專(zhuān)利名稱(chēng)：用作葡萄霜霉菌拮抗劑物質(zhì)的包含內(nèi)生真菌互隔交鏈孢霉菌和/或其代謝物的抗真菌組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及包含真菌互隔交鏈孢霉菌(J/"rAmnVi 和/或?qū)?于二酮艱溱(DKP)家族的其代謝物的組合物，用于控制病原體真菌葡萄 霜霉菌(戶(hù)/fls附印flm v/ft'co/fl)，其為葡萄霜霉病的藥劑。主要的三種代謝 物分別是具有以下各式的下述化合物
環(huán)(L-苯丙氨酸-反式-4-羥基-L-脯氨酸)(1)
環(huán)(L-亮氨酸-反式-4-羥基-L-脯氨酸)(2)
環(huán)(L-丙氨酸-反式斗羥基-L-脯氨酸)(3)
背景技術(shù)：
所有品種的葡萄(v/rtiy^rfl)都易感染霜霉病，這種病是由病原 體葡萄霜霉菌引起的。相反地，來(lái)自其中寄生蟲(chóng)的存在對(duì)地方種群的選 擇發(fā)揮強(qiáng)大作用的潮濕地區(qū)的美洲葡萄(F "'s fl附w/owm)品種則具有 抵抗力0
直到50年代，化學(xué)性對(duì)抗葡萄霜霉病幾乎完全基于使用涂覆rameic 產(chǎn)品波爾多混合劑(Bordeaux mixture)和氧氯化銅，所述產(chǎn)品除了強(qiáng) 的抗霜霉病活性以外，還具有不可忽略的抗粉孢子(Oidium)和葡萄孢屬(Botritis)的活性。二價(jià)銅產(chǎn)品已經(jīng)被幾種有機(jī)合成產(chǎn)品(氨基甲酸 酯類(lèi)、鄰苯二甲酸類(lèi)似物(phthalymmidic)等)部分替代。直到如今， 還主要采取以下兩種策略來(lái)減少由所述病原體引起的損傷持續(xù)涂覆和 導(dǎo)引性對(duì)抗(guided struggle )。
所提議的解決辦法可能不夠適當(dāng)，尤其是在持續(xù)降雨時(shí)期，這時(shí)一 旦發(fā)生感染，必須通過(guò)使用可一次性施用的系統(tǒng)性殺真菌劑進(jìn)行緊急處 理。然而，這樣介入的風(fēng)險(xiǎn)在于可能產(chǎn)生真菌的耐藥林。
而且，根據(jù)當(dāng)前對(duì)于涂覆非二價(jià)銅產(chǎn)品進(jìn)行的研究，已突出表明盡 管它們與銅不同不對(duì)葡萄產(chǎn)生危害植物的毒性，但它們可能對(duì)人有毒。 事實(shí)上，已發(fā)現(xiàn)在種植葡萄和制造葡萄酒的工人中，ETU(亞乙基硫脲， 代森錳鋅(Mancozeb )的降解產(chǎn)物)的平均痕量是可在其余人群中發(fā)現(xiàn) 的平均痕量的4倍。應(yīng)當(dāng)提醒，亞乙基硫脲被認(rèn)為是一種潛在的致癌物 質(zhì)，從這一點(diǎn)本身來(lái)講，足以解釋尋找替代方法的原因。
考慮到僅基于植物藥物介入(phytoiatric intervention )的對(duì)抗策略 容易產(chǎn)生各種缺點(diǎn)，因此探尋了將具有部分單一功效的不同和互補(bǔ)的對(duì) 抗方法進(jìn)行協(xié)同聯(lián)合。這樣的方法通常稱(chēng)為綜合性對(duì)抗方法，其基本上 基于聯(lián)合使用低劑量抗真菌劑和病原體拮抗劑。然而，它們并不具有完 全功效。由Raziq和Fox ( 2002 )進(jìn)行的研究是綜合性對(duì)抗cryptogram 病的一個(gè)具體實(shí)例，其中利用拮抗劑和抗真菌劑對(duì)蘋(píng)果植株上的蜜環(huán)菌 (^7W///tf/7Vl/lie//e")進(jìn)行綜合控制。在葡萄霜霉菌的具體情況下，目前 還沒(méi)有綜合方法被授予專(zhuān)利權(quán)。
