專利名稱：芽孢桿菌d747菌株、應(yīng)用該菌株的植物病害防除劑或害蟲防除劑及其應(yīng)用這些防除劑的 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及芽孢桿菌(Bacillus)D747菌株及其相關(guān)應(yīng)用，具體地說，涉及含有將具有抑制植物病害發(fā)病的效果和害蟲防除效果的芽孢桿菌(Bacillus)D747菌株作為有效菌的植物病害防除劑和/或害蟲防除劑，及其應(yīng)用上述防除劑的防除方法。
背景技術(shù)：
作為植物病害和害蟲的防除方法有例如，利用輪作、太陽熱進(jìn)行耕種或進(jìn)行物理防除、利用化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行化學(xué)防除、應(yīng)用抗病害品種進(jìn)行防除、利用對(duì)弱毒性病毒或病原菌具有拮抗作用的微生物進(jìn)行生物防除。這當(dāng)中，化學(xué)農(nóng)藥，特別是有機(jī)合成殺菌劑的開發(fā)研究近年來發(fā)展異常迅猛，接二連三地開發(fā)出了具有較高效力、不同作用的多種藥劑，同時(shí)也進(jìn)一步開發(fā)出了多種施用方法。應(yīng)用上述藥劑的化學(xué)防除方法對(duì)植物病害防除和防除作業(yè)中節(jié)省勞動(dòng)力作出了很大貢獻(xiàn)，已被廣泛應(yīng)用。但是近年來，由于出現(xiàn)了所謂耐藥菌，出現(xiàn)了用化學(xué)防除方法防除效果低下的現(xiàn)象，一部分作物又出現(xiàn)了受病害困擾的問題。此外，隨著作物的指定產(chǎn)地化而不得己進(jìn)行連作的結(jié)果，在各地發(fā)生的用化學(xué)農(nóng)藥難以防除的土壤傳染性病害已成為十分嚴(yán)重的問題。此外，多次反復(fù)大量使用化學(xué)農(nóng)藥的方法，將自然界所不存在的化學(xué)物質(zhì)釋放到環(huán)境中，不用說對(duì)動(dòng)植物有直接毒性的藥劑，即使是不完全釋放的藥劑對(duì)環(huán)境造成的惡劣影響也是令人擔(dān)憂的。
鑒于上述，用化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)行病害防除，由于耐藥菌的出現(xiàn)使防除效果低下的可能性較高，這種情況下，研究開發(fā)新的殺菌劑已成為必要。此外，對(duì)用化學(xué)農(nóng)藥難以防除的病害的防除必須采取替代方法或與其他方法并用的方法。并且希望建立對(duì)環(huán)境安全性更高的防除技術(shù)。
近年來在上述背景之下，對(duì)偏重使用化學(xué)農(nóng)藥的防除方法進(jìn)行重新研究，提出了利用預(yù)計(jì)與化學(xué)農(nóng)藥相比對(duì)環(huán)境的安全性高的微生物的生物防除(所謂的生物農(nóng)藥)方法，其中的一部分已產(chǎn)業(yè)化。
關(guān)于植物病害的生物防除研究已嘗試?yán)萌醵拘缘牟《尽⒉≡娜醪≡曰蚍遣≡晕⑸?、拮抗微生物等。其中有許多有關(guān)利用拮抗微生物的研究實(shí)例，此外，在拮抗微生物中，雖然有很多利用芽孢桿菌屬進(jìn)行病害防除的研究，但未見到有廣譜病害防除的芽孢桿菌屬菌。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的課題涉及分離具有抑制多種植物病害的發(fā)病和/或害蟲防除效果的新菌株。
本發(fā)明進(jìn)一步提供含有上述菌株作為有效菌，可作為生物農(nóng)藥來有效利用的植物病害防除劑和/或害蟲防除劑。
本發(fā)明進(jìn)一步提供利用上述植物病害防除劑和/或害蟲防除劑的植物病害和/或害蟲的防除方法。
本發(fā)明人等從自然界分離出一種屬于芽孢桿菌屬的新菌株，發(fā)現(xiàn)該菌株對(duì)植物生長無不良影響，具有抑制多種植物病害發(fā)病的效果及害蟲防除效果，由此完成了本發(fā)明。
本發(fā)明涉及以下的菌株和植物病害防除劑和或害蟲防除劑，以及植物病害防除和/或害蟲防除方法。
(1)芽孢桿菌菌株D747。
(2)植物病害防除劑，其特征在于含有作為有效菌的芽孢桿菌菌株D747。
(3)害蟲防除劑，其特征在于含有作為有效菌的芽孢桿菌菌株D747。
(4)植物病害和/或害蟲防除方法，其特征在于使用上述(2)中記載的植物病害防除劑和/或上述(3)中記載的害蟲防除劑。
