專利名稱：栽培的沉香木的制作方法
背景技術(shù)：
沉香木是極其稀少的高貴香料。在中東、中國(guó)和日本至少有3000年的歷史。在印度和法國(guó)，甚至在圣經(jīng)的舊約全書中也有沉香木的記載。沉香木在目前仍然是世界上最昂貴的香料。僅新加坡每年出口的沉香木的價(jià)值估計(jì)都超過(guò)12億美元。E.Hansen，Saudi Aramco World 512-13(2000年12月)。這種芳香的樹(shù)脂木有很多通用名，包括沉香木、gaharu、eaglewood、aloeswood、agila wood、aguru、瓊脂、oud、ude、ud、ood、oode、jinkoh、jinko、Ch’Ing Kuei Hsiang、Ch’En Hsiang、Chan Hsiang、Chi Ku Hsiang、Huang Shu Hsiang、kalambak和grindsanah。
中醫(yī)、Unanai、Ayuravedic和藏族醫(yī)生都使用這種樹(shù)脂。沉香木在醫(yī)藥上用作治療神經(jīng)錯(cuò)亂如神經(jīng)官能癥、神經(jīng)強(qiáng)迫和分裂癥和神經(jīng)衰弱癥的藥物。沉香木具有高度的精神作用，用在宗教儀式中。許多宗教團(tuán)體將其尊為神香(meditation incense)，用于平靜人的思想和精神。在Ayuravedic醫(yī)藥中，將其用于治療多種精神疾病和驅(qū)趕邪魔。在日本，許多人將其看得很神圣，將其涂抹在死人身上。在佛教中，沉香木在許多香料混合物中作為主要成分，它被認(rèn)為是三種整體香料中的一種，另兩種香料是檀香和丁香。
沉香木的來(lái)源是沉香樹(shù)(Aquilaria tree)。沉香樹(shù)是一種常綠樹(shù)，最高可達(dá)40米，直徑可達(dá)60厘米。它結(jié)出有甜蜜香味的白花。沉香屬在被子植物中被分到瑞香科中。已經(jīng)報(bào)導(dǎo)的有15種沉香，并且都能生產(chǎn)沉香木。這些種的分類學(xué)還不完全清楚，也不是所有種都已被分類學(xué)家所認(rèn)知。這些種包括Aquilaria malaccensis、A.agallocha、A.baillonii、A.crassna、A.hirta、A.rostrata、A.beccariana、A.cummingiana、A.filaria、A.khasiana、A.microcarpa、A.grandiflora、A.chinesis或A.sinensis、A.borneensis和A.bancana。Aquilaria bancana是否真的是沉香種已經(jīng)受到置疑，現(xiàn)在已經(jīng)將其分到線桂屬(Gonystylus genus)的線桂科(Gonystylaceaefamily)中，其名稱為棱柱木。人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)Gonystylus也能產(chǎn)生被認(rèn)為與沉香木相同或非常類似的芳香樹(shù)脂。
沉香樹(shù)的原產(chǎn)地是從北印度至越南和印度尼西亞的亞洲。沉香樹(shù)的正常木質(zhì)是白色、柔軟、木紋均勻，在剛切割時(shí)沒(méi)有香味。在某些病理?xiàng)l件下，心材被樹(shù)脂飽和，最終變得越來(lái)越硬。最高級(jí)別的沉香木堅(jiān)硬，近乎黑色，置于水中時(shí)下沉。一般認(rèn)為色調(diào)較淺的沉香木質(zhì)量較差，因?yàn)闃?shù)脂的量減少了。
瓊脂的沉積過(guò)程還不完全清楚。1933年的荷蘭論文(J.P.Schuitemaker，″Het garoehout van West Boreno″Boschbouwkundig TijdschriftTectona Uitgave der Vereeniging van Hoogere Ambtenaren bij het Boschwezenin Nederlands Oost-Indi 26851-892)報(bào)導(dǎo)了在婆羅洲(Bomeo)發(fā)現(xiàn)的沉香木，并且討論了樹(shù)上生產(chǎn)的多種類型的樹(shù)脂。當(dāng)時(shí)大多數(shù)當(dāng)?shù)厝硕颊J(rèn)為沉香木是以神秘的方式形成的，與精神世界有關(guān)。作者認(rèn)為“‘圣’木的神秘出現(xiàn)與超自然力有關(guān)”，并且把沉香木稱為“神木”。該作者還認(rèn)為“我們不能排除由于不知道的原因而發(fā)病的可能性”，“完美的樹(shù)木從來(lái)沒(méi)有沉香木”及“沉香木是在樹(shù)干的創(chuàng)傷或腐爛部位周圍形成的”。該作者還建議將鹽放在樹(shù)洞內(nèi)可以增加樹(shù)脂。該論文中還提到如果沉香木具有傳染性，通過(guò)將新切的沉香木插入樹(shù)莖中人工傳染樹(shù)干可能能夠誘導(dǎo)沉香木的生成。
后來(lái)的作者也報(bào)導(dǎo)了一種長(zhǎng)期的信仰瓊脂的沉積是樹(shù)的免疫反應(yīng)所致，是菌類攻擊的結(jié)果。I.H.Burkill，A dictionary of the economic productsof the Malay Peninsula.Vol.I Crown Agents for the Colonies，London，197-205頁(yè)。在二十世紀(jì)40和50年代，幾個(gè)研究者對(duì)瓊脂的沉積原因進(jìn)行了研究，其結(jié)果不相同，有時(shí)候相互矛盾。Rahman和Basak，Bano BiggyanPatrika987-93(1980)。其他人得出的結(jié)論是不可能有一種特定的真菌導(dǎo)致沉香木的生成。Gibson，Bano Biggyan Patrika 616-26(1977)。有人認(rèn)為樹(shù)莖組織對(duì)隨后被弱病原體攻擊的創(chuàng)傷的直接反應(yīng)造成樹(shù)脂的沉積。
Rahman和Basak認(rèn)為創(chuàng)傷使樹(shù)中的顏色發(fā)生變化，有一些“油性樹(shù)脂”沉積。Rahmnan和Basak，Bano Biggyan Patrika 987-93(1980)。他們假定暴露的開(kāi)放的創(chuàng)傷的存在似乎比某些種類的真菌在創(chuàng)傷中的存在更重要。但是，他們?cè)谡撐闹姓J(rèn)為為了確定對(duì)于瓊脂的沉積來(lái)說(shuō)很重要的創(chuàng)傷的影響因素，他們需要進(jìn)一步的研究。
對(duì)小部分具有瓊脂的樹(shù)木的鑒別是困難而帶有破壞性的，這將加劇對(duì)近乎滅絕的天然枝條的破壞。另外，大規(guī)模的采伐作業(yè)已經(jīng)對(duì)很多發(fā)現(xiàn)有沉香樹(shù)的森林地區(qū)造成破壞。因此，現(xiàn)在的沉香木源，即天然而原始的沉香樹(shù)正逐漸滅絕。目前還沒(méi)有一個(gè)人能夠成功地栽培沉香木。E.Hansen，Saudi Aramco World 512-13(2000年12月)。因此，目前越來(lái)越需要一種栽培沉香樹(shù)的方法，這種沉香樹(shù)不僅能夠生成沉香木，而且是沉香木的可再生源。
