專(zhuān)利名稱(chēng)：一種器官保存液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，尤其是涉及一種器官保存液及其制備方法。
背景技術(shù)：
器官移植是20世紀(jì)人類(lèi)醫(yī)學(xué)科學(xué)的重大進(jìn)展。目前，全世界在肝臟、腎臟、心臟、胰腺和骨髓移植的領(lǐng)域的移植總數(shù)已超過(guò)70萬(wàn)例(次)，存活最長(zhǎng)的器官移植受者已近半個(gè)世紀(jì)。器官移植是本世紀(jì)醫(yī)學(xué)發(fā)展的主要方向之一，是治療終末期器官衰竭唯一有效的根治手段。任何臨床器官移植首先要有高質(zhì)量的供體，這是器官移植成功的先決條件和根本保障，作為器官移植學(xué)三大支柱之一的器官保存是器官移植的基石。
1987年，F(xiàn)olkert O.Belzer博士領(lǐng)導(dǎo)的美國(guó)WISCONSIN大學(xué)實(shí)驗(yàn)小組成功研制了一種低溫保存液——UW液，極大地延長(zhǎng)了肝臟、腎臟、胰腺、心臟、肺和小腸等器官的保存時(shí)間，推動(dòng)了世界器官移植的快速發(fā)展。UW液的成分是羥乙基淀粉50克/升、乳酸(內(nèi)酯)35.83克/升、KH2PO43.4克/升、MgSO4·7H2O 1.23克/升、棉子糖17.83克/升、腺苷1.34克/升、別嘌呤醇0.136克/升、總谷胱甘肽0.922克/升、KOH 5.61克/升、pH為7.4胰島素40單位青霉素G 20萬(wàn)單位、地塞米松16mg。
UW液的特點(diǎn)有(1)不使用代謝活躍的葡萄糖來(lái)維持滲透壓，而用乳糖醛酸鹽作為非滲透陰離子，并用棉子糖作為附加的滲透支持，用來(lái)預(yù)防因體溫過(guò)低而引發(fā)的細(xì)胞水腫；(2)用谷胱甘肽、別嘌呤醇對(duì)抗氧自由基；(3)含有腺苷，可刺激ATP合成，支持能量代謝；(4)含羥乙基淀粉(250 KU)，用來(lái)防止細(xì)胞間隙膨脹和維持膠體滲透壓；(5)以磷酸鹽系統(tǒng)防止細(xì)胞酸中毒。臨床證實(shí)UW液可顯著延長(zhǎng)器官體外活性，由此增加了可供移植的器官數(shù)量。目前，UW液及其各種UW型改良液已在國(guó)際上日益廣泛應(yīng)用。但是目前此類(lèi)保存液并不能降低器官移植過(guò)程中的灌注再損傷，對(duì)進(jìn)一步提高器官移植后的存活率存在一定障礙。
由于移植器官的保存對(duì)于移植手術(shù)的成功與否至關(guān)重要，因此，本領(lǐng)域迫切需要開(kāi)發(fā)新的器官移植保存液。
缺血再灌注損傷是缺血再灌注損傷的特殊類(lèi)型，在現(xiàn)代臨床肝移植中越來(lái)越顯出其重要性，以往研究表明在肝臟的再灌注期，枯否氏細(xì)胞大量激活，釋放一系列的炎性損傷因子，導(dǎo)致肝竇內(nèi)皮細(xì)胞損傷及肝功能受損。在冷保存期間導(dǎo)致再灌注損傷的因素已經(jīng)存在，而在再灌注期通過(guò)某種途徑激活相關(guān)損傷因子，導(dǎo)致肝臟損傷。
盡管缺血缺氧引起細(xì)胞凋亡的機(jī)制尚不完全清楚，但缺氧引起細(xì)胞膜鈣離子通道狀態(tài)改變，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣超載，已被普遍認(rèn)為是細(xì)胞死亡的“最后共同途徑”。研究證明，拮抗鈣離子內(nèi)流，在一定程度上能夠抑制細(xì)胞的凋亡。
