專利名稱：常見灘涂貝類育成雜交方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種海洋貝類遺傳育種技術(shù)，具體的說是選用兩個具有較大遺 傳差異地理群體的常見灘涂貝類進行育成雜交的方法。
背景技術(shù)：
雜交育種是培育新品種的主要途徑。通過選用具有優(yōu)良性狀的品種、品系、 群體以及個體進行雜交，繁殖出符合育種要求的雜種群，對生產(chǎn)具有重要的指 導和實踐意義。雜交可以使雙親的基因重新組合，形成各種不同的類型，為選
擇提供豐富的材料；基因重組可以將雙親控制不同性狀的優(yōu)良基因結(jié)合于一體， 或?qū)㈦p親中控制同一性狀的不同微效基因積累起來，產(chǎn)生在各該性狀上超過親 本的類型。
育成雜交包括簡單育成雜交、引入育成雜交、級進育成雜交等。簡單育成 雜交是根據(jù)當?shù)?、當時的自然條件、生產(chǎn)需要以及原地方品種品質(zhì)等客觀因素 確定育種目標，應用相應的不同品種(品系、群體)使它們各參加雜交一次， 并結(jié)合定向選育，將不同品種的優(yōu)點，綜合到新品種的一種雜交育種的方法。 引入育成雜交是引入一個相應的改良品種(品系、群體)與當?shù)乇桓牧计贩N進 行雜交，獲得級進第一代雜交種(FJ。然后將此雜交種再與引進品種回交，以 獲得在生產(chǎn)性能上顯著地向改良品種方面發(fā)展，并適當保留引入品種的某些優(yōu) 點。級進育成雜交與引入育成雜交相反，是以雜交種R再與當?shù)貎?yōu)良品種(品 系、群體)回交，如此各代雜種連續(xù)與當?shù)貎?yōu)良品種回交若干代，并結(jié)合定向 培育，以獲得在生產(chǎn)性能上顯著地向改良品種方面發(fā)展，并適當保留本地品種 原有的某些優(yōu)點。
目前，對水產(chǎn)動物的雜交主要集中在簡單育成雜交上，因為該法簡便，易 于見到雜交效果，但是雜交子代具有雜種優(yōu)勢衰退、性狀分離的現(xiàn)象。中國發(fā) 明專利號為CN101147473的發(fā)明公開了刺參級進雜交育種方法。該方法雖然改 良了刺參的品質(zhì)，提高了生長、存活及相關(guān)的抗逆性狀。但是，與本發(fā)明相比， 該發(fā)明育成雜交方法單一、雜交種后代(〉F2)仍會發(fā)生雜種優(yōu)勢衰退、性狀分 離的不足。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在解決當前灘涂貝類存在的種質(zhì)抗逆性差，生長速度慢等問題。 通過兩個差異較大地理群體灘涂貝類相互關(guān)聯(lián)的三種育成雜交方法，有效地增 強了常見灘涂貝類對溫度、鹽度等環(huán)境因子劇變的抵抗能力，使其生長、存活 性狀得到改良，并能夠使雜交種一直保持雜種優(yōu)勢；完善了育成雜交的在貝類 應用上的育種方法，有效地防止雜交子代雜種優(yōu)勢衰退現(xiàn)象的發(fā)生；為灘涂貝 類高產(chǎn)、抗逆品種開發(fā)奠定了堅實的基礎。
本發(fā)明采集A、 B兩個不同地理群體的灘涂貝類親本，逐步進行簡單育成雜 交、引入育成雜交、級進育成雜交、親本回交，使雜交子代一直保持其雜種優(yōu) 勢。其具體工藝過程包括以下歩驟
第一歩、采集A、 B兩個不同地理群體的灘涂貝類親本，選擇2齡健康無損 的個體為親本，其中A群體為土著種，B群體為引入種。
第二步、將采集的親本放置于蝦池屮進行生態(tài)促熟，經(jīng)過6 12個月的底播 養(yǎng)殖，于第2年性腺同步成熟。
