專利名稱：一株堅強芽孢桿菌及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株堅強芽孢桿菌及其應(yīng)用，屬于微生物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
種植業(yè)每年因病蟲害造成巨大的損失。病蟲害的防治有多種方法，化學(xué)防治在世 界農(nóng)業(yè)發(fā)展史上起著重要的作用。幾個世紀以來，化學(xué)農(nóng)藥在農(nóng)林生產(chǎn)中防治病蟲害起到 非常重要的作用。但由于大量使用，已造成環(huán)境污染嚴重，病蟲害抗藥性增強，形成惡性循 環(huán)，嚴重影響人類健康和生態(tài)平衡。生物防治是農(nóng)林生產(chǎn)中的必然趨勢。利用拮抗微生物 防治植物病害是其中一個主要內(nèi)容。在研究開發(fā)的各種生防菌中，利用生防細菌來防治植 物病害成為國內(nèi)外在生物防治中的一個熱點。大量研究表明，生防細菌不僅在其生長發(fā)育 過程中產(chǎn)生多種拮抗性或競爭性的代謝產(chǎn)物，通過直接或間接作用，達到阻礙或殺死病原 菌的效果。大部分生防細菌都是從植物的根圍、根際和葉圍等處分離獲得，對植物具有較好 的親合性，接種后易在植物上定殖、存活，防治效果持久穩(wěn)定。芽孢桿菌是一群好氧或兼性厭氧、產(chǎn)芽孢的革蘭氏陽性菌。芽孢桿菌分布及其廣 泛，極易分離培養(yǎng)，是土壤和植物體表、根際的重要微生物種群。所產(chǎn)生的芽孢具有耐熱抗 逆的特點，極利于菌劑的生產(chǎn)、劑型的加工以及在環(huán)境中存活、定殖和繁殖。批量生產(chǎn)上工 藝簡單，成本也較低，施用方便，儲存期長，是一種理想的生防微生物。目前，對芽孢桿菌研 究較多的是枯草芽孢桿菌、蠟質(zhì)芽孢桿菌等，對堅強芽孢桿菌用于生物防治的研究國內(nèi)外 參考文獻較少。朱天輝等(林業(yè)大學(xué)，2007，43 (2) 120-123)等從苗圃土壤中分離純化出 一株具有拮抗活性的堅強芽胞桿菌，專利(申請?zhí)?200710121274. 6)提供了一株防治草莓 白粉病的堅強芽胞桿菌菌株SAB-1，因此篩選對病原菌具有抑制作用的堅強芽胞桿菌是防 止植物病害的最有效方法之一。目前為止，防止其他病蟲害如黃瓜白粉病、核桃炭疽病、黃 瓜灰霉病、小麥紋枯病、蘋果輪紋病、煙草赤星病、玉米小斑病、冬棗黑斑病、棉花枯萎病、棉 花紅腐病、小麥赤霉病等未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種新的堅強芽孢桿菌菌株，它可以用作生物農(nóng)藥，防治植 物多種病害。本發(fā)明所提供的菌株為堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02是從山東省林業(yè) 科學(xué)研究院實驗苗圃土壤中采用土壤稀釋分離法分離獲得到的，已于2009年06月19日 保藏于中國微生物保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCCJia 北京市朝陽區(qū)大屯 路，中國科學(xué)院微生物研究所)，保藏號為CGMCC No. 3129。其具有以下微生物學(xué)特性菌體 桿狀，革蘭氏陽性菌，周生鞭毛，兼性厭氧。NA培養(yǎng)基培養(yǎng)菌落圓形，白色，平展，表面粗糙， 中間有圓環(huán)形突起，邊緣整齊。液體培養(yǎng)形成菌膜，液體顏色棕黃色，渾濁，有沉淀。本發(fā)明堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf_02 CGMCC No. 3129的培養(yǎng)方法或繁 殖方法(1)普通培養(yǎng)采用NA培養(yǎng)基保存。實驗室液體培養(yǎng)采用NYBD液體培養(yǎng)基。NYBD配方牛肉浸膏8g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，氯化鈉5g，水1000mL，pH 7.3。(2)大量發(fā)酵培 養(yǎng)配方(質(zhì)量百分含量)豆粉1. 8 %，玉米粉1.6%，淀粉和碳酸鈣各0. 44 %，魚粉0. 47 %， 硫酸鎂0.01%，磷酸二氫鉀0.03%，其余為水，pH 7.3。采用此培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)，菌落可達 40 億 /g。