本發(fā)明的芽孢桿菌菌株D747是從靜岡県小笠郡菊川街的空氣中分離得到的菌株。該菌株根據(jù)其后所述的細(xì)菌學(xué)性質(zhì)，同時(shí)參考伯杰氏細(xì)菌分類學(xué)手冊第一卷(1984)確定為芽孢桿菌屬的新菌株，最初認(rèn)為它是蠟狀芽孢桿菌，2000年11月28日作為“蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereusD747)”保藏在工業(yè)技術(shù)院生命工學(xué)工業(yè)技術(shù)研究所(Agency of Industrial Science and Technology，National Institute ofBioscience and Human-Technology)。
但其后對(duì)其是否屬于蠟狀芽孢桿菌產(chǎn)生了疑問，經(jīng)過詳細(xì)研究只能將其確定至芽孢桿菌屬，因此在2002年4月1日提出將記載變更為“芽孢桿菌(Bacillussp.)D747”。
因此，本發(fā)明芽孢桿菌D747菌株(下文簡稱為“D747菌株”)在獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所專利生物保藏中心(National Institute of AdvancedIndustril Science and Technology，Intemational Patent Organism Depositary)作為“Bacillus sp.D747”(FERM P-18128)提交保藏。2002年11月8日在同一專利生物保藏中心作為“Bacillus sp.D747”(FERMBP-8234)提交為國際保藏。
本發(fā)明的D747菌株的細(xì)菌學(xué)性質(zhì)如下所示。即，根據(jù)上述的伯杰氏細(xì)菌分類學(xué)手冊進(jìn)行細(xì)菌學(xué)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)。
(A)形態(tài)學(xué)性質(zhì)形態(tài)桿菌大小寬1.0～1.2μm，長3～5μm運(yùn)動(dòng)性+鞭毛著生狀態(tài)周鞭毛內(nèi)生孢子+孢子位置中央孢子膨脹-(B)培養(yǎng)性質(zhì)菌落顏色白色～淡茶色肉汁瓊脂平板培養(yǎng)形成白色～奶油色的菌落，表面有皺褶(C)生理學(xué)性質(zhì)革蘭氏染色+硝酸鹽還原+MR實(shí)驗(yàn)-VP實(shí)驗(yàn)+吲哚生成-淀粉水解+檸檬酸同化+
無機(jī)氮源+氧化酶-カラタ-ゼ+培養(yǎng)pH6.8、肉湯培養(yǎng)基+培養(yǎng)pH5.7、肉湯培養(yǎng)基+培養(yǎng)溫度30℃+培養(yǎng)溫度50℃-培養(yǎng)NaCl濃度2％+培養(yǎng)NaCl濃度5％+培養(yǎng)NaCl濃度7％+好氣培養(yǎng)+厭氣培養(yǎng)-O-F實(shí)驗(yàn)○卵黃反應(yīng)-由葡萄糖產(chǎn)酸+由甘露醇產(chǎn)酸-由L-阿拉伯糖產(chǎn)酸-由D-木糖產(chǎn)酸-由葡萄糖產(chǎn)氣-β-半乳糖苷酶-對(duì)NaCl和KCl的需求性-[D747菌株的培養(yǎng)]有關(guān)本發(fā)明所用的D747菌株的培養(yǎng)方法可以選擇任何適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。除肉湯培養(yǎng)基之類的一般培養(yǎng)基之外，例如還可舉出含有葡萄糖、胨、酵母提取物的培養(yǎng)基等等。此外，除液體培養(yǎng)基之外也可以使用加入了瓊脂的斜面培養(yǎng)基和平板培養(yǎng)基等固體培養(yǎng)基。通過培養(yǎng)使D747菌株增殖以獲得所需的菌體量。
培養(yǎng)基中的碳源可以利用上述菌株可以同化的所有物質(zhì)。具體地說，除葡萄糖、半乳糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖、麥芽提取物、淀粉水解物等糖之外，還有D747菌株可以利用的各種合成或天然碳源。
培養(yǎng)基中的氮源，同樣地，除含有有機(jī)氮的胨、肉湯、酵母提取物外，還可以是D747菌株可以利用的各種合成或天然氮源。
根據(jù)常規(guī)的微生物培養(yǎng)方法，必要時(shí)可以相應(yīng)地添加食鹽、磷酸鹽等無機(jī)鹽類、鈣、鎂、鐵等金屬鹽，維生素、氨基酸等微量營養(yǎng)源。
