專利名稱：：恒河猴癇性發(fā)作模型及其藥物篩選方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種恒河猴癇性發(fā)作動物模型，具體地，是馬桑內(nèi)酯在制備恒河猴癇性發(fā)作模型中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：癇性發(fā)作(印il印ticseizures或seizures，癲癇發(fā)作)是大腦神經(jīng)元異常放電引起的發(fā)作性腦功能異常。發(fā)作大多短暫并有自限性，由于異常放電所累及的腦功能區(qū)不同，臨床可有多種發(fā)作表現(xiàn)，包括部分性或全面性發(fā)作，具體表現(xiàn)為運動、感覺異常，或是行為認知、植物神經(jīng)功能障礙。全面性發(fā)作和復(fù)雜部分性發(fā)作，往往伴有程度不同的意識障礙。癲癇是神經(jīng)元的過度同步異常放電，其發(fā)生機制主要是腦內(nèi)興奮與抑制機制失衡，即一方面是腦內(nèi)興奮機制增強，一方面是抑制機制減弱。前者通過腦內(nèi)興奮性氨基酸介導(dǎo)，主要有谷氨酸和天冬氨酸，它們合成后貯存與神經(jīng)末梢的囊泡內(nèi)，依賴鈣離子釋放，釋放后與突觸后膜N-甲基-D-天門冬氨酸鹽(NMDA)受體結(jié)合后，打開離子通道，鈉離子、鈣離子內(nèi)流產(chǎn)生去極化。后者通過抑制性氨基酸r-氨基丁酸(GABA)介導(dǎo)，GABA釋放出來與其受體結(jié)合后，氯離子通道打開，氯離子內(nèi)流使突觸后膜超極化。目前癲癇的動物模型按照發(fā)作情況被分為兩類，一類是癇性發(fā)作的動物模型，即急性模型，指單次實驗操作誘發(fā)的一次性急性發(fā)作，一類是癲癇發(fā)作的動物模型，即慢性模型，指維持一段時間反復(fù)自發(fā)性發(fā)作，模擬人類癲癇發(fā)作的臨床和腦電圖特征，按照發(fā)作表現(xiàn)分為急性單純部分性發(fā)作，慢性單純部分性發(fā)作，復(fù)雜部分性發(fā)作，全面強直陣攣發(fā)作，失神發(fā)作，癲癇持續(xù)狀態(tài)，難治性癲癇；按照發(fā)生機制分為遺傳性癲癇模型，癲癇免疫模型，外傷性癲癇模型，皮質(zhì)發(fā)育障礙動物模型；按照制備方法分為化學(xué)藥物模型，金屬植入，電刺激等。難治性癲癇病因和發(fā)病機制復(fù)雜，發(fā)作無預(yù)見性，發(fā)作程度難以控制。目前主要通過建立難治性癲癇動物模型探討其發(fā)病機理、耐藥機制以及篩選鑒定新的抗癲癇藥物。Loscher(LoscherW.Animalmodelsofintractableepilepsy.ProgNeurobiol1997,53:239-258.)模型應(yīng)具備以下特點(1)發(fā)作類型與臨床耐藥性癲癇的發(fā)作類型相似；(2)模型具有腦部的陣發(fā)性異常放電，并可以從電生理方面評價藥物療效；(3)AED不能滿意控制其發(fā)作；(4)模型動物能存活較長時間。國際上唯一被認可的耐藥性癲癇模型是由Loscher等建立的大鼠耐苯妥英鈉杏仁核電點燃模型，但是該模型的缺點是操作復(fù)雜，動物不易飼養(yǎng)，點燃率低，容易死亡，耐藥譜窄，對大鼠腦組織有機械損傷。研究得比較多的顳葉癲癇模型為海人酸模型和匹羅卡品模型。