該微生物制劑可以作為生物農(nóng)藥，防治多種植物病害。利用堅強芽孢桿菌防治黃 瓜、土豆根線蟲，可直接殺死線蟲細胞，具有極好的防治效果。利用綠粘帚霉與堅強芽孢桿 菌，預(yù)先接種生防菌協(xié)同控制松赤枯病取得一定效果。堅強芽孢桿菌防治黃瓜白粉病，防治 效果可達79.02%。堅強芽孢桿菌可以防治核桃炭疽病、黃瓜灰霉病、小麥紋枯病、蘋果輪紋 病、煙草赤星病、玉米小斑病、冬棗黑斑病、棉花枯萎病、棉花紅腐病、小麥赤霉病等多種病 害。室內(nèi)對峙試驗表明其對多種病菌影響如下表所示。表1 堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. No. 3129 對多種病菌的影 響
小麥赤霉病菌10.33 ±1.86cd65.92± 2.93d玉米小斑病菌12.33 土2.27ab76.97士 1.49a
蘋果輪紋病菌10.50 ±1.66cd78.64± 2.04 a核桃炭疽病菌12.75 ±1.13a78.34±4.67a
小麥紋枯病菌8.04±1.77e65.37 ±1.69d黃瓜灰霉病菌11.21 ±1.87bc73.60士7.89bc
煙草赤星病菌12.33 ±1.32ab66.75 ±2.90d棉花枯蔞病菌9.33 士 1.28de76.67±2.50ab
棉花紅腐病菌11.46±1.49abc52.30 ±5.09e冬棗黑斑病菌11.25±1.28bc73.30 ±1.68c堅強芽孢桿菌也是昆蟲病原細菌。利用堅強芽孢桿菌可以防止黃條跳甲，4億/mL 濃度48h死亡率可達100%。堅強芽孢桿菌可以侵染臭椿皮蛾和喬蝽巢蛾，利用堅強芽孢 桿菌處理葉片，幼蟲18-24h停止取食，72h死亡率可達80-100%。幼蟲死亡后變黑，蟲體變 軟，輕微觸動可流出黑色液體。


圖 1 為堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. No. 3129 放大 10K 倍的
光學(xué)顯微鏡照片。
具體實施例方式實施例1 1、堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 的分離與純化本發(fā)明堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129從山東省林業(yè)科 學(xué)研究院實驗苗圃土壤采用土壤稀釋分離法分離獲得，分離方法為(1) 土樣采集從土壤表層到15cm處取樣200g，一個地點采幾個樣本，混合過粗 篩，取25g作分離用；
(2)培養(yǎng)基平板制備將NA培養(yǎng)基(營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基)和PDA(馬鈴薯葡萄糖瓊 脂培養(yǎng)基)培養(yǎng)基融化，分別倒入滅菌培養(yǎng)皿，冷卻，制成NA和PDA平板；所述NA培養(yǎng)基配 方為蛋白胨10g、牛肉膏3g、NaCl 5g、瓊脂14g，蒸餾水IOOOmL, ρΗ7· 3。所述PDA培養(yǎng)基配 方為馬鈴薯(去皮切塊)200g，葡萄糖17g，瓊脂12-14g，蒸餾水lOOOmL。(3)稱取Ig 土樣于250mL滅菌三角瓶中，加IOOmL無菌水，振蕩，制成10_2 土壤懸 浮液，靜置5min，按10倍梯度稀釋到10_7 ；(4)取上述土壤懸浮液lmL，加到培養(yǎng)基NA或PDA平板上平板上，用彎玻棒涂勻。 置于培養(yǎng)箱26°C恒溫培養(yǎng)5-7d。2、菌株鑒定(1)微生物學(xué)特性菌體桿狀，革蘭氏陽性菌，周生鞭毛，兼性厭氧。NA培養(yǎng)基培養(yǎng) 菌落圓形，白色，平展，表面粗糙，中間有圓環(huán)形突起，邊緣整齊。液體培養(yǎng)形成菌膜，液體顏 色棕黃色，渾濁，有沉淀。(2)生化特性如表2所示。表2 堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 的生化特性 注“ + ”表示生長或反應(yīng)陽性；“_”表示不生長或反應(yīng)陰性實施例2 堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 的發(fā)酵NA培養(yǎng)基配方(市售)蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl 5g，瓊脂14g，蒸餾水lOOOmL，ρΗ7· 3。
