專利名稱：一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種微生物發(fā)酵混合飼料的制備方法，特別是涉及一種禽類 枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法。 背景4支術(shù)
禽類祠養(yǎng)所用飼料， 一 方面要考慮飼料中的營養(yǎng)成分使飼料性價(jià)比提 高，另外還要考慮飼料本身能否提高禽類對致病微生物的抵抗力，普通的飼
料常常是向其中添加"三素"，即抗生素、激素和維生素，但"三素，，的 濫用會(huì)波及到做為人類食品用禽類的肉和蛋的質(zhì)量，對人類造成潛在的危 害，因此，亟需一種既能改善粗飼料的營養(yǎng)成分，使植物纖維轉(zhuǎn)化小分子禽 類易吸收物質(zhì)又可以提高禽類抵抗力的飼料。
枯草芽孢桿菌零星存在于畜禽腸道微生物群落中。與常用的乳酸菌等益 生菌相比，芽孢桿菌是好氧菌，在一定條件下產(chǎn)生芽孢。因而芽孢桿菌具有 耐高溫、耐酸堿、耐壓等特點(diǎn)，能夠耐受顆粒銅料加工過程的影響以及胃內(nèi) 的酸性環(huán)境和腸道上段的膽鹽和消化液的破壞，進(jìn)入腸道后段后，在腸道迅 速復(fù)活，且其復(fù)活率較高。芽孢桿菌在腸道內(nèi)消耗大量的氧，維持腸道厭氧 環(huán)境，抑制需氧致病菌的生長繁殖，維持宿主腸道微生態(tài)平衡
發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種能促進(jìn)禽類生長的禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混 合飼料的制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下
一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合伺料的制備方法，包括下迷步驟
(1)用肉湯培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基，在30 45。C有氧條件下培養(yǎng)枯草芽 孢桿菌8-30小時(shí)，成為一級(jí)種子；
(2 )將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為 二級(jí)種子培養(yǎng)基，在30 45。C有氧條件下培養(yǎng)8 3Q小時(shí)，成為二級(jí)種子；
(3 )將二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為 發(fā)酵培養(yǎng)基，在30 - 45。C有氧條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培 養(yǎng)8 36小時(shí)，成為三級(jí)種子；
(4)將米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液均勻混合，再發(fā)酵培 養(yǎng)36 60小時(shí)，制得第一發(fā)酵飼料；(5)將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽混
合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料。 '
所述步驟(4)中所述米糠、麩皮、碎玉米的質(zhì)量比為1:1~5:1~5,所 述米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液的質(zhì)量比為100: 0. 2~1。 所述米糠、麩皮、碎玉米的質(zhì)量比為l:l:l。 ' 所述步驟(4)中所述發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為48小時(shí)。
所述步驟(5)中所述第一發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼 粉、食鹽的質(zhì)量比為50 ~ 70: 10 - 20: 5 ~ 10: 5 ~ 15: 0. 2 ~ 1: 0. 2 ~ 1: 0. 2 ~ 1。
所述第一發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽的質(zhì)量比 65: 17: 7: 9. 5: 0. 63: 0. 45: 0. 37。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)
本發(fā)明的方法能改善粗飼料的營養(yǎng)成分，使植物纖維轉(zhuǎn)化為小分子禽類 易吸收的物質(zhì)，用本發(fā)明的方法制備的混合飼料在應(yīng)用于禽類時(shí)，可不使用 抗生素和激素，并能促進(jìn)禽類的生長。
促進(jìn)禽類高效增重、本發(fā)明的方法具有生產(chǎn)工藝筒單、產(chǎn)品的成本低等 優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。 實(shí)施例l
一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法，包括下述步驟 (1)用肉湯培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基，在40。C有氧條件下培養(yǎng)枯草芽孢桿
菌18小時(shí)，成為一級(jí)種子；
(2 )將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，釆用肉湯培養(yǎng)基為
二級(jí)種子培養(yǎng)基，在4(TC有氧條件下培養(yǎng)18小時(shí)，成為二級(jí)種子；
(3) 將二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，.采用肉湯培養(yǎng)基為 發(fā)酵培養(yǎng)基，在4(TC有氧條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培養(yǎng)18 小時(shí)，成為三級(jí)種子；
(4) 將質(zhì)量比為l: 1: l的米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液均勻 混合，所述米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液的質(zhì)量比為100: 0.5, 再發(fā)酵培養(yǎng)48小時(shí)，制得第一發(fā)酵飼料；
(5) 將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽按 質(zhì)量比為65: 17: 7: 9. 5: 0, 63: 0. 45: 0. 37的比例混合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā) 酵混合飼料。
實(shí)施例2
一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法，其特征包括下述步
驟
(1) 用肉湯培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基，在3(TC有氧條件下培養(yǎng)枯草芽孢桿 菌30小時(shí)，成為一鄉(xiāng)及種子；
(2) 將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為 二級(jí)種子培養(yǎng)基，在3(TC有氧條件下培養(yǎng)30小時(shí)，成為二級(jí)種子；
(3 )將二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，釆用肉湯培養(yǎng)基為 發(fā)酵培養(yǎng)基，在3(TC有氧條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培養(yǎng)36 小時(shí)，成為三級(jí)種子； .