海人酸是興奮性氨基酸，研究表明海人酸單位致癇劑量和致癇造成的損害程度隨大鼠的品種和性別而異；匹羅卡品是毒蕈堿樣激動劑，致癇劑量的匹羅卡品有明顯的副作用，且產(chǎn)生嚴重的神經(jīng)病理改變，已經(jīng)遠遠超過了人類顳葉癲癇的病理改變。癇性發(fā)作和癲癇是完全不同的兩個概念，前者是指發(fā)作性皮層功能異常所引起的一組臨床癥狀，而后者是指臨床呈長期反復(fù)癇性發(fā)作的疾病過程。各種癇性發(fā)作，即可在癲癇患者，也可在許多急性疾患中表現(xiàn)。早在七十年代從臨床和動物實驗中觀察到中藥馬桑寄生的有效成分一馬桑內(nèi)酯(CL)具有治療精神分裂癥的作用，同時也可引起驚厥(四川醫(yī)學(xué)院神經(jīng)精神病學(xué)教研室馬桑寄生混合結(jié)晶注射液治療精神分裂癥臨床觀察。馬桑寄生治療精神分裂癥臨床及藥物研究資料匯編。內(nèi)部資料。1997；四川醫(yī)學(xué)院藥理教研組馬桑寄生煎劑與注射劑的毒性與藥理作用。馬桑寄生治療精神分裂癥臨床及藥物研究資料匯編。內(nèi)部資料。1977)。至今國內(nèi)外研究者用馬桑內(nèi)酯作為致癇劑，已經(jīng)采用不同的給藥途徑和方式在多種動物身上建立急性癲癇模型、慢性點燃模型、離體海馬腦片癇性放電模型，并廣泛應(yīng)用于癲癇發(fā)生機制研究和抗癲癇藥物的篩選(柴慧霞，謝揚高，陳啟賢，曾懷德，徐建國，桑內(nèi)酷制造成大鼠癲癰模型的報告，四川醫(yī)學(xué)院學(xué)報1983；14283-287；陳啟賢，謝揚高，柴慧霞，黃云。家兔海馬內(nèi)微量注射馬桑內(nèi)酷造成化學(xué)點燃的方法，中國應(yīng)用生理學(xué)雜志1989；5316-318；柴慧霞，馬桑內(nèi)酷所致癲癰模型的點燃效應(yīng)，中華神經(jīng)精神科雜志1991；24:367-369，385。GuoL，ChaiHX,LiuXL,XieYG.Obserbationsofsynapticefficacyandpaired-facilitationinareaCAlofhippocampalslicesfromcoriarialactone—kindledrats.BrainRes1992；572:269-272.WangY,ZhouD,WangB,LiHS,ChaiHX,ZhouQ,ZhangSF,StefanH.AkindlingmodelofpharmacoresistanttemporallobeepilepsyinSprague-dawleyratsbycoriarialactoneanditspossiblemechanism.Epilepsia2003；44475-488.)，結(jié)果表明馬桑內(nèi)酯所致癲癇與臨床顳葉癲癇發(fā)作類型相似，抗癲癇藥不能滿意控制其發(fā)作，具有建立過程簡單、點燃率高、沒有機械損傷等優(yōu)點，是一種較好的耐藥性癲癇模型。靈長類動物與人的親緣關(guān)系最近，國內(nèi)外至今仍無恒河猴馬桑內(nèi)酯癲癇模型的相關(guān)報道，也沒有采用馬桑內(nèi)酯構(gòu)建癇性發(fā)作動物模型且用于篩選治療癇性發(fā)作藥物的相關(guān)報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了馬桑內(nèi)酯在制備恒河猴癇性發(fā)作模型的藥物中的用途。