積最大的位置上，讓其最大程度的和外界進(jìn)行氣體交換(即透氣部分面積與玻璃蘭花瓶的比例為8cm2250ml)。(如圖2所示)從去除頂芽至長出2.Ocm長且具2片真葉的芽點，此過程需要14天。4)在超凈臺中，從具芽點的青花菜植株中將2.Ocm長且具2片真葉的芽點切下，并接種于生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至得到青花菜幼苗。其中，培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX，且使玻璃蘭花瓶內(nèi)的透氣良好，具體方法是將透氣孔從完全封閉的狀態(tài)逐漸調(diào)到1/2部分被敞開的狀態(tài)，每3天使所述透氣孔總面積的1/8部分被敞開(即透氣部分面積與所述容器的比例由Ocm2250ml逐漸變至4cm2250ml，具體方式是每3天增加一次透氣部分面積，每次增加的透氣部分面積與所述容器的比例為Icm2250ml)；在整個過程中，透氣孔敞開的部分均由透氣膜覆蓋，逐步加大它和外界的空氣交換，降低其濕度。(如圖3所示)從將芽點切下并接種于生根培養(yǎng)基，至得到青花菜幼苗，此過程需要15天左右。統(tǒng)計增殖周期及增殖率。增殖周期是從將青花菜植株去根至獲得青花菜幼苗所用的時間，即從上述步驟1)至步驟4)所需的時間。增值率的計算公式增值率=最終得到的植株數(shù)/原始母本植株數(shù)X100%。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。結(jié)果平均增殖周期為36天；平均增殖率為530%。二、營養(yǎng)缽移栽將獲得的青花菜幼苗移栽入裝有培養(yǎng)基質(zhì)的營養(yǎng)缽中，在溫度為28°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX的條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)10天，獲得青花菜植株；培養(yǎng)基質(zhì)組成珍珠巖蛭石=11。統(tǒng)計成活率。成活率的計算公式為成活率=移栽成活的植株數(shù)/移栽植株總數(shù)。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。平均成活率為100%。三、田間移栽將營養(yǎng)缽移栽獲得的植株移栽入田間，正常田間管理，得到青花菜植株。統(tǒng)計成活率。成活率的計算公式為成活率=移栽成活的植株數(shù)/移栽植株總數(shù)。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。平均成活率為100%。實施例2、青花菜增殖增殖培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向ILMS培養(yǎng)基中添加40g蔗糖、IOg瓊脂和0.ImgIAA,混勻，并調(diào)節(jié)其pH值至6.2，得到增殖培養(yǎng)基；121.3攝氏度，1520分鐘高壓滅菌。生根培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向ILMS培養(yǎng)基中添加30g蔗糖和8g瓊脂，混勻，并調(diào)節(jié)其PH值至6.2，得到生根培養(yǎng)基；121.3攝氏度，1520分鐘高壓滅菌。一、增殖以下胚軸3cm長的青花菜植株作為增殖起始材料。增殖步驟具體如下1)在超凈臺中，將下胚軸3cm長的青花菜植株去根，將去根后的青花菜植株記作去根的青花菜植株；2)將去根的青花菜植株接入增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至去根的青花菜植株長出Icm長的根，將得到的植株記作具有根和頂芽的青花菜植株；其中，培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX。此培養(yǎng)過程中，使透氣孔的1/2部分被敞開，且敞開部分由透氣膜覆蓋(即透氣部分面積與玻璃蘭花瓶的比例為4cm2250ml)(如圖1所示)。從接入培養(yǎng)基至長出頂芽和Icm長的根，此過程需要8天。3)在超凈臺中，將步驟2)得到的具有根和頂芽的青花菜植株去除頂芽，繼續(xù)培養(yǎng)，至植株的大多數(shù)葉片基部長出1.5cm長且具2片真葉的芽點，將此時期的植株記作具芽點的青花菜植株；其中，繼續(xù)培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX，且使玻璃蘭花瓶內(nèi)的透氣良好，具體方法是將透氣孔全部敞開，且敞開部分由透氣膜覆蓋，讓其最大程度的和外界進(jìn)行氣體交換(即透氣部分面積與玻璃蘭花瓶的比例為8cm2250ml)。(如圖2所示)從去除頂芽至長出1.5cm長且具2片真葉的芽點，此過程需要18天。4)在超凈臺中，從具芽點的青花菜植株中將1.5cm長且具2片真葉的芽點切下，并接種于生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至得到青花菜幼苗。其中，培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX，且使玻璃蘭花瓶內(nèi)的透氣良好，具體方法是將透氣孔從完全封閉的狀態(tài)逐漸調(diào)到1/2部分被敞開的狀態(tài)，每3天使所述透氣孔總面積的1/8部分被敞開(即透氣部分面積與所述容器的比例由Ocm2250ml逐漸變至4cm2250ml，具體方式是每3天增加一次透氣部分面積，每次增加的透氣部分面積與所述容器的比例為Icm2250ml)；在整個過程中，敞開部分均由透氣膜覆蓋，逐步加大它和外界的空氣交換，降低其濕度。