培養(yǎng)可以在振蕩培養(yǎng)、通氣培養(yǎng)等好氣條件下進(jìn)行。培養(yǎng)溫度20～30℃、優(yōu)選25～30℃、pH5～8、優(yōu)選6～7，培養(yǎng)時(shí)間1～4天，優(yōu)選2～3天為宜。
對(duì)于本發(fā)明的芽孢桿菌菌株D747，使其培養(yǎng)物(含有菌體)或其處理產(chǎn)物(培養(yǎng)物和其他成分的混合物等)、或培養(yǎng)分離的菌體(培養(yǎng)物經(jīng)離心分離所得的菌體或其洗凈的菌體等)及其處理產(chǎn)物(培養(yǎng)分離的菌體和其他成分的混合物等)，以及由這些處理產(chǎn)物(這些的經(jīng)液體或固體稀釋的稀釋物等)存在于根、莖、葉、種子等植物體上，或存在于栽培土壤中，具有抑制各種植物病害或害蟲防除的性質(zhì)。
本發(fā)明的D747菌株根據(jù)其使用形態(tài)可以對(duì)由屬于卵菌類(Oomycetes)、子囊菌類(Ascomycetes)、擔(dān)子菌類(Basidiomcetes)以及半知菌烴(Deuteromycetes)的菌類引起的以及由細(xì)菌類引起的植物病害進(jìn)行防除。
作為可以用D747菌株防除病害的原因菌，具體地說例如假霜霉屬(Pseudoperonospora)菌，如古巴假霜霉菌(Pseudoperonospora cubensis)、黑星菌屬(Venturia)菌，如蘋果黑星菌(Venturia inaequalis)、白粉菌屬(Erysiphe)菌，如禾白粉菌(Erysiphe graminis)、稻瘟病菌屬(Pyricularia)菌，如米稻瘟病(Pyriculariaoryzae)、葡萄孢菌屬(Botrytis)菌，如灰葡萄孢病菌(Botrytis cinerea)、絲核菌屬(Rhizoctonia)菌，如稻紋枯病菌(Rhizoctonia solani)、柄銹菌屬(Puccinia)菌，如隱匿柄銹菌(Puccinia recondita)、殼針孢菌屬(Septoria)菌，如穎枯殼針孢菌(Septoria nodorum)、核盤菌屬(Sclerotinia)菌，如油菜核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum)、腐霉菌屬(Pythium)菌，如德巴利氏腐霉(Pythium debaryanumHesse)，此外作為細(xì)菌的伯克氏菌屬(Burkholderia)，如植物伯克氏菌(Burkholderiaplantarii)等，本發(fā)明不局限于這些例子。
此外，本發(fā)明的D747菌株還可以對(duì)半翅目害蟲、鱗翅目害蟲、鞘翅目害蟲、雙翅目害蟲、直翅目害蟲、白蟻目害蟲(シロアリ目害蟲)、薊馬目害蟲(アザミウマ目害蟲)、葉螨類害蟲(ハダニ害蟲)等害蟲進(jìn)行防除。
作為可以用D747菌株防除的害蟲，具體地說例如半翅目害蟲，如棒蜂緣蝽(Riptortus clavatus)等蝽類(異翅類；HETEROPTERA)、黑尾葉蟬(Nephotettiscincticeps)等葉蟬類、稻褐飛虱(Nilaparvata lugens)等飛虱類、木虱(Psylla)屬等木虱類、甘薯粉虱(Bemisia tabaci)等粉虱類、桃蚜(Myzus persicae)等蚜類、康氏粉蚧(Pseudococcus comstocki)等蚧類；鱗翅目害蟲，如茶長卷蛾(Homonamagnanima)等卷蛾類、環(huán)針單紋蛾(Eupoecillia ambiguella)等細(xì)卷蛾類、Bambalina.sp等蓑蛾類、Nemapogon granellus等細(xì)蛾類、柑桔潛葉蛾(Phyllocnistis citrella)等葉潛蛾類、菜蛾(Plutella xylostella)等巢蛾類、二化螟(Chilo suppressalis)等螟蛾類、美洲蕷夜蛾(Heliothis virescens)等夜蛾類；鞘翅目害蟲，例如古銅異麗金龜(Anomalacuprea)等金龜子甲蟲類、Epilachna vigintioctopunctata等瓢蟲類、稻水象甲(Lissorhoptrus oryzophilus)等象蟲類，雙翅目害蟲，例如尖音庫蚊(Culex pipiens)、中國按蚊(Anopheles sinensis)、三帶喙庫蚊(Culex tritaeniorhynchus)、直翅目害蟲，例如德國蟑螂(Blatella germanica)、白蟻目害蟲，例如棲北散白蟻(Reticulitermessperatus)、薊馬目害蟲，例如茶黃薊馬(Scirtothrips dorsalis)、葉螨類例如二點(diǎn)葉螨(Tetranychus urticae)，此外，其他有害動(dòng)物和令人不快的動(dòng)物、衛(wèi)生害蟲、寄生蟲、例如福壽螺(Pomacea canaliculata)、蛞蝓(Incilaria)等腹足綱(Gastropoda)、平甲蟲(Armadillidium sp.)等腳目類等。本發(fā)明不局限于這些例子。