本發(fā)明提供了馬桑內(nèi)酯在制備恒河猴癇性發(fā)作模型的藥物中的用途。其中，所述的藥物是制備急性癇性發(fā)作模型的藥物。所述的動物模型是癲癇耐藥動物模型。本發(fā)明還提供了一種制備恒河猴癇性發(fā)作模型的方法，它是將劑量為0.5ml/kg-0.7ml/kg的馬桑內(nèi)酯施用于恒河猴誘發(fā)癇性發(fā)作。進一步優(yōu)選的馬桑內(nèi)酯的劑量為0.7ml/kg。其中，所述的動物模型在篩選治療癲癇的藥物中用途。本發(fā)明還提供了一種篩選治療癇性發(fā)作藥物的方法，它包括如下步驟a、用馬桑內(nèi)酯建立癇性發(fā)作的動物模型，作為對照；b、將候選藥物與馬桑內(nèi)酯一起施用于實驗恒河猴；C、觀察候選藥物抑制馬桑內(nèi)酯引起的模型動物癇性發(fā)作的發(fā)作情況，并進行評分，評價潛在的治療癇性發(fā)作的藥物。步驟c所述的藥物是治療急性癲癇的藥物。a步驟所述的動物模型是癲癇耐藥動物模型。a步驟所述的動物模型的制備方法是將劑量為0.5ml/kg-0.7ml/kg的馬桑內(nèi)酯施用于恒河猴。進一步優(yōu)選地，所述的馬桑內(nèi)酯的劑量為0.7ml/kg。本發(fā)明選擇了與人類親緣關(guān)系最近的靈長類動物-恒河猴作為受試對象，初步建立急性癇性發(fā)作模型，觀察行為學(xué)及腦電圖改變。實驗結(jié)果表明，實驗組的3只恒河猴在大腿肌肉注射馬桑內(nèi)酯后10.33+/-0.58分鐘，均發(fā)生了由部分性發(fā)作發(fā)展到全面強直_陣攣發(fā)作即1-5級的癇性發(fā)作，且用腦電圖記錄到不同時期的癇性放電，再次證實了馬桑內(nèi)酯在靈長類動物的致癇作用。本次實驗，恒河猴經(jīng)歷了由運動減少，伴咀嚼的口咽自動癥，唾液分泌增加，惡心嘔吐等植物神經(jīng)癥狀，逐漸發(fā)展到單側(cè)肢體的抽搐，間斷的“濕狗樣抖動”，再到四肢抽搐，最后到全面強直_陣攣發(fā)作的全過程，發(fā)作形式與人類顳葉癲癇極為相似。腦電圖記錄采用額F3，F(xiàn)4，中顳T3，T4四個電極記錄，以Cz為參考電極，注射馬桑內(nèi)酯后3-5分鐘腦電圖開始出現(xiàn)變化，頻率增加，波幅增高，但是未見咀嚼、惡心、嘔吐等行為學(xué)表現(xiàn)，分析原因是運用氟哌啶醇控制猴躁動，對早期的腦電圖和行為學(xué)表現(xiàn)如咀嚼、嘔吐等有一定的抑制作用。7分鐘開始四個電極均記錄到明顯的癇性放電，從猴單個肢體的抽搐到全面強直_陣攣發(fā)作的過程，癇性放電逐漸增多，波幅逐漸增高，雙側(cè)同步對稱，發(fā)作后腦電抑制明顯，2-3分鐘后波幅恢復(fù)如前，仍可見散在癇性放電，1.5-2小時后恢復(fù)至基礎(chǔ)波。相對于其它的顳葉癲癇模型，本研究具有以下優(yōu)點1、采用肌肉注射的途徑系統(tǒng)給藥，易操作；2、致癇劑量與動物性別、年齡相關(guān)不大；3、重復(fù)性好；4、電極安置方便；5、對腦沒有直接的機械損傷；6、致癇過程清晰；7、藥物安全性好。