(如圖3所示)從將芽點切下并接種于生根培養(yǎng)基，至得到青花菜幼苗，此過程需要15天。統(tǒng)計增殖周期及增殖率。增殖周期是從將青花菜植株去根至獲得青花菜幼苗所用的時間，即從上述步驟1)至步驟4)所需的時間。增值率的計算公式增值率=最終得到的植株數(shù)/原始母本植株數(shù)X100%。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。結(jié)果平均增殖周期為41天；平均增殖率為260%。二、營養(yǎng)缽移栽將獲得的青花菜幼苗移栽入裝有培養(yǎng)基質(zhì)的營養(yǎng)缽中，在溫度為28°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)10天，獲得青花菜植株；培養(yǎng)基質(zhì)組成珍珠巖蛭石=11。統(tǒng)計成活率。成活率的計算公式為成活率=移栽成活的植株數(shù)/移栽植株總數(shù)。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。平均成活率為100%。三、田間移栽將營養(yǎng)缽移栽獲得的植株移栽入田間，正常田間管理，得到青花菜植株。統(tǒng)計成活率。成活率的計算公式為成活率=移栽成活的植株數(shù)/移栽植株總數(shù)。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。平均成活率為100%。實施例3、青花菜增殖增殖培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向ILMS培養(yǎng)基中添加40g蔗糖、IOg瓊脂和0.ImgIAA,混勻，并調(diào)節(jié)其pH值至6.2，得到增殖培養(yǎng)基；121.3攝氏度，1520分鐘高壓滅菌。生根培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向ILMS培養(yǎng)基中添加30g蔗糖和8g瓊脂，混勻，并調(diào)節(jié)其PH值至6.2，得到生根培養(yǎng)基；121.3攝氏度，1520分鐘高壓滅菌。一、增殖以下胚軸5cm長的青花菜植株作為增殖起始材料。增殖步驟具體如下1)在超凈臺中，將下胚軸5cm長的青花菜植株去根，將去根后的青花菜植株記作去根的青花菜植株；2)將去根的青花菜植株接入增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至去根的青花菜植株長出3cm長的根，將得到的植株記作具有根和頂芽的青花菜植株；其中，培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX。此培養(yǎng)過程中，使透氣孔的1/2部分被敞開，且敞開部分由透氣膜覆蓋(即透氣部分面積與玻璃蘭花瓶的比例為4cm2250ml)(如圖1所示)。從接入培養(yǎng)基至長出頂芽和3cm長的根，此過程需要10天。3)在超凈臺中，將步驟2)得到的具有根和頂芽的青花菜植株去除頂芽，繼續(xù)培養(yǎng)，至植株的大多數(shù)葉片基部長出2.5cm長且具2片真葉的芽點，將此時期的植株記作具芽點的青花菜植株；其中，繼續(xù)培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX，且使玻璃蘭花瓶內(nèi)的透氣良好，具體方法是將透氣孔全部敞開，且敞開部分由透氣膜覆蓋，讓其最大程度的和外界進(jìn)行氣體交換(即透氣部分面積與玻璃蘭花瓶的比例為8cm2250ml)。(如圖2所示)從去除頂芽至長出2.5cm長且具2片真葉的芽點，此過程需要14天。4)在超凈臺中，從具芽點的青花菜植株中將2.5cm長且具2片真葉的芽點切下，并接種于生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至得到青花菜幼苗。其中，培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX，且使玻璃蘭花瓶內(nèi)的透氣良好，具體方法是將透氣孔從完全封閉的狀態(tài)逐漸調(diào)到1/2部分被敞開的狀態(tài)，每3天使所述透氣孔總面積的1/8部分被敞開(即透氣部分面積與所述容器的比例由Ocm2250ml逐漸變至4cm2250ml，具體方式是每3天增加一次透氣部分面積，每次增加的透氣部分面積與所述容器的比例為Icm2250ml)；在整個過程中，且敞開部分均由透氣膜覆蓋，逐步加大它和外界的空氣交換，降低其濕度。(如圖3所示)從將芽點切下并接種于生根培養(yǎng)基，至得到青花菜幼苗，此過程需要15天。統(tǒng)計增殖周期及增殖率。增殖周期是從將青花菜植株去根至獲得青花菜幼苗所用的時間，即從上述步驟1)至步驟4)所需的時間。增值率的計算公式增值率=最終得到的植株數(shù)/原始母本植株數(shù)X100%。。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。結(jié)果平均增殖周期為39天；平均增殖率為370%。二、營養(yǎng)缽移栽將獲得的青花菜幼苗移栽入裝有培養(yǎng)基質(zhì)的營養(yǎng)缽中，在28°C、光照時間為16h/d條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)10天，獲得青花菜植株；培養(yǎng)基質(zhì)組成珍珠巖蛭石=11。