第三步、采用直徑為0.6mm的電鉆進行親本性別鑒定，鑒別后，通過陰干、 流水刺激，使親本同步產(chǎn)卵排精，然后按照A群體親本XB群體親本的方式進 行群體正反雜交，得到簡單育成雜交的子一代(FAB)。
第四步、按照三段法在生態(tài)蝦池中進行簡單育成雜交子一代的養(yǎng)成，養(yǎng)成 周期》1年，于第3年或第4年的秋季，雜交子一代與親本性腺同步成熟。
第五步、雜交子一代(FAB) XB群體親本進行引入育成雜交；雜交子一代 (Fab) XA群體進行級進育成雜交，得到兩個不同組合的育成雜交子一代，三 段法養(yǎng)成。
第六步、重復第五步，將育成雜交子一代繼續(xù)與親本回交。 本發(fā)明適用于各種不同地理群體同種貝類親本之間的雜交，適用于菲律賓 蛤仔、中國蛤蜊、四角蛤蜊、青蛤、文蛤、繹蟶、泥蚶等常見的灘涂貝類。
本發(fā)明對親本采用生態(tài)促熟法，克服了不同地理群體間的地理隔離，性成 熟和繁殖等生理差異，促使性腺同步發(fā)育精卵同步排放。本發(fā)明采用了逐步進 行簡單育成雜交、引進育成雜交、級進育成雜交等雜交方式，促使雜交子代始 終保持雜種優(yōu)勢，防止雜交種發(fā)生子代衰退，其雜合度不斷得到加強。由于每
次雜交都采用lH反雜交，所以能夠更加充分的利用親本效應，從中得到的最有 效的育成雜交子代。與現(xiàn)有養(yǎng)殖的灘涂貝類品種相比，本發(fā)明有效增強了灘涂 貝類對溫度、鹽度等環(huán)境因子劇變的抵抗能力，使其生長、存活性狀得到改良， 為灘涂貝類高產(chǎn)、抗逆良種開發(fā)奠定了基礎。
具體實施例方式
下面以不同地理群體菲律賓蛤仔為實施例，進一步說明本發(fā)明，但不構(gòu)成 對本發(fā)明的限制。 實施例1
第一步、采集大連群體和莆田群體的菲律賓蛤仔親本于2003年9月，選 擇2齡健康無損的大連群體和莆田群體的菲律賓蛤仔親本。其中，中國莆田群 體生長快，殼薄，抗熱能力強；大連群體個體大小適中，殼厚，抗寒能力強。
第二歩、兩個地理群體菲律賓蛤仔親本的生態(tài)促熟將采集的親本放置于 蝦池中進行生態(tài)促熟，經(jīng)過12個月的底播養(yǎng)殖，于第2004年9月，性腺同步 成熟。
第三步、兩個理群體間的簡單育成雜交采用直徑為0.6mm的電鉆進行親 本性別鑒定，鑒別后,通過陰干、流水刺激，親本可以同步產(chǎn)卵排精；然后按照 大連群體x莆田群體的方式進行群體正反雜交，得到簡單育成雜交的子一代。
第四步、三段法養(yǎng)成簡單育成雜交子一代按照的三段法在生態(tài)蝦池中進 行簡單育成雜交子一代的養(yǎng)成，養(yǎng)成周期》1年。于2005年的秋季，雜交子一 代與親本性腺同步成熟。
第五步、引入育成雜交與級進育成雜交同第二步，進行雜交子一代x莆田 群體進行引入育成雜交；雜交子一代x大連群體進行級進育成雜交，得到兩個不 同組合的育成雜交子一代，三段法養(yǎng)成。
第六步、重復第五步，于2006年秋季，將引入育成雜交子代與莆田群體親 本回交；級進雜交子代與大連群體親本回交，得到了回交子代。
經(jīng)過上述方法得到的回交子代，其生長速度提高了40 60%，存活率提高了 60~80%。
實施例2
第一步、采集中國廣西群體和日本東京群體的菲律賓蛤仔親本于2004年
9月，選擇2齡健康無損的中國廣西群體和日本東京群體的菲律賓蛤仔親本。其 中，中國廣西群體個體大，殼薄，抗熱能力強；日本東京群體個體大小適中， 殼厚，抗寒能力強。