圖1腦電圖基礎(chǔ)波圖2注射后5分鐘的腦電圖行為學(xué)無明顯變化圖3注射后7分鐘的腦電圖行為學(xué)無明顯變化圖4注射后8分鐘的腦電圖單個肢體的陣攣圖5注射后9-10分鐘的腦電圖四肢陣攣圖6注射后10-12分鐘的腦電圖四肢強直圖7注射后10-12分鐘的腦電圖四肢抽搐圖8發(fā)作后的腦電9抗癲癇藥對癇性發(fā)作的影響具體實施例方式實驗例1本發(fā)明恒河猴癇性發(fā)作模型的建立1、實驗材料1.1實驗動物健康恒河猴4只，購于平安動物飼養(yǎng)中心，年齡3歲，體重分別為4.7kg、5kg、5.2kg、7.6kg，均單獨飼養(yǎng)于(80*90*100)cm猴籠中，每日飼喂2次，輔以蔬菜、水果，自動飲水器飲水，室內(nèi)平均溫度(21.1士13.6)°C，相對濕度87.5士12.6，用同于實驗前均有3周的適應(yīng)時間，均進行神經(jīng)系統(tǒng)檢查和腦電圖檢查以排除異常者。1.2實驗藥物馬桑內(nèi)酯注射液10月份于四川西昌采集馬桑葉63.5公斤，由成都中醫(yī)藥大學(xué)提供出馬桑內(nèi)酯注射液提取方法馬桑葉加水煎煮3次，合并濾液濃縮，加95%乙醇混勻靜置過夜，減壓回收乙醇，濃縮，加NaCl至飽和，靜置過夜，濾過保留濾液，濾液有氯仿萃取5次，合并氯仿液加無水Na2SO4,減壓回收氯仿，保留沉淀，水浴加熱干燥沉淀，少量無水乙醇溶解沉淀，加聚酰胺顆粒拌勻，水浴揮發(fā)乙醇，將聚酰胺顆粒上柱，蒸餾水洗脫至無色，洗脫液濃縮滅菌，消毒，最終得馬桑內(nèi)酯注射液9.5L(每Iml馬桑內(nèi)酯提取注射液含6.7g生藥)。其主要成分是羥基馬桑毒素(C15H19O6)和馬桑毒素(C15H18O5)羥基馬桑毒素馬桑毒素麻醉藥鹽酸氯胺酮江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司規(guī)格0.lg/2ml氟哌啶醇湖南洞庭藥廠規(guī)格5mg/lml2、主要儀器、器械便攜式數(shù)字腦電圖儀EB/Mizar，EBNeuroS.p.Α.，F(xiàn)lorence,Italy；16導(dǎo)聯(lián)放大器EEG記錄軟件GaliIeoNT自制猴固定架3動物飼養(yǎng)管理恒河猴飼養(yǎng)于國家成都中藥安全性評價中心普通動物房，實驗前動物適應(yīng)環(huán)境并進行驅(qū)蟲治療，選擇健康(雌性須未孕)動物作為受試動物，不銹鋼猴籠分籠飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件符合國標GB14925-2001，室溫18士26°C，相對濕度40士70%。猴精飼料喂養(yǎng)，自來水裝瓶自由飲用，每日喂飼水果。動物掛頸牌和籠上貼標簽作為動物識別標記。4實驗方法4.1急性癲癇模型制作首先將藥液肌肉注射SD大鼠，發(fā)現(xiàn)按照鼠肌肉注射1.6ml/kg可恰致5級發(fā)作且不致死，根據(jù)動物間藥物劑量換算公式猴？/kg=SD大鼠？/kg*0.45436，得出猴的致癇理論劑量為0.72ml/kg肌注。將4只猴分為兩組實驗組3只，對照組1只。隨機選取實驗組中1只恒河猴，將馬桑內(nèi)酯先后以0.5ml/kg,0.6ml/kg,0.7ml/kg進行大腿肌肉注射，每次注射后觀察其行為學(xué)表現(xiàn)，未出現(xiàn)5級發(fā)作則間隔1周加量注射，確定恰致5級發(fā)作且不致死的劑量。實驗結(jié)果表明在0.7ml/kg劑量時，能誘發(fā)5級發(fā)作且不致死的劑量。同時進行了高于0.7ml/kg劑量的實驗，在0.8ml/kg劑量時，發(fā)作程度嚴重，使用抗癇性持續(xù)發(fā)作的藥物地西泮肌注后也不能控制發(fā)作癥狀，死亡率高。