發(fā)明概述本發(fā)明提供一種通過(guò)在沉香或線桂樹(shù)(Gonystylus tree)的木質(zhì)部中形成人工創(chuàng)傷來(lái)生產(chǎn)沉香木的方法，本發(fā)明還提供一種向創(chuàng)傷充氣的手段(means)。可以在脫色區(qū)域開(kāi)始在樹(shù)中形成的同時(shí)或之后形成其它創(chuàng)傷。創(chuàng)傷可以通過(guò)切割、鉆孔、砍剁或插入釘子形成。形成的創(chuàng)傷要深達(dá)木質(zhì)部。在木質(zhì)部中形成的創(chuàng)傷深度至少約為1-10cm。在一個(gè)實(shí)施方案中，創(chuàng)傷的形成深度約為4-6cm。創(chuàng)傷可以是在樹(shù)中形成的一系列緊密排列的創(chuàng)傷。例如，系列創(chuàng)傷如約30-100個(gè)創(chuàng)傷可以在樹(shù)中以螺旋狀分布。創(chuàng)傷的排列間距可以約為5cm。
在本發(fā)明的方法中，充氣手段可以是插入創(chuàng)傷的充氣設(shè)備，如插入創(chuàng)傷的釘子、管道或?qū)Ч?。充氣設(shè)備中可以含有多個(gè)充氣孔和/或在其外表面上可以含有多個(gè)溝槽。充氣設(shè)備可以由塑料、竹子、木頭或其它有機(jī)材料或金屬如鐵制成。其直徑可以約為2cm。當(dāng)插入時(shí)，充氣設(shè)備可以伸出到樹(shù)外面，如伸出樹(shù)外約2-15cm。
一種替代方案是，本發(fā)明的充氣手段可以是將創(chuàng)傷周期性地(如一個(gè)月為周期)再損傷。可以在樹(shù)的壽命內(nèi)一次或多次劃傷創(chuàng)傷周圍的一片新生組織。也可以是脫除鄰近創(chuàng)傷的新生組織區(qū)。
本發(fā)明的方法還涉及在創(chuàng)傷周圍的細(xì)胞上應(yīng)用樹(shù)脂誘導(dǎo)劑。樹(shù)脂誘導(dǎo)劑刺激樹(shù)脂在樹(shù)中的形成。它可以殺死木質(zhì)部創(chuàng)傷區(qū)域周圍的活薄壁細(xì)胞。樹(shù)脂誘導(dǎo)劑可以是化學(xué)試劑。如果使用化學(xué)試劑，則可以局部殺死細(xì)胞。例如，它可以是亞硫酸氫鈉、NaCl、三氯化鐵、氯化亞鐵、甲殼質(zhì)、甲酸、纖維二糖、水楊酸、鐵粉或酵母提取物。特別是1∶1∶3的亞硫酸氫鈉、Difco酵母提取物和鐵粉。替代性的或附加性的是，樹(shù)脂誘導(dǎo)劑可以是生物體，如昆蟲或微生物如真菌(如Deuteromyota sp.、Ascomycota sp.、Basidiomycota sp.)。
本發(fā)明使用的樹(shù)的樹(shù)齡低于100年，約為2-80年，約為3-20年，甚至只有大約3-12年。本發(fā)明使用的樹(shù)不是在原始森林中天然生長(zhǎng)的。此處將“原始森林”定義為經(jīng)受過(guò)可以忽略的非天然干擾如采伐、筑路和開(kāi)墾的生態(tài)上成熟的森林。這個(gè)定義還包括干擾造成的影響現(xiàn)在可以忽略不計(jì)的生態(tài)上成熟的森林。在這樣的原始森林中，上地層或上林冠比過(guò)成熟生長(zhǎng)階段(over-mature growth phases)成熟晚。例如，可用于本發(fā)明的樹(shù)種包括Aquilaria malaccensis、A.agallocha、A.baillonii、A.crassna、A.hirta、A.rostrata、A.beccariana、A.cummingiana、A.filaria、A.khasiana、A.microcarpa、A.grandiflora、A.chinesis或A.sinensis、A.borneensis和A.bancana或棱柱木。
本發(fā)明還提供用上述方法生產(chǎn)的沉香木。本發(fā)明還提供用生長(zhǎng)在家庭花園、種植園、溫室或農(nóng)田里的樹(shù)生產(chǎn)的沉香木。
本發(fā)明還通過(guò)提供上述生產(chǎn)的沉香木來(lái)提供一種提純沉香木樹(shù)脂的方法及從沉香木提純樹(shù)脂的方法。本發(fā)明還提供根據(jù)該方法提純的沉香木樹(shù)脂。本申請(qǐng)中使用的術(shù)語(yǔ)“樹(shù)脂”與本領(lǐng)域普通技術(shù)人員使用的術(shù)語(yǔ)是一致的，即，從植物中流出的或提取的固體或柔軟的半固體無(wú)定形的可熔可燃的物質(zhì)。術(shù)語(yǔ)樹(shù)脂包括沉香木油(或其它形式的濃縮沉香木)，這是一種含樹(shù)脂物質(zhì)的油提取物。沉香木油是可以通過(guò)蒸餾沉香木得到的其中溶解有樹(shù)脂物質(zhì)的濃稠液體和濃縮的芳香物質(zhì)。本發(fā)明還提供由用上述方法生產(chǎn)的沉香木樹(shù)脂制成的濃縮沉香木產(chǎn)品。
應(yīng)當(dāng)注意本申請(qǐng)中使用的不定冠詞“a”和“an”及定冠詞“the”與一般專利申請(qǐng)中的意思相同，除非在上下文中明確指出，都表示一種或多種。
附圖簡(jiǎn)述


圖1是收獲時(shí)創(chuàng)傷的沉香樹(shù)的示意圖，沒(méi)有任何措施促使沉香木的形成。該圖示出由內(nèi)含的韌皮細(xì)胞束形成的內(nèi)部愈合組織及從鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)部開(kāi)始愈合的創(chuàng)傷。表面細(xì)胞也能產(chǎn)生愈合組織，從鉆孔創(chuàng)傷的外邊也能夠愈合創(chuàng)傷。在脫色木質(zhì)和良好的沒(méi)有變化的木質(zhì)部之間的非常窄的條帶中很少脫色，也不會(huì)形成很多(如果有)沉香木。
圖2A是已經(jīng)創(chuàng)傷且插入有帶有充氣孔的管道的沉香樹(shù)的示意圖，圖2B是已經(jīng)創(chuàng)傷且樹(shù)中插多個(gè)充氣管道的樹(shù)的示意圖。
圖3是示出收獲時(shí)創(chuàng)傷的沉香樹(shù)的示意圖，鉆孔內(nèi)插入有塑料管。用亞硫酸氫鈉對(duì)樹(shù)進(jìn)行處理。創(chuàng)傷區(qū)域周圍的脫色區(qū)向創(chuàng)傷的上、下和周圍延伸。在脫色木質(zhì)和良好的沒(méi)有變化的木質(zhì)部之間的厚條帶中形成沉香木樹(shù)脂區(qū)。該沉香木生產(chǎn)區(qū)隨著時(shí)間的推移越來(lái)越大，越來(lái)越密集。
圖4是示出形成原始創(chuàng)傷1年后形成的新創(chuàng)傷的效果示意圖。這些新創(chuàng)傷能夠在形成原始創(chuàng)傷后生成的新木質(zhì)部中形成沉香木。
具體實(shí)施例方式
沉香具有獨(dú)特的解剖結(jié)構(gòu)，希望從幼樹(shù)中導(dǎo)出沉香木的人必須了解其解剖結(jié)構(gòu)。與在木質(zhì)部外產(chǎn)生韌皮細(xì)胞(從新生組織的周緣開(kāi)始生長(zhǎng))的被子植物中的多數(shù)樹(shù)不同，沉香在整個(gè)木質(zhì)部及木質(zhì)部外的層產(chǎn)生韌皮細(xì)胞束。這意味著木質(zhì)部(由脈管、纖維和薄壁細(xì)胞組成)也含有包括在擴(kuò)散(有小孔)類型的韌皮部或木質(zhì)間(interxlyary)韌皮部中的所謂薄壁細(xì)胞群。當(dāng)樹(shù)受到創(chuàng)傷時(shí)，它們通過(guò)新生組織形成新木質(zhì)細(xì)胞而產(chǎn)生反應(yīng)。這些細(xì)胞是有區(qū)別的，新生細(xì)胞使創(chuàng)傷愈合(Blanchette R.A.1992.Anatomical responses of xylem to injury and invasion by fungi.InDefenseMechanisms of Woody Plants Against Fungi.R.A.Blanchette和A.R.Biggs編輯，Springer-Verlag Berlin.76-95頁(yè))。一旦創(chuàng)傷愈合，停止向受傷的木質(zhì)充氣，需要空氣的內(nèi)部過(guò)程停止。大多數(shù)樹(shù)是通過(guò)在創(chuàng)傷的新生組織邊緣處產(chǎn)生新細(xì)胞使創(chuàng)傷愈合，而沉香樹(shù)從木質(zhì)部的內(nèi)部及外部愈合創(chuàng)傷。
