專利名稱:蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置及蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置及蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法,用于培養(yǎng)以
液體為培養(yǎng)基材的菌種(液體菌種)。
背景技術(shù):
在金針菇、蟹味菇、灰樹菇、滑菇、杏鮑菇等蘑菇的人工栽培中,使用菌種。菌種是 指,用以鋸屑或切屑為基體材料的固體培養(yǎng)基或者液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)蘑菇的次生菌絲,使 操作變得容易,若以植物作比喻則有如種子。將該菌種接種于培養(yǎng)基中,經(jīng)過蘑菇(子實 體)的制造工序(培養(yǎng)工序、發(fā)育工序、培育工序),就能夠收獲蘑菇。 在菌種的制造中,具有固體培養(yǎng)和液體培養(yǎng)兩種方法,但固體培養(yǎng)普遍。然而固體 培養(yǎng)的操作比液體培養(yǎng)復(fù)雜,也費時間。因此,那樣會使用于培養(yǎng)的空間變狹窄。另外,由 于使用培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)菌種,因此需要準備多瓶培養(yǎng)瓶,從而使培養(yǎng)瓶的操作變復(fù)雜。
另外,在固體培養(yǎng)的情況下,實際上若不在培養(yǎng)基中接種菌種并試著栽培蘑菇則 無法確認菌種的好壞,因此在菌種出現(xiàn)問題時就會存在以下問題產(chǎn)生栽培損失,且即使在 使菌種恢復(fù)的情況下到恢復(fù)為止也需要花費時間。
因此液體培養(yǎng)受到矚目,例如在專利文獻1中公開有蘑菇的液體菌種的制造方 法。在圖7中示意地表示該蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法的工序。這里,圖7中的白圓表示 閥門打開的狀態(tài),黑圓表示閥門關(guān)閉的狀態(tài)。
專利文獻1 :日本特開2002-51639號公報 在加熱殺菌工序中,由于加熱使培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣膨脹,因此必須將該空氣向培養(yǎng) 罐外排氣,然而根據(jù)專利文獻1,如圖7中上部的(A)所示,在加熱殺菌工序中打開閥門 (52)進行排氣的情況下(虛線箭頭表示排氣的流動),在冷卻工序中流進空氣時,由于在閥 門(52)側(cè)的管上未設(shè)置過濾器,因此雜菌也一起侵入。另外,如圖7中下部的(B)所示,在 加熱殺菌工序中打開閥門(45)及(48)進行殺菌的情況下(虛線箭頭表示排氣的流動),由 于在冷卻工序中流入的空氣經(jīng)過過濾器(44)因此可以不污染培養(yǎng)罐內(nèi)。然而,由于在加熱 殺菌時培養(yǎng)罐內(nèi)的壓力升高,因此培養(yǎng)液向培養(yǎng)罐外逆流(實線的箭頭表示液體的逆流)。 另外,根據(jù)專利文獻1,由于不取下壓力計(54),因此在加熱殺菌時壓力計易破損。
發(fā)明內(nèi)容
因此,本發(fā)明的目的在于,提供一種能夠較好地進行制造工序中的罐內(nèi)外空氣的 供給及排氣的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置及蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法。 為了實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明是一種蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置,其特征在于,具有 培養(yǎng)罐,其用于容納培養(yǎng)液并培養(yǎng)菌種;曝氣裝置,其用于將空氣供給到培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液 中進行曝氣,曝氣裝置具有送氣管,其將從流入口導(dǎo)入的空氣從罐下部的噴出口送到培養(yǎng) 罐內(nèi)的培養(yǎng)液中;排氣管,其將供給到培養(yǎng)罐內(nèi)培養(yǎng)液中的空氣,經(jīng)培養(yǎng)罐上部的排氣管口 向培養(yǎng)罐外排氣;帶開閉閥的旁通管,其將送氣管和排氣管在培養(yǎng)罐的外部進行旁通,送氣
