專利名稱：一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)性別判定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬鲆鰈魚(yú)類性別的判定領(lǐng)域，特別是涉及于一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)的性別判 定方法。
背景技術(shù)：
性別判定是研究魚(yú)類繁殖與發(fā)育的基礎(chǔ)，魚(yú)類的性腺分為精巢和卵巢，在魚(yú)類的繁育中具有不同的功能。在魚(yú)類研究中，包括魚(yú)類的繁殖發(fā)育、內(nèi)分泌調(diào)節(jié)、外界環(huán)境及化 學(xué)物質(zhì)等對(duì)魚(yú)類的繁殖與生理影響等均需要判定其性別。牙鲆等鲆鰈魚(yú)類具有雌性個(gè)體生 長(zhǎng)速度大于雄性個(gè)體的特點(diǎn)，為了提高生產(chǎn)效益，單性育種技術(shù)如雌核發(fā)育、激素誘導(dǎo)雌性 化及溫度性別決定等逐漸發(fā)展起來(lái)。而在這些研究中均需要大量判定幼魚(yú)的性別，進(jìn)行性 別比例計(jì)算以研究人工性別控制的成效。同樣，在對(duì)鲆鰈魚(yú)類進(jìn)行內(nèi)分泌調(diào)控研究時(shí)，亦需 要首先確定其性別組成。由于魚(yú)類幼魚(yú)的性腺還未發(fā)育成熟，性腺組織較小，呈細(xì)小的現(xiàn)狀，不能用肉眼分 辨性別，通常情況下，性別判定主要依靠組織切片技術(shù)進(jìn)行。但是，組織切片技術(shù)操作步驟 較多，如大量判定必定花費(fèi)較多的人力物力，且其操作過(guò)程中的二甲苯等化學(xué)物質(zhì)對(duì)操作 人員健康有較大的危害。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的問(wèn)題是提供了一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)性別判定方法。該發(fā)明流程 簡(jiǎn)單，易操作，整個(gè)過(guò)程耗時(shí)少，結(jié)果穩(wěn)定可靠，無(wú)需特殊或昂貴的儀器，成本少，所需試劑 少，減少操作人員組織切片過(guò)程中所接觸的多種有毒化學(xué)物質(zhì)，對(duì)操作人員傷害極小。本發(fā)明的一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)性別判定方法，包括(1)取新鮮的牙鲆幼魚(yú)，稱量后解剖并將含有性腺組織的腹部固定于Davision’ s AFA固定液中，在固定24h后換用70%乙醇長(zhǎng)期保持；(2)將固定的牙鲆腹部放置在載玻片上，將其置于解剖鏡下，剝?nèi)テ浔砥ず图∪饨M 織，取出完整的性腺組織；(3)將性腺靠近腎臟的一端放于解剖鏡視野中央，用解剖針和鑷子輕輕撫平其表 皮部分；(4)觀察近腎臟一端性腺部分表皮內(nèi)性腺組織的形狀，根據(jù)形狀的不同判定其性 別。所述步驟(1)中Davision’ s AFA固定液由無(wú)水乙醇、甲醛、冰乙酸按體積比 6:3: 1的比例配制。所述步驟(4)中根據(jù)形狀的不同判定其性別方法為若性腺較大且呈“心”形則為 雌性，若性腺細(xì)長(zhǎng)且呈細(xì)長(zhǎng)的“D”形則為雄性。本發(fā)明根據(jù)牙鲆等鲆鰈魚(yú)類的性腺組織結(jié)構(gòu)及其形狀的不同，設(shè)計(jì)出快捷的不經(jīng) 組織切片技術(shù)的性別判定方法，經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)及組織切片證明，所述方法可以準(zhǔn)確地判定性別分化后全長(zhǎng)在6. Ocm以上的牙鲆幼魚(yú)的性別，本發(fā)明可以用于牙鲆等鲆鰈魚(yú)類的神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)控、單性培育及環(huán)境因子性別調(diào)控等研究中，具有廣泛的適用性。有益效果(1)本發(fā)明流程簡(jiǎn)單，易操作，整個(gè)過(guò)程耗時(shí)少，結(jié)果穩(wěn)定可靠；(2)無(wú)需特殊或昂貴的儀器，成本少，所需試劑少，減少操作人員組織切片過(guò)程中 所接觸的多種有毒化學(xué)物質(zhì)，對(duì)操作人員傷害極小。