鹽酸地爾硫卓為鈣離子通道阻滯藥，臨床用于在冠狀動(dòng)脈痙攣引起的心絞痛，可使心外膜、心內(nèi)膜的冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張，緩解心絞痛，在勞力性心絞痛，它擴(kuò)張周?chē)?，降低血壓，減輕心臟工作負(fù)荷。由于鹽酸地爾硫卓使血管平滑肌松弛，周?chē)茏枇档停獕合陆担糜谥委煾哐獕?。但是在器官保存液中使用鹽酸地爾硫卓未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于針對(duì)目前傳統(tǒng)的UW液使用中存在的不能降低器官移植過(guò)程中的灌注再損傷的實(shí)際問(wèn)題，提供一種能在器官移植保存中通過(guò)抑制鈣超載，對(duì)缺血所致的器官細(xì)胞損傷有明顯的保護(hù)作用的多器官移植保存液及其制備方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種器官保存液，其特征在于，在1000ml器官保存液中含有5mol/L的NaOH溶液3ml以及羥乙基淀粉58.5～71.5g；乳糖酸鉀 37.08～45.32g；MgSO4·7H2O 1.12～1.38g；腺苷 1.61～1.97g；別嘌呤醇 0.13～0.16g；KH2PO43.15～3.85 g；蔗糖 9.23～11.29g； 谷胱甘肽 0.92～1.12g；鹽酸地爾硫卓 20mg； KOH 適量；
雙蒸水 適量；保存液的pH值為7.3～7.5。
在本發(fā)明中所述的羥乙基淀粉的分子量為200KD，取代級(jí)為0.5MS。
一種上述器官保存液的制備方法，其特征在于按照1000ml配制量的具體步驟如下(a)用去離子水配制5mol/L的NaOH溶液3ml備用；配制5mol/L的KOH溶液20ml備用；取5mol/L的KOH溶液5ml，并將0.13～0.16g的別嘌呤醇溶解于其中備用；(b)將800ml雙蒸水加入＞1000ml的容器中，再加入37.08～45.32g乳糖酸鉀攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；并在攪拌中依次加?.12～1.38gMgSO4·7H2O、備用的3ml NaOH溶液、備用的15ml KOH溶液，繼續(xù)攪拌；(c)加入1.61～1.97g腺苷，攪拌至顏色變?yōu)榍逦尤?ml溶有別嘌呤醇的KOH溶液，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?.15～3.85g KH2PO4，攪拌至顏色變?yōu)榍逦患尤?.23～11.29g蔗糖，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?.92～1.12g谷胱甘肽，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?0mg鹽酸地爾硫卓，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?8.5～71.5g羥乙基淀粉，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?d)用KOH混合物的pH值調(diào)至7.3～7.5，繼續(xù)加雙蒸水，至1000ml攪拌均勻，形成器官保存液；(e)所得1000ml保存液，先經(jīng)0.45μm無(wú)菌濾膜濾除不溶性雜質(zhì)，再用0.45μm和0.22μm無(wú)菌濾膜疊加過(guò)濾后，濾液在0℃～8℃無(wú)菌保存。
在所述的器官保存液的制備方法中配制的環(huán)境溫度為20～25℃。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于鹽酸地爾硫卓是苯并噻嗪類(lèi)鈣通道阻斷藥，能阻止L型鈣通道，阻止鈣內(nèi)流。同時(shí)刺激鈣離子ATP酶，使胞質(zhì)內(nèi)鈣排除增加，增強(qiáng)線(xiàn)粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等攝取儲(chǔ)存鈣的作用。在細(xì)胞膜表面存在通過(guò)介導(dǎo)胞漿游離鈣升高而起作用的鈣動(dòng)員受體，鈣通道阻滯劑是指能選擇性地阻滯Ca2+從細(xì)胞外液經(jīng)電壓依賴(lài)性鈣通道流人細(xì)胞內(nèi)，從而減少細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的藥物，有效地預(yù)防細(xì)胞內(nèi)鈣超載，從而對(duì)缺血再灌注有保護(hù)作用。