4管上具有第一閥門,其以可自由開閉的方式設(shè)置在流入口側(cè),以便向培養(yǎng)罐內(nèi)接種菌種時 阻止空氣流向培養(yǎng)罐;第二閥門,其以可自由開閉的方式設(shè)置在比第一閥門更靠近下游側(cè) 并且比旁通管的分支部更靠近下游側(cè),以便在培養(yǎng)液的加熱殺菌時阻止培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液 逆流;過濾器,其介于第一閥門與其下游側(cè)的上述旁通管的分支部之間,用于凈化從流入口 流入的空氣,在排氣管上具有壓力計,其以自由拆裝的方式設(shè)置在比旁通管的分支部更靠 近的下游側(cè);第三閥門及第四閥門,它們隔著壓力計并配置在其兩側(cè),在取下壓力計時進行 封閉。 使用這樣的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置,通過依次進行以下工序,即在培養(yǎng)液的加 熱殺菌前進行的加熱殺菌準備工序、在高溫環(huán)境下對培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液進行加熱殺菌的加 熱殺菌工序、進行培養(yǎng)液的冷卻的冷卻工序、在培養(yǎng)液中接種菌種的菌種接種工序、進行菌 種的培養(yǎng)的菌種培養(yǎng)工序,由此能夠培養(yǎng)蘑菇的液體菌種。 g卩,在加熱殺菌準備工序中,在培養(yǎng)罐內(nèi)容納培養(yǎng)液,并且將以自由拆裝的方式固 定在排氣管的安裝口上的壓力計取下,在安裝口處關(guān)閉蓋。通過在加熱殺菌前預(yù)先取下壓 力計,從而將由熱引起的壓力計的破損防患于未然。另外,通過在壓力計的安裝口處關(guān)閉 蓋,從而能夠防止從安裝口流入污染空氣。 在加熱殺菌工序中,在打開第一閥門及開閉閥的同時,關(guān)閉第二閥門、第三閥門以 及第四閥門,將培養(yǎng)罐內(nèi)膨脹的空氣,從排氣管經(jīng)由旁通管及送氣管從送氣管的流入口排 出。通過伴隨著加熱的培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣的膨脹,就能夠防止培養(yǎng)罐內(nèi)的壓力變得過高。另 外,借助關(guān)閉狀態(tài)的第二閥門,就能夠阻止培養(yǎng)液從處于高壓狀態(tài)的培養(yǎng)罐內(nèi)向培養(yǎng)罐外 逆流。 在冷卻工序中,在關(guān)閉第三閥門及第四閥門封閉了排氣管的狀態(tài)下,取下蓋將壓 力計安裝到安裝口,并且在保持打開第一閥門及開閉閥,關(guān)閉第二閥門、第三閥門及第四閥 門的狀態(tài)下,伴隨由冷卻引起的培養(yǎng)罐內(nèi)空氣的凝結(jié)而將空氣從送氣管的流入口經(jīng)由送氣 管、過濾器、旁通管以及排氣管,再從向培養(yǎng)罐內(nèi)開口的排氣管口,朝向培養(yǎng)罐內(nèi)流入。由于 在安裝壓力計時,第三閥門及第四閥門被關(guān)閉,因此能夠?qū)娜∠律w時的安裝口流入的空 氣帶來的污染抑制到最小限度。另外,在空氣流入時,由于在送氣管上設(shè)置有過濾器,因此 能夠凈化從流入口流入的空氣。因此,能夠防止培養(yǎng)罐內(nèi)的污染。另外,可以在培養(yǎng)罐的外 周設(shè)置水套,以便在冷卻工序中使水在水套內(nèi)循環(huán)。與自然冷卻相比能夠顯著縮短冷卻時 間。 在菌種接種工序中,在培養(yǎng)罐的培養(yǎng)液中接種菌種。借助關(guān)閉狀態(tài)的第一閥門,就 能夠在菌種接種時阻止向培養(yǎng)罐流入空氣。 在菌種培養(yǎng)工序中,在打開第一閥門、第二閥門、第三閥門及第四閥門的同時關(guān)閉 開閉閥,將空氣從流入口經(jīng)過送氣管從噴出口送出,從而進行培養(yǎng)液的曝氣,并且使培養(yǎng)罐 內(nèi)的空氣從排氣管口導(dǎo)入,并經(jīng)過排氣管而從排氣口排氣。 另外,優(yōu)選為,設(shè)置攪拌裝置,用于攪拌培養(yǎng)罐內(nèi)容納的培養(yǎng)液。攪拌裝置具有攪 拌葉片,和與攪拌葉片的葉片軸連結(jié)的驅(qū)動電動機,葉片軸的上端露在罐外,將驅(qū)動電動機 以可自由拆裝的方式設(shè)置在葉片軸上的構(gòu)成較好。由于可將驅(qū)動電動機進行自由拆裝,從 而能夠防止在加熱殺菌時驅(qū)動電動機的破損。 根據(jù)本發(fā)明,通過在用于在培養(yǎng)罐內(nèi)進行空氣的供給及排氣的曝氣裝置的規(guī)定位置上設(shè)置多個閥門,并根據(jù)各工序進行閥門的開閉,從而能夠較好地進行培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣 的供給及排氣。
圖1是本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置的俯視圖。 圖2是本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置的局部透視側(cè)視圖。 圖3是表示壓力計或者蓋的安裝狀態(tài)的圖,(a)是表示蓋的安裝狀態(tài)的立體圖,
