專利名稱：蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法
蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬循環(huán)農(nóng)業(yè)中的廢物再利用技術(shù)，尤其涉及利用蘋(píng)果渣固體培養(yǎng)菌體蛋白 的方法。
背景技術(shù)：
隨著航天技術(shù)的發(fā)展，中國(guó)提出了航天效益工程，利用太空特殊的環(huán)境條件對(duì)生 物種質(zhì)材料產(chǎn)生的誘變來(lái)培育優(yōu)良品種成為一種有效新途徑；中國(guó)對(duì)農(nóng)作物航天育種技術(shù) 研究較多，已取得了大量成果，中國(guó)發(fā)明專利“一種空間育種的方法”(ZL02125223. 8)，把航 天技術(shù)和農(nóng)業(yè)育種技術(shù)有機(jī)結(jié)合在一起，開(kāi)創(chuàng)了一條嶄新的農(nóng)作物育種新途徑；但利用航 天技術(shù)培育新的菌株，并用于菌體蛋白的合成、提高蛋白轉(zhuǎn)化率尚未見(jiàn)報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，它利用復(fù)配菌 劑接種到以蘋(píng)果渣為基本原料的固體培養(yǎng)基上，能夠獲得蛋白質(zhì)含量為30%以上的菌體蛋 白飼料。
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用技術(shù)方案的基本構(gòu)思是它包括下列步驟
(1)培菌
將太空育種得到的保藏號(hào)為CCTC NO :M209125的黑曲霉ZM-8 (AspergiIlusniger ZM-8)菌株和生產(chǎn)中常見(jiàn)的啤酒酵母、熱帶假絲酵母分別用蒸餾水制成1.0X1011 5. OX IO11個(gè)孢子或細(xì)胞/L的液體菌種，然后將所述保藏號(hào)為CCTCNO :M209125的黑曲霉 ZM-8按50 100mL/kg的接種量接種于麩皮培養(yǎng)基上，于20°C 35°C恒溫培養(yǎng)2天 5天 后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；所述熱帶假絲酵母和啤酒酵母均按50 100mL/kg的接種量接種于玉米 粉培養(yǎng)基上，20°C 35°C恒溫混合培養(yǎng)2天 5天后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；最后把二者培養(yǎng)物按 質(zhì)量比為3 5 1混合成為復(fù)合菌劑；其中，黑曲霉ZM-8 (Aspergillus niger ZM-8) Μ 株，已按專利法實(shí)施細(xì)則第二十五條的規(guī)定在國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局認(rèn)可的保藏單位保藏，保藏 日期2009年6月10日；保藏單位名稱及簡(jiǎn)稱中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，CCTCC ；保藏編 號(hào)CCTCC NO :M209125o
(2)蘋(píng)果渣原料配制
按質(zhì)量kg/體積L的百分比計(jì)，蘋(píng)果渣50% 80%，麩皮20% 40% ；拌勻，潤(rùn) 水，用自來(lái)水配制；
(3)蒸煮
將所述蘋(píng)果渣原料放置蒸煮鍋中蒸20分鐘 35分鐘，出鍋；
(4)接種與培養(yǎng)
所述復(fù)合菌劑按質(zhì)量比kg/干原料kg 5% 10%接種于所述蒸煮步驟后的蘋(píng)果 渣原料中，拌勻，堆制12小時(shí) 48小時(shí)，堆溫不要超過(guò)36°C，期間不斷攪拌，當(dāng)M小時(shí)后原 料上長(zhǎng)滿菌絲體、顏色為灰白時(shí)，將培養(yǎng)物移入發(fā)酵池中，通風(fēng)培養(yǎng)，溫度不要超過(guò)36°C，24小時(shí) 72小時(shí)后培養(yǎng)結(jié)束。