在生理情況下肝細(xì)胞內(nèi)外存在Ca2+濃度差但保持得相當(dāng)穩(wěn)定，對(duì)維持細(xì)胞的各種代謝過(guò)程十分重要。但在缺血再灌注損傷時(shí)Ca2+即可通過(guò)細(xì)胞膜上鈣通道流入細(xì)胞內(nèi)，破壞了肝細(xì)胞分裂、增殖、能量代謝及氧的供求關(guān)系，細(xì)胞膜變薄，細(xì)胞膜損傷，影響線(xiàn)粒體呼吸功能和氧化磷酸化，ATP生成減少，使肝細(xì)抱變性、壞死。如灌注液中使用Ca2+拮抗劑，則對(duì)缺血所致的肝細(xì)胞損傷有明顯的保護(hù)作用。由于器官保存液含有鹽酸地爾硫卓，從而減輕鈣超載；并能促進(jìn)平滑肌松弛及血管擴(kuò)張和血流增加，提高器官和組織對(duì)缺血的耐受性，促進(jìn)器官和組織功能恢復(fù)。
它含有這種逆轉(zhuǎn)因熱缺血造成的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷藥物，能有效地防治被保存器官的血管內(nèi)皮損傷。應(yīng)用該保存液可有效延長(zhǎng)移植器官的存活時(shí)間，提高移植器官在宿主體內(nèi)的存活率，還可以減輕缺血再灌注損傷，它可以替代傳統(tǒng)的UW液應(yīng)用于包括肝臟、腎臟、胰腺、心臟、等重要臟器的移植。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)還在于采用了第三代的中分子量、低取代級(jí)的羥乙基淀粉(平均分子量為200KD，取代級(jí)為0.5MS)，與高分子量(450～480KD)羥乙基淀粉相比，其對(duì)凝血功能的影響較小；與低分子量(70～130KD)羥乙基淀粉相比，其清除快、體內(nèi)蓄積少，有防堵毛細(xì)血管滲漏作用。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1器官保存液的制備(以配制1000ml為例)原材料的準(zhǔn)備羥乙基淀粉65g；乳糖酸鉀41.2g；MgSO4·7H2O 1.25g；腺苷1.79g；別嘌呤醇0.146g；KH2PO43.5g；蔗糖10.26g；谷胱甘肽1.02g；鹽酸地爾硫卓20mg；5mol/L的NaOH溶液3ml；足量的KOH和雙蒸水。
其中羥乙基淀粉的分子量為200KD，取代級(jí)為0.5MS。
1500ml的容器一個(gè)，量杯3個(gè)，玻璃攪拌棒1根。
制備過(guò)程具體步驟如下環(huán)境溫度為20～25℃實(shí)施。首先用去離子水配制5mol/L的NaOH溶液3ml備用；配制5mol/L的KOH溶液20ml備用；取5mol/L的KOH溶液5ml，并將0.146g的別嘌呤醇溶解于其中備用；配置中先將800ml雙蒸水加入＞1000ml的容器中，再加入41.2g乳糖酸鉀攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；并在攪拌中依次加?.25g MgSO4·7H2O、備用的3ml NaOH溶液、備用的15ml KOH溶液；繼續(xù)攪拌5分鐘；然后加入1.79g腺苷，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?，加?ml溶有別嘌呤醇的KOH溶液，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?.5g KH2PO4，攪拌至顏色變?yōu)榍逦患尤?0.26g蔗糖，攪拌至顏色變?yōu)榍逦患尤?.02g谷胱甘肽，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?0mg鹽酸地爾硫卓，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?5g羥乙基淀粉，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；最后用KOH混合物的pH值調(diào)至7.4，繼續(xù)加雙蒸水至1000ml攪拌均勻，形成器官保存液。所得1000ml保存液先經(jīng)0.45μm無(wú)菌濾膜濾除不溶性雜質(zhì)，再用0.45μm和0.22μm無(wú)菌濾膜疊加后過(guò)濾，在0℃～8℃保存。