圖1為解剖鏡下取出的牙鲆性腺組織；圖2為雌性牙鲆的“心”形性腺；圖3為雄性牙鲆的“D”形性腺。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書(shū)所限定 的范圍。實(shí)施例1(1)取新鮮的牙鲆幼魚(yú)，稱量(全長(zhǎng)6. 9cm, 2. 78g)，解剖并將含有性腺組織的腹部 固定于Davision's AFA固定液(無(wú)水乙醇、甲醛、冰乙酸按照體積比6 3 1配制)中， 在固定24h后換用70%乙醇長(zhǎng)期保持；(2)取固定的牙鲆腹部放置在載玻片上，將其置于解剖鏡下，剝?nèi)テ浔砥ず图∪饨M 織，取出完整的性腺組織；(3)將性腺靠近腎臟的一端放于解剖鏡視野中央，用解剖針和鑷子輕輕撫平其表 皮部分；(4)觀察近腎臟一端性腺部分表皮內(nèi)性腺組織的形狀，根據(jù)形狀的不同判定其性 別；性腺細(xì)長(zhǎng)且呈細(xì)長(zhǎng)的“D”形，判定其性別為雄性。將該性腺組織做常規(guī)石蠟切片，染色 后觀察，經(jīng)驗(yàn)證其性腺為雄性，精巢呈細(xì)長(zhǎng)的棒狀，與解剖鏡鏡檢結(jié)果一致。實(shí)施例2(1)取新鮮的牙鲆幼魚(yú)，稱量(全長(zhǎng)7. 5cm, 3. 12g)，解剖并將含有性腺組織的腹部 固定于Davision's AFA固定液(無(wú)水乙醇、甲醛、冰乙酸按照體積比6 3 1配制)中， 在固定24h后換用70%乙醇長(zhǎng)期保持；(2)取固定的牙鲆腹部放置在載玻片上，將其置于解剖鏡下，剝?nèi)テ浔砥ず图∪饨M 織，取出完整的性腺組織；(3)將性腺靠近腎臟的一端放于解剖鏡視野中央，用解剖針和鑷子輕輕撫平其表 皮部分；(4)觀察近腎臟一端性腺部分表皮內(nèi)性腺組織的形狀，根據(jù)形狀的不同判定其性 別；性腺較大且呈“心”形，判定其性別為雌性。將該性腺組織做常規(guī)石蠟切片，染色后觀察，經(jīng)驗(yàn)證其性腺為雌性，卵巢較大，組織切片中的卵巢形狀與解剖鏡下觀察的形狀基本一致
權(quán)利要求
一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)性別判定方法，包括(1)取新鮮的牙鲆幼魚(yú)，稱量后解剖并將含有性腺組織的腹部固定于Davision’s AFA固定液中，在固定24h后換用70％乙醇長(zhǎng)期保持；(2)將固定的牙鲆腹部放置在載玻片上，將其置于解剖鏡下，剝?nèi)テ浔砥ず图∪饨M織，取出完整的性腺組織；(3)將性腺靠近腎臟的一端放于解剖鏡視野中央，用解剖針和鑷子輕輕撫平其表皮部分；(4)觀察近腎臟一端性腺部分表皮內(nèi)性腺組織的形狀，根據(jù)形狀的不同判定其性別。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)性別判定方法，其特征在于所述步驟 (1)中Davision's AFA固定液由無(wú)水乙醇、甲醛、冰乙酸按體積比6 3 1的比例配制。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)性別判定方法，其特征在于所述步驟 (4)中根據(jù)形狀的不同判定其性別方法為若性腺較大且呈“心”形則為雌性，若性腺細(xì)長(zhǎng)且 呈細(xì)長(zhǎng)的“D”形則為雄性。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種簡(jiǎn)便的牙鲆幼魚(yú)性別判定方法，包括(1)將牙鲆幼魚(yú)稱量后取腹部包含性腺的部分固定于Davision’s AFA固定液中，在處理24h后改用70％乙醇保存；(2)將固定的幼魚(yú)腹部置于解剖鏡下，剝?nèi)テ浔砥ぜ凹∪獠糠?，取出性腺組織；(3)將性腺組織置于解剖鏡下，觀察其性腺表皮包含的性腺組織的形狀，雌性牙鲆的性腺組織較大，呈“心”形，而雄性牙鲆的性腺組織較小且細(xì)長(zhǎng)，呈長(zhǎng)“D”形。本發(fā)明操作簡(jiǎn)便，成本低，結(jié)果穩(wěn)定可靠，適用于鲆鰈魚(yú)類等多種魚(yú)類的繁殖與發(fā)育研究。
文檔編號(hào)A01K61/00GK101803578SQ20101013643
公開(kāi)日2010年8月18日 申請(qǐng)日期2010年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月30日
發(fā)明者孫鵬, 尹飛, 彭士明, 施兆鴻 申請(qǐng)人:中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所