NB配方蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，蒸餾水lOOOmL，ρΗ7· 3 ；NYBD配方牛肉浸膏8g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，氯化鈉5g，水1000mL，pH 7.3。大量發(fā)酵培養(yǎng)配方(質(zhì)量百分含量)豆粉1.8%，玉米粉1.6%，淀粉0.44%，碳 酸鈣0. 44%，魚粉0. 47 %，硫酸鎂0.01%，磷酸二氫鉀0.03%，其余為水，pH 7. 3。1、堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 菌種活化將斜面上保存的菌種接種到NA試管斜面上面，于28°C培養(yǎng)24h。2、堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 種子液的制備從斜面上挑三環(huán)菌接種到裝有NB培養(yǎng)液的三角瓶中，置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱中，振 蕩培養(yǎng)，280C，200r/min培養(yǎng)8h即可獲得種子液。3、堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 發(fā)酵液的制備以培養(yǎng)液初始pH7. 2，初始接種量2%，裝液量50mL/500mL，將種子液接入到裝有 NYBD發(fā)酵培養(yǎng)液的500mL三角瓶中，置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱中，振蕩培養(yǎng)，28°C，200r/min培 養(yǎng) 48h。4、堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 發(fā)酵培養(yǎng)將搖床發(fā)酵的菌液接種到裝有IOOmL培養(yǎng)基的200mL種子發(fā)酵罐，初始pH7. 2，溫 度32°C，通風(fēng)體積比1 0.8，從菌種接種后12h菌體生長處于指數(shù)生長中期，轉(zhuǎn)入2000L 的發(fā)酵罐，以70%的罐裝量，pH7.3，溫度為28-34°C，前期通風(fēng)體積比為1 0.8，后期通風(fēng) 體積比為1 1發(fā)酵。采用此培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)，菌落可達40億/g。實施例3 堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129發(fā)酵液的應(yīng)用為了明確堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129發(fā)酵液對黃瓜 灰霉病的防治增產(chǎn)效果，為其推廣應(yīng)用提供依據(jù)。我們于2008年1-2月份在臨邑試驗基地 進行此試驗，現(xiàn)將試驗結(jié)果報告如下1供試材料及方法1.1供試藥劑按本發(fā)明發(fā)酵方法生產(chǎn)的堅強芽孢桿菌(Baci 1 Ius f irmus) Bf-02 CGMCC No. 3129發(fā)酵液；40%咪霉胺可濕性粉劑(山東壽光雙星農(nóng)藥有限公司生產(chǎn)，市售)。1. 2供試作物與防治對象供試作物為黃瓜，品種為長春密刺；防治對象灰霉病1. 3試驗地情況試驗地設(shè)在山東省臨邑縣臨南鎮(zhèn)大聶村，該村大棚黃瓜灰霉病近幾年發(fā)生嚴重， 且防治困難，試驗在620平方米(0.93畝)黃瓜大棚內(nèi)，土質(zhì)為輕壤土，有機質(zhì)含量為 1. 07%, pH值為6. 9，所有試驗小區(qū)栽培條件及管理措施一致，施藥時黃瓜灰霉病處于發(fā)病 初期。1. 4試驗設(shè)計及安排本試驗設(shè)堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129發(fā)酵液10倍， 40%咪霉胺可濕性粉劑可濕性粉劑600倍液及不施藥清水作對照共3個處理，重復(fù)4次，共 12個小區(qū)，各小區(qū)隨機排列，小區(qū)面積為20平方米。于2008年1月29日、2月6日和13 日各噴藥一次，將植株葉片上下噴灑均勻、周到，噴藥時用塑料布遮擋，畝用藥液60公斤， 噴藥器械為工農(nóng)-16型噴霧器。