本發(fā)明進(jìn)行的試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)沉香樹(shù)的新生組織對(duì)創(chuàng)傷的反應(yīng)是在創(chuàng)傷周圍、甚至在創(chuàng)傷表面上都產(chǎn)生新細(xì)胞。參見(jiàn)
圖1。韌皮細(xì)胞明顯產(chǎn)生了新的形成層細(xì)胞，這些形成層細(xì)胞產(chǎn)生新的分化木質(zhì)細(xì)胞。創(chuàng)傷會(huì)快速愈合。暴露的木質(zhì)部表面上的韌皮束產(chǎn)生二次形成層細(xì)胞，這些形成層細(xì)胞產(chǎn)生新細(xì)胞，使創(chuàng)傷愈合。大表面的創(chuàng)傷不會(huì)僅通過(guò)在創(chuàng)傷邊緣處(象大多數(shù)樹(shù)那樣)產(chǎn)生愈合組織使創(chuàng)傷愈合，而是在整個(gè)暴露的木質(zhì)部的表面上都產(chǎn)生新的形成層細(xì)胞，這些形成層細(xì)胞，反過(guò)來(lái)分化產(chǎn)生新的木質(zhì)細(xì)胞，這些木質(zhì)細(xì)胞使創(chuàng)傷愈合。
盡管已經(jīng)有人提示創(chuàng)傷能夠產(chǎn)生沉香木，但是在樹(shù)中產(chǎn)生的一般類型的創(chuàng)傷不能產(chǎn)生沉香木。如果通過(guò)在樹(shù)內(nèi)鉆孔在木質(zhì)部?jī)?nèi)形成人工創(chuàng)傷，則包含在整個(gè)創(chuàng)傷部位中的韌皮部產(chǎn)生反應(yīng)，可能產(chǎn)生新的形成層細(xì)胞。由該新的新生組織形成的新木質(zhì)在創(chuàng)傷的木質(zhì)部?jī)?nèi)生長(zhǎng)。這將密封和愈合內(nèi)部創(chuàng)傷。有內(nèi)部創(chuàng)傷的沉香樹(shù)可以從樹(shù)內(nèi)部及沿樹(shù)外表面的創(chuàng)傷面密封和愈合創(chuàng)傷。本發(fā)明的試驗(yàn)證實(shí)創(chuàng)傷的愈合使沉香木的形成停止。
該文獻(xiàn)提示在創(chuàng)傷的沉香樹(shù)內(nèi)生長(zhǎng)的真菌可以促進(jìn)沉香木的生成。已經(jīng)建議的不同類型的真菌包括Phialophora parasitica、Torula sp.、Aspergillus sp.、Penicillium sp.、Fusarium sp.、Cladosporium sp.、Epicoccumgranulatum、Cylimndrocladium、Sphaeropsis sp.、Botryodiplodiatheobromae、Trichoderma sp.、Phomopsis sp.和Cunninghamella echinulata。所有這些建議的真菌均有可能，但是沒(méi)有確切的研究結(jié)果顯示何種真菌能夠?qū)е鲁料隳镜男纬桑芯空咧赋觥俺料闼氐男纬稍蚋赡苁瞧胀ㄔ?，而非先前所想?Gibson，Bano Biggyan Patrika 616-26(1977))。Punithalingam和Gibson，Nova Hedwigia 29251-255(1978)報(bào)導(dǎo)了來(lái)自沉香的一個(gè)新的Phomopsis種，但是其指出“沒(méi)有證據(jù)證明這種真菌是形成沉香素的導(dǎo)因”。在Rahman和Basak的論文(Bano Biggyan Patrika 987-93(1980))“Agarwood production in agar tree by artificial inoculation andwounding”中，他們經(jīng)過(guò)生成沉香木的試驗(yàn)后得出結(jié)論“在完全理解產(chǎn)生瓊脂沉積(agar deposit)前需要大量的試驗(yàn)工作，毫無(wú)疑問(wèn)，我們還遠(yuǎn)未開(kāi)發(fā)出能夠穩(wěn)定供應(yīng)瓊脂產(chǎn)品的技術(shù)”。Rao和Dayal的論文(InternationalAssociation of Wood Anatomist Bulletin N.S.，13163-172(1992))討論了沉香木的形成，并且提供了天然生長(zhǎng)的沉香樹(shù)的受感染的木質(zhì)的顯微照片。他們建議性地認(rèn)為“對(duì)諸如樹(shù)齡、樹(shù)內(nèi)對(duì)季節(jié)進(jìn)行反應(yīng)的變化及環(huán)境變化的因素進(jìn)行研究”對(duì)確定沉香木是如何形成的很重要。本發(fā)明的發(fā)明人的研究證明樹(shù)齡并不重要(種植的幼樹(shù)，不是在森林中天然生長(zhǎng)的樹(shù)，也能夠生產(chǎn)沉香木)，在越南的三個(gè)不同地理位置處的樹(shù)中都能夠生產(chǎn)沉香木這一事實(shí)證明環(huán)境也不是關(guān)鍵因素。
沉香木是樹(shù)產(chǎn)生的樹(shù)脂狀木材物質(zhì)，作為非特定宿主對(duì)創(chuàng)傷、昆蟲和/或微生物入侵的反應(yīng)。該樹(shù)脂中含有樹(shù)提取物，其中存在有芳香族萜烯。如上所述，沉香的特點(diǎn)是在木質(zhì)部?jī)?nèi)產(chǎn)生韌皮束。作為樹(shù)的防衛(wèi)反應(yīng)，韌皮和薄壁細(xì)胞網(wǎng)在感染區(qū)域周圍產(chǎn)生和分布樹(shù)脂。先前認(rèn)為，只有古樹(shù)才能生產(chǎn)樹(shù)脂。
本發(fā)明的發(fā)明人確定了沉香木的形成機(jī)理，用該形成機(jī)理在栽培的幼沉香樹(shù)中生產(chǎn)沉香木。例如，沉香樹(shù)可以生長(zhǎng)在家庭或協(xié)作的花園、種植園或溫室里。本發(fā)明生產(chǎn)沉香木的技術(shù)已經(jīng)用在樹(shù)齡約為3-8年的種植園中生長(zhǎng)的幼樹(shù)上。雖然由于經(jīng)濟(jì)原因，該技術(shù)最好用在幼樹(shù)上，但是該技術(shù)也可以用在更老的樹(shù)上。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)為了在沉香樹(shù)中誘導(dǎo)沉香木的生成，兩個(gè)因素是必需的(1)在樹(shù)中有開(kāi)放的創(chuàng)傷，和(2)必須為該開(kāi)放的創(chuàng)傷充氣。
在木質(zhì)部?jī)?nèi)鉆孔，使樹(shù)形成創(chuàng)傷。試驗(yàn)多種類型的創(chuàng)傷，而橫切木質(zhì)部的孔是必需的。孔的大小并不重要，最重要的是孔必須不能被愈合組織所封閉。在生長(zhǎng)快速的熱帶樹(shù)中，小的鉆孔創(chuàng)傷在1年內(nèi)就可被新生的木質(zhì)封閉。為了確保創(chuàng)傷不封閉，可以在鉆孔創(chuàng)傷周圍切割新生組織區(qū)。除去新生組織可以延遲愈合組織的形成和創(chuàng)傷的愈合。如果創(chuàng)傷看起來(lái)將要愈合，則必須重復(fù)該過(guò)程。另一種方法是將硬塑料、竹子、木材或其它有機(jī)材料或金屬管道或?qū)Ч?在管的側(cè)面上都形成孔)插入鉆孔創(chuàng)傷，使其伸到樹(shù)外，參見(jiàn)圖2A和2B。當(dāng)樹(shù)生長(zhǎng)時(shí)，這些管能夠防止樹(shù)將創(chuàng)傷愈合。為了防止創(chuàng)傷愈合，可以使用這些方法及其它任何方法。