(b)是表示壓力計的安裝狀態(tài)的立體圖。 圖4是表示壓力計或者蓋的安裝狀態(tài)的圖,(a)是表示蓋的安裝狀態(tài)的剖視圖, (b)是表示壓力計的安裝狀態(tài)的剖視圖。 圖5是表示驅(qū)動電動機與攪拌葉片的軸的連結(jié)狀態(tài)的圖。 圖6是表示本實施方式的蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法的工序的圖。 圖7是表示以往的蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法的工序的圖。 圖8是表示本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置的清洗臺裝置的立體圖。 圖9是表示本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置的清洗臺裝置的側(cè)視圖。
附圖標記說明1...培養(yǎng)罐;2...曝氣裝置;3...送氣管;3a...上游側(cè)送氣管;
3b...下游側(cè)送氣管;4...排氣管;4a...上游側(cè)排氣管;4b...下游側(cè)排氣管;5...旁通
管;6...流入口 ;7...噴出口 ;9...送氣單元;10...第一閥門;11...過濾器;12...第
二閥門;14...排氣管口 ;15...排氣口 ;16...壓力計;17...第三閥門;18...第四閥門;
19.箍夾;20.安裝口 ;21.塞;22.開閉閥;24.蓋;27.接種口 ;33.水套;
34...攪拌裝置;41...清洗臺裝置。
具體實施例方式
以下,說明本發(fā)明的實施方式。圖1是本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置的 俯視圖,圖2是本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置的局部透視側(cè)視圖,圖3是表示壓 力計或者蓋的安裝狀態(tài)的圖,(a)是表示蓋的安裝狀態(tài)的立體圖,(b)是表示壓力計的安裝 狀態(tài)的立體圖,圖4是表示壓力計或者蓋的安裝狀態(tài)的圖,(a)是表示蓋的安裝狀態(tài)的剖視 圖,(b)是表示壓力計的安裝狀態(tài)的剖視圖,圖5是表示驅(qū)動電動機與攪拌葉片的軸的連結(jié) 狀態(tài)的圖。 如圖1及圖2所示,本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置具有培養(yǎng)罐l,其用 于容納培養(yǎng)液并培養(yǎng)菌種;曝氣裝置2,其用于將空氣供給到培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液中進行曝 氣。 曝氣裝置2的構(gòu)成包括送氣管3,其將空氣送入培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液中;排氣管 4,其將供給到培養(yǎng)罐1內(nèi)的空氣向培養(yǎng)罐1外排氣;旁通管5,其將送氣管3和排氣管4在 培養(yǎng)罐1的外部進行旁通,它們通過將多個金屬制的管連結(jié)而構(gòu)成。 送氣管3,以連通培養(yǎng)罐1內(nèi)外的方式設(shè)置,流入口 6開口于培養(yǎng)罐1夕卜,噴出口 7 在培養(yǎng)罐l內(nèi)的下部可開口于培養(yǎng)液中,通往旁通管5的分支部配置在培養(yǎng)罐1外。送氣 管3由從流入口 6到分支部為止的上游側(cè)送氣管3a,和從分支部到噴出口 7為止的下游 側(cè)送氣管3b構(gòu)成。
送氣管3的噴出口 7,可以構(gòu)成送氣管3的管的前端開口,然而構(gòu)成為使管的前端 部分彎曲,并在其彎曲部的側(cè)面設(shè)置多個孔。從這些多個孔(噴出口 7)噴出空氣,從而能 夠有效地進行培養(yǎng)罐l內(nèi)所容納的培養(yǎng)液的曝氣。 在上游側(cè)送氣管3a上,設(shè)置第一閥門lO及過濾器ll。第一閥門IO,以自由開閉 的方式設(shè)置在流入口6側(cè),以便在向培養(yǎng)罐1內(nèi)接種菌種時,阻止向培養(yǎng)罐l流入空氣。過 濾器ll,介于第一閥門10和其下游側(cè)的通往旁通管5的分支部之間,從而凈化從流入口 6 流入的空氣。 在下游側(cè)送氣管3b上,且在培養(yǎng)罐1外設(shè)置第二閥門12。第二閥門12以自由開
閉的方式設(shè)置,以便在培養(yǎng)液的加熱殺菌時阻止培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液逆流。 排氣管4,以連通培養(yǎng)罐1內(nèi)外的方式設(shè)置,排氣管口 14在培養(yǎng)罐1內(nèi)開口,排氣
口 15在培養(yǎng)罐1外開口,通往旁通管5的分支部配置在培養(yǎng)罐1外。排氣管口 14,位于培
養(yǎng)罐1的上部,不浸漬于培養(yǎng)液中。能夠?qū)⑴囵B(yǎng)罐1內(nèi)的空氣從排氣管口 14導(dǎo)入,并從排
氣口 15向培養(yǎng)罐1外排氣。排氣管4由從排氣管口 14到分支部為止的上游側(cè)排氣管4a、