所述麩皮培養(yǎng)基按質(zhì)量kg/體積L的百分比，為麩皮40 % 85 %，蘋(píng)果渣15 % 60 %，磷酸銨0. 5 % 2 %，硫酸鎂0. 01 % 0. 05 %，磷酸二氫鉀0. 002 % 0. 012 %，用自 來(lái)水配制，pH值為4. 0 7. 0，在121°C滅菌15 30分鐘。
所述玉米粉培養(yǎng)基按質(zhì)量kg/體積L的百分比，為玉米淀粉30 % 70 %，磷酸二 氫鉀0. 05% 0. 2%，用自來(lái)水配制，pH值為4. 0 7. 0，在121°C滅菌15分鐘 30分鐘。
在所述蒸煮步驟中，出鍋后按質(zhì)量比kg/干原料kg添加1 % 5 %的尿素為氮源、 5%的白糖為碳源、0. 0. 8%的磷酸二氫鉀，并將蒸料晾至25°C 35°C。
所述接種與培養(yǎng)步驟后還包括下列步驟
(1)出料與烘干
將培養(yǎng)好的半成品從發(fā)酵池中移出，運(yùn)進(jìn)烘干室進(jìn)行烘干。烘干溫度為100°C，時(shí) 間控制在3小時(shí)以內(nèi)，水分控制在5% 7%為宜。
(2)粉碎與質(zhì)檢
烘干后降溫，粉碎，質(zhì)檢后包裝。
本發(fā)明的有益效果是，利用太空誘變獲得的優(yōu)良菌種-黑曲霉ZM-8和生產(chǎn)中常見(jiàn) 的啤酒酵母、熱帶假絲酵母混合復(fù)配制成菌劑，用于蘋(píng)果渣的發(fā)酵，可以獲得蛋白質(zhì)含量為 30%以上的菌體蛋白飼料，比發(fā)酵原料中的粗蛋白含量提高了 5倍多；可以將大量的氮素 轉(zhuǎn)化為蛋白質(zhì)氮，大大地提高了非蛋白氮素的轉(zhuǎn)化率；混菌發(fā)酵后的纖維素含量從15%降 至3. 2%，降低了 4. 7倍；操作簡(jiǎn)單，設(shè)備投入小，按日產(chǎn)IOOOkg的蘋(píng)果渣蛋白飼料的生產(chǎn) 規(guī)模計(jì)算，設(shè)備投資約3萬(wàn)元(不包括廠房投資)，包括攪拌機(jī)、蒸煮鍋、發(fā)酵箱、烘干箱和粉 碎機(jī)等；生產(chǎn)成本低，每噸成品的原料成本約300元。
黑曲霉ZM-8 (Aspergillus niger ZM-8)菌株，已按專利法實(shí)施細(xì)則第二十五條的 規(guī)定在國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局認(rèn)可的保藏單位保藏，保藏日期2009年6月10日；保藏單位名稱 及簡(jiǎn)稱中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，CCTCC ；保藏編號(hào)CCTCCN0 :M209125。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，包括下列步驟
(1)培菌
將黑曲霉CCTC NO :M209125菌株和生產(chǎn)中常見(jiàn)的啤酒酵母、熱帶假絲酵母分別用 蒸餾水制成ι. ο X IO11 5. 0 X IO11個(gè)孢子或細(xì)胞/L的液體菌種，然后將所述的黑曲霉CCTC NO :M209125按50 100mL/kg的接種量接種于麩皮培養(yǎng)基上，于20°C 35°C恒溫培養(yǎng)2 天 5天后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；所述熱帶假絲酵母和啤酒酵母均按50 100mL/kg的接種量接 種于玉米粉培養(yǎng)基上，20°C 35°C恒溫混合培養(yǎng)2 5天后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；最后把二者培 養(yǎng)物按質(zhì)量比為3 51混合成為復(fù)合菌劑；