為了使沉香木的生產(chǎn)最大化，在形成孔后，可以干擾作為孔壁的樹(shù)細(xì)胞?？梢钥吹綄?duì)活細(xì)胞的干擾越大，形成沉香木的內(nèi)部面積越大。如果孔是鉆成的，則只在創(chuàng)傷邊緣周圍形成沉香木(并且只是在充氣時(shí))。如果形成鉆孔創(chuàng)傷時(shí)導(dǎo)入能夠殺死一些樹(shù)細(xì)胞的物質(zhì)(樹(shù)脂誘導(dǎo)劑)，則能夠在更大的面積上形成樹(shù)脂。參見(jiàn)圖3?？梢允褂迷S多不同的樹(shù)脂誘導(dǎo)劑，如NaCl、三氯化鐵、氯化亞鐵、甲殼質(zhì)、甲酸等。也可以在樹(shù)內(nèi)接種微生物以誘導(dǎo)更強(qiáng)烈的宿主反應(yīng)。在試驗(yàn)的樹(shù)中接種從生長(zhǎng)在越南的古樹(shù)中的沉香木柱上分離出來(lái)的在分類學(xué)上是Deuteromycota、Ascomycota和Basidiomycota群的真菌種。一些真菌的存在有助于使創(chuàng)傷保持開(kāi)放狀態(tài)，有助于干擾活樹(shù)細(xì)胞，從而可以作為誘導(dǎo)劑。對(duì)在古樹(shù)中天然形成的沉香木中生成的倍半萜烯和在種植園中生長(zhǎng)的幼樹(shù)中形成的沉香木中生成的倍半萜烯進(jìn)行化學(xué)分析，結(jié)果證明這些樹(shù)脂是相同的。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該方法包括在樹(shù)上呈螺旋狀的一系列鉆孔創(chuàng)傷(每棵樹(shù)上有30至100多個(gè))。每一個(gè)創(chuàng)傷被很小的間距隔開(kāi)。每一個(gè)創(chuàng)傷中都插入其壁上有許多孔的管，如塑料管。這些管插入鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)，伸出樹(shù)外2-15cm。管內(nèi)還含有誘導(dǎo)劑。另一種方法是在樹(shù)上鉆出呈螺旋狀的孔，將誘導(dǎo)劑直接加入創(chuàng)傷中。刮劃每一個(gè)創(chuàng)傷，在孔的周圍切去一片新生組織。觀察創(chuàng)傷一段時(shí)間，為了使孔保持開(kāi)放狀態(tài)，可以重新刮劃和/或鉆孔。
用于生產(chǎn)沉香木的樹(shù)可以是天然生長(zhǎng)的，也可以是在溫室內(nèi)生長(zhǎng)的。
下面的實(shí)施例只是為了例示本發(fā)明，而不是限定本發(fā)明。
實(shí)施例在試驗(yàn)1-8中使用生長(zhǎng)在越南的An Giang省或Phu Quoc島內(nèi)的種植園中的樹(shù)齡約為4-5年的樹(shù)。
實(shí)施例1使樹(shù)形成創(chuàng)傷，方法是在每一個(gè)樹(shù)的主干中用斧頭制造六個(gè)創(chuàng)傷。六個(gè)月后切開(kāi)收獲的樹(shù)，劈開(kāi)創(chuàng)傷區(qū)。在暴露的縱切面上測(cè)量脫色面積。在創(chuàng)傷的脫色的木質(zhì)和鮮活的沒(méi)有變化的木質(zhì)部之間的很小區(qū)域內(nèi)形成樹(shù)脂(如果形成的話)。6個(gè)月后，六個(gè)斧傷的脫色面積是1.6-9.1cm2，平均脫色面積是6.1cm2，沒(méi)有看到明顯的樹(shù)脂形成區(qū)。21個(gè)月后，六個(gè)斧傷的脫色面積是0.0-1.5cm2，平均脫色面積是0.3cm2，沒(méi)有出現(xiàn)樹(shù)脂。這個(gè)研究結(jié)果表明用斧頭創(chuàng)傷樹(shù)和表面的淺創(chuàng)傷不會(huì)產(chǎn)生沉香木。
實(shí)施例2
用5/8英寸的鉆頭對(duì)樹(shù)制造創(chuàng)傷，創(chuàng)傷深度約為5cm。在樹(shù)干上以螺旋方式形成六個(gè)創(chuàng)傷，每一個(gè)創(chuàng)傷的間隔約為20cm。六個(gè)創(chuàng)傷中的一個(gè)作對(duì)比用，其它5個(gè)創(chuàng)傷中填入來(lái)自具有天然沉香木的森林中的樹(shù)上的沉香木(每個(gè)創(chuàng)傷約0.5g)。該樹(shù)被偷獵者砍伐過(guò)，但是樹(shù)的一些部分還在，并且從中能夠得到一些新鮮的沉香木?？诚滦〔糠值某料隳?，塞入鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)。6個(gè)月和18個(gè)月后，對(duì)樹(shù)進(jìn)行收獲，用下述結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。6個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1 對(duì)比 11.72 沉香木27.63 沉香木22.14 沉香木15.65 沉香木12.66 沉香木16.018個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1 對(duì)比 18.42 沉香木16.93 沉香木18.84 沉香木19.15 沉香木15.16 沉香木17.6脫色量比使用斧傷時(shí)略大，在脫色木質(zhì)和良好木質(zhì)的界面處發(fā)現(xiàn)非常小的出現(xiàn)樹(shù)脂的區(qū)域。但是，樹(shù)快速愈合，在18個(gè)月后在較小的脫色區(qū)域內(nèi)看不到沉香木的形成過(guò)程。
實(shí)施例3用5/8英寸的鉆頭對(duì)樹(shù)制造創(chuàng)傷，創(chuàng)傷深度約為5cm。在樹(shù)干上以螺旋方式形成六個(gè)創(chuàng)傷，每一個(gè)創(chuàng)傷的間隔約為20cm。六個(gè)創(chuàng)傷中的一個(gè)作對(duì)比用，其它5個(gè)創(chuàng)傷中接種從在越南的天然森林中得到的新鮮沉香木中分離出來(lái)的真菌的純培養(yǎng)物。使用5種不同的代表不同種的Ascomyota和Deuteromycota的真菌。雖然這些真菌的種和屬都不確定，但是培養(yǎng)物的形態(tài)表示每一種真菌代表不同的屬。得到現(xiàn)場(chǎng)數(shù)據(jù)后，只有證明能夠成功刺激沉香木的培養(yǎng)物才被認(rèn)定為真菌種。真菌在消毒燕麥上生長(zhǎng)，燕麥上補(bǔ)充麥精肉湯，用于添加營(yíng)養(yǎng)成分。培養(yǎng)物在燕麥/麥精基質(zhì)上生長(zhǎng)3周。接種有真菌的鉆孔創(chuàng)傷中填入真菌/燕麥接種體。6個(gè)月、18個(gè)月和21個(gè)月后，對(duì)樹(shù)進(jìn)行收獲，得到下述結(jié)果。
6個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1對(duì)比，未處理 24.82分離體F-4 20.23分離體F-5 17.74分離體F-9 14.65分離體F-2415.66分離體F-3211.718個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1對(duì)比，未處理 8.82分離體(Isolate)F-47.73分離體F-5 12.54分離體F-9 8.65分離體F-241.66分離體F-3213.3
