專利名稱：：苦參殺菌成份的提取方法及含有苦參殺菌成份的消毒劑的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明屬于消毒劑領域，特別涉及一種苦參殺菌成份的提取方法，及由提取的含有苦參殺菌成份的苦參提取物制備的消毒劑。技術背景現(xiàn)階段使用的殺菌劑中，化學藥物占有相當大的比例，而化學藥物的長期使用，給環(huán)境帶來了化學藥物殘留、環(huán)境污染等問題。在全球環(huán)保意識增強的形勢下，化學藥物正面臨著嚴重的挑戰(zhàn)，來源于天然的藥物正成為藥物研究開發(fā)的熱點。來源于天然的藥物包括來自于植物源、微生物源和礦物源藥物，其中大部分是來源于植物的藥物。植物中的大部分次生代謝物如萜烯類、生物堿類、黃酮類、淄體、酚類及特殊氨基酸、多糖等均具有抗菌、抑菌活性。中草藥源殺菌劑是利用中藥提取技術，把具有殺菌作用的成份從中草藥中提取出來，得到分離純化的單體物質(zhì)。這些成份是自然存在的，一般易于降解，對環(huán)境積蓄毒性可能性不大，與化學成分的殺菌劑相比，中藥藥源的殺菌劑對人和動物的毒性較低，對生態(tài)環(huán)境的影響較小，是很有應用前景的環(huán)保型藥物。在提取方法中，熱回流法是以易揮發(fā)的有機溶劑為溶媒，對浸出液加熱蒸餾。通過有機溶劑的蒸發(fā)與回流，使得每次與原料接觸的溶劑都是純有機溶劑，提高了萃取動力，從而提高萃取速度和效果。此方法在中藥有效成份提取中，應用較為廣泛，現(xiàn)有的文獻有較多的報道。但是通過熱回流法提取，提取液中含有相對分子質(zhì)量大于幾萬的雜質(zhì)(無效成份)，這部分雜質(zhì)的存在破壞了有效成份的作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對己有的熱回流技術中存在的問題，提供一種簡單、有效的苦參殺菌成份的提取方法。本發(fā)明的另一目的在于提供一種殺菌效果良好的，含有苦參殺菌成份的消毒劑。本發(fā)明的苦參殺菌成份的提取方法包括以下步驟1)取干燥粉碎的苦參加入到是其810倍重量的丙酮中浸泡24小時后，對浸泡苦參的丙酮溶劑加熱回流1.52小時，然后將苦參渣過濾除去，收集濾液；2)用與步驟1)相同重量的丙酮洗滌步驟1)得到的苦參渣，得到洗滌液，將洗滌液與步驟l)得到的濾液合并，此為一次濾液；3)利用超濾裝置，采用截取分子量為500010000的膜過濾步驟2)得到的一次濾液，得到二次濾液；將得到的二次濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，蒸出溶劑丙酮，得到苦參提取物，此苦參提取物中含有苦參的有效殺菌成份，苦參的有效殺菌成份的質(zhì)量含量為96%左右(表l)，對得到的苦參提取物粉碎后為淺棕黃色粉末。所述的苦參提取物的有效殺菌成份為苦參堿。利用本發(fā)明的方法得到的含有苦參殺菌成份的苦參提取物制備的含有苦參殺菌成份的消毒劑在苦參提取物中加入丙酮和乳化劑壬垸基酚聚氧乙烯醚(TX—IO)配制成含有苦參殺菌成份的消毒劑；其中，消毒劑中含有苦參提取物35重量％，余量為丙酮和乳化劑TX—IO，丙酮與乳化劑TX—10的體積比為h1。本發(fā)明中采用丙酮提取、二次過濾方法得到具有殺菌作用的苦參提取物。在濾液過濾試驗中采用了一系列過濾方法，利用氣相色譜法對濾液進行定性、定量分析，結(jié)果見表l。表l.不同過濾方法的提取結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>通過氣相色譜法對濾液的分析，結(jié)果顯示不采用超濾法過濾的一次濾液，圖譜(圖1)雜質(zhì)峰多，而采用超濾法對一次濾液進行過濾，隨著膜截取分子量的降低，雜質(zhì)峰逐漸減少，提取物中有效成份含量(質(zhì)量比)提高。