其中，所述麩皮培養(yǎng)基按質(zhì)量kg/體積L的百分比，為麩皮40% 85%，蘋(píng)果 S 15% 60%，磷酸銨0.5% 2%，硫酸鎂0.01% 0. 05 %，磷酸二氫鉀0. 002 % 0. 012%，用自來(lái)水配制，PH值為4. 0 7. 0，在121°C滅菌15分鐘 30分鐘。
其中，所述麩皮培養(yǎng)基按質(zhì)量kg/體積L的百分比，為玉米淀粉30% 70%，磷酸二氫鉀0. 05 % 0. 2 %，用自來(lái)水配制，pH值為4. 0 7. 0，在121 °C滅菌15分鐘 30分鐘。
(2)蘋(píng)果渣原料配制
按質(zhì)量kg/體積L的百分比計(jì)，蘋(píng)果渣50% 80%，麩皮20% 40% ；拌勻，潤(rùn) 水，用自來(lái)水配制；
⑶蒸煮
將所述蘋(píng)果渣原料放置蒸煮鍋中蒸20分鐘 35分鐘，出鍋；
(4)接種與培養(yǎng)
所述復(fù)合菌劑按質(zhì)量比kg/干原料kg 5% 10%接種于所述蒸煮步驟后的蘋(píng)果 渣原料中，拌勻，堆制12小時(shí) 48小時(shí)，堆溫不要超過(guò)36°C，期間不斷攪拌，當(dāng)M小時(shí)后原 料上長(zhǎng)滿菌絲體、顏色為灰白時(shí)，將培養(yǎng)物移入發(fā)酵池中，通風(fēng)培養(yǎng)，溫度不要超過(guò)36°C，24 小時(shí) 72小時(shí)后培養(yǎng)結(jié)束。
(5)出料與烘干
將培養(yǎng)好的半成品從發(fā)酵池中移出，運(yùn)進(jìn)烘干室進(jìn)行烘干。烘干溫度為100°C，時(shí) 間控制在3小時(shí)以內(nèi)，水分控制在5% 7%為宜。
(6)粉碎與質(zhì)檢
烘干后降溫，粉碎，質(zhì)檢后包裝。
實(shí)施例2
蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，包括下列步驟
其中，對(duì)應(yīng)于實(shí)施例1的各個(gè)步驟，下面僅列出不同的步驟，步驟1)、2)、4)、5)、6) 與實(shí)施例1中相同，在此不再贅述。
步驟幻蒸煮將所述蘋(píng)果渣原料放置蒸煮鍋中蒸20 35分鐘，出鍋后按質(zhì)量比 kg/干原料kg添加 5%的尿素為氮源、 5%的白糖為碳源、0. 0.8%的磷酸 二氫鉀，并將蒸料晾至25°C 35°C。
權(quán)利要求
1.一種蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，其特征在于，它包括下列步驟(1)培菌將太空育種得到的保藏號(hào)為CCTC NO :M209125的黑曲霉ZM-8 (Aspergi Ilusniger ZM-8)菌株和生產(chǎn)中常見(jiàn)的啤酒酵母、熱帶假絲酵母分別用蒸餾水制成1.0X1011 5. OX IO11個(gè)孢子或細(xì)胞/L的液體菌種，然后將所述黑曲霉CCTCNO :M209125按50 IOOmL/ kg的接種量接種于麩皮培養(yǎng)基上，于20°C 35°C恒溫培養(yǎng)2天 5天后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；所 述熱帶假絲酵母和啤酒酵母均按50 100mL/kg的接種量接種于玉米粉培養(yǎng)基上，20°C 35°C恒溫混合培養(yǎng)2天 5天后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；最后把二者培養(yǎng)物按質(zhì)量比為3 5 1 混合成為復(fù)合菌劑；(2)蘋(píng)果渣原料配制按質(zhì)量kg/體積L的百分比計(jì)，蘋(píng)果渣50% 80%，麩皮20% 40% ；拌勻，潤(rùn)水，用 自來(lái)水配制；(3)蒸煮將所述蘋(píng)果渣原料放置蒸煮鍋中蒸20 35分鐘，出鍋；(4)接種與培養(yǎng)所述復(fù)合菌劑按質(zhì)量比kg/干原料kg 5% 10%接種于所述蒸煮步驟后的蘋(píng)果渣原 料中，拌勻，堆制12小時(shí) 48小時(shí)，堆溫不要超過(guò)36°C，期間不斷攪拌，當(dāng)M小時(shí)后原料 上長(zhǎng)滿菌絲體、顏色為灰白色時(shí)，將培養(yǎng)物移入發(fā)酵池中，通風(fēng)培養(yǎng)，溫度不要超過(guò)36°C，24 小時(shí) 72小時(shí)后培養(yǎng)結(jié)束。