21個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1 對(duì)比，未處理 10.22 分離體F-4 8.63 分離體F-5 11.44 分離體F-9 10.85 分離體F-249.96 分離體F-3211.7這些結(jié)果顯示與越南的新鮮沉香木相關(guān)的普通真菌不能顯著刺激沉香木的形成。在沒(méi)有接種的鉆孔創(chuàng)傷和接收了真菌的純培養(yǎng)物的創(chuàng)傷之間，脫色面積與非常少量樹(shù)脂生產(chǎn)的中間面積類似。在三種收獲數(shù)據(jù)中，沉香木的生產(chǎn)沒(méi)有明顯增長(zhǎng)。
實(shí)施例4用5/8英寸的鉆頭對(duì)樹(shù)制造創(chuàng)傷，創(chuàng)傷深度約為5cm。在樹(shù)干上以螺旋方式形成六個(gè)創(chuàng)傷，每一個(gè)創(chuàng)傷的間隔約為20cm。六個(gè)創(chuàng)傷中的兩個(gè)作對(duì)比用，其它4個(gè)創(chuàng)傷中接種生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)基(用于在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)微生物)或土壤。
處理?xiàng)l件包括--對(duì)比，未處理--每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.1g的Difco麥精(Malt Extract，簡(jiǎn)稱ME)--每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.1g的Difco真菌學(xué)瓊脂(MYCO)--每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.1g的Difco酵母提取物(YE)--每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.25g取自樹(shù)所生長(zhǎng)的種植園內(nèi)的土壤。
12個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1 對(duì)比，未處理 16.72 ME11.23 MYCO 12.34 YE8.15 土壤 7.36 對(duì)比，未處6.421個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1 對(duì)比，未處6.02 ME7.23 MYCO 16.84 YE10.85 土壤 10.56 對(duì)比，未處理 12.6這些結(jié)果顯示只使用在培養(yǎng)基中用于生長(zhǎng)真菌的營(yíng)養(yǎng)物時(shí)，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)誘導(dǎo)出沉香木。在鉆孔創(chuàng)傷中放入土壤也不能刺激沉香木的生成。所有創(chuàng)傷都明顯由表面形成層細(xì)胞所愈合，木質(zhì)部中包含的韌皮細(xì)胞產(chǎn)生新細(xì)胞，從鉆孔內(nèi)部將創(chuàng)傷愈合。
實(shí)施例5為了試驗(yàn)不同的混合物是否能夠刺激沉香木的生產(chǎn)，用5/8英寸的鉆頭在種植的幼樹(shù)樹(shù)干中鉆出深度約為5cm的孔。用不同的材料處理鉆孔創(chuàng)傷。使用的化學(xué)物質(zhì)來(lái)自Sigma Chemicals Inc.St.Louis，Missouri或Mallinckrodt Inc.Paris，Kentucky。每一棵樹(shù)上有一個(gè)鉆孔創(chuàng)傷不進(jìn)行處理，其它創(chuàng)傷經(jīng)受下述處理脫乙酰殼多糖-提純的甲殼質(zhì)，每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.2g的甲殼質(zhì)甲酸-每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.1g的甲酸氯化鈉-每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.2g的氯化鈉纖維二糖-每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.2g的纖維二糖石灰石-每一個(gè)創(chuàng)傷中加入約0.1g的碳酸鈣12個(gè)月、18個(gè)月和21個(gè)月后，對(duì)樹(shù)進(jìn)行收獲。
12個(gè)月后創(chuàng)傷處理脫色面積1 對(duì)比，未處理11.22 脫乙酰殼多糖9.03 甲酸28.54 NaCl49.35 石灰石 10.06 纖維二糖9.918個(gè)月后創(chuàng)傷處理脫色面積1 對(duì)比，未處理25.42 脫乙酰殼多糖22.13 甲酸18.64 NaCl44.75 石灰石 18.76 纖維二糖 20.3
21個(gè)月后創(chuàng)傷 處理 脫色面積1 對(duì)比，未處理 11.12 脫乙酰殼多糖 3.83 甲酸 31.84 NaCl 36.45 石灰石 9.76 纖維二糖 7.4這些結(jié)果顯示能夠殺死木質(zhì)部創(chuàng)傷區(qū)域周圍薄壁細(xì)胞的復(fù)合物能夠增大樹(shù)內(nèi)的反應(yīng)面積和脫色面積。在脫色區(qū)域周緣形成沉香木樹(shù)脂的沉積物。像pH低的甲酸和pH高的NaCl的物質(zhì)都能夠干擾活細(xì)胞，因此能夠誘導(dǎo)比對(duì)比創(chuàng)傷更多量的沉香木。隨著樹(shù)的生長(zhǎng)和創(chuàng)傷的愈合，感染面積下降。像脫乙酰殼多糖、纖維二糖和石灰石的其它物質(zhì)在試驗(yàn)濃度下不會(huì)增加脫色面積。但是，如果加入量對(duì)鄰近創(chuàng)傷區(qū)域的活細(xì)胞有害，則也能起作用。顯微觀察顯示用NaCl或甲酸處理的創(chuàng)傷周圍的細(xì)胞廣泛反應(yīng)，韌皮細(xì)胞內(nèi)充滿樹(shù)脂。這些細(xì)胞不能產(chǎn)生形成層原始細(xì)胞，因此，創(chuàng)傷的愈合被延遲。影響木質(zhì)部?jī)?nèi)的活薄壁細(xì)胞和韌皮細(xì)胞的物質(zhì)刺激樹(shù)脂的生成，誘導(dǎo)沉香木的生成。它們還能夠阻止外部形成層和內(nèi)含韌皮部形成的新細(xì)胞愈合創(chuàng)傷。
實(shí)施例6通過(guò)標(biāo)定存在的倍半萜烯對(duì)天然沉香木和試驗(yàn)產(chǎn)生的沉香木的化學(xué)組成進(jìn)行分析。將樣品萃取在37.5℃的二氯甲烷中，用氮?dú)馐蛊潴w積減小，但不少于0.1ml。注入帶有15m×0.25mm DB-1柱的Hewlett-Packard5890氣相色譜儀之前加入甲基化劑。注射器溫度是280℃。4分鐘后，以10℃/min的速度將50℃的初始柱溫升到340℃。用界面溫度為280℃的Hewlett-Packard 5972質(zhì)量選擇檢測(cè)器檢測(cè)洗提液。
