專利名稱：蜜蜂種蜂人工授精培育方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蜜蜂種蜂人工授精方法。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的提高，人們的保健意識(shí)增強(qiáng)，國(guó)內(nèi)國(guó)外市場(chǎng)對(duì)蜂王漿 的需求量在急速增加，而現(xiàn)有的蜂種，王漿產(chǎn)量及蜂群的詞養(yǎng)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足 這一需求。同時(shí)，蜜蜂經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期飼養(yǎng)，常造成種性混雜、退化，維持群勢(shì)的能 力減弱，產(chǎn)育力(蜂王產(chǎn)卵力與工蜂哺育力)、抗病力和抗逆性衰退，生產(chǎn)性能 下降。長(zhǎng)久以來(lái)，蜂農(nóng)就想通過(guò)飼養(yǎng)王漿高產(chǎn)蜂種，以提高蜂王漿的產(chǎn)量來(lái)增 加自己的收入，但市場(chǎng)上的王漿高產(chǎn)蜂種都存在一定的缺陷王漿高產(chǎn)，采集 力卻低下，或盜蜂成性，或是抗病力太差，或不能維持強(qiáng)群，這些都是阻礙群 勢(shì)發(fā)展及生產(chǎn)的重大因素，因此需要進(jìn)一步做好蜂種的提純、復(fù)壯，培育出高 產(chǎn)抗病的蜂種，全面提高蜂群生產(chǎn)力。
在近代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的實(shí)踐中，不同品種、品系的生產(chǎn)性雜交，能在較短時(shí)間 內(nèi)大大提高生產(chǎn)力，在養(yǎng)蜂生產(chǎn)上，充分利用雜種優(yōu)勢(shì)也是一項(xiàng)有效的增產(chǎn)措 施。據(jù)有關(guān)報(bào)導(dǎo)，外來(lái)蜂種兩元雜交后的第一代、第二代產(chǎn)蜜量比高產(chǎn)的意蜂 提高三成以上，三元雜交的增產(chǎn)更多。通過(guò)選種和繁育兩個(gè)步驟，可提高其生 產(chǎn)力，并為培育高產(chǎn)雜交種和新品種提供素材。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題就是提供一種蜜蜂種蜂人工授精培育方法，以 培育出高產(chǎn)抗病的蜂種，全面提高蜂群生產(chǎn)力。其培育出的蜂群在采集力、抗 病力、抗逆性、產(chǎn)卵率、產(chǎn)漿量等方面都有較大的提高，而且提高釆集的王漿和花粉產(chǎn)量。
為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明釆用如下技術(shù)方案蜜蜂種蜂人工授精培育 方法，其特征在于包括如下步驟
1) 雄蜂培育利用引進(jìn)的優(yōu)良蜂種培育出新的優(yōu)質(zhì)蜂種，同時(shí)在雄蜂性成熟前 培育處女王；
2) 釆精用氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖及雙重蒸餾水配制成精子稀釋液，裝瓶后 高溫滅菌，然后把精子稀釋液裝入精液采集器的采集管內(nèi)，用消毒的玻璃棒將 雄蜂的精液及粘液刮到稀釋液內(nèi)，當(dāng)稀釋液內(nèi)漂洗有足夠的精液時(shí)，將釆集器 放入離心機(jī)的離心管內(nèi)進(jìn)行離心分離以分離出精液；
3) 授精選擇性成熟處女王，裝入麻醉室，安裝到授精儀底座的固定夾上，開 啟C02流量，在處女王進(jìn)入昏迷狀態(tài)時(shí)，進(jìn)行人工授精，授精完畢方可解除麻醉；
4) 將授精蜂王放在具有3框足蜂以上的核群中產(chǎn)卵。
作為優(yōu)選，所述步驟1)雄蜂培育過(guò)程中要清除群內(nèi)雄蜂，并安裝雄蜂阻隔 器，使外界雄蜂不能混入，再加入雄蜂空巢脾，運(yùn)用單脾扣王法，使蜂王這天 只在雄蜂脾上產(chǎn)生受精卵，在雄蜂性成熟前除去雄蜂阻隔器，采用雄蜂飛翔籠， 控制雄蜂的純潔度。
作為優(yōu)選，所述步驟2)中精子稀釋液中氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖的重量比 為8: 1: 3，精子稀釋液的pH值調(diào)至7.5，裝瓶后115.6""C熱壓滅菌15分鐘。