(植物病害防除劑和害蟲防除劑)本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑是含有以能防除上述植物病害或害蟲的D747菌株為有效菌的防除劑。在本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑中可以使用D747菌株單體，也可以將D747菌株和D747菌株變異體一起使用。變異體是具有上述D747菌株的細(xì)菌學(xué)性質(zhì)、具有植物病害防除作用和害蟲防除作用的物質(zhì)，可以利用自然突變株、用紫外線或化學(xué)誘變劑所得的突變株、或者細(xì)胞融合株以及基因重組株。本發(fā)明中，在植物病害防除劑和害蟲防除劑中所含的D747菌株包括D747菌株的變異體。
本說明書中所謂的“防除”不僅指對(duì)病、害蟲的預(yù)防、抵制，也用于表示包含有去除、殺死的意思。因此，對(duì)于已感染了病原菌的植物，應(yīng)用本發(fā)明的植物病害防除劑可從植物中去除病原菌，也可以預(yù)防由病原菌引起的疾病或疾病的惡化。此外，對(duì)于害蟲也可通過抵制和殺蟲效果進(jìn)行防除。
根據(jù)本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑，應(yīng)用D747活菌體的情況下優(yōu)選以105～1010個(gè)/ml的濃度向植物添加。
而應(yīng)用D747菌株培養(yǎng)物的情況，使用時(shí)間和使用量可根據(jù)上述活菌體的情況適當(dāng)?shù)卮_定。
另外，本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑中的D747菌株除單獨(dú)以菌體或培養(yǎng)物使用外，還可以作為用非活性的液體或固體載體稀釋，必要時(shí)添加表面活性劑、其他助劑的藥劑使用。具體的制劑例，例如粒劑、粉劑、水和劑、懸濁劑、乳劑等劑型。優(yōu)選的載體，例如滑石、皂土、粘土、高嶺土、硅藻土、白碳、蛭石、消石灰、硅砂、硫酸銨、尿素、多孔固體載體、水、異丙醇、二甲苯、環(huán)己酮、甲基萘、烷基二醇等液體載體等。作為表面活性劑和分散劑，例如二萘基甲磺酸鹽、乙醇硫酸酯鹽、烷基芳基磺酸鹽、木質(zhì)素磺酸鹽、聚氧乙烯二醇醚、聚氧乙烯烷基芳基醚、聚氧乙烯脫水山梨糖醇單烷基化合物等。作為助劑，例如羧甲基纖維素、聚乙二醇、丙二醇、阿拉伯膠、黃原膠等。作為保護(hù)劑，例如脫脂牛奶、pH緩沖劑等。此時(shí)，D747菌株活菌體的量和/或其培養(yǎng)物的量、以及適用時(shí)期和適用量可根據(jù)上述應(yīng)用活菌體的情況適宜地確定。
本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑，作為有效成分必要時(shí)可以含有殺蟲劑、其他殺菌劑、除草劑、植物生長調(diào)節(jié)劑、肥料等其他成分。此外，作為本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑，除D747菌株外還可以含有其他種類的菌株。
本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑可以直接施用也可以用水等稀釋后施用。植物病害防除劑和害蟲防除劑的施用方法沒有特別地限定，例如，直接向植物或害蟲撒播的方法、向土壤中撒播的方法、添加到向植物或土壤中添加的水或肥料中的方法等。此外，制劑的施用量優(yōu)選根據(jù)對(duì)象病害、對(duì)象害蟲、對(duì)象作物、施用方法、發(fā)生傾向、受害程度、環(huán)境條件、使用劑型等的不同作適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。
如上所述，本發(fā)明的芽孢桿菌(Bacillus sp.)菌株D747具有廣泛的病害及害蟲防除譜，能夠防除多種植物病害和害蟲。