購(gòu)自新加坡商人的低、中、高檔沉香木樣品中的倍半萜烯量是樣品的0.3-10％。倍半萜烯包括香橙烯(aromadendrene)、β-蛇床烯、γ-杜松烯、α-和β-愈創(chuàng)烯。從試驗(yàn)樹(shù)得到的沉香木樣品中的倍半萜烯的量是0％(對(duì)比創(chuàng)傷)-1.5％(12個(gè)月后用NaCl處理的鉆孔創(chuàng)傷)。倍半萜烯包括香橙烯、β-蛇床烯、γ-杜松烯、α-和β-愈創(chuàng)烯及α-律草烯。
實(shí)施例7在每一棵樹(shù)的三個(gè)位置處形成多個(gè)小鉆孔創(chuàng)傷，觀察創(chuàng)傷尺寸和多個(gè)創(chuàng)傷對(duì)沉香木形成的影響。鉆20個(gè)直徑約為5mm的孔，其在樹(shù)的木質(zhì)部?jī)?nèi)的深度約為5cm。形成4行每行5個(gè)的創(chuàng)傷，行距約為2cm。在樹(shù)的不同側(cè)面上形成30cm間隔的創(chuàng)傷組。在每一組20個(gè)創(chuàng)傷周圍剝?nèi)ッ娣e為10×10cm的樹(shù)皮。18個(gè)月后，對(duì)樹(shù)進(jìn)行收獲。小鉆孔創(chuàng)傷結(jié)合在一起形成的脫色面積導(dǎo)致很大的沿周緣形成有一些沉香木樹(shù)脂的脫色面積。多個(gè)創(chuàng)傷的作用是干擾創(chuàng)傷周圍細(xì)胞的正常功能，延遲創(chuàng)傷的愈合。在樹(shù)中形成的單個(gè)小鉆孔創(chuàng)傷不會(huì)產(chǎn)生大量沉香木樹(shù)脂，因?yàn)樗鼈儠?huì)很快愈合，但是多個(gè)創(chuàng)傷的組在樹(shù)上緊密結(jié)合在一起，干擾木質(zhì)部的正常功能，刺激沉香木的生成。
實(shí)施例8為了試驗(yàn)不同的處理方式，使用在Phu Quoc島上的14棵種植園內(nèi)生長(zhǎng)的樹(shù)。每一棵樹(shù)都有8個(gè)創(chuàng)傷，這8個(gè)創(chuàng)傷在樹(shù)的主干上呈螺旋狀分布，間隔約20cm。在每一棵樹(shù)上都形成很多不同類型的創(chuàng)傷和處理方式及對(duì)比例。每一種處理都在每一棵樹(shù)的不同位置處進(jìn)行，以確保創(chuàng)傷的位置不起作用。15個(gè)月后，對(duì)樹(shù)進(jìn)行收獲，并且進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室分析。
處理方式包括1、切去樹(shù)皮，除掉樹(shù)皮組織，露出木質(zhì)部，以此形成約5×5cm的表面創(chuàng)傷，沒(méi)有鉆孔。
2、用5/8英寸的鉆頭在木質(zhì)部?jī)?nèi)鉆出深度約為5cm的孔。
3、用5/8英寸的鉆頭在木質(zhì)部?jī)?nèi)鉆出深度約為5cm的孔。將鉆孔周圍5×5cm大的樹(shù)皮去掉，在鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)加入約0.3g消毒的沉香鋸屑。
4、與3號(hào)相同，只是在鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)加入約0.3g比例為1∶1的氯化亞鐵和消毒的沉香鋸屑。
5、與3號(hào)相同，只是在鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)加入約0.3g比例為1∶2的NaCl和消毒的沉香鋸屑。
6、與3號(hào)相同，只是在鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)加入約0.3g 比例為1∶4的Difco酵母提取物和消毒的沉香鋸屑。
7、與3號(hào)相同，只是在鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)加入約0.3g比例為1∶1的亞硫酸氫鈉和消毒的沉香鋸屑。
8、與3號(hào)相同，只是在鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)加入約0.3g比例為1∶2∶4的Difco營(yíng)養(yǎng)肉湯∶Difco麥精∶消毒的沉香鋸屑。
15個(gè)月后，對(duì)8棵樹(shù)進(jìn)行收獲，并且進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室分析。將樹(shù)的創(chuàng)傷區(qū)域劈開(kāi)，測(cè)定脫色面積和樹(shù)脂的形成，用圖像分析儀測(cè)量受影響的面積。在縱切面上測(cè)定所有創(chuàng)傷的面積(cm2)。每一個(gè)值都是8個(gè)創(chuàng)傷的平均值。
創(chuàng)傷 處理 脫色面積1表面創(chuàng)傷 1.42鉆孔創(chuàng)傷 46.33表面創(chuàng)傷和鉆孔創(chuàng)傷 27.34創(chuàng)傷/氯化亞鐵112.55創(chuàng)傷/NaCl 48.16創(chuàng)傷/酵母提取物 28.67創(chuàng)傷/亞硫酸氫鈉 182.08創(chuàng)傷/營(yíng)養(yǎng)基 34.3該研究示出幾種處理方式對(duì)于在沉香幼樹(shù)中生成可感知量沉香木的影響。表面創(chuàng)傷不產(chǎn)生沉香木。深孔創(chuàng)傷在創(chuàng)傷部位保持開(kāi)放的條件下可以產(chǎn)生一些沉香木。對(duì)木質(zhì)部?jī)?nèi)的鉆孔創(chuàng)傷周圍的活細(xì)胞起干擾作用的化合物(如NaCl、亞硫酸氫鈉、氯化亞鐵及能夠干擾活樹(shù)細(xì)胞正常功能的其它任何化學(xué)物質(zhì))能夠增加樹(shù)內(nèi)的脫色面積和沉香木樹(shù)脂的形成量。
實(shí)施例9將兩個(gè)地方(越南的Kon Turn和越南的Nui Cam)的家庭花園和農(nóng)田里生長(zhǎng)的幼樹(shù)的每一棵樹(shù)上制造8個(gè)創(chuàng)傷。鉆直徑為5/8英寸的孔，其在每一棵樹(shù)的主干內(nèi)的深度約為5cm，創(chuàng)傷在樹(shù)的主干上呈螺旋狀分布，間隔約20cm。刮劃所有的鉆孔創(chuàng)傷，在創(chuàng)傷周圍剝?nèi)ッ娣e為5×5cm的樹(shù)皮。真菌處理由三種不同類型的從越南的沉香樹(shù)得到的擔(dān)子真菌(Basidiomycota)組成。雖然這些分離體的屬不確定，但是培養(yǎng)物的形態(tài)表示它們是不同的屬。培養(yǎng)物在消毒稻谷上生長(zhǎng)，稻谷上補(bǔ)充麥精。培養(yǎng)物在接種前生長(zhǎng)3周。
處理方式包括1、對(duì)比創(chuàng)傷，接受消毒稻谷2、真菌培養(yǎng)物97-14-53、真菌培養(yǎng)物97-13-74、真菌培養(yǎng)物97-11-255、對(duì)比創(chuàng)傷，接受0.5g消毒的沉香鋸屑。
6、約0.5g比例為1∶4的亞硫酸氫鈉和消毒的沉香鋸屑。
7、約0.5g比例為1∶2的水楊酸和消毒的沉香鋸屑。
8、約0.5g比例為1∶4的氯化亞鐵和消毒的沉香鋸屑。
15個(gè)月后，對(duì)每一個(gè)地方的兩棵樹(shù)進(jìn)行收獲，并且進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室分析。計(jì)算每一種創(chuàng)傷的平均面積。
Kon Tum創(chuàng)傷 處理 脫色面積cm21對(duì)比 22.7297-14-5 14.5397-13-7 18.0497-11-25 17.55對(duì)比 11.16硫酸氫鈉 52.37水楊酸 16.98氯化亞鐵 18.4
