專利名稱：楊樹誘變育種新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明楊樹誘變育種新方法涉及一種對(duì)楊樹胚性細(xì)胞的輻射誘導(dǎo)突變法，尤其是經(jīng)γ射線誘導(dǎo)突變從而經(jīng)培育得到大量變異植株的新方法。

背景技術(shù)：
樹木育種研究發(fā)展表明，傳統(tǒng)的方法存在年限長(zhǎng)，育種進(jìn)展慢等缺點(diǎn)，應(yīng)用高新技術(shù)結(jié)合常規(guī)育種方式是當(dāng)前樹木育種的主要方向。
利用理化因子誘變，選育優(yōu)良突變體，培育成品種，在品種改良上被廣泛利用。其中最主要是用X-射線、γ-射線輻射種子或其他繁殖器官，但經(jīng)輻照后的突變頻率極低(10-8-10-5)，因此要求被處理的個(gè)體(種子、芽塊或莖等)的數(shù)量必須大。就楊樹而言，如果用它的種子、枝條、單芽作為處理材料要達(dá)到一定的數(shù)量是難以實(shí)現(xiàn)的。
而胚性細(xì)胞是具有全能性表達(dá)的能力一種細(xì)胞，且因其數(shù)量龐大，以其作為單位進(jìn)行誘變處理，則可獲得數(shù)量多，種類多的突變植株。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明楊樹誘變育種新方法的目的在于提供一種可獲得大量楊樹突變植株的新方法。
為達(dá)上述目的，本發(fā)明提供一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對(duì)象的選擇，輻射時(shí)機(jī)的選擇和輻射處理，其中，所述的誘變對(duì)象為楊樹愈傷組織胚性細(xì)胞，所述的輻射時(shí)機(jī)為楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)間段，所述的輻射處理總劑量為20～50Gy，劑量率為70～370Gy/H。
獲得楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)期的步驟為 第一步選取楊樹組培苗莖段切成1～2mm作為外植體； 第二步將莖段接種在脫分化培養(yǎng)基MS+2，4-D 0-1.0mg/ml+KT0-0.5mg/ml+NAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上脫分化72～120小時(shí)； 第三步第二步所得愈傷組織轉(zhuǎn)接至再分化培養(yǎng)基MS+6-BA0-1.0mg/ml+KT 0-0.5mg/ml+IAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上再分化72～96小時(shí)，達(dá)到楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)間段。
利用楊樹誘變育種新方法的用途，獲得優(yōu)良的楊樹變異植株。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是 利用對(duì)胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)期的輻射誘變處理，克服了楊樹誘變育種基數(shù)少，篩選生活周期長(zhǎng)的劣勢(shì)，經(jīng)篩選、培育可獲得優(yōu)良變異植株。

具體實(shí)施例方式 實(shí)施例1 一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對(duì)象的選擇，輻射時(shí)機(jī)的選擇和輻射處理，所述的誘變對(duì)象為楊樹愈傷組織胚性細(xì)胞，所述的輻射時(shí)機(jī)為楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)期。
獲得楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)期的步驟為 第一步選擇組培日齡40天，苗高4～5cm的歐美楊(黑楊派)組培苗，將其莖段切成1mm作為外植體； 第二步將莖段接種在脫分化培養(yǎng)基MS+2，4D 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂4g/L上脫分化120小時(shí)； 第三步第二步所得愈傷組織轉(zhuǎn)接至再分化培養(yǎng)基MS+6-BA0.2mg/L+KT 0.2mg/L+IAA 0.05+蔗糖30g/L+瓊脂4g/L上再分化72小時(shí)，此時(shí)即為胚性細(xì)胞發(fā)生最多的時(shí)期。
將獲得的大量歐美楊(黑楊派)胚性細(xì)胞置于總劑量為50Gy，劑量率為300Gy/H的γ射線下輻射，之后在溫度25℃±2℃，光照時(shí)間為每天14h的條件下無(wú)菌培養(yǎng)得到單株，經(jīng)過觀察、篩選得到優(yōu)良突變體。
實(shí)施例2 一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對(duì)象的選擇，輻射時(shí)機(jī)的選擇和輻射處理，所述的誘變對(duì)象為楊樹愈傷組織胚性細(xì)胞，所述的輻射時(shí)機(jī)為楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)期。
獲得楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)期的步驟為 第一步選取白楊派組培苗莖段切成1～2mm作為外植體； 第二步將莖段接種在脫分化培養(yǎng)基MS+2，4-D 0-1.0mg/ml+KT0-0.5mg/ml+NAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上脫分化72～120小時(shí)； 第三步第二步所得愈傷組織轉(zhuǎn)接至再分化培養(yǎng)基MS+6-BA0-1.0mg/ml+KT 0-0.5mg/ml+IAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上再分化72～96小時(shí)，達(dá)到楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)間段。
將獲得的大量白楊派胚性細(xì)胞置于總劑量為30Gy，劑量率為145Gy/H的γ射線下輻射，之后在溫度25℃±2℃，光照時(shí)間為每天14h的條件下無(wú)菌培養(yǎng)得到單株，經(jīng)過觀察、篩選得到優(yōu)良突變體。
權(quán)利要求
1、一種楊樹誘變育種新方法，包括誘變對(duì)象的選擇，輻射時(shí)機(jī)的選擇和輻射處理，其特征在于所述的誘變對(duì)象為楊樹愈傷組織胚性細(xì)胞，所述的輻射時(shí)機(jī)為楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)間段，所述的輻射處理總劑量為20～50Gy，劑量率為70～370Gy/H。
2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的楊樹誘變育種新方法，其特征在于獲得楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)期的步驟為
第一步選取楊樹組培苗莖段切成1～2mm作為外植體；
第二步將莖段接種在脫分化培養(yǎng)基MS+2，4-D 0-1.0mg/ml+KT0-0.5mg/ml+NAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上脫分化72～120小時(shí)；
第三步第二步所得愈傷組織轉(zhuǎn)接至再分化培養(yǎng)基MS+6-BA0-1.0mg/ml+KT 0-0.5mg/ml+IAA 0-1.0mg/ml+ZT 0-0.5mg/ml上再分化72～96小時(shí)，達(dá)到楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)間段。
3、利用權(quán)利要求1或2所述的楊樹誘變育種新方法的用途，獲得優(yōu)良的楊樹變異植株。
全文摘要
一種楊樹誘變育種新方法，為一種經(jīng)γ射線誘導(dǎo)突變從而經(jīng)培育得到大量變異植株的新方法。包括誘變對(duì)象的選擇，輻射時(shí)機(jī)的選擇和輻射處理，其中，所述的誘變對(duì)象為楊樹愈傷組織胚性細(xì)胞，所述的輻射時(shí)機(jī)為楊樹胚性細(xì)胞大量發(fā)生時(shí)間段，所述的輻射處理總劑量為20～50Gy，劑量率為70～370Gy/H。
文檔編號(hào)A01H3/00GK1957678SQ20061011868
公開日2007年5月9日 申請(qǐng)日期2006年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月23日
發(fā)明者蘇敏, 宋學(xué)孟, 董舉文, 張艷, 龐瑞華, 許雄山, 章振華, 王凌健, 張承妹 申請(qǐng)人:上海光兆植物速生技術(shù)有限公司