在葡萄的生物栽培中，迄今為止對(duì)抗葡萄霜霉病的方法主要是基于 使用天然物質(zhì)尤其是銅。然而，由于其在土壤中積累可能對(duì)環(huán)境產(chǎn)生負(fù) 面的后效應(yīng)，其使用存在爭(zhēng)議。由于這一原因，自2002年開(kāi)始，二價(jià) 銅化合物在生物農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中的使用已經(jīng)受到具體法規(guī)的限制，目的在于 規(guī)定可應(yīng)用的金屬銅的最大值。
一種用于防護(hù)該病原體的真正可替代方法是使用拮抗劑生物。所述 拮抗劑(或生物控制劑)是一種天然存在的生物，其可限制該病原體的 生長(zhǎng)并使其保持在經(jīng)濟(jì)損失的閾值以下；所述拮抗劑并不完全消除病原 體，但其限制病原體的生長(zhǎng)并因此減少對(duì)作物的損害。在文獻(xiàn)中，有應(yīng)用拮抗劑控制由病原體生物引起的不同植物品種的
一些疾病的實(shí)例，并且其中一些涉及葡萄霜霉病(Falk et al., 1996; Kortekamp， 1997 )。然而，對(duì)于葡萄而言，還沒(méi)有關(guān)于^"吏用內(nèi)生真菌(尤 其是互隔交鏈孢霉菌)作為拮抗劑生物以及由其產(chǎn)生的代謝物的應(yīng)用的報(bào) 道.
內(nèi)生菌是其部分或整個(gè)生物周期都在宿主植物體內(nèi)度過(guò)但不引起可 見(jiàn)的疾病癥狀的微生物(真菌、細(xì)菌和放線菌)。那么，所述內(nèi)生真菌 就是"無(wú)癥狀的"，其與植物的關(guān)系可解釋為共生型的相互作用(Clay, 1991)。內(nèi)生菌能夠合成多種可廣泛用于醫(yī)藥、醫(yī)藥工業(yè)和農(nóng)業(yè)中的次 生代謝物(Gusman e Vanhaelen， 2000 )。

發(fā)明內(nèi)容
現(xiàn)已出乎意料地發(fā)現(xiàn)，葡萄的內(nèi)生真菌互隔交鏈孢霉菌和/或其某些 次生代謝物可用作葡萄霜霉菌的拮抗劑。有利地，其用途以組合物的形式 實(shí)現(xiàn)，所述組合物包含上述拮抗劑和通常用于待用于植物的抗真菌組合物 中的賦形劑與添加劑。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是抗真菌組合物，其包含作為葡萄霜霉菌 拮抗劑的各種形式的互隔交鏈孢霉菌真菌以及適用于農(nóng)業(yè)中所用的抗真 菌組合物中的賦形劑和添加劑。有利地，使用活躍生長(zhǎng)中的互隔交鏈孢霉 菌的菌絲體。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是由互隔交鏈孢霉菌制備葡萄霜霉菌拮抗劑提取 物的方法，其包括以下步驟
a. 將互隔交鏈孢霉菌的生長(zhǎng)中的菌絲體部分接種到培養(yǎng)用肉湯中， 并且可能地進(jìn)行攪拌，孵育12-60小時(shí)，冷凍并凍干；
b. 將由步驟a)得到的凍干肉湯溶于水中，過(guò)濾并用中等極性的溶 劑(優(yōu)選正丁醇)萃取水溶液，直到得到有機(jī)相；
c. 通過(guò)制備性色鐠在硅膠層上利用重量比為60:15:25的正丁醇/ 乙酸/水的混合物進(jìn)行洗脫而將所述有機(jī)相進(jìn)行分級(jí)分離，直到 得到三個(gè)級(jí)分A、 B和C;d.通過(guò)薄層色鐠，利用重量比為9:1的二氯甲烷/甲醇的混合物進(jìn) 行洗脫，將級(jí)分A和B繼續(xù)分級(jí)分離，直到得到下式(l)(Rf 0.48)和(2)(Rf0.43)的化合物
還可針對(duì)上述方法增加額外的步驟e)(仍構(gòu)成本發(fā)明的主題)，在該 步驟中將所述級(jí)分C進(jìn)行薄層色譜處理，利用重量比為85:15的二氯甲 烷/甲醇的混合物進(jìn)行洗脫，直到得到下述式(3)(Rf0.40)的化合物
根據(jù)本發(fā)明，可制備葡萄霜霉菌的拮抗劑組合物，其包含所述三種級(jí) 分A、 B和/或C中的一種或多種，和/或所述化合物(1)、 (2)和/或(3) 中的一種或多種，以及常用于農(nóng)業(yè)中所用的抗真菌組合物中的添加劑和/ 或賦形劑。