Nui Cam創(chuàng)傷 處理脫色面積cm21 對(duì)比15.52 97-14-5 18.23 97-13-7 31.24 97-11-2520.95 對(duì)比20.66 硫酸氫鈉56.97 水楊酸 25.58 氯化亞鐵23.3該研究表明使用的三種不同的擔(dān)子真菌不會(huì)導(dǎo)致極大的脫色面積，脫色面積與控制創(chuàng)傷的脫色面積不會(huì)有非常大的差別。該研究還表明與實(shí)施例8相比，亞硫酸氫鈉濃度的降低將導(dǎo)致脫色量和沉香木樹(shù)脂量的降低。盡管發(fā)現(xiàn)的脫色面積較小，但是確實(shí)在脫色/愈合創(chuàng)傷界面處形成沉香木樹(shù)脂。當(dāng)從創(chuàng)傷周圍取下沉香木燃燒時(shí)，能夠產(chǎn)生獨(dú)特的沉香木的香味。一些化合物如水楊酸和氯化亞鐵不會(huì)產(chǎn)生大的脫色面積，很明顯，必須施加足夠的濃度，以對(duì)鄰近鉆孔創(chuàng)傷的木質(zhì)部中的活細(xì)胞產(chǎn)生影響。例如，在這次試驗(yàn)中，氯化亞鐵的用量是其與鋸屑的比例是1∶4，觀察到中等大小的脫色量。在前一個(gè)試驗(yàn)中，其與鋸屑的比例是1∶1，在創(chuàng)傷的木質(zhì)部中會(huì)發(fā)生更大量的反應(yīng)，產(chǎn)生更多的沉香木。
實(shí)施例10將鐵釘釘入試驗(yàn)樹(shù)中，6、15或18個(gè)月后收獲時(shí)，沉香木的量雖少，但效果顯著。木質(zhì)部中觀察到的反應(yīng)表明鐵能夠刺激樹(shù)脂的生成，鐵釘或其它鐵源對(duì)沉香木的形成產(chǎn)生影響。
實(shí)施例11用5/8英寸的鉆頭對(duì)在越南的Nui Cam和越南的Kon Turn這兩個(gè)地方生長(zhǎng)的樹(shù)齡為5-6年的幼樹(shù)上制造創(chuàng)傷，在木質(zhì)部?jī)?nèi)的深度約為5.0cm。這些創(chuàng)傷在樹(shù)上呈螺旋狀分布，間隔約為10cm。在創(chuàng)傷周圍剝?nèi)ッ娣e為5×5cm的樹(shù)皮，在創(chuàng)傷內(nèi)插入塑料管。塑料管具有鉆在側(cè)壁中的充氣孔和形成在其表面中的淺槽，當(dāng)塑料管插入樹(shù)中時(shí)(參見(jiàn)圖3)，這些孔和淺槽能夠促進(jìn)空氣沿塑料管的流動(dòng)。管伸出樹(shù)外約10cm，使得多年內(nèi)孔不會(huì)閉合。該管能夠保證創(chuàng)傷處于開(kāi)放狀態(tài)，空氣能夠到達(dá)創(chuàng)傷的木質(zhì)部?jī)?nèi)部。除只接收管的創(chuàng)傷外，其它內(nèi)插有管的創(chuàng)傷中添加有比例為1∶1∶3的亞硫酸氫鈉、Difco酵母提取物和鐵粉(這種鐵粉是99.6％的Fe粉，J.T.Baker Inc.Phillipsburg，NJ生產(chǎn))的組合物。也可以用能夠局部干擾木質(zhì)部和韌皮細(xì)胞正常功能的其它化合物防止內(nèi)含的韌皮部產(chǎn)生二次細(xì)胞(能夠從鉆孔創(chuàng)傷內(nèi)部將創(chuàng)傷愈合)、干擾木質(zhì)部中更大面積的細(xì)胞。只要?jiǎng)?chuàng)傷對(duì)空氣保持開(kāi)放狀態(tài)，沉香木就能逐步集聚。對(duì)創(chuàng)傷周圍的活細(xì)胞干擾越大(但不能殺死樹(shù))，沉香木的產(chǎn)量越大。用于形成沉香木的樹(shù)必須是活的，因?yàn)樗罉?shù)不會(huì)形成沉香木。當(dāng)樹(shù)長(zhǎng)出新木質(zhì)時(shí)，制造其它孔，使沉香木區(qū)域移入新木質(zhì)部(圖4)。
實(shí)施例12用5/8英寸的鉆頭對(duì)越南的Nui Cam和越南的Kon Tum這兩個(gè)地方生長(zhǎng)的樹(shù)制造創(chuàng)傷，創(chuàng)傷深度約為5cm。這些創(chuàng)傷在樹(shù)上從地面到樹(shù)冠呈螺旋狀分布，這些創(chuàng)傷的間隔為3-5cm。一段時(shí)間后，將創(chuàng)傷再次創(chuàng)傷，使創(chuàng)傷保持開(kāi)放狀態(tài)。只要?jiǎng)?chuàng)傷出現(xiàn)任何創(chuàng)傷愈合，都進(jìn)行這一步驟。在越南的這些地區(qū)，每2-3個(gè)月將其檢查和再次創(chuàng)傷一次。樹(shù)上有30-70個(gè)創(chuàng)傷，這取決于樹(shù)的大小。這些研究顯示深入木質(zhì)部的重復(fù)機(jī)械創(chuàng)傷通過(guò)防止外部形成層創(chuàng)傷愈合和內(nèi)含的韌皮部生長(zhǎng)出內(nèi)部二次細(xì)胞而使創(chuàng)傷保持開(kāi)放狀態(tài)。只要?jiǎng)?chuàng)傷保持開(kāi)放狀態(tài)，局部的沉香木就會(huì)緊鄰創(chuàng)傷集聚。
所有公開(kāi)出版物、專利和專利文獻(xiàn)引入本申請(qǐng)中都是為了參考，好像單篇也可以作為參考。前面已經(jīng)參考各種具體而優(yōu)選的實(shí)施方案和技術(shù)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述。但是應(yīng)當(dāng)理解的是，可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行多種變動(dòng)和改進(jìn)，這些變動(dòng)和改進(jìn)都在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種生產(chǎn)沉香木的方法，其包括(a)在沉香或線桂樹(shù)的木質(zhì)部中形成人工創(chuàng)傷，和(b)提供一種向創(chuàng)傷充氣的設(shè)備。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其還包括重復(fù)步驟a和/或b。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中，在樹(shù)中開(kāi)始形成脫色區(qū)域后，重復(fù)步驟a和/或b。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中，在脫色區(qū)域中重復(fù)進(jìn)行創(chuàng)傷。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，通過(guò)切割、鉆孔、砍剁或插入釘子形成創(chuàng)傷。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，形成的創(chuàng)傷要深達(dá)木質(zhì)部。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，在木質(zhì)部中形成的創(chuàng)傷深度至少約為1-10cm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，創(chuàng)傷的形成深度約為4-6cm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，在樹(shù)中形成一系列緊密間隔排列的創(chuàng)傷。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中，一系列創(chuàng)傷在樹(shù)上呈螺旋狀分布。