和從分支部到排氣口 15為止的下游側(cè)排氣管4b構(gòu)成。 在下游側(cè)排氣管4b上,以自由拆裝的方式設(shè)置有測量培養(yǎng)罐1內(nèi)壓力的壓力計 16,并且隔著壓力計16在其兩側(cè)配置第三閥門17及第四閥門18。此外,第四閥門設(shè)置在下 游側(cè)(接近排氣口 15側(cè))。第三閥門17以及第四閥門18,在取下壓力計時封閉下游側(cè)排 氣管4b,從而阻止外部空氣從壓力計16的安裝口 20流入。 如圖3以及圖4所示,壓力計16,通過箍夾(ferrule clamp) 19,以自由拆裝的方 式設(shè)置在形成下游側(cè)排氣管4b的管的安裝口 20處。安裝口 20,以從管向上方突出的方式 分支形成,其開口為安裝口 20。安裝口 20的前端形成為凸緣狀。另外,壓力計16的下端也 形成為凸緣狀。使安裝口 20的凸緣部20a與壓力計16的凸緣部16b重疊,并用箍部19a 包圍該重疊部分,通過用夾部19b緊固而固定。另外,在安裝口 20上,通過箍夾19以可自 由拆裝的方式安裝有塞21,該塞21是可覆蓋安裝口 20的另一部件。塞21,下部形成為凸 緣狀,使該凸緣部與安裝口 20的凸緣部重疊,從而能夠?qū)⒃撝丿B部分用箍夾19進行緊固固 定。 旁通管5,連結(jié)送氣管3的分支部和排氣管4的分支部。在旁通管5上,設(shè)置有開 閉旁通管5的開閉閥22。 作為上述的閥門10、12、17、18以及22,第一閥門10及第四閥門18使用針型閥,第 二閥門12、第三閥門17以及開閉閥22使用隔膜閥,然而不限定于此。 培養(yǎng)罐l,是用不銹鋼板形成為有底的可密閉的容器。另外,也可以使用不銹鋼板 以外的材料,也可以不限于金屬板而使用塑料等材料。培養(yǎng)罐1的大小可以適當(dāng)?shù)卦O(shè)計,但 在本實施方式中,使用了直徑77cm、高度130cm的培養(yǎng)罐1。在培養(yǎng)罐1的上部設(shè)置有作 為培養(yǎng)液放入口的開口部(未圖示)、和擋住該開口部的蓋24。蓋24,通過螺旋部件25可 自由地開閉并可密閉。在蓋24的中央部,設(shè)置有用于固定攪拌裝置34的攪拌裝置安裝部 26。 在培養(yǎng)罐1的上部,設(shè)置接種口 27,用于放入前期培養(yǎng)階段調(diào)整過的調(diào)整培養(yǎng)液。 在接種口 27處,連結(jié)有注入管29,該注入管29在后述的菌種接種工序中,與裝有調(diào)整培養(yǎng) 液的容器(錐形燒瓶)28內(nèi)的調(diào)節(jié)培養(yǎng)液連通。
在培養(yǎng)罐1的下部,設(shè)置用于排出培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液的排出口 30。在培養(yǎng)罐1 的側(cè)面和頂面,設(shè)置有檢查用窗31,用于確認培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液的狀態(tài)。另外,在培養(yǎng)罐 1的下部設(shè)置有滾動輪32,易于進行培養(yǎng)罐1的移動。 以覆蓋培養(yǎng)罐1的外周的方式,設(shè)置有作為冷卻水的流路的水套33。水套33,在 培養(yǎng)罐1的外周壁的更外側(cè)周圍設(shè)置第二外壁從而成為雙層構(gòu)造,使冷卻水能夠在它們之 間的空間內(nèi)流動。水套33,設(shè)置成C字形,以便避開培養(yǎng)罐1側(cè)面的觀察窗31以及培養(yǎng)罐 1下部的滾動輪32,并且覆蓋培養(yǎng)罐1的側(cè)面的大部分。水套33的構(gòu)造為,從下部的注入 口 33a注入冷卻水,而多余的水從上部的排水口 33b流出。通過使冷卻水在水套33內(nèi)循環(huán), 從而能夠在冷卻水和培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液之間進行熱交換,并在短時間內(nèi)冷卻培養(yǎng)液。
設(shè)置對培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液進行攪拌的攪拌裝置34。攪拌裝置34,由攪拌葉片35 和驅(qū)動電動機36構(gòu)成。攪拌葉片35的葉片部分配置在培養(yǎng)罐1內(nèi)部,能夠攪拌培養(yǎng)罐1 內(nèi)所容納的培養(yǎng)液。攪拌葉片35的葉片軸35a的上端部分,插通攪拌裝置安裝部26并向 培養(yǎng)罐1外突出。攪拌葉片35的葉片軸35a以可旋轉(zhuǎn)的方式固定于攪拌裝置安裝部26。 此外,如圖5所示將攪拌葉片35的葉片軸35a插通到驅(qū)動電動機36的軸36a,并用螺栓37 和螺母38固定在彼此的插通孔35b、36b中,由此以自由拆裝的方式固定攪拌葉片35的葉 片軸35a和驅(qū)動電動機36。通過該構(gòu)成,能夠在加熱殺菌時取下攪拌裝置34的驅(qū)動電動機 36。 接下來,對液體菌種培養(yǎng)裝置的清洗臺裝置41進行說明。培養(yǎng)罐1可反復(fù)使用, 但在使用后需要對培養(yǎng)罐1內(nèi)進行清洗。清洗作業(yè),是通過卸下培養(yǎng)罐1的螺旋部件25打 開蓋24,從開口部注入水等清洗用水來清洗培養(yǎng)罐1的內(nèi)面,并從培養(yǎng)罐1下部的排出口 30排水,由此進行清洗作業(yè)。