已知互隔交鏈孢霉菌在幾種草本和喬木樹(shù)種中作為內(nèi)生真菌；迄今為 止對(duì)其在葡萄中所知甚少(Cardinali et al., 1994)，但還沒(méi)有關(guān)于通過(guò) 葡萄內(nèi)生菌互隔交鏈孢霉菌制備二酮嗛嚷(DKP)的報(bào)道。
互隔交鏈孢霉菌的次生代謝物是已知的屬于二酮艱喚(DKP)化學(xué)物 質(zhì)家族中的化合物，本發(fā)明提出了其用途。
所述二酮哌溱是可見(jiàn)于自然界(動(dòng)物界和植物界)中的小肽衍生物。 其化學(xué)構(gòu)型簡(jiǎn)單，對(duì)蛋白水解穩(wěn)定，其合成路線眾所周知，因此，其可
7在實(shí)驗(yàn)室中容易地合成(Horton et al.， 2000 )。
在醫(yī)藥領(lǐng)域中，它們用作抗生素、合成疫苗、化療產(chǎn)品和抗高血壓 藥；在農(nóng)業(yè)中，已經(jīng)利用它們對(duì)抗非生物脅迫(abiotic stress)和作為 抗菌物質(zhì)和抗真菌物質(zhì)(Horton et al" 2000; McCleland et al ， 2004 )， 但還從來(lái)沒(méi)有被報(bào)道過(guò)用于抗葡萄病原體，尤其是抗葡萄霜霉菌。
就有關(guān)抗病原體真菌(其中包括葡萄霜霉菌)的其它活性二肽分子 的才艮道而言，可引用Camaggi等的美國(guó)專(zhuān)利6,084,065和Filippini等 的美國(guó)專(zhuān)利6,448,228。上述專(zhuān)利公開(kāi)了用于制備具有抗微生物作用和殺 蟲(chóng)作用的肽分子的新合成方法。
使用真菌對(duì)抗葡萄霜霉菌的優(yōu)點(diǎn)如下該內(nèi)生真菌既不引起癥狀，也 不導(dǎo)致葡萄的其它變化，但其能夠通過(guò)破環(huán)孢子形成的能力而顯著改變病 原體；直接由培養(yǎng)基提取的DKP可作為從"天然"生物中提取的天然化 合物用于葡萄的生物栽培。
以下報(bào)道本發(fā)明的一些實(shí)施例。
具體實(shí)施例方式
在室溫下，在置于150轉(zhuǎn)/分的擺動(dòng)式攪拌器上的48孔無(wú)菌板中的 液體培養(yǎng)基(營(yíng)養(yǎng)肉湯-NB+蔗糖)中培養(yǎng)126種葡萄內(nèi)生菌微生物。
將含有900 nl NB和一種微生物的懸液(懸液1)放入每一孔中。對(duì) 于每種微生物而言，設(shè)定5次重復(fù)。
隨后，將從健康葡萄葉上切下來(lái)的小圓片與拮抗劑懸液接觸5分鐘， 然后在20'C下于含有濃度為4.25xl05個(gè)孢子/ml的霜霉菌孢子的板中接 種一夜(懸液2)。
然后，將所述小圓片置于20'C的恒溫濕潤(rùn)箱中放置一周。
結(jié)束時(shí)，借助立體顯微鏡檢查葡萄霜霉菌孢子的存在。該檢查在2002 年和2003年期間重復(fù)了 6次。在126種微生物中，有5種始終抑制葡萄霜霉菌的孢子形成。因此， 將它們純化并鑒定。所有這5種分離產(chǎn)物均屬于互隔交鏈孢霉菌種。
接種霜霉菌3天和6天后，從上述同一葉的小圓片中取組織部分， 利用透射電子顯微鏡(TEM)進(jìn)行分析，目的是在細(xì)胞水平上檢查葡萄 霜霉菌和互隔交鏈孢霉菌的相互作用。
還在對(duì)照組織部分(健康葡萄、僅與互隔交鏈孢霉菌一起孵育的葡 萄、以及僅與葡萄霜霉菌一起孵育的葡萄)進(jìn)行了取樣和觀察。
根據(jù)通過(guò)TEM的觀察可以得出，互隔交鏈孢霉菌不誘導(dǎo)葡萄葉組織 的超結(jié)構(gòu)變化；事實(shí)上，該組織看上去M良好；而相反地葡萄霜霉菌則 顯示了嚴(yán)重的變化。菌絲體具有非常少的大液泡，這些液泡有時(shí)候包含 黑色的沉淀物。卵菌的吸器發(fā)育不全。在逃逸階段(escaping phase)中， 從來(lái)沒(méi)有在氣孔保衛(wèi)細(xì)胞之間發(fā)現(xiàn)葡萄霜霉菌。