實(shí)施例2器官保存液在肝移植手術(shù)中的應(yīng)用受試對(duì)象家豬將家豬分成A、B、C、D、E、F六組，每組n＝12，其中供體n＝6，受體n＝6；A組供體術(shù)后移植肝用UW液冷保存12h后移植到受體；B組供體術(shù)后移植肝用實(shí)施例1提供的器官保存液(下稱(chēng)“本器官保存液”)冷保存12h后移植到受體；C組供體術(shù)后移植肝用UW液冷保存24h后移植到受體；D組供體術(shù)后移植肝用本器官保存液冷保存24h后移植到受體；E組供體術(shù)后移植肝用UW液冷保存36h后移植到受體；F組供體術(shù)后移植肝用本器官保存液冷保存36h后移植到受體。
實(shí)施過(guò)程供體手術(shù)術(shù)前禁食12小時(shí)，在全身麻醉下采用經(jīng)典原位肝移植的手術(shù)方式，術(shù)后予靜脈補(bǔ)液、輸血、抗排斥、抗感染等治療，兩天后自行進(jìn)食。手術(shù)時(shí)，先以氯胺酮誘導(dǎo)，氣管插管，全身麻醉后，取腹部正中劍突至恥骨聯(lián)合切口，切開(kāi)腹壁后推開(kāi)腸道，暴露后腹膜，于腹主動(dòng)脈下段前方切開(kāi)后腹膜，游離主動(dòng)脈下段和其右側(cè)下腔靜脈下段，并預(yù)置7號(hào)線(xiàn)。解剖第一肝門(mén)，于十二指腸上緣剪斷膽總管，游離肝動(dòng)脈至腹腔干、腹主動(dòng)脈，游離門(mén)靜脈主干，剪斷肝周韌帶，游離肝上、下腔靜脈，予結(jié)扎腹主動(dòng)脈下段遠(yuǎn)心端，向近心端插入預(yù)制的18號(hào)氣囊導(dǎo)尿管，注水10ml后結(jié)扎近心端，開(kāi)始分別灌注HCA液500ml和UW液1000ml或HCA液500ml和本器官保存液1000ml，結(jié)扎門(mén)靜脈近腸側(cè)，向近肝側(cè)插入18號(hào)腔靜脈管，結(jié)扎近肝端，開(kāi)始分別灌注HCA液500ml和UW液或?qū)嵤├?的器官保存液1000ml，同時(shí)剪斷肝上、下腔靜脈開(kāi)放流出道，再剪斷門(mén)靜脈和腹主動(dòng)脈上段，取出供肝并稍作修剪。
保存將修剪后的肝臟按照不同的組分別放入0～4℃UW液或本器官保存液中保存?zhèn)溆谩?br> 受體手術(shù)術(shù)前禁食12小時(shí)，在全身麻醉下采用經(jīng)典原位肝移植的手術(shù)方式，術(shù)后予靜脈補(bǔ)液、輸血、抗排斥、抗感染等治療，兩天后自行進(jìn)食。手術(shù)時(shí)，先以氯胺酮誘導(dǎo)，氣管插管，全身麻醉后，取腹部正中劍突至恥骨聯(lián)合切口，依次離斷肝周?chē)g帶。再解剖第一肝門(mén)，解剖膽總管全長(zhǎng)，在左、右肝管匯合處離斷肝管。確認(rèn)肝動(dòng)脈，直視其至左、右半肝的兩分支，分別予以縫扎，輕輕牽開(kāi)肝動(dòng)脈并顯露門(mén)靜脈，將門(mén)靜脈游離，繼而游離肝上、下腔靜脈，在肝門(mén)高位將門(mén)靜脈剪斷，無(wú)肝期開(kāi)始，再分別剪斷肝上、下腔靜脈。首先用4-0Prolene縫線(xiàn)連續(xù)縫合肝上下腔靜脈，再以5-0Prolene縫線(xiàn)連續(xù)縫合門(mén)靜脈，依次開(kāi)放門(mén)靜脈和肝上下腔靜脈，結(jié)束無(wú)肝期，然后以4-0Prolene縫線(xiàn)連續(xù)縫合肝下下腔靜脈，再用7-0Prolene縫線(xiàn)行肝動(dòng)脈的端端吻合，最后將供肝膽總管直接與受體膽總管端一端吻合，放或不放T管，先連續(xù)縫合后壁，再間斷縫合前壁，切除膽囊。嚴(yán)密止血后放引流管關(guān)腹。
肝移植后受體生存情況A組分別存活38d(死于肺部感染)、67d(死于腹腔感染)、87d(死于膽漏)和3頭＞180d。
B組分別存活43d(死于膽道并發(fā)癥)、62d(死于肺部感染)、70d(死因不明)和3頭＞180d。
結(jié)果兩組生存時(shí)間無(wú)顯著性差異。
C組分別存活18d(死于腹腔感染)、35d(死于膽漏)、46d(死因不明)和3頭＞180d。