作為優(yōu)選，所述步驟2)中離心機(jī)以每分鐘2500轉(zhuǎn)的速度分離10分鐘。
作為優(yōu)選，所述步驟2)中精液離心分離后如果在常溫下貯存2天以上，需 將采集管的開口端在酒精燈上封閉。
作為優(yōu)選，所述步驟3)中一次性授精注射精液，若分二次授精，則每 次各注射4 5W精液，且第一次與第二次授精間隔時(shí)間為24 28小時(shí)。作為優(yōu)選，所述步驟3)中C02流量通過(guò)調(diào)節(jié)閥門控制每分鐘流出300個(gè)氣泡， 麻醉時(shí)間30秒。
作為優(yōu)選，所述步驟3)中每只蜂王從麻醉至授精結(jié)束必須控制在5分鐘以 內(nèi)，蜂王的背腹板一經(jīng)打開，必須及時(shí)進(jìn)針注射。
本發(fā)明由于采用了上述技術(shù)方案進(jìn)行蜜蜂種蜂人工授精培育，其培育出的
蜂群在采集力、抗病力、抗逆性、產(chǎn)卵率、產(chǎn)漿量等方面都有較大的提高，而
且提高采集的王槳和花粉產(chǎn)量。
具體實(shí)施例方式
以下是本發(fā)明蜜蜂種蜂人工授精培育方法的實(shí)施例，其過(guò)程如下
1、 雄蜂培育利用引進(jìn)的優(yōu)良蜂種培育出新優(yōu)質(zhì)蜂種。在此過(guò)程中清除群 內(nèi)雄蜂，安裝雄蜂阻隔器，使外界雄蜂不能混入，再加入雄蜂空巢脾，運(yùn)用單 脾扣王法，使蜂王這天只在雄蜂脾上產(chǎn)生受精卵。以后出的雄蜂都是同一天出 房(少量也有一定的時(shí)間差)，同一天性成熟，便于控制性成熟雄蜂的數(shù)量。在 雄蜂性成熟前除去雄蜂阻隔器，采用雄蜂飛翔籠，控制雄蜂的純潔度(不含外 界蜂種)，同時(shí)移蟲培育處女王，使雄蜂與處女王性成熟期相同或相近(相差不 超過(guò)二天)。在人工授精儀上我們采用低能聚光采光法，這種光線可以達(dá)到人工 授精采光要求，同時(shí)不會(huì)使蜂王受熱發(fā)生生理上的變化。
2、 采精當(dāng)雄蜂12天性成熟后，配制好精子稀釋液，精子稀釋液配制如 下表。
試劑氯化鈉氯化鉀葡萄糖
用量L60g0. 20g0. 60g
備注用雙重蒸餾水定容至200ml，pH值調(diào)至7.5，裝瓶后 115.6。C熱壓滅菌15分鐘。6選擇腹部環(huán)節(jié)收縮的比較緊、腹部顯得堅(jiān)硬、翅與腹部的比值略大些、行 動(dòng)比較靈敏的雄蜂進(jìn)行采精。采精時(shí)左手拇、食、中指輕輕的對(duì)其胸部向后施
加壓力，并使尾部朝上，右手拇指按在雄蜂腹部背面1一3節(jié)，與左手的拇、食 指同時(shí)向腹部尾端施加壓力，使腹腔的血淋巴積壓內(nèi)陽(yáng)莖，迫使陽(yáng)莖漸次外翻， 首先翻出的是陽(yáng)莖基板，然后是一對(duì)角囊和羽狀突，最后是陽(yáng)莖球，射精管開 口于陽(yáng)莖球，當(dāng)陽(yáng)莖球末端冒出淡黃褐色精液時(shí)，停止擠壓。加壓時(shí)用力要穩(wěn) 妥，切勿操之過(guò)急，如用力太大，容易導(dǎo)致精液飛濺或陽(yáng)莖球破裂，使精液混 入體液。在雄蜂陽(yáng)莖外翻過(guò)程中，切勿使外翻的陽(yáng)莖球及精液接觸到雄蜂體表 面及操作者的手指，以免造成污染。采精時(shí)，將采集器垂直固定在支架上，采 集管內(nèi)裝有七分滿面的精子稀釋液，用消毒的玻璃棒將雄蜂的精液及粘液刮到 稀釋液內(nèi)，利用精液采集器一次可以采集數(shù)十只雄蜂精液。當(dāng)稀釋液內(nèi)漂洗有 足夠的精液時(shí)，將采集器放入離心機(jī)的離心管內(nèi)，以每分鐘2500轉(zhuǎn)的速度分離 10分鐘。離心后，稀釋液位于精液上面，中間部分是精液，粘液沉積在采集管 的底部。用刀片將聚乙烯采集管切斷，使采集管與漏斗分開。離心分離后如果 在當(dāng)日內(nèi)用此精液給蜂王授精，將采集管的封閉端切開，用注射器把精液吸入 或注入授精針頭。離心分離后如果在常溫下貯存2天以上，需將采集管的開口 端在酒精燈上封閉。當(dāng)時(shí)采精當(dāng)時(shí)授精，污染機(jī)會(huì)少，精子在體外滯留時(shí)間短， 活力較強(qiáng)， 一般不需要檢査精子活力情況。