11.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中，形成30-100個(gè)創(chuàng)傷。
12.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中，一系列創(chuàng)傷的間隔約為5cm。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，充氣設(shè)備是插入創(chuàng)傷的充氣設(shè)備。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中，充氣設(shè)備是插入創(chuàng)傷的釘子、管道或?qū)Ч堋?br> 15.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中，充氣設(shè)備包括充氣孔。
16.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中，充氣設(shè)備包括具有溝槽的外表面。
17.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中，充氣設(shè)備是塑料、竹子、木頭或其它有機(jī)材料或金屬。
18.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中，充氣設(shè)備的直徑約為2cm。
19.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中，充氣設(shè)備由鐵制成。
20.根據(jù)權(quán)利要求13的方法，其中，充氣設(shè)備伸出樹(shù)外。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中，充氣設(shè)備伸出樹(shù)外2-15cm。
22.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，充氣設(shè)備對(duì)創(chuàng)傷周期性地再創(chuàng)傷。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中，充氣設(shè)備對(duì)創(chuàng)傷每月再創(chuàng)傷一次。
24.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，向創(chuàng)傷充氣的方法包括在樹(shù)的壽命內(nèi)一次或多次劃傷創(chuàng)傷周圍的一片新生組織。
25.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，該方法還包括脫除鄰近創(chuàng)傷的新生組織區(qū)。
26.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，該方法還包括在創(chuàng)傷周圍的細(xì)胞上應(yīng)用樹(shù)脂誘導(dǎo)劑。
27.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中，該劑刺激樹(shù)脂的生成。
28.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中，該劑能夠殺死木質(zhì)部創(chuàng)傷區(qū)域周圍的活薄壁細(xì)胞。
29.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中，樹(shù)脂誘導(dǎo)劑是化學(xué)試劑或生物。
30.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中，生物是微生物或昆蟲。
31.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中，化學(xué)試劑能夠局部殺死細(xì)胞。
32.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中，化學(xué)試劑是亞硫酸氫鈉、NaCl、三氯化鐵、氯化亞鐵、甲殼質(zhì)、甲酸、纖維二糖、水楊酸、鐵粉或酵母提取物。
33.根據(jù)權(quán)利要求29的方法，其中，化學(xué)試劑是1∶1∶3的亞硫酸氫鈉、Difco酵母提取物和鐵粉。
34.根據(jù)權(quán)利要求26的方法，其中，微生物是真菌。
35.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其中，真菌是Deuteromyota sp.、Ascomycota sp.、Basidiomycota sp.。
36.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，樹(shù)的樹(shù)齡低于100年。
37.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中，樹(shù)的樹(shù)齡約為2-80年。
38.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中，樹(shù)的樹(shù)齡約為3-20年。
39.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中，樹(shù)的樹(shù)齡約為3-12年。
40.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中，樹(shù)不是在原始森林中天然生長(zhǎng)的樹(shù)。
41.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，其中，樹(shù)種是Aquilaria malaccensis、A.agallocha、A.baillonii、A.crassna、A.hirta、A.rostrata、A.beccariana、A.cummingiana、A.filaria、A.khasiana、A.microcarpa、A.grandiflora、A.chinesis或A.sinensis、A.borneensis和A.bancana或棱柱木。
42.用權(quán)利要求1的方法生產(chǎn)的沉香木。
43.用生長(zhǎng)在家庭花園、種植園、溫室或農(nóng)田里的樹(shù)生產(chǎn)的沉香木。
44.一種提純沉香木樹(shù)脂的方法，包括(a)提供權(quán)利要求42或43的沉香木，和(b)從沉香木中提純樹(shù)脂。
45.一種包括用權(quán)利要求44的方法提純的沉香木樹(shù)脂的組合物。
46.一種提純沉香木樹(shù)脂的方法，包括(a)用權(quán)利要求1的方法生產(chǎn)沉香木，和(b)從沉香木中提純樹(shù)脂。
47.一種包括用權(quán)利要求46的方法提純的沉香木樹(shù)脂的組合物。
全文摘要
本發(fā)明提供來(lái)自栽培樹(shù)的沉香木和/或沉香木樹(shù)脂及在栽培樹(shù)中生產(chǎn)沉香木和/或沉香木樹(shù)脂的方法。
文檔編號(hào)A01N25/06GK1541058SQ02810500
公開(kāi)日2004年10月27日 申請(qǐng)日期2002年5月23日 優(yōu)先權(quán)日2001年5月24日
發(fā)明者R·A·布蘭切特, H·H·范貝克, R A 布蘭切特, 范貝克 申請(qǐng)人:明尼蘇達(dá)大學(xué)董事會(huì)