第二步、兩個地理群體菲律賓蛤仔親本的生態(tài)促熟將采集的親木放置于 蝦池中進行生態(tài)促熟，經(jīng)過12個月的底播養(yǎng)殖，于第2005年9月，性腺同步成熟。
第三步、兩個理群體間的簡單育成雜交采用直徑為0.6mm的電鉆進行親 本性別鑒定，鑒別后,通過陰干、流水刺激，親本可以同步產(chǎn)卵排精；然后按照 中國廣西群體x日本東京群體的方式進行群體正反雜交，得到簡單育成雜交的子一代。
第四步、三段法養(yǎng)成簡單育成雜交子一代按照的三段法在生態(tài)蝦池中進 行簡單育成雜交子一代的養(yǎng)成，養(yǎng)成周期》1年。于2006年的秋季，雜交子一 代與親本性腺同步成熟。
第五步、引入育成雜交與級進育成雜交同第三步，進行雜交子一代x日木 東京群體進行引入育成雜交；雜交子一代x中國廣西群體進行級進育成雜交，得 到兩個不同組合的育成雜交子一代(Fabxb、 Fabxa)，三段法養(yǎng)成。
第六步、重復第五步，于2007年秋季，將引入育成雜交子代與日本東京群 體親本回交；級進雜交子代與中國廣西群體親本回交，得到了回交子代。
經(jīng)過上述方法得到的回交子代，其生長速度提高了 90 150%，存活率提高 了卯 120%。
實施例3
第一步、采集中國莆田群體和日本東京群體的菲律賓蛤仔親本于2005年 9月，選擇2齡健康無損的中國莆田群體和日本東京群體的菲律賓蛤仔親本。其
中，中國莆田群體生長快，殼薄，抗熱能力強；日本東京群體個體大小適中， 殼厚，抗寒能力強。
第二步、兩個地理群體菲律賓蛤仔親本的生態(tài)促熟將采集的親本放置于 蝦池中進行生態(tài)促熟，經(jīng)過12個月的底播養(yǎng)殖，于第2006年9月，性腺同步 成熟。
第三步、兩個理群體間的簡單育成雜交采用直徑為0.6mm的電鉆進行親
本性別鑒定，鑒別后，通過陰干、流水刺激，親本可以同步產(chǎn)卵排精；然后按照 中國莆田群體x日本東京群體的方式進行群體正反雜交，得到簡單育成雜交的子 一代。
第四步、三段法養(yǎng)成簡單育成雜交子一代按照的三段法在生態(tài)蝦池屮進 行簡單育成雜交子一代的養(yǎng)成，養(yǎng)成周期^1年。于第2007年的秋季，雜交子 一代與親本性腺同步成熟。
第五步、引入育成雜交與級進育成雜交同第三步，進行雜交子一代x日本 東京群體進行引入育成雜交；雜交子一代x中國莆田群體進行級進育成雜交，得 到兩個不同組合的育成雜交子一代，三段法養(yǎng)成。
經(jīng)過上述方法得到的引入育成雜交子代，其生長速度提高了 30~50%，存活 率提高了 50~70%;級進雜交子代，其生長速度提高了 40 60%，存活率提高了 60~80%。
實施例4
第一步、采集中國莆田群體和韓國釜山群體的菲律賓蛤仔親本于2005年 9月，選擇2齡健康無損的中國莆田群體和韓國釜山群體的菲律賓蛤仔親本。其
中，中國莆田群體生長快，殼薄，抗熱能力強；韓國釜山群體個體大小適中，
殼厚，抗寒能力強。
第—步、兩個地理群體菲律賓蛤仔親本的生態(tài)促熟將采集的親本放置于
蝦池中進行生態(tài)促熟，經(jīng)過12個月的底播養(yǎng)殖，于第2006年9月，性腺同步 成熟。
第三步、兩個理群體間的簡單育成雜交采用直徑為0.6mm的電鉆進行親 本性別鑒定，鑒別后，通過陰干、流水刺激，親本可以同步產(chǎn)卵排精；然后按照 中國莆田群體x韓國釜山群體的方式進行群體正反雜交，得到簡單育成雜交的子一代。
第四歩、三段法養(yǎng)成簡單育成雜交子一代按照的三段法在生態(tài)蝦池中進 行簡單育成雜交子一代的養(yǎng)成，養(yǎng)成周期》1年。于第2007年的秋季，雜交子 一代與親本性腺同步成熟。