由內(nèi)生菌互隔交鏈孢霉菌制備低分子量的代謝物是從真菌培養(yǎng)用肉 湯開(kāi)始進(jìn)行的。將M于皮氏皿(Petri capsule)中的瓊脂化培養(yǎng)基上的 互隔交鏈孢霉菌的活躍生長(zhǎng)的菌絲體部分接種到^^有250 ml營(yíng)養(yǎng)肉湯的 培養(yǎng)瓶中。然后將肉湯在振蕩器上于20'C孵育48小時(shí)，然后冷凍(-4(TC ) 并凍干。隨后將凍干的肉湯(20 g)溶于水中并過(guò)濾；然后用正丁醇萃取 水溶液。通過(guò)制備性層色鐠(preparatory layer Chromatography)(PLC ) 在> ^板(Merck-Kiesdgel60PF254 )上將此有;M目進(jìn)行分級(jí)分離，利用 60:15:25的正丁醇/乙紛1120的混合物洗脫，直到得到按極性遞增順序 被稱(chēng)為A、 B和C的三個(gè)帶。通過(guò)薄層色鐠(TLC )在硅膠板上進(jìn)一步 純化級(jí)分A (54 mg)和B (48 mg)，利用二氯甲烷和甲醇混合物 (CH2Cl2/MeOH 9:1)洗脫，得到純化合物1 (1.5 mg， Rf 0.48)和2 (5 mg， Rf 0.43 )。將級(jí)分C ( 83 mg )也進(jìn)行TLC處理(CH2Cl2/MeOH 85:15 )，直到得到另 一種純化合物3 ( 3.5 mg， Rf 0.40 )。通過(guò)質(zhì)磁共振 語(yǔ)(Bruker AV400， 鐠和2D-NMR鐠，400 MHz )，利用殘留溶劑的 信號(hào)(S ( ppm ) ， CHD2OD = 3.31, CHC13 = 7.26, D20 = 4.卯)作為標(biāo)準(zhǔn)， 表征所分離的代謝物。通過(guò)鐠儀KratosMS80獲得質(zhì)鐠數(shù)據(jù)。通過(guò)偏光 計(jì)JASCO-DIP-181利用10 cm的池測(cè)量旋光。通過(guò)電子轟擊質(zhì)鐠法(電子轟擊質(zhì)譜法，EIMS)和高分辨EIMS (HREIMS)計(jì)算液體培養(yǎng)基 中由互隔交鏈孢霉菌產(chǎn)生的主要低分子量代謝物的分子式。
與其它化合物相比，以較高量提取到三種DKP。它們是
環(huán)(L-苯丙氨酸-反式-4-羥基-L-脯氨酸)(1)
環(huán)(L-亮氨酸-反式-4-羥基-L-脯氨酸)(2)
環(huán)(L-丙氨酸-反式-4-羥基-L-脯氨酸)(3)，
其化學(xué)式如下
1 2 3
以不同濃度單獨(dú)和相聯(lián)合測(cè)試這些代謝物對(duì)抗保存于濕潤(rùn)箱中的葉 的小圓片(體外)和溫室中植物的葉的小圃片(植物內(nèi))的葡萄霜霉菌的 活性。
制備以下濃度的水溶液1(T3M、 1(T4M、 10_5]\1和10-6]\1。
還通過(guò)每次取兩種化合物以及一起取所有三種化合物但總是為同樣 終濃度而制備溶液。
按上述同樣方法對(duì)葉的小圓片進(jìn)行測(cè)試。
對(duì)于植物內(nèi)測(cè)試而言，使用控制條件下于溫室(20'C，光周期12小 時(shí))中生長(zhǎng)的葡萄栽培品種Pinot grigio的生根的扦插苗；利用釘將所 述扦插苗排列在聚苯乙烯板上，使下葉面能保持盡可能與所述板相附 著。
=H所述植物內(nèi)試驗(yàn)在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行
1) 接種葡萄霜霉菌2小時(shí)后和24小時(shí)后評(píng)價(jià)DKP效力的治療性實(shí)驗(yàn);
2) 接種葡萄霜霉菌前評(píng)價(jià)處理效力的預(yù)防性實(shí)驗(yàn)。
1) 治療性實(shí)驗(yàn)