3、授精安裝好人工授精設(shè)備，采用低能聚光采光，選擇性成熟處女王， 裝入麻醉室(固定管)，安裝到授精儀底座上的固定夾上，開啟C(V流量，通過(guò) 調(diào)節(jié)閥門以每分鐘流出300個(gè)氣泡為宜，麻醉時(shí)間30秒左右，處女王進(jìn)入昏迷 狀態(tài)，直到授精完畢，方可解除麻醉。蜂王麻醉的同時(shí)，調(diào)節(jié)顯微鏡的位置及 焦距，使處女王的腹部清晰的呈現(xiàn)在視野中央。然后移動(dòng)背腹鉤操縱桿，當(dāng)蜂王腹部停止抽動(dòng)時(shí)，移動(dòng)腹鉤操縱桿，使腹鉤鉤住腹板，接著在探險(xiǎn)針的配合 下使背鉤鉤住背板，同時(shí)移動(dòng)背、腹鉤操縱桿，使背鉤端部"膨大"部分伸到 蜂王螫針鞘基部，并使其嵌入基部的三角縫內(nèi)。背鉤嵌入后，在此移動(dòng)背腹鉤 操縱桿，把背腹板距離拉至5 6mm。蜂王背腹板拉開后，調(diào)整蜂王的角度，使 蜂王的縱軸線與注射器縱軸線平行,蜂王縱軸線與授精儀垂直線的角度為32度。 調(diào)節(jié)縱向?qū)к壥贯樈咏幍揽?，將陰道探針插入陰道，并向蜂王腹面靠攏，使 探針壓住陰道瓣突，并使陰道口擴(kuò)張，調(diào)節(jié)縱向?qū)к壥贯樇庋刂结樀谋辈啃?徐進(jìn)入陰道，直至中輸卵管，取出探針，當(dāng)進(jìn)針深度達(dá)到1. 8mm，進(jìn)針略感到受 阻力，陰道口有下陷跡象時(shí)，停止進(jìn)針，然后將針頭稍退出一點(diǎn)，開始注射精 液， 一次性授精通常注射8W精液(若分二次授精，則每次各注射4 5W精液， 第一次與第二次授精間隔時(shí)間為24 28小時(shí))。注精完畢，稍待10 15秒后退 出針頭，卸下麻醉室，小心退出蜂王，給蜂王作上標(biāo)記，待蘇醒后送回原核群。 并在小核群的巢門口安裝隔王柵或脫粉片，防止授精王飛出巢外。次日用C02 再次麻醉5 10分鐘，促進(jìn)授精蜂王的早日產(chǎn)卵。
4、授精蜂王必須放在具有3框足蜂以上的核群中，這種核群的保溫性能好， 新蜂王產(chǎn)卵比較快， 一般在2 5天內(nèi)產(chǎn)卵。當(dāng)授精王開始產(chǎn)卵時(shí)就成為一只新 蜂王，記錄一周內(nèi)的產(chǎn)卵量。新蜂王產(chǎn)的卵經(jīng)過(guò)十一天封蓋，觀察封蓋子的情 況，選擇封蓋平整，封蓋面積大，沒(méi)有花子的新蜂王為商品王，可以出售。商 品王售出后必須跟蹤服務(wù)，記錄新王群的經(jīng)濟(jì)性能?？共×Α⒖鼓嫘阅?、盜性、 溫馴性，并記錄雄蜂的顏色、工蜂的形態(tài)特征等。
人工授精操作的幾個(gè)控制點(diǎn)，人工授精技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室的精細(xì)工作，優(yōu) 良的實(shí)驗(yàn)環(huán)境、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、性能優(yōu)越的蜂種、精深的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是人工授 精成功的必要條件，而精深的人工授精技術(shù)操作是成功的關(guān)鍵。經(jīng)過(guò)人工授精操作的實(shí)踐，我們總結(jié)了以下控制點(diǎn)
1、 在授精操作過(guò)程中，必須操作輕穩(wěn)，準(zhǔn)確不顫抖，以免背腹鉤和針頭損 傷蜂王。
2、 熟練掌握體視顯微鏡、授精儀的各部件性能，必須在雙眼不離開目鏡的 情況下，雙手能操作自如。
3、 每只蜂王從麻醉至授精結(jié)束必須控制在5分鐘以內(nèi)，熟練者大約在2分 鐘左右。蜂王的背腹板一經(jīng)打開，必須及時(shí)進(jìn)針注射，以免陰道口干燥造成進(jìn) 針困難。再之，背腹板長(zhǎng)時(shí)間打開會(huì)增加污染的機(jī)會(huì)。
4、 在進(jìn)行授精蜂王觀察的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，溫度是影響精子轉(zhuǎn)移速度的重要因 素。授精蜂王必須放在具有3框足蜂以上的核群中，這種核群的保溫、調(diào)溫性 能比較好，產(chǎn)卵期提前。
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權(quán)利要求