4.2行為觀察及分級分別給實驗組另外2只猴注射致癇劑量的馬桑內(nèi)酯，給對照組注射相同單位劑量生理鹽水。于猴籠中觀察猴急性癇性發(fā)作模型的發(fā)作表現(xiàn)形式，觀察癲癇發(fā)作的潛伏期，發(fā)作的表現(xiàn)形式，發(fā)作級別，持續(xù)時間以及，發(fā)作高峰時間和發(fā)作停止時間、發(fā)作后表現(xiàn)，發(fā)作分級參照Racine的標準，依據(jù)驚厥程度將行為分為5級，1級頭面部抽搐，咀嚼；2級節(jié)律性點頭或全身驚動；3級一側(cè)前肢陣攣；4級具有后肢站立的全身陣攣性驚厥常伴雙側(cè)前肢陣攣；5級具有站立伴跌倒或全身強直_陣攣發(fā)作。4.3電極安置用鹽酸氯氨酮注射液按肌肉注射0.2ml/kg分別麻醉實驗組和對照組的4只猴，將猴固定于猴椅，脫去頭部毛發(fā)，脫脂后，膠布固定5個頭皮電極，分別是左額F3，右額F4，左中顳T3，右中顳T4，Cz，以Cz為參考電極。4.4腦電活動的觀察將恒河猴固定于猴椅，安置好電極，1.5-2小時后待猴清醒，如果有躁動影響腦電記錄，則追加氟哌啶醇0.5ml，首先記錄基礎(chǔ)腦電圖，然后給實驗組3只猴采取臀部肌肉分別注射3.4,3.5,5.5ml的馬桑內(nèi)酯(使用劑量為0.7ml/kg)，給實驗組注射相同單位劑量的生理鹽水。連續(xù)觀察猴的腦電圖2小時，主要觀察癇性放電的潛伏期，癇性放電的波形、變化規(guī)律、持續(xù)時間、發(fā)作后表現(xiàn)，以及不同時期癇性放電與行為學(xué)表現(xiàn)的關(guān)系。5、試驗結(jié)果5.1致病劑量的確定及行為學(xué)表現(xiàn)實驗組恒河猴均發(fā)生5級癇性發(fā)作，行為學(xué)表現(xiàn)如下注射CL后約2分鐘，恒河猴活動減少，伏臥，5分鐘出現(xiàn)咀嚼動作伴發(fā)聲，惡心嘔吐胃內(nèi)容物，唾液分泌增多，呼吸加快，2-3分鐘后嘔吐減輕，咀嚼仍明顯，出現(xiàn)“濕狗樣抖動”，8分鐘左右恒河猴出現(xiàn)單個肢體不自主抽搐，9-10分鐘左右很快發(fā)展到雙側(cè)肢體的抽搐，表現(xiàn)為四肢緊抓籠底，前肢伸直，后肢蜷縮，重心下移，如此反復(fù)至10分鐘，抽搐幅度加大，10-11分鐘突然出現(xiàn)倒地，全身強直約5-10秒，表現(xiàn)為四肢伸直，面肌抽搐，而后轉(zhuǎn)變?yōu)樗闹嚁?0-40秒。5級發(fā)作潛伏期為10.33+/-0.58分鐘，發(fā)作后恒河猴反復(fù)出現(xiàn)全身抽動1-2次，肌下，呼吸急促，咀嚼明顯，肌注CL后35分鐘后，猴可站立，肌注CLl小時后猴恢復(fù)正常，可活動進食。對照組的猴未見癇性發(fā)作。2腦電圖表現(xiàn)基礎(chǔ)腦電圖，頻率為8-llHz，波幅為50-100μV，實驗組注射CL后3_5分鐘，腦電圖頻率增高波幅增高，100-150μV波形變尖，注射后7分鐘左右開始出現(xiàn)散發(fā)癇波，波形多為棘波、尖波，頻率9-13Ηζ，波幅平均153.33+/-46.70μV，此時行為學(xué)無明顯變化，平均8分鐘左右恒河猴出現(xiàn)單個肢體的陣攣，此時腦電圖表現(xiàn)為癇波增多，波幅增高平均230+/-60.83μV，9-10分鐘恒河猴出現(xiàn)連續(xù)四肢陣攣，腦電圖連續(xù)高幅癇波，波形為棘波、尖波，多棘波，棘-慢復(fù)合波，波幅平均356.67+/-51.32μV。