D組分別存活33d(死于膽漏)、51d(死于嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良)、79d(死于頑固性腹水)、85d(死于膽道感染)和2頭＞180d。
結(jié)果兩組生存時(shí)間無(wú)顯著性差異。
E組分別存活31d(死于肺部感染)、38d(死于反復(fù)腹水)、51d(死于腹腔感染)和3頭＞180d。
F組分別存活26d(死于膽漏)、37d(死因不明)、55d(死于嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良)、83d(死于肺部感染)和2頭＞180d。
結(jié)果兩組生存時(shí)間無(wú)顯著性差異。
實(shí)施例3對(duì)實(shí)施例2所述各組受體肝移植手術(shù)后跟蹤檢測(cè)豬的肝功能，結(jié)果參見(jiàn)表1～表6。
表1 A細(xì)豬肝功能

表2 B組豬肝功能

結(jié)論A、B組各時(shí)間點(diǎn)肝功能無(wú)顯著性差異。
表3 C組豬肝功能

表4 D組豬肝功能

結(jié)論C、D組各時(shí)間點(diǎn)肝功能無(wú)顯著性差異。
表5 E組豬肝功能

表6 F組豬肝功能

結(jié)論E、F組各時(shí)間點(diǎn)肝功能無(wú)顯著性差異。
實(shí)驗(yàn)證明，本器官保存液和UW液相比，在保存12小時(shí)、24小時(shí)、36小時(shí)時(shí)間段上，兩組豬在生存時(shí)間、肝功能和病理改變上，均沒(méi)有顯著性差異，提示本發(fā)明中的器官保存液在肝臟的灌注和保存上完全可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)的UW液。
實(shí)施例4本器官保存液與UW液在肝臟移植肝灌注損傷對(duì)比試驗(yàn)受試對(duì)象家豬實(shí)驗(yàn)分組UW組n＝6 移植肝冷保存2h；本器官保存液組n＝6移植肝冷保存2h。
(移植肝冷保存前期處理采用實(shí)施例2的供體手術(shù)實(shí)現(xiàn))檢測(cè)指標(biāo)高效液相色譜法測(cè)定肝組織中三磷酸腺苷含量、肝細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度(保存2小時(shí))，檢測(cè)結(jié)果如表7。
表7 移植肝的三磷酸腺苷ATP含量、能量負(fù)荷EC、肝細(xì)胞內(nèi)游離鈣Ca2+濃度

肝細(xì)胞功能的維持必須消耗ATP，細(xì)胞內(nèi)ATP的變化可以反映肝細(xì)胞的代謝活力。能量負(fù)荷(EC)＝(ATP+0.5ADP)/(ATP+ADP+AMP)，EC作為評(píng)價(jià)肝能量代謝的指標(biāo)。UW組與本器官保存液組肝細(xì)胞的ATP檢測(cè)值及EC值進(jìn)行比較，本器官保存液組顯著較UW組高。UW組與本器官保存液組肝細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度進(jìn)行比較，本器官保存液組明顯低，具有顯著性差異(P＜0.01)。
供肝在灌注保存時(shí)處于缺血缺氧狀態(tài)，ATP生成主要依靠糖酵解，但生成量少，同時(shí)移植物在不斷消耗ATP，因此隨著保存時(shí)間延長(zhǎng)，ATP含量越來(lái)越低。
本實(shí)驗(yàn)用測(cè)定供肝的能量代謝情況，結(jié)果本器官保存液組肝細(xì)胞的ATP及EC檢測(cè)值顯著較UW組高，提示能降低供肝灌注保存中肝細(xì)胞的Ca2+濃度，減輕Ca2+超載，具有顯著性地減輕低溫灌洗保存下肝細(xì)胞之ATP及EC的消耗，對(duì)低溫保存的肝臟及肝細(xì)胞具有良好的保護(hù)作用從而增加移植肝的成活率。
實(shí)驗(yàn)證明，本器官保存液和UW液相比，由于本器官保存液使用鈣通道阻滯劑鹽酸地爾硫卓可使細(xì)胞內(nèi)的游離鈣離子濃度顯著下降，減輕肝細(xì)胞損傷，可彌補(bǔ)傳統(tǒng)UW液的不足。
