專利名稱：優(yōu)種板栗組培快速繁植方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及果樹(shù)培植技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種優(yōu)種板栗組培快速繁植方法。
背景技術(shù)：
多年以來(lái)，板栗選種、育種工作滯后，加之區(qū)域化種植制度不嚴(yán)，使板栗產(chǎn)業(yè)存在著品種混雜，優(yōu)種種植率不高，產(chǎn)量低、結(jié)果晚、產(chǎn)量不穩(wěn)、一等果率低等問(wèn)題，非常需要利用高新技術(shù)對(duì)板栗優(yōu)種進(jìn)行快速擴(kuò)繁，以改良現(xiàn)有板栗品種，提高板栗的產(chǎn)量和質(zhì)量。目前，國(guó)內(nèi)板栗優(yōu)種擴(kuò)繁主要是采用嫁接的方法，由于此種方法存在著品種退化、優(yōu)種接穗少、成本高等弊端，因此限制了板栗優(yōu)種的推廣速度。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的旨在使生物組培技術(shù)與現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)缽育苗技術(shù)進(jìn)行有機(jī)結(jié)合，以打破只有靠接穗嫁接擴(kuò)繁優(yōu)種的方法，而提供一種可周年化生產(chǎn)板栗優(yōu)種苗木，且能較好的保持板栗的優(yōu)良種性，成本低，推廣速度快的優(yōu)種板栗組培快速繁植方法。
實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是該優(yōu)種板栗組培快速繁植方法其步驟如下①外植體的選擇選擇生長(zhǎng)活性較強(qiáng)的一年生板栗的莖段作為外植體；②啟動(dòng)培養(yǎng)基的選擇根據(jù)板栗樹(shù)生長(zhǎng)養(yǎng)分需求特點(diǎn)，確定適合板栗組培苗生長(zhǎng)的啟動(dòng)培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+BA0.3mg/L+IAA0.02mg/L+NAA0.02mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+蔗糖30g/L，然后滅菌；③外植體消毒先將外植體沖洗干凈后，選擇升汞和酒精作為消毒介質(zhì)，將外植體在升汞中處理3-5分鐘，然后用酒精處理10-15秒，使外植體消毒效果達(dá)到最好；④接種將消毒過(guò)后的外植體在無(wú)菌操作臺(tái)上按照無(wú)菌操作的各項(xiàng)規(guī)程進(jìn)行操作并接種于啟動(dòng)培養(yǎng)基上；⑤繼代與生根培養(yǎng)將接完種的培養(yǎng)瓶移到培養(yǎng)室內(nèi)，每天光照10小時(shí)，溫度設(shè)定在25±2攝氏度，培養(yǎng)6-8周，當(dāng)外植體有明顯的形態(tài)變化，開(kāi)始芽生長(zhǎng)時(shí)，制備分化培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)，從繼代苗中選育出生長(zhǎng)健壯的瓶苗接種到壯苗生根培養(yǎng)基上，使之發(fā)育出根芽齊全的組培苗，分化培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+BA0.5mg/L+IAA0.02mg/L+NAA0.02mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+蔗糖30g/L，壯苗生根培養(yǎng)基配方為1/3MS培養(yǎng)基3+NAA0.03mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+ABT0.01mg/L+蔗糖30g/L；⑥生根苗煉苗當(dāng)生根苗生長(zhǎng)5-7周后，移至溫室內(nèi)按照煉苗技術(shù)規(guī)程進(jìn)行煉苗1-2個(gè)月，然后將煉好的板栗苗移栽到盛有富含板栗苗生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)的多孔大營(yíng)養(yǎng)杯中，按照常規(guī)的方法對(duì)移栽的板栗苗進(jìn)行正常的施肥、灌水及病蟲(chóng)害管理。