10-12分鐘左右恒河猴出現(xiàn)四肢強直，露齒，牙關(guān)緊閉，腦電圖為棘波、尖波、多棘波，波幅平均466.67+/-20.82μV,強直約5-10秒后表現(xiàn)為四肢陣攣，持續(xù)約30-40秒，腦電圖為多棘慢或棘慢波，波幅平均506.67+/-40.41μV，此后恢復(fù)，腦電圖波幅明顯降低，平均13.33+/-19.15μV,2-3分鐘后逐漸恢復(fù)，此后仍有四肢陣攣及相應(yīng)癇性放電，1.5-2小時后恢復(fù)正常，腦電圖變?yōu)榛A(chǔ)波(見圖1-8)。在其中一只體重為7.6kg的猴5級發(fā)作結(jié)束后半小時到1小時期間，其表現(xiàn)為間斷性意識障礙，雙眼凝視，眨眼反射消失，腦電圖提示為3-4Hz棘慢波，持續(xù)時間約10-15秒，間隔半分到1分鐘再次出現(xiàn)上述表現(xiàn)，發(fā)作間期眼球可轉(zhuǎn)動，眨眼反射存在，無上述規(guī)律放電，對照組恒河猴未見癇性發(fā)作，腦電圖未見癇性放電。上述結(jié)果說明，本實驗首次成功建立了靈長類動物-恒河猴的馬桑內(nèi)酯急性癇性發(fā)作模型，并從行為學(xué)和電生理兩方面予以評價；該急性模型表現(xiàn)為部分性繼發(fā)全面性發(fā)作，很好的模擬了人類顳葉癲癇的發(fā)作形式；且該方法具有建立過程簡單，易操作易重復(fù)，對腦沒有直接的機械損傷，且致癇時間短等優(yōu)點。實驗例2用本發(fā)明動物模型篩選平臺有效性的試驗通過抗癲癇藥來驗證本發(fā)明恒河猴癇性發(fā)作模型，同時初步建立相關(guān)藥物篩選平臺。一、方法1動物抗癲癇藥(AEDs)給藥方式利用實驗例1制備的模型，評價抗癲癇藥物包括兩類經(jīng)典的一線抗癲癇藥丙戊酸鈉(Valproate)和卡馬西平(Carbamaz印ine)，以及兩種新型的抗癲癇藥物左乙拉西坦(Levetiracetam)和唑尼沙胺(Zonisamide)，以上藥物均為進口制劑。按照人體耐受最大劑量將藥物依照體重進行劑量的換算，采取口服給藥的方式將藥物按照每日劑量研磨成粉末溶于IOOOml水中，利用飼水瓶進行飼水，分早晚兩次服用，不另外供水，以保證觀察動物每日均可完全服用。給藥2周后，測血藥濃度達峰值，給予馬桑內(nèi)酯刺激，持續(xù)觀察馬桑內(nèi)酯刺激后2小時情況。每只模型動物血藥濃度達峰后共接受馬桑內(nèi)酯(注射劑量為0.7ml/kg)刺激四次，每次刺激間隔3天。對癲癇發(fā)作情況進行評分。2對癲癇發(fā)作進行評分，評分方法如下發(fā)作分級參照Racine的標準，依據(jù)發(fā)作程度分為5級，1級頭面部抽搐，咀嚼；2級節(jié)律性點頭或全身驚動；3級一側(cè)前肢陣攣；4級具有后肢站立的全身陣攣性驚厥常伴雙側(cè)前肢陣攣；5級具有站立伴跌倒或全身強直_陣攣發(fā)作。以5秒發(fā)作為一個時間單位，1級發(fā)作持續(xù)5秒評1分，2級發(fā)作持續(xù)5秒評2分，依此類推。二、結(jié)果及結(jié)論結(jié)果如圖9所示，用抗癲癇藥物前，模型動物每次馬桑內(nèi)酯刺激后癇性發(fā)作評分為362士27，丙戊酸鈉(Valproate)和卡馬西平(Carbamaz印ine)均不能有效的抑制馬桑內(nèi)酯引起的此模型動物癲癇發(fā)作，然而，新型抗癲癇藥左乙拉西坦(Levetiracetam)和唑尼沙胺(Zonisamide)對該癲癇發(fā)作具有顯著的抑制作用。