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一種含有g(shù)b1蛋白融合標(biāo)簽的快速克隆及表達(dá)質(zhì)粒載體的制作方法技術(shù)資料下載

技術(shù)編號:413250

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技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種克隆及蛋白表達(dá)質(zhì)粒載體,即一種含有GBl蛋白融合標(biāo)簽的快速克隆及蛋白表達(dá)質(zhì)粒載體。背景技術(shù)傳統(tǒng)的克隆方法是通過將質(zhì)粒載體同目的基因片段分別用相同的雙酶切消化后產(chǎn)生2-4個堿基的粘性末端,利用連接酶將互補的粘性末端進行連接,隨后轉(zhuǎn)化大腸桿菌細(xì)胞,表達(dá)純化蛋白。由于粘性末端長度比較短,后續(xù)必須通過T4 DNA連接酶將載體和目的基因片段進行連接,并且在此過程中可能會有部分載體發(fā)生自連接。這種方法克隆基因 大約需要兩到三天時間。為了實現(xiàn)不依賴于連接酶的克隆方法,就需要構(gòu)建一...
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