上述各實(shí)施例通過(guò)例舉的一個(gè)具體配比實(shí)例，并以此制備的器官保存液在家豬的肝移植過(guò)程中與UW液進(jìn)行對(duì)比，不是對(duì)本發(fā)明的一種限制，具體實(shí)施時(shí)，所述的器官保存液可以按照權(quán)利要求涉及的配比范圍和制備方法進(jìn)行配制，所述的器官保存液可以替代UW液應(yīng)用于包括肝臟、腎臟、胰腺、心臟等在內(nèi)的多種重要臟器移植手術(shù)中的臟器保藏。
權(quán)利要求
1.一種器官保存液，其特征在于，在1000ml器官保存液中含有5mol/L的NaOH溶液3ml以及羥乙基淀粉 58.5～71.5g；乳糖酸鉀 37.08～45.32g；MgSO47H2O 1.12～1.38g；腺苷 1.61～1.97g；別嘌呤醇0.13～0.16g；KH2PO43.15～3.85g；蔗糖9.23～11.29g； 谷胱甘肽 0.92～1.12g；鹽酸地爾硫卓20mg； KOH 適量；雙蒸水 適量；保存液的pH值為7.3～7.5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的器官保存液，其特征在于所述的羥乙基淀粉的分子量為200KD，取代級(jí)為0.5MS。
3.如權(quán)利要求1或2所述的一種器官保存液的制備方法，其特征在于按照1000ml配制量的具體步驟如下(a)用去離子水配制5mol/L的NaOH溶液3ml備用；配制5mol/L的KOH溶液20ml備用；取5mol/L的KOH溶液5ml，并將0.13～0.16g的別嘌呤醇溶解于其中備用；(b)將800ml雙蒸水加入＞1000ml的容器中，再加入37.08～45.32g乳糖酸鉀攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；并在攪拌中依次加?.12～1.38gMgSO47H2O、備用的3ml NaOH溶液、備用的15ml KOH溶液，繼續(xù)攪拌；(c)加入1.61～1.97g腺苷，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?，加?ml溶有別嘌呤醇的KOH溶液，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?.15～3.85g KH2PO4，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?.23～11.29g蔗糖，攪拌至顏色變?yōu)榍逦患尤?.92～1.12g谷胱甘肽，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?0mg鹽酸地爾硫卓，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?；加?8.5～71.5g羥乙基淀粉，攪拌至顏色變?yōu)榍逦?d)用KOH混合物的pH值調(diào)至7.3～7.5，繼續(xù)加雙蒸水，至1000ml攪拌均勻，形成器官保存液；(e)所得1000ml保存液，先經(jīng)0.45μm無(wú)菌濾膜濾除不溶性雜質(zhì)，再用0.45μm和0.22μm無(wú)菌濾膜疊加過(guò)濾后，濾液在0℃～8℃無(wú)菌保存。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種器官保存液的制備方法，其特征在于配制的環(huán)境溫度為20～25℃。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種器官保存液及其制備方法。在1000ml器官保存液中含有5mol/L的NaOH溶液3ml及羥乙基淀粉58.5～71.5g；乳糖酸鉀37.08～45.32g；MgSO
文檔編號(hào)A01N1/02GK101019529SQ200710021020
公開(kāi)日2007年8月22日 申請(qǐng)日期2007年3月22日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月22日
發(fā)明者孫倍成, 陸森, 王尤山, 羅望, 岳明 申請(qǐng)人:南京中脈生物醫(yī)藥有限公司