由于含有本發(fā)明的D747菌株的本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑可以防除植物病害或害蟲，所以可以用作生物農(nóng)藥。因此本發(fā)明的植物病害防除劑和害蟲防除劑對(duì)環(huán)境的安全性高，由于其對(duì)多種植物病害和害蟲具有防除效果，即使不與其他手段并用，也可以廣泛的防除病害或害蟲。
實(shí)施本發(fā)明的最佳方式通過以下實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體說明，但這些實(shí)施例不作為對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1D747菌株的培養(yǎng)D747菌株是從靜岡県小笠郡菊川街的空氣中分離得到的。具體說來為了分離靜岡県小笠郡菊川街加茂的空氣中漂浮的微生物，將加入了馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的平板培養(yǎng)基，取下蓋放置10分鐘與空氣接觸。將其在27℃下培養(yǎng)3天，分離所形成的菌落。將所分離的菌落在馬鈴薯-葡萄糖液體培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)了有對(duì)植物病害菌起作用的菌株，分離得到D747菌株。
將分離的D747菌株在含有葡萄糖1％，可溶性淀粉2％、聚胨0.5％、干酵母1％、脫脂大豆1％、KH2PO40.2％、NaCl0.2％、碳酸鈣0.3％，pH6.0的培養(yǎng)基中，27℃下、120rpm振蕩培養(yǎng)3天后，離心收集菌體(10,000×g、15分鐘)，在無菌水中懸浮，洗去培養(yǎng)基成分。上述操作重復(fù)2次后以約109/ml濃度懸浮在無菌水中。
實(shí)施例2稻瘟病的防除效果試驗(yàn)在每個(gè)直徑7.5cm的素?zé)徶懈魅霾?0粒稻種(品種愛知旭)，在溫室中培養(yǎng)。向第4葉展開的稻中散布10ml/缽由上述實(shí)施例1中所得的D747懸浮液，風(fēng)干后，將稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)的孢子懸浮液以噴霧方式接種，在濕室內(nèi)管理。接種5日后，檢查第4葉中的病斑數(shù)，其發(fā)病程度以下表1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
評(píng)價(jià)

實(shí)施例3稻紋枯病的防除效果實(shí)驗(yàn)在每個(gè)直徑6.0cm的素?zé)徶懈魅霾?0粒稻種(品種金南風(fēng))，在溫室中培養(yǎng)。向第2～3葉期的稻中散布10ml/缽由上述實(shí)施例1中所得的D747菌株的懸浮液，風(fēng)干后，將稻紋枯病菌(Thanatephor uscucumeris)接種，在溫室內(nèi)管理。接種5日后，檢查病斑數(shù)，其發(fā)病程度以下表1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
實(shí)施例4穎枯殼針孢病的防除效果實(shí)驗(yàn)在每個(gè)直徑6.0cm的塑料缽中各撒播10粒小麥種(品種農(nóng)林61號(hào))在溫室中培養(yǎng)。向第2葉展開的小麥中散布10ml/缽由上述實(shí)施例1中所得的D747菌株的懸浮液，風(fēng)干后，接種穎枯殼針孢病(Septoria nodorum)的柄孢子，在溫室內(nèi)管理。檢查接種10日后的缽內(nèi)第1葉的發(fā)病面積，其發(fā)病程度以下表1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
實(shí)施例5禾白粉菌防除效果實(shí)驗(yàn)在每個(gè)直徑6.0cm的塑料缽中各撒播10粒小麥種(品種農(nóng)林61號(hào))在溫室中培養(yǎng)。向1.5～2葉期的小麥中散布10ml/缽由上述實(shí)施例1中所得的D747菌株的懸浮液，風(fēng)干后，接種禾白粉菌(Erysiphe graminis)的分生孢子，在溫室內(nèi)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上放置到進(jìn)行檢查，溫室內(nèi)管理。檢查接種10日后的缽內(nèi)全部的第1葉的發(fā)病面積，其發(fā)病程度以下表1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