(4) 將質(zhì)量比為1:5:1的米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液均勻 混合，所述米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液的質(zhì)量比為100: 0.2， 再發(fā)酵培養(yǎng)50小時(shí)，制得第一發(fā)酵飼料；
(5) 將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽按 質(zhì)量比為60: 10: 10: 10: 0. 8: 0. 2: 0. 2混合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼 料。
實(shí)施例3
一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法，其特征包括下述步
驟
(1)用肉湯培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基，在45。C有氧條件下培養(yǎng)枯草芽孢桿 菌8小時(shí)，成為一級(jí)種子；
(2 )將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為 二級(jí)種子培養(yǎng)基，在45。C有氧條件下培養(yǎng)8小時(shí)，成為二級(jí)種子；
(3) 將二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，.采用肉湯培養(yǎng)基為 發(fā)酵培養(yǎng)基，在45'C有氧條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培養(yǎng)8 小時(shí)，成為三級(jí)種子；
(4 )將質(zhì)量比為l: 1 ~ 5: 1 ~ 5的米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子 液均勻混合，所述米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液的質(zhì)量比為100: 1， 再發(fā)酵培養(yǎng)36小時(shí)，制得第一發(fā)酵飼料；
(5)將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽按 質(zhì)量比為50: 20:8:5:0.2: 1: 1混合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料。
實(shí)施例4
一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法，其特征包括下述步
驟
(1)用肉湯培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基，在36t:有氧條伴下培養(yǎng)枯草芽孢桿
菌24小時(shí)，成為一級(jí)種子；
(2) 將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為 二級(jí)種子培養(yǎng)基，在36。C有氧條件下培養(yǎng)24小時(shí)，成為二級(jí)種子；
(3) 將二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，'采用肉湯培養(yǎng)基為 發(fā)酵培養(yǎng)基，在36'C有氧條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培養(yǎng)24 小時(shí)，成為三級(jí)種子；
(4) 將質(zhì)量比為1:1: 5的米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液均 勻混合，所述米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液的質(zhì)量比為100: 0.8， 再發(fā)酵培養(yǎng)60小時(shí)，制得第一發(fā)酵伺料；
(5) 將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽按 質(zhì)量比為70: 15: 5: 15: 1: 0. 8: 0. 8混合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料。
實(shí)施例5
一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法，其特征包括下述步 驟
U)用肉湯培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基，在4(TC有氧條件下培養(yǎng)枯草芽孢桿 菌12小時(shí)，成為一級(jí)種子；
(2 )將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為 二級(jí)種子培養(yǎng)基，在4(TC有氧條件下培養(yǎng)12小時(shí)，成為二級(jí)種子；
(3) 將二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為 發(fā)酵培養(yǎng)基，在4(TC有氧條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培養(yǎng)12 小時(shí)，成為三級(jí)種子；
(4) 將質(zhì)量比為1:2: 3的米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液均勻 混合，所述米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液的質(zhì)量比為100: 0.8， 再發(fā)酵培養(yǎng)48小時(shí)，制得第一發(fā)酵祠料； .
(5) 將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽按 質(zhì)量比為60: 18: 7: 10: 0. 6: 0. 8: 0. 9混合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼 料。
本發(fā)明的一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料能夠產(chǎn)生蛋白酶、淀粉 酶、脂肪酶以及多種氨基酸，促進(jìn)禽類生長。本發(fā)明的方法制軒的飼料能夠 降低雛禽細(xì)菌性腹瀉的發(fā)生率，提高成活率；降低生產(chǎn)成本，提高飼料轉(zhuǎn)化
利用率；提高機(jī)體免疫功能。在肉仔雞日糧中添加本發(fā)明的方法制備的飼料
可使肉仔雞平均日采食量、日增重和飼料轉(zhuǎn)化率均優(yōu)于空白對照組，將少量 本發(fā)明的方法制備的飼料添加于雞祠料中或觀賞禽類的飼料中，可以提高雞 或觀賞禽類的抗病能力，防止感染雞瘟病和其他微生物引起的疾病，提高雞 的成活率。使雞肉或雞蛋中沙門氏菌等有害微生物的菌落個(gè)數(shù)大大下降，從 而提高了禽蛋食品的食用安全級(jí)別。