1. 5試驗調(diào)查及計算方法1.5. 1氣象條件第1次施藥(1月29日)當(dāng)日少云，風(fēng)力3級，最高氣溫為13°C，最低氣溫為4°C， 相對濕度為75%。第2次施藥(2月6日)，當(dāng)日多云，風(fēng)力4級，最高氣溫為irC，最低氣 溫為2°C，相對濕度為70% ；第3次施藥(2月13日)當(dāng)日晴，風(fēng)力3級，最高氣溫為9°C， 最低氣溫為1°C，相對濕度為80%。因塑料大棚環(huán)境條件相對穩(wěn)定，所以該氣候?qū)λ幮]有影響。1. 5. 2藥效及安全性調(diào)查藥效調(diào)查第1次施藥后第7d和最后一次施藥后14d進行調(diào)查。每小區(qū)采用4點取樣法，每點查2株，調(diào)查全部葉片，調(diào)查發(fā)病率，記錄病情級數(shù)并計算病情指數(shù)。安全性調(diào)查于第一次施藥后7d和14d觀察黃瓜的安全性，如有藥害發(fā)生，詳細描 述藥害癥狀并按藥害程度分級標(biāo)準(zhǔn)確定藥害程度。分級方法(以葉片為單位)0級無病班1級病班面積占整個葉面積的5%以下；3級病班面積占整個葉面積的6% -10% ；5級病班面積占整個葉面積的11 % -25% ；7級病班面積占整個葉面積的26% -30% ；9級病班面積占整個葉面積的50以上；1.5. 3調(diào)查時間和次數(shù)施藥前調(diào)查病情基數(shù)，下次施藥前及末次施藥后IOd調(diào)查防治結(jié)果。1.5.4藥效計算方法藥效按式⑴、⑵計算
病情指數(shù)(各級病葉數(shù)χ相對級數(shù)值\100⑴ ‘Λ調(diào)查總?cè)~數(shù)χ9 式中=CKci—空白對照區(qū)施藥前病情指數(shù)；CK1——空白對照區(qū)施藥后病情指數(shù)；PT0——藥劑處理后施藥前病情指數(shù)；PT1——藥劑處理后施藥后病情指數(shù)。1. 5. 5對作物的直接影響觀察藥劑對作物有無藥害，記錄藥害的類型和程度。此外，也要記錄對作物的其他 有益影響(例如促進成熟、刺激生長等)。用下列方式記錄藥害(a)如果藥害能被測量或計算，要用絕對值表示，例如株高、結(jié)實率。(b)在其他情況下，可以按下列兩種方法估計藥害程度和頻率
(1)按照藥害分級方法記錄每小區(qū)的藥害程度，以_、+、++、+++、++++表示。藥害分級方法-無藥害；+ 輕度藥害，不影響作物生長；++ 中度藥害，可復(fù)原，不會造成作物減產(chǎn)；+++ 中度藥害，影響作物正常生長，對作產(chǎn)量和質(zhì)量造成一定程度的損失；++++ 嚴重藥害，作物生長受阻，產(chǎn)量和質(zhì)量損失嚴重。(2)將藥劑處理區(qū)與空白對照區(qū)比較，評價其藥害百分率。同時，要準(zhǔn)確描述作物的藥害癥狀(矮化、褪綠、畸形等)2 結(jié)果2. 1供試藥劑對棉花黃萎病的防治效果表3結(jié)果顯示，堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129發(fā)酵液及 及40%咪霉胺可濕性粉劑對黃瓜灰霉病有較好的防治效果，一次用藥7d后防治效果均達 到60%以上，其中堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129發(fā)酵液防治效果最好。從黃瓜灰霉病田間試驗的病情指數(shù)來看(表3)，一次用藥7d后，堅強芽孢桿菌 (Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129 防治效果為 77. 14%，明顯高于 40%咪霉胺可濕 性粉劑的防治效果。表3各處理防治黃 瓜灰霉病試驗效果調(diào)查原始數(shù)據(jù) 臨邑13/2，2008 2. 2黃瓜安全性調(diào)查經(jīng)施藥7d和14d觀察，各藥劑處理區(qū)與對照區(qū)相比，黃瓜生 長正常，無藥害產(chǎn)生，說明堅強芽孢桿菌Bacillus firmus Bf-02 CGMCC No. 3129發(fā)酵液在 供試濃度對黃瓜安全。2. 3堅強芽孢桿菌發(fā)酵液對黃瓜增產(chǎn)效果表4對黃瓜增產(chǎn)試驗結(jié)果分析表 注小區(qū)面積33. 4m2 ；處理1為堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCCNo. 3129發(fā)酵液，處理2為對照組藥劑(40%咪霉胺可濕性粉劑)。將表2資料進行Duncan，s方差分析處理 樣本數(shù) 均值標(biāo)準(zhǔn)差處理1 3252. 41002. 2987處理2 3194. 24000. 9585方差分析表變異來源 平方和自由度 均方F值顯著水平