統(tǒng)計成活率。成活率的計算公式為成活率=移栽成活的植株數(shù)/移栽植株總數(shù)。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。平均成活率為100%。三、田間移栽將營養(yǎng)缽移栽獲得的植株移栽入田間，正常田間管理，得到青花菜植株。統(tǒng)計成活率。成活率的計算公式為成活率=移栽成活的植株數(shù)/移栽植株總數(shù)。實驗設(shè)3次重復(fù)。結(jié)果取平均值。平均成活率為100%。權(quán)利要求一種青花菜(Brassicaoleraceavar.italica)的增殖方法，包括如下步驟1)將青花菜植株去根，將去根后的青花菜植株記作去根的青花菜植株；2)將所述去根的青花菜植株接入增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至所述去根的青花菜植株長出根和頂芽，將得到的植株記作具有根和頂芽的青花菜植株；3)將所述具有根和頂芽的青花菜植株去除頂芽，繼續(xù)培養(yǎng)，至植株的葉片基部長出芽點，將此時期的植株記作具芽點的青花菜植株；4)將所述具芽點的青花菜植株中的所述芽點切下，并接種于生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至得到青花菜幼苗。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟1)中，所述青花菜植株為下胚軸長度為3cm-7cm的青花菜植株；所述下胚軸長度具體為3cm、5cm或7cm；所述步驟2)和3)中，所述具有根和頂芽的青花菜植株中，所述根的長度為lcm-3cm，具體為2cm、lcm或3cm；所述步驟3)和4)中，所述具芽點的青花菜植株中，所述芽點的長度為1.52.5cm且所述芽點具有2片真葉；所述芽點的長度為1.5cm、2.0cm或2.5cm。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于所述增殖培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向每1LMS培養(yǎng)基中添加40g蔗糖、10g瓊脂和0.lmgIAA，調(diào)節(jié)PH至6.2，得到所述增殖培養(yǎng)基；所述生根培養(yǎng)基是按照如下方法配制的向每1LMS培養(yǎng)基中添加30g蔗糖和8g瓊脂，調(diào)節(jié)PH至6.2，得到所述生根培養(yǎng)基。4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的方法，其特征在于所述步驟2)、驟3)和驟4)中，所述培養(yǎng)的條件為溫度為25°C、光照時間為16h/d和光照強度為25001UX。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述培養(yǎng)過程中使用的容器設(shè)有透氣部分；所述透氣部分由孔徑為0.1微米的透氣膜構(gòu)成；所述透氣膜的材質(zhì)是聚四氟乙烯；所述步驟2)、步驟3)和步驟4)中的培養(yǎng)包括透氣的步驟，所述透氣是通過所述透氣部分實現(xiàn)的；所述步驟2)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例為4cm2250ml；所述步驟3)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例為8cm2250ml；所述步驟4)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例由0cm2250ml逐漸變至4cm2250ml。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述步驟4)中，所述透氣部分面積與所述容器的比例由0cm2250ml逐漸變至4cm2250ml的方式為每3天增加一次透氣部分面積，每次增加的透氣部分面積與所述容器的比例為lcm2250ml。全文摘要本發(fā)明公開了青花菜的增殖方法。該方法包括如下步驟1)將青花菜植株去根，將去根后的青花菜植株記作去根的青花菜植株；2)將所述去根的青花菜植株接入增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至所述去根的青花菜植株長出根和頂芽，將得到的植株記作具有根和頂芽的青花菜植株；3)將所述具有根和頂芽的青花菜植株去除頂芽，繼續(xù)培養(yǎng)，至植株的葉片基部長出芽點，將此時期的植株記作具芽點的青花菜植株；4)將所述具芽點的青花菜植株中的所述芽點切下，并接種于生根培養(yǎng)基，培養(yǎng)，至得到青花菜幼苗。實驗證明，本發(fā)明方法的增殖周期短，增值率高，且得到的青花菜幼苗的成活率高。本發(fā)明方法在青花菜的增殖領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。文檔編號A01H4/00GK101836590SQ201010197380公開日2010年9月22日申請日期2010年6月10日優(yōu)先權(quán)日2010年6月10日發(fā)明者劉莉莎,楊鵬,溫常龍,王玉玨,程琳,趙立群,郭仰東申請人:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)