實(shí)驗(yàn)例
1. 本發(fā)明的方法制備的銅料對單純性雞下痢的治療
某雞場祠養(yǎng)蛋雞2000只，曾于30日齡發(fā)生傳染性法氏嚢病(IBD),用高 免血清及抗生素治療，此后雞群中持續(xù)有50%左右雞下痢，并造成平均約每 天O. 1%的死亡率.直至54日齡就診，其間曾用痢特靈、敵菌凈、土霉素等 口服治療，連用一周病程好轉(zhuǎn)，但停藥不久又復(fù)發(fā)，經(jīng)4企-險(xiǎn)無固定致病原， 糞涂片15份，平均革蘭氏陽性桿菌占13. 57%,視野中大多數(shù)為革蘭氏陰性 桿菌。
通過祠喂本發(fā)明的方法制備的飲料，以每雞每天O. 25億活菌劑量投服， 5天后全群恢復(fù)，采食量由每天每只100克增至110克。糞涂片16份，平均革 蘭氏陽性桿菌占97. 13%,有些涂片幾乎呈分叉乳桿菌的純種狀態(tài)。
2. 對雞沙門氏菌病的防治
某肉用雞場，于進(jìn)雛時(shí)將2000只雞分為二組，同等條件下，其中一組以 每雞每天500萬活菌劑量投服本發(fā)明的方法制備的詞料，2周齡間無一沙門氏 菌病例及雞下痢病例，對照組則平均每天有O. 045%的沙門氏菌病雞死亡， 對照組于2周齡后從^:水中給予每雞每天0. 2億活菌劑量，5天后無新病例出 現(xiàn)，死亡停止。
3. 對二重感染的治療
某鄉(xiāng)四個(gè)肉用雞場(飼養(yǎng)量各2000只)，進(jìn)雛時(shí)為預(yù)防白痢而在銅料中加 入O. 04%的痢特靈，l周齡以后在此基礎(chǔ)上增喂O. 5%的土霉素，2周齡后 再加雞寶，此后還曾間或〗吏用青霉素々大水。4周齡后，該四個(gè)雞場的雞群幾 乎同時(shí)發(fā)生下痢，并每天有1%-2%的死亡率。剖檢可見腸粘膜充血出血，有 的雞在胸腔或腹腔有直徑3、 20mm大小的霉菌菌莒，無其它固定病原，經(jīng)綜 合診斷為二重感染。糞便涂片10份，鏡下可見大量真菌孢子及酵母菌，革蘭 氏染色后檢查，革蘭氏陽性桿菌占3. 2%。
用本發(fā)明的方法制備的飼料(O. 5億活菌/只，日)投服，4日后痊愈， 死亡停止，糞涂片腸道細(xì)菌恢復(fù)正常。
權(quán)利要求
1.一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法，其特征包括下述步驟(1)用肉湯培養(yǎng)基為種子培養(yǎng)基，在30～45℃有氧條件下培養(yǎng)枯草芽孢桿菌8～30小時(shí)，成為一級(jí)種子；(2)將一級(jí)種子液接種在種子罐中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為二級(jí)種子培養(yǎng)基，在30～45℃有氧條件下培養(yǎng)8～30小時(shí)，成為二級(jí)種子；(3)將二級(jí)種子液接種在發(fā)酵罐中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基為發(fā)酵培養(yǎng)基，在30～45℃有氧條件下，采用定時(shí)或連續(xù)補(bǔ)料分批發(fā)酵方式培養(yǎng)8～36小時(shí)，成為三級(jí)種子；(4)將米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液均勻混合，再發(fā)酵培養(yǎng)36～60小時(shí)，制得第一發(fā)酵飼料；(5)將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽混合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方 法，其特征是所述步驟(4 )中所述米糠、麩皮、碎玉米的質(zhì)量比為l: 1 ~ 5: 1 ~ 5,所述米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液的質(zhì)量比為100: 0.2~1。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方 法，其特征是所述米糠、麩皮、碎玉米的質(zhì)量比為l: 1: 1。
4. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方 法，其特征是所述步驟(4)中所述發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為48小時(shí)。
5. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方 法，其特征是所述步驟(5)中所述第一發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、 貝殼粉、食鹽的質(zhì)量比為50 ~ 70: 10 ~ 20: 5 ~ 10: 5 ~ 15: 0. 2 ~ 1: 0. 2 ~ 1: 0. 2 ~ 1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方 法，其特征是所述第一發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽 的質(zhì)量比65: 17: 7: 9. 5: 0. 63: 0. 45: 0. 37。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料的制備方法，包括下述步驟(1)用肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)枯草芽孢桿菌，成為一級(jí)種子；(2)將一級(jí)種子液進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)，成為二級(jí)種子；(3)將二級(jí)種子液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，采用肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)，成為三級(jí)種子；(4)將米糠、麩皮、碎玉米混合后與三級(jí)種子液均勻混合，再發(fā)酵培養(yǎng)制得第一發(fā)酵飼料；(5)將第一次發(fā)酵飼料與豆餅、麩皮、魚粉、骨粉、貝殼粉、食鹽混合成禽類枯草芽孢桿菌發(fā)酵混合飼料。本發(fā)明的方法能改善粗飼料的營養(yǎng)成分，使植物纖維轉(zhuǎn)化為小分子禽類易吸收的物質(zhì)，用本發(fā)明的方法制備的混合飼料在應(yīng)用于禽類時(shí)，可不使用抗生素和激素，并能促進(jìn)禽類的生長。
文檔編號(hào)A23K1/16GK101347177SQ20081005414
公開日2009年1月21日 申請日期2008年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月15日
發(fā)明者王連民, 田杏芳 申請人:天津生機(jī)集團(tuán)股份有限公司