采用截取分子量500010000的膜對一次濾液進行超濾，此條件最佳，得到提取物有效成份含量最高，雜質(zhì)峰小(圖2)。本發(fā)明的苦參殺菌成份的提取方法是一種簡單、有效的苦參殺菌成份的提取方法。利用本發(fā)明的方法得到的含有苦參殺菌成份的苦參提取物制備的含有苦參殺菌成份的消毒劑，在殺菌試驗中，苦參提取物配制成的消毒劑對大腸桿菌和金葡萄球菌的殺菌率均達到99.9%,是效果良好的消毒劑。圖l.本發(fā)明實施例2的一次濾液氣相色譜圖。圖2.本發(fā)明實施例2的二次濾液氣相色譜圖。具體實施方式實施例1取200g粉碎的苦參，放在干燥箱中充分干燥后，加入到是其8倍重量的丙酮中浸泡24小時后，對浸泡苦參的丙酮溶劑加熱回流1.5小時，然后將苦參渣濾除，收集濾液；用與上述相同重量的丙酮洗滌得到的苦參渣一次，得到洗滌液，將洗滌液與上述得到的濾液合并，此為一次濾液。利用超濾裝置，采用截取分子量為500010000的聚醚砜(PES)膜過濾一次濾液，得到二次濾液；將得到的二次濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在一0.01Mpa和40'C的條件下蒸出溶劑丙酮，得到苦參提取物，粉碎后為淺棕黃色粉末。此苦參提取物中含有苦參的有效殺菌成份，苦參的有效殺菌成份的質(zhì)量含量為96%左右(見表1中膜截取分子量500010000的結(jié)果)。實施例2對實施例1方法得到的苦參提取物進行氣相色譜分離和測定?？鄥⑻崛∥镉帽芙?，使用XE-60(25m，0.25mm，0.25nm)石英毛細管色譜柱和FID檢測器進行氣相色譜分離和測定，結(jié)果如圖1和2所示。實施例3用實施例1方法得到的苦參提取物配制消毒劑。取3g苦參提取物粉末，在其中加入50ml丙酮和50ml乳化劑TX-10，充分搖勻，得到淺黃色乳液，即為含量為3重量％的消毒劑。實施例4用實施例3得到的苦參提取物配制的消毒劑。分別取金黃色葡萄球菌ATCC6538、大腸桿菌8099第3代第14代營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面試管的新鮮培養(yǎng)物(培養(yǎng)時間18小時24小時)，用5.0ml吸管吸取3.0ml5.0ml稀釋液(稀釋液為0.1%胰蛋白胨的生理鹽水溶液)加入斜面試管內(nèi)，反復吹吸，洗下斜面試管內(nèi)的菌苔，隨后用5.0ml吸管將洗下的菌液移至另一無菌試管中，用電動混合20秒，制成菌懸液。先用細菌濃度比濁測定法測定菌懸液濃度，然后用稀釋液(稀釋液為0.1%胰蛋白胨的生理鹽水溶液)稀釋至濃度為5X1065X107cfo/ml，取稀釋后的菌懸液0.5ml，再加入0.5ml有機物干擾物質(zhì)(3%(W/V)牛血清白蛋白)混勻，然后將試管置于20。C士的水浴5分鐘。吸取4.0ml消毒劑注入試管中，混勻記時，待作用至規(guī)定時間(陽性對照為稀釋液)，再取0.5ml消毒劑與細菌的混合液，加入4.5ml中和劑(質(zhì)量濃度為1%卵磷脂+質(zhì)量濃度為1%吐溫80的水溶液)于試管中，中和作用10分鐘，吸取1.0ml接種平皿，作菌落計數(shù)，計算殺滅率，殺菌率為99.9%。實施例5取200g粉碎的苦參，放在干燥箱中充分干燥后，加入到是其8倍重量的丙酮中浸泡24小時后，對浸泡苦參的丙酮溶劑加熱回流2小時，然后將苦參渣濾除，收集濾液；用與上述相同重量的丙酮洗滌得到的苦參渣一次，得到洗滌液，將洗滌液與上述得到的濾液合并，此為一次濾液。