處理間5075.6230 15075.6230 1636.615 0.0000處理內(nèi)12.40524 3.1013總變異5088.0282 5Duncan多重比較(下三角為均值差，上三角為顯著水平)No. 均值121 252. 410000.00002 194. 24000 58.1700字母標(biāo)記表示結(jié)果處理 均值5%顯著水平極顯著水平處理1 252.41000 aA處理2 194. 24000 b B由以上結(jié)果可知，在黃瓜上噴灌堅強芽孢桿菌發(fā)酵液(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCCNo. 3129，處理區(qū)比對照區(qū)每畝增產(chǎn)黃瓜1292. 673kg，增產(chǎn)率為29. 95% ；效果十分 明顯。在P < 0. 01水平上具有顯著性差異，說明堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCCNo. 3129發(fā)酵液的防病增產(chǎn)作用非常明顯。3 小結(jié)3. 1從病情指數(shù)和防治效果來看，堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No. 3129對黃瓜灰霉病具有較好的防治效果，在一次施藥后7d可達70%以上，明顯好于對 照藥劑，差異顯著。3. 2 從黃瓜增產(chǎn) 效果看，堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf_02 CGMCC No. 3129 對黃瓜具有明顯的促生增產(chǎn)效果，一次施藥后增產(chǎn)率為29. 95%。
權(quán)利要求
堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02CGMCC No.3129。
2.權(quán)利要求1所述的堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129的分離與純化方法(1)土樣采集從山東省林業(yè)科學(xué)研究院實驗苗圃土壤表層到15cm處取樣200g，混合 過粗篩，取25g作分離用；(2)培養(yǎng)基平板制備將NA培養(yǎng)基和PDA培養(yǎng)基融化，分別倒入滅菌培養(yǎng)皿，冷卻，制 成NA和PDA平板，所述NA培養(yǎng)基配方為蛋白胨10g，牛肉膏3g，NaCl 5g，瓊脂14g，蒸餾水 IOOOmL, pH7. 3 ；所述PDA培養(yǎng)基配方為去皮切塊的馬鈴薯200g，葡萄糖17g，瓊脂12_14g， 蒸餾水IOOOmL ；(3)稱取Ig土樣于250ml滅菌三角瓶中，加IOOmL無菌水，振蕩，制成10_2 土壤懸浮液， 靜置5min，按10倍梯度稀釋到10_7 ；(4)取上述稀釋后的土壤懸浮液lmL，加到培養(yǎng)基NA或PDA平板上，用彎玻棒涂勻，置 于培養(yǎng)箱26°C恒溫，培養(yǎng)5-7天。
3.權(quán)利要求1所述的堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129的發(fā)酵方法1)堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-02CGMCC No. 3129菌種活化將斜面上保存的 菌種接種到NA試管斜面上面，于28°C培養(yǎng)24h，所述NA培養(yǎng)基配方為蛋白胨10g，牛肉膏 3g，NaCl 5g，瓊脂 14g，蒸餾水 IOOOmL, ρΗ7· 3 ；2)堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129種子液的制備從斜面上挑 三環(huán)菌接種到裝有NB培養(yǎng)液的三角瓶中，置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱中，振蕩培養(yǎng)，28°C，200r/ min培養(yǎng)8h即可獲得種子液，所述的NB培養(yǎng)基配方為蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g， 蒸餾水 lOOOmL，pH7. 