基于DKP類(lèi)型和所用的濃度給每片葉標(biāo)記上數(shù)字和字母；而在下 葉面上，畫(huà)上小圓團(tuán)以突出其中含有DKP的溶液將定位的位置。然后， 利用含有4.7xl()S個(gè)孢子/ml濃度的霜霉孢子的混懸液噴灑葉子(用于預(yù) 防性實(shí)驗(yàn)的那些除外)。在利用含有霜霉孢子的混懸液接種2小時(shí)和24 小時(shí)后，將幾滴DKP溶液(每滴相當(dāng)于22nl)置于各小圓圏中。在病 原體的孵育階段結(jié)束時(shí)(第7天)，觀察葉子以評(píng)價(jià)是否有葡萄霜霉菌的 孢子形成或者是否其已受到DKP處理的抑制。
2) 預(yù)防性試驗(yàn)
同樣在本試驗(yàn)中，也是基于DKP類(lèi)型和所用的濃度給葉標(biāo)記上數(shù) 字和字母；并在下葉面上畫(huà)上小圓團(tuán)(每片葉6個(gè))以突出其中含有 DKP分子的液滴將定位的區(qū)域。立即將所述含有DKP分子的液滴置于 于各個(gè)小圓圏內(nèi)。在孵育階段結(jié)束時(shí)觀察葉子以評(píng)價(jià)是否有葡萄霜霉菌 的孢子形成或者是否其已受到DKP作用的抑制。
不論是治療性目的還是預(yù)防性目的使用DKP，所得的DKP對(duì)葉的 小圓片的效力均良好(減少了 80%的葡萄霜霉菌孢子形成)。利用DKP 混合物制備的溶液100%抑制病原體孢子形成。同樣在植物內(nèi)試驗(yàn)中， 無(wú)論是治療性實(shí)驗(yàn)(從感染起2小時(shí)后和24小時(shí)后)中還是在預(yù)防性 實(shí)驗(yàn)中，DKP均抑制葡萄霜霉菌的孢子形成。
這些物質(zhì)并不引起葡萄的葉組織的壞死或任何其它毒性作用；其它 的細(xì)胞學(xué)研究進(jìn)一步證實(shí)了 DKP混合物(濃度為10—4 M)并不引起葡 萄葉組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變；相反，接種在葉的小圓片上并在2小時(shí)后用 DKP處理的葡萄霜霉菌則顯示了完全改變的菌絲體。事實(shí)上，液泡看上 去變形并且吸器壞死。這些超結(jié)構(gòu)變化已經(jīng)在利用拮抗劑處理后的其它病 原體真菌中有報(bào)導(dǎo)，表現(xiàn)為代謝物和/或毒性酶的作用。特別是，在葡萄霜霉菌菌絲體內(nèi)部液泡樣異常結(jié)構(gòu)(液泡的體積大并數(shù)目減少)的存在與真
菌的衰老期相關(guān)聯(lián)；衰老可因?yàn)樯硇栽?病原體周期的末期)而出現(xiàn)， 也可因拮抗劑和/或毒性物質(zhì)的存在(如在我們報(bào)道的實(shí)例中)而出現(xiàn)。
為將我們的發(fā)明用于完全保持在田間的葡萄植林，我們制定了以下 兩個(gè)方案。
第一個(gè)方案提供制備濃度為1(T3M的DKP水溶液，于是對(duì)葡萄進(jìn)行 處理，確保良好地噴灑綠色部分。
第二個(gè)方案提供制備互隔交鏈孢霉菌的培養(yǎng)用肉湯。然后通過(guò)無(wú)菌網(wǎng) 過(guò)濾此肉湯并用于通過(guò)預(yù)防性方式和治療性方式處理葡萄。還利用互隔交 鏈孢霉菌的勻漿化菌絲體的水混懸液進(jìn)行處理。
本文所示的結(jié)果證實(shí)，由于以下不同原因，從葡萄內(nèi)生菌即互隔交鏈 孢霉菌的培養(yǎng)液中提取的DKP看來(lái)是用于控制葡萄霜霉菌的具有前景的 方法
1) 其不導(dǎo)致對(duì)葡萄的毒性；
2) 其為極易合成的低分子量化合物；
3) 將包含適當(dāng)?shù)闹苽涑杀荆?br> 4) 就新的歐洲法律關(guān)于葡萄生物栽培中銅使用的額外限制(2002年 3月15日的委員會(huì)(EC)條例NR. 473/2002)而言，其效力水平已證 實(shí)總體是非常令人感興趣的。
內(nèi)生真菌互隔交鏈孢霉菌作為葡萄霜霉菌拮抗劑物質(zhì)的用途以及其 次生代謝物(尤其是式(1 )、 ( 2 )和(3 )的那些化合物)作為葡萄霜霉菌 拮抗劑物質(zhì)的用途，構(gòu)成了本發(fā)明另外的主題。
