專利名稱：補血草工廠化試管快速繁殖方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及植物花卉——補血草的組培種苗繁殖方法，屬于植物種苗的組織培養(yǎng)技術(shù)領域。
背景技術(shù)：
補血草，俗稱勿忘我，是藍雪科(或磯松科)補血草屬多年生或兩年生草本植物，是著名的觀賞花卉。近年來，隨著我國經(jīng)濟的發(fā)展和人民生活水平的提高，補血草已成為我國花卉市場中的重要切花種類。然而市場上供應的補血草組培種苗仍存在著下列問題一是生根率低，直接影響移栽成活率，不僅會增大種植成本，而且會錯過最佳種植良機，給種植戶帶來較大經(jīng)濟損失。二是組培種苗大多有叢生苗，在移栽大田種植時，會因叢生苗與主苗爭搶營養(yǎng)成分而導致植株生長高矮不齊、花穗不飽滿等質(zhì)量問題。因此，有必要對現(xiàn)有技術(shù)加以改進。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)之不足，提供一種生根率高，無叢生苗的優(yōu)質(zhì)補血草工廠化試管快速繁殖方法。
本發(fā)明所述補血草種苗包括外植體培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和過渡培養(yǎng)，其中外植體培養(yǎng)選取從基部抽出的8-12cm花芽，去除其頂部的花穗，切成0.8-1.2cm的含腋芽莖段，常規(guī)滅菌后，將莖段接種在下列外植體培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.3～1.5mg/ml萘乙酸(NAA) 0～0.3mg/ml蔗糖30000mg/L瓊脂粉 7000mg/LpH值5.4-5.8
培養(yǎng)4-6周，控制溫度15-28℃，光照強度800-1000勒克斯，每天光照12-15小時；繼代培養(yǎng)篩選經(jīng)外植體培養(yǎng)出的健壯芽，轉(zhuǎn)接在下列繼代培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.2～0.6mg/ml培養(yǎng)3-4周，使之長成外部葉均包含腋芽的芽；過渡培養(yǎng)將生根苗移栽至下列栽培土中腐殖土∶紅土＝1∶1，控制遮蔭度50-70％，注意通風保濕，3-4周后，即可移栽大田；其特征在于切芽在繼代轉(zhuǎn)接時，選擇葉內(nèi)包裹的腋芽，在腋芽基部水平切芽，切下的芽的切口平整、均勻，不帶愈傷組織，且切下的芽只有一對嫩葉包裹著生長點，切下的芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，其余部分轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)；生根培養(yǎng)將切下的芽轉(zhuǎn)接在下列生根培養(yǎng)基中50％的MS基本培養(yǎng)液α-萘乙酸(NAA)0.1～03mg/ml蔗糖 20000mg/L瓊脂粉5000mg/L水解酪蛋白(CH)100mg/LpH值 5.4-5.8在室溫及無光照條件下，培養(yǎng)4-5天，待芽切口周圍分化出根原基后，在強度為800-1000勒克斯的光照條件下，每天光照12-15小時，培養(yǎng)4-5天，待芽基部長滿4-5mm的放射狀根，芽上部長出4-6片葉后，進行移栽。
在研究補血草種苗組培繁殖的過程中，解決了以下技術(shù)難題1、切芽方法生根培養(yǎng)前的切芽，是決定組培苗能否生根的關鍵技術(shù)，切芽不準，即切芽過大、過小以及切芽方法不當都無法保證生根以及移栽成活率。發(fā)明人經(jīng)過多年的探索與試驗研究，終于得出了生根良好，成活率高，無叢生苗的切芽方法。