本方案所述的該優(yōu)種板栗組培快速繁植方法，從板栗生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)成分入手，通過(guò)在培養(yǎng)基中添加適量的鐵離子和鋅離子，調(diào)整培養(yǎng)基養(yǎng)分含量，篩選最適宜板栗生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，在適宜時(shí)期，選擇適當(dāng)外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)，當(dāng)組培出的板栗苗木長(zhǎng)至10厘米后，通過(guò)再次調(diào)整培養(yǎng)基配方后轉(zhuǎn)接使板栗組培苗生根，組培苗生根1個(gè)月后，將其移至溫室中進(jìn)行煉苗，煉苗完成后將苗木栽植到裝有營(yíng)養(yǎng)豐富基質(zhì)的大營(yíng)養(yǎng)杯中，然后將營(yíng)養(yǎng)杯苗木進(jìn)行定植移栽。該方法通過(guò)將生物組培技術(shù)與現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)杯育苗技術(shù)有機(jī)的結(jié)合，解決了有種苗木擴(kuò)繁緩慢和優(yōu)良種性變異快的難題，實(shí)現(xiàn)了板栗優(yōu)種苗木的周年化擴(kuò)繁，苗木種性純度高、質(zhì)量好，抗逆性強(qiáng)，易成活。
具體實(shí)施例方式以下結(jié)合實(shí)施例詳述本發(fā)明。
本實(shí)施例所述的優(yōu)種板栗組培快速繁植方法，適合于優(yōu)種板栗工廠化育苗。該方法分為兩個(gè)階段第一階段是苗木組培階段，第二階段為營(yíng)養(yǎng)杯育苗階段，其中苗木組培階段是本發(fā)明的關(guān)鍵技術(shù)。具體操作有以下幾個(gè)步驟①外植體的選擇。具體方法是早春從優(yōu)種板栗樹(shù)上選擇一年生板栗的莖段作為外植體，原因是一年生板栗莖段生長(zhǎng)活性較強(qiáng)。
②啟動(dòng)培養(yǎng)基的選擇。具體做法是根據(jù)板栗樹(shù)生長(zhǎng)養(yǎng)分需求特點(diǎn)，以MS為主培養(yǎng)基。通過(guò)多因子試驗(yàn)調(diào)整BA、IAA、NAA激素含量并適當(dāng)添加含有鐵離子的無(wú)機(jī)鹽、微量元素和抗壞血酸等成分，克服由于板栗中單寧含量高，易褐化的困難，確定適合板栗組培苗生長(zhǎng)的啟動(dòng)培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+BA0.3mg/L+IAA0.02mg/L+NAA0.02mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+蔗糖30g/L，然后滅菌。
③外植體消毒。先將外植體沖洗干凈后(流水沖洗2-3小時(shí))，選擇升汞和酒精作為消毒介質(zhì)，將外植體在升汞中處理3-5分鐘，然后用酒精處理10-15秒，使外植體消毒效果達(dá)到最好。
④接種。將消毒過(guò)后的外植體在無(wú)菌操作臺(tái)上按照無(wú)菌操作的各項(xiàng)規(guī)程進(jìn)行操作并接種于啟動(dòng)培養(yǎng)基上。
⑤繼代與生根培養(yǎng)。將接完種的培養(yǎng)瓶移到培養(yǎng)室內(nèi)，每天光照10小時(shí)，溫度設(shè)定在25±2攝氏度培養(yǎng)6-8周，當(dāng)外植體有明顯的形態(tài)變化，開(kāi)始芽生長(zhǎng)時(shí)，制備分化培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)，從繼代苗中選育出生長(zhǎng)健壯的瓶苗接種到壯苗生根培養(yǎng)基上，使之發(fā)育出根芽齊全的組培苗。分化培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+BA0.5mg/L+IAA0.02mg/L+NAA0.02mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+蔗糖30g/L；壯苗生根培養(yǎng)基配方為1/3MS培養(yǎng)基3+NAA0.03mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+ABT0.01mg/L+蔗糖30g/L。
⑥生根苗煉苗。當(dāng)生根苗生長(zhǎng)5-7周后，移至溫室內(nèi)按照煉苗技術(shù)規(guī)程進(jìn)行煉苗1-2個(gè)月，然后將煉好的板栗苗移栽到盛有富含板栗苗生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)的多孔大營(yíng)養(yǎng)杯中，按照常規(guī)的方法對(duì)移栽的板栗苗進(jìn)行正常的施肥、灌水及病蟲(chóng)害管理。
權(quán)利要求