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，其特征在于，所述麩皮培養(yǎng)基按 質(zhì)量kg/體積L的百分比，為麩皮40 % 85 %，蘋(píng)果渣15 % 60 %，磷酸銨0. 5 % 2 %， 硫酸鎂0. 01 % 0. 05 %，磷酸二氫鉀0. 002 % 0. 012 %，用自來(lái)水配制，pH值為4. 0 7. 0，在121°C滅菌15分鐘 30分鐘。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，其特征在于，所述玉米粉培養(yǎng)基 按質(zhì)量kg/體積L的百分比，為玉米淀粉30% 70%，磷酸二氫鉀0. 05 % 0. 2 %，用自 來(lái)水配制，PH值為4. 0 7. 0，在121°C滅菌15分鐘 30分鐘。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，其特征在于，在所述蒸煮步驟 中，出鍋后按質(zhì)量比kg/干原料kg添加 5%的尿素為氮源、 5%的白糖為碳源、 0. 0. 8%的磷酸二氫鉀，并將蒸料晾至25 35°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)技術(shù)，其特征在于，所述堆制與培養(yǎng)步 驟后還包括下列步驟(1)出料與烘干將培養(yǎng)好的半成品從發(fā)酵池中移出，運(yùn)進(jìn)烘干室進(jìn)行烘干。烘干溫度為100°C，時(shí)間控 制在3小時(shí)以內(nèi)，水分控制在5% 7%為宜。(2)粉碎與質(zhì)檢烘干后降溫，粉碎，質(zhì)檢后包裝。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種蘋(píng)果渣菌體蛋白生產(chǎn)方法，它利用復(fù)配菌劑接種到以蘋(píng)果渣為基本原料的固體培養(yǎng)基上，能夠獲得蛋白質(zhì)含量為30％以上的菌體蛋白飼料。它包括下列步驟(1)培菌將黑曲霉CCTCC NOM209125接種于麩皮培養(yǎng)基上，于20℃～35℃恒溫培養(yǎng)2天～5天后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；熱帶假絲酵母和啤酒酵母均接種于玉米粉培養(yǎng)基上，20℃～35℃恒溫混合培養(yǎng)2天～5天后，將培養(yǎng)物風(fēng)干；最后把二者培養(yǎng)物混合成為復(fù)合菌劑。(2)蘋(píng)果渣原料配制。(3)蒸煮。(4)接種與培養(yǎng)所述復(fù)合菌劑接種于所述蒸煮步驟后的蘋(píng)果渣原料中，拌勻，當(dāng)原料顏色為灰白時(shí)，將培養(yǎng)物移入發(fā)酵池中，通風(fēng)培養(yǎng)，24小時(shí)～72小時(shí)后培養(yǎng)結(jié)束。
文檔編號(hào)A23K1/00GK102028097SQ20091017962
公開(kāi)日2011年4月27日 申請(qǐng)日期2009年10月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年10月6日
發(fā)明者鞏曉芳, 張宗舟, 張永科, 曹莉, 楊子娟, 王淑娟, 陳志梅 申請(qǐng)人:鞏曉芳, 張宗舟, 陳志梅