此時,由于液體菌種培養(yǎng)裝置很重,因此難于從排出口 30進行 排水作業(yè)。 因此,如圖8及圖9所示,清洗臺裝置41由載置液體菌種培養(yǎng)裝置1的架臺42, 和使架臺42傾斜的傾斜單元43構(gòu)成。通過傾斜單元43使架臺42上的液體菌種培養(yǎng)裝置 1傾斜,從而能夠容易地從排水口進行排水作業(yè)。 架臺42,由臺座44和圍柵45構(gòu)成,其中圍柵45,是以圍繞在液體菌種培養(yǎng)裝置1 周圍的方式從臺座44豎直設(shè)立。圍柵45,限制液體菌種培養(yǎng)裝置1的周圍以便在其傾斜時 不脫落。正面的圍柵45a被設(shè)置成可自由地開閉,打開正面的圍柵45a,就能夠取放液體菌 種培養(yǎng)裝置l。 傾斜單元43由支承架臺42的臺座44的支承部46、和汽缸等升降單元47構(gòu)成。 支承部46,由軸部46b以自由轉(zhuǎn)動的方式支承架臺42的臺座44的前方側(cè)面,從而可以使架 臺42前傾。另外,汽缸47,在上下連結(jié)支承部46的后端和架臺42的圍柵45的后端。通過 使汽缸47伸縮來升降架臺42的圍柵45的后方,從而能夠使架臺42傾斜,或者復(fù)位。
[液體菌種的制造工序] 以下,按順序?qū)χ圃煲后w菌種的工序進行說明。液體菌種,經(jīng)過前期培養(yǎng)階段和正 式培養(yǎng)階段來制造。 此外,作為本液體菌種培養(yǎng)裝置所使用的培養(yǎng)液,雖不對此進行限定,然而例如, 是在水中將作為營養(yǎng)素的大豆粉、磷酸氫鹽、硫酸鹽及糖類進行充分地混合而成的培養(yǎng) 液。更具體而言,作為大豆粉,使用脫脂大豆粉末。培養(yǎng)液中脫脂大豆粉末的含量,優(yōu)選為0. 5 7. 5g/L的范圍,更優(yōu)選為1. 5 4g/L的范圍。作為磷酸氫鹽,使用磷酸二氫鉀。培 養(yǎng)液中磷酸二氫鉀的含量,優(yōu)選為0. 05 2. 5g/L的范圍,更優(yōu)選為0. 2 2. 5g/L的范圍。 作為硫酸鹽,使用七水硫酸鎂。培養(yǎng)液中七水硫酸鎂的含量,優(yōu)選為0. 05 2. 5g/L的范圍, 更優(yōu)選為0.2 2.5g/L的范圍。作為糖類,使用精制砂糖。精制砂糖,優(yōu)選為3 20g/L 的范圍,更優(yōu)選為6 19g/L的范圍。
1.前期培養(yǎng)階段 首先,從容納蘑菇保藏菌株的試管中將菌株接種到培養(yǎng)皿的固體培養(yǎng)基( 一般的 瓊脂培養(yǎng)基)上,在溫室(恒溫箱2(TC)中進行培養(yǎng)。菌絲在培養(yǎng)基內(nèi)蔓延后,從培養(yǎng)皿 中取出2 10個5mm左右的方形的塊,將其接種到裝有500 1000ml上述培養(yǎng)液的錐形 燒瓶28中。另外,裝有培養(yǎng)液的錐形燒瓶28,通過事前使用了高壓滅菌器的高壓殺菌,在 12rC下進行15分鐘 20分鐘的殺菌。 然后,將接種了塊的錐形燒瓶28,在調(diào)整為2(TC 25t:左右室溫的室內(nèi)靜置培養(yǎng) 一天。靜置培養(yǎng)之后,在2(TC 25t:的環(huán)境下進行6 ll天左右的振蕩(轉(zhuǎn)動)培養(yǎng)。在 振蕩(轉(zhuǎn)動)培養(yǎng)中,使用振蕩培養(yǎng)機,以轉(zhuǎn)數(shù)100rpm進行振蕩,然而振蕩培養(yǎng)機的轉(zhuǎn)數(shù)在 50 150rpm左右適當(dāng)調(diào)節(jié)即可。 當(dāng)振蕩培養(yǎng)接近完成時,菌絲在培養(yǎng)液中擴展。在將該培養(yǎng)液用于正式培養(yǎng)的情 況下,在利用均漿機或者磁力攪拌器(Magnetic Stirrer)等將菌絲體變細之后使用較好。 另外,經(jīng)過使用了磁力攪拌器的旋轉(zhuǎn)培養(yǎng),其結(jié)果菌絲體變細小。因為通過使之細小可使正 式培養(yǎng)時的菌絲體生長(Mycelial growth)加快。以上的前期培養(yǎng)階段用7 14天左右 完成。 2.正式培養(yǎng)階段 然后,轉(zhuǎn)移到正式培養(yǎng)階段。圖6是表示本實施方式的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)方法 的工序的圖。這里,圖6中的白圓表示閥門打開的狀態(tài),黑圓表示閥門關(guān)閉的狀態(tài)。
在正式培養(yǎng)中,使用容納了約360L(或者470L)上述培養(yǎng)液的液體菌種培養(yǎng)裝置。 在正式培養(yǎng)階段中,依次進行以下工序A.加熱殺菌準備工序、B.加熱殺菌工序、C.冷卻工 序、D.菌種接種工序、E.菌種培養(yǎng)工序。
〈A.加熱殺菌準備工序> 加熱殺菌準備工序,是在加熱殺菌工序前預(yù)先進行的工序。松開夾部19b,取下壓 力計16。然后,用箍夾19將塞21緊固固定于安裝口20。而且,取下對培養(yǎng)罐l內(nèi)的培養(yǎng) 液進行攪拌的攪拌裝置34的驅(qū)動電動機36。能夠防止由于加熱殺菌工序中的加熱或蒸汽 侵入內(nèi)部等使壓力計16及攪拌裝置34的驅(qū)動電動機36發(fā)生故障。