實(shí)施例6灰葡萄孢病防除效果實(shí)驗(yàn)在每個(gè)直徑6.0cm的塑料缽中各撒播4粒黃瓜種子(品種相模半白)在溫室中培養(yǎng)。向展開子葉的黃瓜幼苗中散布相當(dāng)于10ml/缽由上述實(shí)施例1中所得的D747菌株的懸浮液，風(fēng)干后，用浸潤了灰葡萄孢病菌(Botrytis cinerea)的孢子懸浮液的紙碟在黃瓜子葉表面著床接種，20℃下濕室內(nèi)管理。檢查接種3日后的子葉的發(fā)病面積，其發(fā)病程度以下表1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
實(shí)施例7古巴假霜霉病防除效果實(shí)驗(yàn)在每個(gè)直徑6.0cm的塑料缽中各撒播4粒黃瓜種子(品種相模半白)在溫室中培養(yǎng)。向展開子葉的黃瓜幼苗中散布10ml/缽由上述實(shí)施例1中所得的D747懸浮液，風(fēng)干后，噴霧接種古巴假霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensis)的游動(dòng)孢子囊懸浮液，22℃下濕室內(nèi)放置24小時(shí)后于溫室內(nèi)管理。檢查接種8日后的子葉的發(fā)病面積，其發(fā)病程度以下表1中的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。
表2

實(shí)施例8稻水象甲殺蟲效果實(shí)驗(yàn)將30ml由實(shí)施例1所得的D747菌株的懸濁液加入容積為60ml的塑料杯中，其上漂浮3片長3cm的水稻葉片。向其上放置10只稻水象甲(Lissorhoptmsoryzophilus)成蟲，加蓋25℃恒溫室放置。3日后記數(shù)存活成蟲數(shù)。實(shí)驗(yàn)進(jìn)行3次，按照下式(1)求得死蟲率，最終的死蟲率由3次實(shí)驗(yàn)的平均值確定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表3所示。
死蟲率＝{[10-(存活成蟲數(shù))]/10}×100表3

由上述表2和表3的結(jié)果可知，散布了含有本發(fā)明的D747菌株的植物病害防除劑和害蟲防除劑的植物對(duì)各種植物病害或害蟲都有高防除效果。
產(chǎn)業(yè)上應(yīng)用的可能性本發(fā)明的新菌株芽孢桿菌D747(FERM BP-8234)具有特色，對(duì)于芽孢桿菌D747，使其培養(yǎng)物(含有活菌體)或其培養(yǎng)分離的活菌體存在于根、莖、葉、種子等植物體上，或存在于栽培土壤中，可在非常廣泛的范圍內(nèi)抑制各種植物病害的發(fā)生并進(jìn)行害蟲的防除，并且，散布了含有本發(fā)明的D747菌株的植物病害防除劑和害蟲防除劑的植物對(duì)各種植物病害和害蟲都具有高效防除效果。
權(quán)利要求
1.芽孢桿菌D747菌株。
2.植物病害防除劑，其特征在于，含有作為有效菌的芽孢桿菌D747菌株。
3.害蟲防除劑，其特征在于，含有作為有效菌的芽孢桿菌D747菌株。
4.植物病害和/或害蟲防除方法，其特征在于，使用如權(quán)利要求2所述的植物病害防除劑和/或如權(quán)利要求3所述的害蟲防除劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及新菌株即芽孢桿菌D747菌株(FERMBP－8234)，及其涉及含有芽孢桿菌D747菌株作為有效菌的植物病害防除劑和/或害蟲防除劑，及其應(yīng)用上述防除劑的防除方法。對(duì)于芽孢桿菌菌株D747，使其培養(yǎng)物(包含活菌體)或其培養(yǎng)分離的活菌體存在于根、莖、葉、種子等植物體上，或存在于栽培土壤中，可在非常廣泛的范圍內(nèi)抑制各種植物病害的發(fā)生并進(jìn)行害蟲的防除，并且，散布了含有本發(fā)明的D747菌株的植物病害防除劑和害蟲防除劑的植物對(duì)各種植物病害和害蟲都具有高效防除效果。
文檔編號(hào)A01N63/02GK1589323SQ02823250
公開日2005年3月2日 申請(qǐng)日期2002年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月26日
發(fā)明者渡邊哲, 豐島淳, 清水力, 山路孝二, 永山孝三, 矢野祐幸 申請(qǐng)人:組合化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社