3 ；3)堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129發(fā)酵液的制備以培養(yǎng)液 初始pH7. 2，初始接種量2%，裝液量50mL/500mL，將種子液接入到裝有NYBD發(fā)酵培養(yǎng)液的 500mL三角瓶中，置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱中，振蕩培養(yǎng)，28 V，200r/min培養(yǎng)48h，所述的NYBD 培養(yǎng)基配方為牛肉浸膏8g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，氯化鈉5g，水lOOOmL，pH 7. 3 ；4)堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129發(fā)酵培養(yǎng)將搖床發(fā)酵的 菌液接種到裝有IOOmL培養(yǎng)基的200mL種子發(fā)酵罐，初始pH7. 2，溫度32 V，通風(fēng)體積比 1 0.8，從菌種接種后12h菌體生長處于指數(shù)生長中期，轉(zhuǎn)入2000L的發(fā)酵罐，以70%的 罐裝量，PH7.3，溫度為28-34°C，前期通風(fēng)體積比為1 0. 8，后期通風(fēng)體積比為1 1發(fā) 酵，所述大量發(fā)酵培養(yǎng)配方為豆粉1. 8 %，玉米粉1. 6 %，淀粉0. 44 %，碳酸鈣0. 44 %，魚粉 0.47%，硫酸鎂0.01%，磷酸二氫鉀0.03%，其余為水，pH 7. 3，所述的百分數(shù)為重量百分 數(shù)。
4.堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129在防治作物的核桃炭疽病、 黃瓜灰霉病、小麥紋枯病、蘋果輪紋病、煙草赤星病、玉米小斑病、冬棗黑斑病、棉花枯萎病、 棉花紅腐病和小麥赤霉病方面的應(yīng)用。
5.如權(quán)利要求4所述的堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129在防治 黃瓜灰霉病的防治方面的應(yīng)用。
6.堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129在黃瓜促生增產(chǎn)方面的應(yīng)用。
7.堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-02CGMCC No. 3129在防治黃瓜、土豆根線蟲方 面的應(yīng)用。
8.堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-O2CGMCC No. 3129在防止黃條跳甲方面的應(yīng)用。
9.堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)Bf-02CGMCC No. 3129在殺滅臭椿皮蛾和喬蝽巢蛾 方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一株堅強芽孢桿菌。該堅強芽孢桿菌菌株為堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCC No.3129。它作為生物農(nóng)藥，可以防治核桃炭疽病、黃瓜灰霉病、小麥紋枯病、蘋果輪紋病、煙草赤星病、玉米小斑病、冬棗黑斑病、棉花枯萎病、棉花紅腐病、小麥赤霉病等多種植物病害。本發(fā)明通過試驗表明堅強芽孢桿菌(Bacillus firmus)Bf-02 CGMCCNo.3129發(fā)酵液防治蔬菜尤其是黃瓜灰霉病效果顯著，且蔬菜生長健壯，無藥害產(chǎn)生，對黃瓜具有明顯的促生增產(chǎn)效果，一次施藥后增產(chǎn)率為29.95％。
文檔編號A01P1/00GK101845409SQ20091025646
公開日2010年9月29日 申請日期2009年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月31日
發(fā)明者劉幸紅, 張淑靜, 牛贍光, 王清海 申請人:山東省林業(yè)科學(xué)研究院