第五步、引入育成雜交與級進育成雜交同第三步，進行雜交子一代x韓國 釜山群體進行引入育成雜交；雜交子一代x中國莆田群體進行級進育成雜交，得
到兩個不同組合的育成雜交子一代，三段法養(yǎng)成。
經(jīng)過上述方法得到的引入育成雜交子代，其生長速度提高了30~40%，存活 率提高了 20 30%;級進雜交子代，其生長速度提高了 20~30%，存活率提高了 30 40%。
權(quán)利要求
1、一種常見灘涂貝類育成雜交方法，其特征在于，采集A、B兩個不同地理群體的灘涂貝類親本，逐步進行簡單育成雜交、引入育成雜交、級進育成雜交、親本回交，其具體工藝過程包括以下步驟第一步、采集A、B兩個不同地理群體的灘涂貝類親本，選擇2齡健康無損的個體為親本，其中A群體為土著種，B群體為引入種；第二步、將采集的親本放置于蝦池中進行生態(tài)促熟，經(jīng)過6～12個月的底播養(yǎng)殖，于第2年性腺同步成熟；第三步、采用直徑為0.6mm的電鉆進行親本性別鑒定，鑒別后，通過陰干、流水刺激，使親本同步產(chǎn)卵排精，然后按照A群體親本×B群體親本的方式進行群體正反雜交，得到簡單育成雜交的子一代(FAB)；第四步、按照三段法在生態(tài)蝦池中進行簡單育成雜交子一代的養(yǎng)成，養(yǎng)成周期≥1年，于第3年的秋季，雜交子一代與親本性腺同步成熟；第五步、雜交子一代(FAB)×B群體親本進行引入育成雜交，雜交子一代(FAB)×A群體進行級進育成雜交，得到兩個不同組合的育成雜交子一代(FAB×B、FABxA)，三段法養(yǎng)成；第六步、重復第五步，將育成雜交子一代繼續(xù)與親本回交。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種常見灘涂貝類育成雜交方法，其特征在于第 四步雜交子一代在養(yǎng)成周期第4年的秋季，與親本性腺同步成熟。
3、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的一種常見灘涂貝類育成雜交方法，其特征在于適 用于各種不同地理群體同種貝類親本之間的雜交。
4、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種常見灘涂貝類育成雜交方法，其特征在于適 用的灘涂貝類包括菲律賓蛤仔、中國蛤蜊、四角蛤蜊、青蛤、文蛤、繹蟶、泥 甜。
全文摘要
常見灘涂貝類育成雜交方法，采集不同地理群體灘涂貝類的2齡親本；經(jīng)過生態(tài)促熟，促使性腺同步成熟；開展兩個地理群體間的簡單育成雜交；三段法養(yǎng)成簡單育成雜交子一代；雜交子一代與引入群體進行引入育成雜交；雜交子一代與土著群體進行級進育成雜交，得到育成雜交子一代。在此基礎上，重復以上步驟，將育成雜交子一代繼續(xù)與親本群體回交，使雜交子代一直保持其雜種優(yōu)勢。本發(fā)明操作簡便，實用性高，有效地增強了灘涂貝類對溫度、鹽度等環(huán)境因子劇變的抵抗能力，使其生長、存活性狀得到改良，并能夠使雜交種一直保持雜種優(yōu)勢，為灘涂貝類高產(chǎn)、抗逆良種開發(fā)奠定了基礎。
文檔編號A01K61/00GK101361467SQ20081001342
公開日2009年2月11日 申請日期2008年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年9月25日
發(fā)明者洋 劉, 張國范, 張躍環(huán), 鳳 楊, 王金海, 閆喜武, 霍忠明 申請人:大連水產(chǎn)學院