〈B.加熱殺菌工序〉 在加熱殺菌工序中,一直以來是在蘑菇栽培中所使用的高壓加熱殺菌鍋內(nèi)容納液 體菌種培養(yǎng)裝置,對各液體菌種培養(yǎng)裝置進行加熱殺菌。在本實施方式中,是在12(TC下進 行約20分鐘的殺菌,然而不限定于此。 此時,在打開第一閥門10及開閉閥22,并且關(guān)閉第二閥門12、第三閥門17以及第 四閥門18的狀態(tài)下,配置在高溫下。培養(yǎng)罐1內(nèi)的空氣膨脹使培養(yǎng)罐1內(nèi)變?yōu)楦邏海欢?培養(yǎng)罐l內(nèi)膨脹的空氣,由于第二閥門12、第三閥門17以及第四閥門18被關(guān)閉,因此從排 氣管4的排氣管口 14經(jīng)由上游側(cè)排氣管4a、旁通管5以及上游側(cè)送氣管3a,從送氣管3的流入口6排出。能夠防止培養(yǎng)罐l內(nèi)的壓力變得過高。另外,伴隨著高溫的排氣,也能對位 于上游側(cè)送氣管3a的過濾器11進行殺菌。
〈C.冷卻工序> 然后,作為轉(zhuǎn)移到冷卻工序前的準備階段,暫時關(guān)閉第一閥門阻止空氣從送氣管3
流向培養(yǎng)罐l內(nèi),而且,在關(guān)閉第三閥門17、第四閥門18阻止從排氣管4流入空氣的狀態(tài)
下,將加熱殺菌后的液體菌種培養(yǎng)裝置從高壓加熱殺菌鍋中取出移動到培養(yǎng)室。 而且,在保持關(guān)閉第三閥門17和第四閥門18的狀態(tài)下,松開夾19b取下塞21之
后,用箍夾19將壓力計16安裝到安裝口 20。此時,由于第三閥門17及第四閥門18被關(guān)
閉,因此能夠在取下塞21時將污染空氣從安裝口 20流入到培養(yǎng)罐1內(nèi)的情況抑制到最小限度。 而且,將送潔凈(無菌)空氣的潔凈空氣供給管路39與流入口 6連結(jié),將排氣管 路40與排氣口 15連結(jié)。潔凈空氣供給管路39具有將空氣進行初步凈化的過濾器等凈化 單元(未圖示),和送風(fēng)單元(未圖示)。在本實施方式中,送風(fēng)單元是壓縮機的空氣發(fā)生 裝置,可以在高壓下送風(fēng)。另外,排氣管路40向培養(yǎng)室外進行排氣。 另外,將攪拌裝置34的驅(qū)動電動機36安裝到攪拌葉片35的軸上,來設(shè)置攪拌裝 置34。 然后轉(zhuǎn)移到冷卻工序,成為打開第一閥門10及開閉閥22,且關(guān)閉第二閥門12、第 三閥門17以及第四閥門18的狀態(tài)。在冷卻工序中,從水套33下部的注入口 33a注入冷卻 水,使多余的水從上部的排水口 33b排出,從而使冷卻水在水套33內(nèi)循環(huán)。在冷卻水和培 養(yǎng)罐l內(nèi)的培養(yǎng)液之間進行熱交換。為了將溫度降低到可接種菌種的20度左右,能夠?qū)⒁?往的自然冷卻中花費的近40小時,以大約15小時來進行,因而能夠縮短冷卻時間。
在冷卻時,培養(yǎng)罐l內(nèi)的空氣產(chǎn)生凝結(jié)。伴隨于此培養(yǎng)罐l內(nèi)的壓力下降,因此需 要向培養(yǎng)罐l內(nèi)流入空氣。該空氣的流入以如下方式進行空氣從打開閥門的管,B卩,從送 氣管3的流入口 6經(jīng)過上游側(cè)送氣管3a、旁通管以及上游側(cè)排氣管4a,從排氣管4的排氣管 口流入。從與送氣管3的流入口連接的潔凈空氣供給管路39,強制地將空氣送到培養(yǎng)罐1 內(nèi),培養(yǎng)罐l內(nèi)的壓力設(shè)定為約O. 16MPa。另外,在空氣流入時,由于在上游側(cè)送氣管3a中 設(shè)置有過濾器ll,因此從流入口 6流入的空氣被凈化。因此,能夠防止培養(yǎng)罐1內(nèi)的污染。
〈D.菌種接種工序〉 在關(guān)閉第一閥門阻止空氣流向培養(yǎng)罐l內(nèi)的狀態(tài)下,在培養(yǎng)罐l內(nèi),接種在前期培 養(yǎng)階段接種并培養(yǎng)了菌種的調(diào)整培養(yǎng)液。放入在前期培養(yǎng)階段中使用的錐形燒瓶28 —瓶 的量的調(diào)整培養(yǎng)液(600ml)。 在此,對調(diào)整培養(yǎng)液的放入方法進行說明。將與錐形燒瓶28內(nèi)的調(diào)整培養(yǎng)液連通 的注入管29,與培養(yǎng)罐1上部的接種口 27連結(jié)。將供給潔凈(無菌)空氣的潔凈空氣供給 管路41連接到錐形燒瓶28上,潔凈空氣供給管路41具有將空氣進行初步凈化的過濾器 等凈化單元(未圖示),和送風(fēng)單元(未圖示)。在本實施方式中,送風(fēng)單元是壓縮機的空 氣發(fā)生裝置,可以在高壓下送風(fēng)。 而且,通過預(yù)先使培養(yǎng)罐l內(nèi)的壓力暫時降低到0.02MPa,用潔凈空氣供給管路41 將空氣送到錐形燒瓶28內(nèi),以及關(guān)閉第一閥門10阻止空氣流入培養(yǎng)罐1,由此將錐形燒瓶 28內(nèi)的壓力設(shè)定得高于培養(yǎng)罐1的壓力。利用該壓力差就能夠?qū)㈠F形燒瓶28內(nèi)的調(diào)整培養(yǎng)液注入到培養(yǎng)罐l內(nèi)。此時,由于調(diào)整培養(yǎng)液完全不與外部氣體接觸,因此可以不混入雜 菌。此外,以往是在潔凈室(clean booth)內(nèi)進行接種作業(yè),而且在將培養(yǎng)液注入到培養(yǎng)罐 1內(nèi)時,用酒精燈等實現(xiàn)防止雜菌混入,但卻無法完全防止雜菌的混入。然而,在本實施方式 中,由于與培養(yǎng)罐1直接連結(jié)因此完全不必擔(dān)心雜菌的混入。