1.一種優(yōu)種板栗組培快速繁植方法，該方法步驟如下①外植體的選擇選擇生長(zhǎng)活性較強(qiáng)的一年生板栗的莖段作為外植體；②啟動(dòng)培養(yǎng)基的選擇根據(jù)板栗樹(shù)生長(zhǎng)養(yǎng)分需求特點(diǎn)，確定適合板栗組培苗生長(zhǎng)的啟動(dòng)培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+BA0.3mg/L+IAA0.02mg/L+NAA0.02mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+蔗糖30g/L，然后滅菌；③外植體消毒先將外植體沖洗干凈后，選擇升汞和酒精作為消毒介質(zhì)，將外植體在升汞中處理3-5分鐘，然后用酒精處理10-15秒，使外植體消毒效果達(dá)到最好；④接種將消毒過(guò)后的外植體在無(wú)菌操作臺(tái)上按照無(wú)菌操作的各項(xiàng)規(guī)程進(jìn)行操作并接種于啟動(dòng)培養(yǎng)基上；⑤繼代與生根培養(yǎng)將接完種的培養(yǎng)瓶移到培養(yǎng)室內(nèi)，每天光照10小時(shí)，溫度設(shè)定在25±2攝氏度，培養(yǎng)6-8周，當(dāng)外植體有明顯的形態(tài)變化，開(kāi)始芽生長(zhǎng)時(shí)，制備分化培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)，從繼代苗中選育出生長(zhǎng)健壯的瓶苗接種到壯苗生根培養(yǎng)基上，使之發(fā)育出根芽齊全的組培苗，分化培養(yǎng)基配方為MS培養(yǎng)基+BA0.5mg/L+IAA0.02mg/L+NAA0.02mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+蔗糖30g/L，壯苗生根培養(yǎng)基配方為1/3MS培養(yǎng)基3+NAA0.03mg/L+抗壞血酸0.2mg/L+維生素C0.05mg+活性炭0.2mg/L+ABT0.01mg/L+蔗糖30g/L；⑥生根苗煉苗當(dāng)生根苗生長(zhǎng)5-7周后，移至溫室內(nèi)按照煉苗技術(shù)規(guī)程進(jìn)行煉苗1-2個(gè)月，然后將煉好的板栗苗移栽到盛有富含板栗苗生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)的多孔大營(yíng)養(yǎng)杯中，按照常規(guī)的方法對(duì)移栽的板栗苗進(jìn)行正常的施肥、灌水及病蟲(chóng)害管理。
全文摘要
本發(fā)明涉及果樹(shù)培植技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種優(yōu)種板栗組培快速繁植方法。該方法從板栗生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)成分入手，通過(guò)在培養(yǎng)基中添加適量的鐵離子和鋅離子，調(diào)整培養(yǎng)基養(yǎng)分含量，篩選最適宜板栗生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，在適宜時(shí)期，選擇適當(dāng)外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)，當(dāng)組培出的板栗苗木開(kāi)始芽生長(zhǎng)時(shí)，通過(guò)再次調(diào)整培養(yǎng)基配方后轉(zhuǎn)接使板栗組培苗生根，組培苗生根后，將其移至溫室中進(jìn)行煉苗，煉苗完成后將苗木栽植到裝有營(yíng)養(yǎng)豐富基質(zhì)的大營(yíng)養(yǎng)杯中，然后將營(yíng)養(yǎng)杯苗木進(jìn)行定植移栽。該方法將生物組培技術(shù)與現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)杯育苗技術(shù)有機(jī)的結(jié)合，解決了優(yōu)種苗木擴(kuò)繁緩慢和優(yōu)良種性變異快的難題，實(shí)現(xiàn)了板栗優(yōu)種苗木的周年化擴(kuò)繁，苗木種性純度高、質(zhì)量好，抗逆性強(qiáng)，易成活。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1633842SQ20041009240
公開(kāi)日2005年7月6日 申請(qǐng)日期2004年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月10日
發(fā)明者孫立新, 楊軍, 李強(qiáng), 王鳳春, 吳桂軍 申請(qǐng)人:孫立新