利用超濾裝置，采用截取分子量為500010000的聚醚砜(PES)膜過濾一次濾液，得到二次濾液；將得到的二次濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在一0.01Mpa和4(TC的條件下蒸出溶劑丙酮，得到苦參提取物，粉碎后為淺棕黃色粉末。實施例6取200g粉碎的苦參，放在干燥箱中充分干燥后，加入到是其10倍重量的丙酮中浸泡24小時后，對浸泡苦參的丙酮溶劑加熱回流2小時，然后將苦參渣濾除，收集濾液；用與上述相同重量的丙酮洗滌得到的苦參渣一次，得到洗滌液，將洗滌液與上述得到的濾液合并，此為一次濾液。利用超濾裝置，采用截取分子量為500010000的聚醚砜(PES)膜過濾一次濾液，得到二次濾液；將得到的二次濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在一0.01Mpa和4(TC的條件下蒸出溶劑丙酮，得到苦參提取物，粉碎后為淺棕黃色粉末。實施例7用實施例6方法得到的苦參提取物配制消毒劑。取3g苦參提取物粉末，在其中加入50ml丙酮和50ml乳化劑TX-IO，充分搖勻，得到淺黃色乳液，即為含量約為5重量％的消毒劑。權(quán)利要求1.一種苦參殺菌成份的提取方法，其特征是，該方法包括以下步驟1)取干燥粉碎的苦參加入到是其8～10倍重量的丙酮中浸泡24小時后，對浸泡苦參的丙酮溶劑加熱回流1.5～2小時，然后將苦參渣過濾除去，收集濾液；2)用與步驟1)相同重量的丙酮洗滌步驟1)得到的苦參渣，得到洗滌液，將洗滌液與步驟1)得到的濾液合并，此為一次濾液；3)利用超濾裝置，采用截取分子量為5000～10000的膜過濾步驟2)得到的一次濾液，得到二次濾液；將得到的二次濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，蒸出溶劑丙酮，得到苦參提取物，此苦參提取物中含有苦參的有效殺菌成份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是所述的苦參提取物的有效殺菌成份為苦參堿。3.—種利用權(quán)利要求1或2得到的含有苦參殺菌成份的苦參提取物制備的含有苦參殺菌成份的消毒劑，其特征是在苦參提取物中加入丙酮和乳化劑壬烷基酚聚氧乙烯醚配制成含有苦參殺菌成份的消毒劑；其中，消毒劑中含有苦參提取物35重量％，余量為丙酮和乳化劑壬烷基酚聚氧乙烯醚，丙酮與乳化劑壬烷基酚聚氧乙烯醚的體積比為l:1。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的消毒劑，其特征是所述的消毒劑對金葡萄球菌和大腸桿菌的殺滅率為99.9%。全文摘要本發(fā)明屬于消毒劑領域，特別涉及一種苦參殺菌成份的提取方法，及由提取的含有苦參殺菌成份的苦參提取物制備的消毒劑。取干燥粉碎的苦參加入到丙酮中浸泡后，對浸泡苦參的丙酮溶劑加熱回流，然后將苦參渣過濾除去，收集濾液；用丙酮洗滌得到的苦參渣，得到洗滌液，將洗滌液與得到的濾液合并，此為一次濾液；利用超濾裝置，采用截取分子量為5000～10000的膜過濾得到的一次濾液，得到二次濾液；將得到的二次濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，蒸出溶劑丙酮，得到苦參提取物，此苦參提取物中含有苦參的有效殺菌成份。在苦參提取物中加入一定比例的丙酮和乳化劑烷基酚聚氧乙烯醚配制成含有苦參殺菌成份的，具有滅菌效果良好的消毒劑。文檔編號A01P1/00GK101401592SQ20081022564公開日2009年4月8日申請日期2008年11月3日優(yōu)先權(quán)日2008年11月3日發(fā)明者樂張,張順合,穎慈,林王申請人:中國檢驗檢疫科學研究院