2、生根培養(yǎng)生根的好壞直接影響著種苗的成活及長勢，而生根培養(yǎng)又是決定能否生根的關健環(huán)節(jié)。采用現(xiàn)有技術(shù)中的溫度、光照等控制條件是很難保障幼芽生根的，尤其是溫度的控制相當嚴格，不適宜規(guī)?；a(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。發(fā)明人經(jīng)長期的努力，研究出一種無需特殊的溫度要求，只要在室溫下即可生根，生根率高達90-100％，且生根苗移栽后能100％成活。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有下列優(yōu)點和效果通過上述方案中的切芽方法可獲得易生根且成活率高的幼芽，再經(jīng)過無特殊溫度要求的上述生根培養(yǎng)，使幼芽生根快，生根率高，無叢生苗，生根苗移栽后成活率達100％，大田中植株長勢好，整齊，花穗大且飽滿，既能給種植戶帶來可觀的經(jīng)濟收益，又能完全滿足補血草鮮切花市場的需求，是一項具有推廣應用價值的技術(shù)。
具體實施例方式
下面通過具體實施例對本發(fā)明做進一步描述，但本發(fā)明的范圍不局限于此。
實施例11、外植體培養(yǎng)選取從基部抽出的8cm花芽，去除其頂部的花芽，切成0.8cm的含腋芽莖段，常規(guī)滅菌后，將莖段接種在下列外植體培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)1.5mg/ml萘乙酸(NAA) 0.3mg/ml蔗糖30000mg/L瓊脂粉 7000mg/LpH值5.8培養(yǎng)6周，控制溫度15℃，光照強度1000勒克斯，每天光照15小時；2、繼代培養(yǎng)篩選經(jīng)外植體培養(yǎng)出的健壯芽，轉(zhuǎn)接在下列繼代培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液
6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.6mg/ml培養(yǎng)4周，使之長成外部葉均包含腋芽的芽；3、切芽選擇葉內(nèi)包裹的腋芽，在腋芽基部水平切芽，切下的芽的切口平整、均勻，不帶愈傷組織，且切下的芽只有一對嫩葉包裹著生長點，切下的芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，其余部分轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)；4、生根培養(yǎng)將切下的芽轉(zhuǎn)接在下列生根培養(yǎng)基中50％的MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA) 0.3mg/ml蔗糖 20000mg/L瓊脂粉5000mg/L水解酪蛋白(CH)100mg/LpH值 5.8在室溫及無光照條件下，培養(yǎng)4-5天，待芽切口周圍分化出根原基后，在強度為1000勒克斯的光照條件下，每天光照15小時，培養(yǎng)4-5天，待芽基部長滿4-5mm的放射狀根，芽上部長出4-6片葉后，進行移栽；5、過渡培養(yǎng)將生根苗移栽至下列栽培土中腐殖土∶紅土＝1∶1，控制遮蔭度50-70％，注意通風保濕，3-4周后，即可移栽大田。
實施例21、外植體培養(yǎng)選取從基部抽出的12cm花芽，去除其頂部的花芽，切成1.2cm的含腋芽莖段，常規(guī)滅菌后，將莖段接種在下列外植體培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.3mg/ml蔗糖30000mg/L瓊脂粉 7000mg/LpH值5.4培養(yǎng)4周，控制溫度28℃，光照強度800勒克斯，每天光照12小時；2、繼代培養(yǎng)篩選經(jīng)外植體培養(yǎng)出的健壯芽，轉(zhuǎn)接在下列繼代培養(yǎng)基中
MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA)0.2mg/ml培養(yǎng)3周，使之長成外部葉均包含腋芽的芽；3、切芽選擇葉內(nèi)包裹的腋芽，在腋芽基部水平切芽，切下的芽的切口平整、均勻，不帶愈傷組織，且切下的芽只有一對嫩葉包裹著生長點，切下的芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，其余部分轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)；4、生根培養(yǎng)將切下的芽轉(zhuǎn)接在下列生根培養(yǎng)基中50％的MS基本培養(yǎng)液萘乙酸(NAA) 0.1mg/ml蔗糖20000mg/L瓊脂粉 5000mg/L水解酪蛋白(CH) 100mg/LpH值5.4在室溫及無光照條件下，培養(yǎng)4-5天，待芽切口周圍分化出根原基后，在強度為800勒克斯的光照條件下，每天光照12小時，培養(yǎng)4-5天，待芽基部長滿4-5mm的放射狀根，芽上部長出4-6片葉后，進行移栽；5、過渡培養(yǎng)將生根苗移栽至下列栽培土中腐殖土∶紅土＝1∶1，控制遮蔭度50-70％，注意通風保濕，3-4周后，即可移栽大田。
權(quán)利要求
1.一種補血草工廠化試管快速繁殖方法，包括外植體培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和過渡培養(yǎng)，其中外植體培養(yǎng)選取從基部抽出的8-12cm花芽，去除其頂部的花穗，切成0.8-1.2cm的含腋芽莖段，常規(guī)滅菌后，將莖段接種在下列外植體培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.3～1.5mg/ml萘乙酸(NAA) 0～0.3mg/ml蔗糖 30000mg/L瓊脂粉7000mg/LpH值 5.4-5.8培養(yǎng)4-6周，控制溫度15-28℃，光照強度800-1000勒克斯，每天光照12-15小時；繼代培養(yǎng)篩選經(jīng)外植體培養(yǎng)出的健壯芽，轉(zhuǎn)接在下列繼代培養(yǎng)基中MS基本培養(yǎng)液6-芐基氨基嘌呤(6-BA) 0.2～0.6mg/ml培養(yǎng)3-4周，使之長成外部葉均包含腋芽的芽；過渡培養(yǎng)將生根苗移栽至下列栽培土中腐殖土∶紅土＝1□1，控制遮蔭度50-70％，注意通風保濕，3-4周后，即可移栽大田；其特征在于切芽在繼代轉(zhuǎn)接時，選擇葉內(nèi)包裹的腋芽，在腋芽基部水平切芽，切下的芽的切口平整、均勻，不帶愈傷組織，且切下的芽只有一對嫩葉包裹著生長點，切下的芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，其余部分轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)；生根培養(yǎng)將切下的芽轉(zhuǎn)接在下列生根培養(yǎng)基中50％的MS基本培養(yǎng)液α-萘乙酸(NAA) 0.1～0 3mg/ml蔗糖 20000mg/L瓊脂粉 5000mg/L水解酪蛋白(CH)100mg/LpH值 5.4-5.8在室溫及無光照條件下，培養(yǎng)4-5天，待芽切口周圍分化出根原基后，在強度為800-1000勒克斯的光照條件下，每天光照12-15小時，培養(yǎng)4-5天，待芽基部長滿4-5mm的放射狀根，芽上部長出4-6片葉后，進行移栽。
全文摘要
本發(fā)明提供一種補血草工廠化試管快速繁殖方法，包括外植體培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和過渡培養(yǎng)，其特征在于在繼代轉(zhuǎn)接時，選擇葉內(nèi)包裹的腋芽，在腋芽基部水平切芽，將切下的芽轉(zhuǎn)接在生根培養(yǎng)基中，在室溫及無光照條件下，培養(yǎng)4－5天，待芽切口周圍分化出根原基后，每天光照12－15小時，培養(yǎng)4－5天，待芽基部長滿4－5mm的放射狀根，芽上部長出4－6片葉后，進行移栽。本發(fā)明能使幼芽生根快，生根率高，無叢生苗，生根苗移栽后成活率達100％，大田中植株長勢好，整齊，花穗大且飽滿，既能給種植戶帶來可觀的經(jīng)濟收益，又能完全滿足補血草鮮切花市場的需求，是一項具有推廣應用價值的技術(shù)。
文檔編號A01H4/00GK1666598SQ20041002201
公開日2005年9月14日 申請日期2004年3月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年3月11日
發(fā)明者易清元 申請人:云南省香料研究開發(fā)中心