權(quán)利要求
1. 抗真菌組合物，其包含作為葡萄霜霉菌(Plasmopara viticola)拮抗劑物質(zhì)的各種形式的真菌互隔交鏈孢霉菌(Alternaria alternata)以及適用于農(nóng)業(yè)中所用的抗真菌組合物中的賦形劑和添加劑。
2. —種用于由互隔交鏈孢霉菌制備葡萄霜霉菌拮抗劑提取物的方 法，其包括以下步驟a. 將互隔交鏈孢霉菌的生長(zhǎng)中的菌絲體部分接種到培養(yǎng)用肉湯中， 并且可能地還進(jìn)行攪拌，孵育12-60小時(shí)，冷凍并凍干；b. 將由步驟a)得到的凍干肉湯溶于水中，過(guò)濾并用中等極性的 溶劑、優(yōu)選正丁醇萃取所述水溶液，直到得到有機(jī)相；c. 通過(guò)制備性色鐠在硅膠層上利用重量比為60:15:25的正丁醇/ 乙酸/水的混合物進(jìn)行洗脫而將所述有機(jī)相進(jìn)行分級(jí)分離，直到得 到三個(gè)級(jí)分A、 B和C;d. 通過(guò)薄層色鐠，利用重量比為9:1的二氯甲烷/甲醇的混合物 進(jìn)行洗脫，將級(jí)分A和B繼續(xù)分級(jí)，直到得到Rf值為0.48的下 述式(1)化合物和Rf值為0.43的下述式(2 )化合物<formula>formula see original document page 2</formula>
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中提供了額外的步驟e)，其中利用重 量比為85:15的二氯甲烷/甲醇的混合物將所述級(jí)分C進(jìn)行薄層色鐠， 直到得到Rf值為0.40的下述式(3)化合物<formula>formula see original document page 2</formula>
4. 葡萄霜霉菌的拮抗劑組合物，其包含可得自權(quán)利要求2的步驟c) 的所述級(jí)分A、 B和/或C中的一種或多種以及適用于農(nóng)業(yè)中所用的抗真菌 組合物中的添加劑和/或賦形劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4的葡萄霜霉菌的拮抗劑組合物，其包含所述化合物 (1)、 (2)和/或(3)中的一種或多種以及適用于農(nóng)業(yè)中所用的抗真菌組合物中的添加劑和/或賦形劑。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5和/或6的葡萄霜霉菌的拮抗劑組合物，其包含所 述級(jí)分A、 B和/或C中的一種或多種、和/或適用于農(nóng)業(yè)中所用的抗真菌 組合物中的所述化合物(1)、 (2)和/或(3)中的一種或多種。
7. 真菌互隔交鏈孢霉菌作為葡萄霜霉菌的拮抗劑物質(zhì)的用途。
8. 可得自權(quán)利要求2的步驟c)的所述級(jí)分A、 B和/或C中一種或多 種作為葡萄霜霉菌的拮抗劑物質(zhì)的用途。
9. 化合物(1)、 (2)和/或(3)中的一種或多種作為葡萄霜霉菌的拮 抗劑物質(zhì)的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及含有真菌互隔交鏈孢霉菌(Alternaria alternata)和/或?qū)儆诙哙?DKP)家族的式(1)、式(2)和式(3)的其次生代謝物的組合物，用于控制病原體真菌葡萄霜霉菌(Plasmopara viticola)。
文檔編號(hào)A01N43/90GK101484010SQ200780022489
公開(kāi)日2009年7月15日 申請(qǐng)日期2007年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月16日
發(fā)明者麗塔·穆塞蒂, 斯特凡諾·博爾塞利, 米凱萊·德安布羅西奧 申請(qǐng)人:烏迪內(nèi)大學(xué)