1、蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于包括如下步驟1)雄蜂培育利用引進(jìn)的優(yōu)良蜂種培育出新的優(yōu)質(zhì)蜂種，同時(shí)在雄蜂性成熟前培育處女王；2)采精用氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖及雙重蒸餾水配制成精子稀釋液，裝瓶后高溫滅菌，然后把精子稀釋液裝入精液采集器的采集管內(nèi)，用消毒的玻璃棒將雄蜂的精液及粘液刮到稀釋液內(nèi)，當(dāng)稀釋液內(nèi)漂洗有足夠的精液時(shí)，將采集器放入離心機(jī)的離心管內(nèi)進(jìn)行離心分離以分離出精液；3)授精選擇性成熟處女王，裝入麻醉室，安裝到授精儀底座的固定夾上，開啟CO2流量，在處女王進(jìn)入昏迷狀態(tài)時(shí)，進(jìn)行人工授精，授精完畢方可解除麻醉；4)將授精蜂王放在具有3框足蜂以上的核群中產(chǎn)卵。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于所述步驟1) 雄蜂培育過(guò)程中要清除群內(nèi)雄蜂，并安裝雄蜂阻隔器，使外界雄蜂不能混入， 再加入雄蜂空巢脾，運(yùn)用單脾扣王法，使蜂王這天只在雄蜂脾上產(chǎn)生受精卵。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的蜜峰種蜂人工授精培育方法，其特征在于在雄蜂性 成熟前除去雄蜂阻隔器，采用雄蜂飛翔籠，控制雄蜂的純潔度。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于所述步驟2) 中精子稀釋液中氯化鈉、氯化鉀、葡萄糖的重量比為8: 1: 3，精子稀釋液 的pH值調(diào)至7.5，裝瓶后115.6'C熱壓滅菌15分鐘。
5、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于所述步驟 2)中離心機(jī)以每分鐘2500轉(zhuǎn)的速度分離10分鐘。
6、 根據(jù)權(quán)利要求5所述的蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于所述步驟 2)中精液離心分離后如果在常溫下貯存2天以上，需將采集管的開口端在酒精 燈上封閉。
7、 根據(jù)權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于:所述步驟3)中一次性授精注射8W精液，若分二次授精，則每次各注射4 5W 精液，且第一次與第二次授精間隔時(shí)間為24 28小時(shí)。
8、 根據(jù)權(quán)利要求7所述的蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于所述步驟 3)中C02流量通過(guò)調(diào)節(jié)閥門控制每分鐘流出300個(gè)氣泡，麻醉時(shí)間30秒。
9、 根據(jù)權(quán)利要求7所述的蜜蜂種蜂人工授精培育方法，其特征在于所述步驟 3)中每只蜂王從麻醉至授精結(jié)束必須控制在5分鐘以內(nèi)，蜂王的背腹板一經(jīng)打 開，必須及時(shí)進(jìn)針注射。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種蜜蜂種蜂人工授精培育方法，包括如下步驟(1)雄蜂培育利用優(yōu)良蜂種培育出新的優(yōu)質(zhì)蜂種，同時(shí)在雄蜂性成熟前培育處女王；(2)采精配制成精子稀釋液，裝瓶后高溫滅菌，然后把精子稀釋液裝入精液采集器的采集管內(nèi)，用消毒的玻璃棒將雄蜂的精液及粘液刮到稀釋液內(nèi)，當(dāng)稀釋液內(nèi)漂洗有足夠的精液時(shí)，將采集器放入離心機(jī)的離心管內(nèi)進(jìn)行離心分離以分離出精液；(3)授精選擇性成熟處女王，裝入麻醉室，在處女王進(jìn)入昏迷狀態(tài)時(shí)，進(jìn)行人工授精，授精完畢方可解除麻醉。利用本方法培育出的蜂群在采集力、抗病力、抗逆性、產(chǎn)卵率、產(chǎn)漿量等方面都有較大的提高，而且提高采集的王漿和花粉產(chǎn)量。
文檔編號(hào)A01K67/033GK101664018SQ20091015290
公開日2010年3月10日 申請(qǐng)日期2009年9月18日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月18日
發(fā)明者沈衛(wèi)平 申請(qǐng)人:沈衛(wèi)平