因此，進一步說明本模型與人類癲癇疾病具有很好的相似性；可以用于臨床藥物篩選，具有實用價值。另外，實驗也證明該模型對傳統(tǒng)抗癲癇藥物耐藥，因此屬于癲癇耐藥模型范疇，更加具有研究和應(yīng)用價值。權(quán)利要求一種制備恒河猴癇性發(fā)作模型的方法，其特征在于將劑量為0.5ml/kg-0.7ml/kg的馬桑內(nèi)酯施用于恒河猴。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備模型的方法，其特征在于所述的馬桑內(nèi)酯的劑量為0.7ml/kg；每ml馬桑內(nèi)酯含6.7g生藥馬桑葉。3.權(quán)利要求1或2所述的方法制備的動物模型在篩選治療癇性發(fā)作的藥物中用途。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于所述的藥物是治療急性癇性發(fā)作的藥物。5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的用途，其特征在于所述的動物模型是癲癇耐藥動物模型。6.一種篩選癇性發(fā)作治療藥物的方法，它包括如下步驟a、用馬桑內(nèi)酯建立急性癇性發(fā)作動物模型，作為對照動物；b、將候選藥物與馬桑內(nèi)酯一起施用于恒河猴；c、觀察候選藥物抑制馬桑內(nèi)酯引起的模型動物癇性發(fā)作的發(fā)作情況，并進行評分，評價潛在的治療癇性發(fā)作的藥物。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選藥物的方法，其特征在于a步驟所述的動物模型的制備方法是將劑量為0.5ml/kg-0.7ml/kg的馬桑內(nèi)酯施用于恒河猴。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的篩選藥物的方法，其特征在于所述的馬桑內(nèi)酯的劑量為0.7ml/kg。9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選藥物的方法，其特征在于步驟c所述的藥物是治療急性癇性發(fā)作的藥物。10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選藥物的方法，其特征在于a步驟所述的動物模型是癲癇耐藥動物模型。全文摘要本發(fā)明提供了一種制備恒河猴癇性發(fā)作模型的方法，它是將劑量為0.5ml/kg-0.7ml/kg的馬桑內(nèi)酯施用于恒河猴誘發(fā)癇性發(fā)作。本發(fā)明還提供了該動物模型在篩選癇性發(fā)作治療藥物中的用途。相對于其它的顳葉癲癇模型，本研究具有以下優(yōu)點1、采用肌肉注射的途徑系統(tǒng)給藥，易操作；2、致癇劑量與動物性別、年齡相關(guān)不大；3、重復(fù)性好；4、電極安置方便；5、對腦沒有直接的機械損傷；6、致癇過程清晰；7、藥物安全性好。文檔編號A01K67/027GK101843906SQ20091005868公開日2010年9月29日申請日期2009年3月24日優(yōu)先權(quán)日2009年3月24日發(fā)明者何俐,周東,張勤,李宏霞,楊天華,洪楨,王莉,辜蕊,鄢波申請人:四川大學(xué)華西醫(yī)院;成都華西海圻醫(yī)藥科技有限公司;國家成都中藥安全性評價中心