〈E.菌種培養(yǎng)工序> 接下來,開始培養(yǎng)。培養(yǎng)室的室溫為22t: 23t:左右。在菌種培養(yǎng)工序中,通過 打開第一閥門10、第二閥門12、第三閥門17以及第四閥門18并關(guān)閉開閉閥22,從而將從 流入口 6送入的空氣經(jīng)過上游側(cè)送氣管3a及下游側(cè)送氣管3b從噴出口 7送出,進行培養(yǎng) 罐1內(nèi)的培養(yǎng)液的曝氣。這樣,在培養(yǎng)時一邊向培養(yǎng)罐1內(nèi)噴入空氣一邊進行曝氣。在該 曝氣時,由于經(jīng)由過濾器11導(dǎo)入空氣,因此雜菌無法進入培養(yǎng)罐1內(nèi)。
另外,供給到培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液中的空氣,從排氣管口 14經(jīng)過排氣管4再從排 氣口 15被排出。通過調(diào)節(jié)從流入口6流入的空氣量和從排氣口 15排出的空氣量,培養(yǎng)罐 1內(nèi)的壓力被設(shè)定為0. 02 0. 04MPa。 另外,在培養(yǎng)時通過攪拌裝置34進行培養(yǎng)液的攪拌。借助攪拌葉片35的攪拌,能 夠使菌種暴露于曝氣的空氣從而加快成長。另外,借助攪拌葉片35的攪拌,能夠?qū)⑴囵B(yǎng)液 中的菌種的菌絲切割得較碎。這樣,通過將菌種切碎來防止群體的大型化,從而能夠?qū)⒁酝?大概花費約6天的時間縮短到3 4天。另外,在菌種培養(yǎng)結(jié)束后,在蘑菇(子實體)的制 作工序中在培養(yǎng)基中接種時,能夠防止輸送液體菌種的管或接種用的噴嘴等的堵塞。
在培養(yǎng)罐1內(nèi)培養(yǎng)所需的時間,金針菇等為3天 6天左右,蟹味菇、滑菇等為4 天 8天。培養(yǎng)罐l內(nèi)的培養(yǎng)的進展情況,通過從檢查用窗31觀察培養(yǎng)罐1內(nèi)的培養(yǎng)液的 狀態(tài),就能夠容易地知曉。隨著培養(yǎng)的進行,菌絲體在培養(yǎng)罐l內(nèi)的培養(yǎng)液中擴展,因而能 夠判斷培養(yǎng)狀態(tài)。 另外,通過從檢查用窗31來觀察培養(yǎng)罐1內(nèi)培養(yǎng)液的狀態(tài),因此能夠正確地知曉 是菌種不良或者產(chǎn)生了培養(yǎng)不良的情況。另外,菌種的不良通過培養(yǎng)時的氣味也能夠簡單 地知曉。這樣能夠知曉菌種的好壞,與使用以往的鋸屑菌種等情況相比,在以下方面有利, 即能夠防止不良的菌種用于實際的栽培,并將由此產(chǎn)生栽培損失的情況防患于未然。另 外,假設(shè),即使在菌種不良的情況下,由于能夠從培養(yǎng)液的調(diào)制開始再次進行殺菌、接種調(diào) 整培養(yǎng)液的工序,因此在短時間內(nèi)恢復(fù)的方面是有利的。 這樣,經(jīng)過上述工序,就能夠制造液體菌種。將該液體菌種接種于培養(yǎng)基,經(jīng)過蘑 菇(子實體)的制造工序(培養(yǎng)工序、發(fā)育工序、培育工序),就能夠收獲蘑菇。另外,蘑菇 的栽培方法,雖然因蘑菇的種類不同其生長環(huán)境和栽培工序也不同,然而在各個蘑菇領(lǐng)域 中能夠采用一般的栽培方法。
1權(quán)利要求
一種蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置,其特征在于,具有培養(yǎng)罐,其用于容納培養(yǎng)液并培養(yǎng)菌種;曝氣裝置,其用于將空氣供給到上述培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液中進行曝氣,上述曝氣裝置具有送氣管,其將從流入口導(dǎo)入的空氣從罐下部的噴出口送到培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液中;排氣管,其將供給到培養(yǎng)罐內(nèi)培養(yǎng)液中的空氣,經(jīng)由培養(yǎng)罐上部的排氣管口向培養(yǎng)罐外排出;帶開閉閥的旁通管,其將上述送氣管和排氣管在培養(yǎng)罐的外部進行旁通,在上述送氣管上具有第一閥門,其以可自由開閉的方式設(shè)置在流入口側(cè),以便向上述培養(yǎng)罐內(nèi)接種菌種時阻止空氣流向培養(yǎng)罐;第二閥門,其以可自由開閉的方式設(shè)置在比上述第一閥門更靠近下游側(cè)并且比上述旁通管的分支部更靠近下游側(cè),以便在培養(yǎng)液的加熱殺菌時阻止培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液逆流;過濾器,其介于上述第一閥門與其下游側(cè)的上述旁通管的分支部之間,用于凈化從流入口流入的空氣,在上述排氣管上具有壓力計,其以可自由拆裝的方式設(shè)置在比上述旁通管的分支部更靠近下游側(cè);第三閥門及第四閥門,它們隔著上述壓力計配置在其兩側(cè),在取下壓力計時進行封閉。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置,其特征在于,在上述培養(yǎng)罐的外 周設(shè)置有水套。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置,其特征在于,設(shè)置攪拌裝置,用于 攪拌上述培養(yǎng)罐內(nèi)容納的培養(yǎng)液,上述攪拌裝置具有攪拌葉片,和與上述攪拌葉片的葉片 軸連結(jié)的驅(qū)動電動機,上述葉片軸的上端露在罐外,上述驅(qū)動電動機以可自由拆裝的方式 設(shè)置在上述葉片軸上。
4. 一種蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法,使用上述權(quán)利要求1 3中的任意一項所述的蘑 菇的液體菌種培養(yǎng)裝置,并依次進行以下工序,即在培養(yǎng)液的加熱殺菌前進行的加熱殺菌 準備工序、在高溫環(huán)境下對培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液進行加熱殺菌的加熱殺菌工序、進行培養(yǎng)液 的冷卻的冷卻工序、在培養(yǎng)液中接種菌種的菌種接種工序、進行菌種的培養(yǎng)的菌種培養(yǎng)工 序,該蘑菇的液體菌種培養(yǎng)方法的特征在于,在上述加熱殺菌準備工序中,在上述培養(yǎng)罐內(nèi)容納培養(yǎng)液,并且從上述排氣管的安裝 口取下上述壓力計之后,利用蓋關(guān)閉上述安裝口,在上述加熱殺菌工序中,在打開第一閥門及開閉閥的同時,關(guān)閉第二閥門、第三閥門以 及第四閥門,將培養(yǎng)罐內(nèi)膨脹的空氣,從排氣管經(jīng)由旁通管及送氣管再從送氣管的流入口 排出,并且借助關(guān)閉狀態(tài)的第二閥門來阻止培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液逆流,在上述冷卻工序中,在關(guān)閉第三閥門及第四閥門而封閉了排氣管的狀態(tài)下,取下上述 蓋將壓力計安裝到安裝口,并且在保持打開第一閥門及開閉閥,關(guān)閉第二閥門、第三閥門及 第四閥門的狀態(tài)下,伴隨由冷卻引起的上述培養(yǎng)罐內(nèi)空氣的凝結(jié)而將空氣從送氣管的流入 口經(jīng)由送氣管、過濾器、旁通管以及排氣管,再從向培養(yǎng)罐內(nèi)開口的排氣管口,朝向培養(yǎng)罐 內(nèi)流入,在上述菌種接種工序中,在關(guān)閉第一閥門而阻止空氣向培養(yǎng)罐流入的狀態(tài)下,在上述 培養(yǎng)罐內(nèi)接種菌種,在上述菌種培養(yǎng)工序中,在打開第一閥門、第二閥門、第三閥門以及第四閥門的同時關(guān) 閉開閉閥,將來自流入口的空氣經(jīng)過送氣管從噴出口送到培養(yǎng)罐內(nèi),由此進行培養(yǎng)液的曝 氣,并且使培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣從排氣管口經(jīng)過排氣管再從排氣口排出。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法,其特征在于,在上述冷卻工序 中,使水在水套內(nèi)循環(huán)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種能夠較好地進行制造工序中的罐內(nèi)外空氣的供給及排氣的蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置及蘑菇的液體菌種的培養(yǎng)方法。蘑菇的液體菌種培養(yǎng)裝置具有培養(yǎng)罐,和進行培養(yǎng)罐內(nèi)的培養(yǎng)液的曝氣的曝氣裝置,曝氣裝置具有將空氣送到培養(yǎng)液中的送氣管、排出培養(yǎng)罐內(nèi)空氣的排氣管、將送氣管和排氣管在培養(yǎng)罐的外部進行旁通的帶開閉閥的旁通管。在送氣管上具有阻止菌種接種時空氣流入的第一閥門、阻止加熱殺菌時培養(yǎng)液逆流的第二閥門和凈化流入空氣的過濾器。排氣管上具有壓力計,其以可自由拆裝的方式設(shè)置;第三閥門和第四閥門,它們隔著壓力計并配置在其兩側(cè),在取下壓力計時進行封閉。
文檔編號A01G1/04GK101790936SQ20091013861
公開日2010年8月4日 申請日期2009年5月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月2日
發(fā)明者三原聰, 具滋暻, 市村昌紀, 春山敏昭, 藤澤博一 申請人:春山敏昭;藤澤博一;具滋暻;李章雨