一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液的制作方法
【專利摘要】一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下重量份的原料組成：艾沙康唑0.01～0.5份、增溶劑0.1～10份、聚乙二醇400 2～10份、水90～99.8份；本發(fā)明提供的眼用艾沙康唑納米膠束溶液，其通過艾沙康唑與聚乙二醇400、增溶劑及水簡單的混合，由增溶劑自聚集形成艾沙康唑納米膠束；艾沙康唑納米膠束的平均粒徑小于20nm，物理化學性質穩(wěn)定，可顯著促進艾沙康唑納米膠束的在角膜的吸收，由于其眼角膜吸收更好，抗真菌效果更好。本發(fā)明使用聚乙二醇400作為助溶劑，不涉及其他有機溶劑，納米膠束制備完成后不需要特殊的處理，即可直接的使用，大大簡化了的膠束制備的步驟。
【專利說明】
一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液
技術領域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥領域，涉及一種可供滴眼使用的艾沙康唑膠束溶液，特別涉及一 種能夠促進艾沙康唑角膜吸收的低分子納米膠束溶液及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 真菌性角膜炎是一類嚴重威脅患者視力的感染性眼部疾病，多發(fā)于發(fā)展中國家， 在我國已成為角膜盲的首要病因，尤其是在農業(yè)人口較多的我省真菌性角膜炎的發(fā)病率一 直居高不下。但市場上眼部抗真藥物制劑十分匱乏，目前也僅有那他霉素混懸劑的療效比 較確切，可供患者使用。艾沙康唑（Isavuconazole)是一種三唑類的抗真菌新藥，在體內外 表現出強大的抗真菌活性，尤其是對于曲霉菌和毛霉菌。與其他抗真菌藥物相似，艾沙康唑 疏水性強，不易制成水溶液型滴眼劑，如果以混懸劑進行給藥，一般吸收效果很差，刺激性 也較強，而且制劑的穩(wěn)定性通常也較差。
[0003] 具有親水性表面的納米膠束(NanomicelIs，NMs)可將難溶性藥物包裹于親脂性 內核，進而均勻地分散于水相之中，形成穩(wěn)定的膠束溶液。匪s還具有載藥量高和生物相容 性好的特點，并能夠顯著促進藥物在角膜的吸收，十分適合作為艾沙康唑的眼部傳遞載體。 目前還沒有關于艾沙康唑納米膠束的報道。

【發(fā)明內容】

[0004] 本發(fā)明的目的就在于為解決現有技術的不足而提供一種含有艾沙康唑的眼用抗 真菌納米膠束溶液及它的制備方法。
[0005] 本發(fā)明的目的是以下述技術方案實現的： 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下重量份的原料組成:艾沙康唑 0.01~0.5份、增溶劑0.1~10份、聚乙二醇400 2~10份、水90~99.8份;優(yōu)選的，由以下重 量份的原料組成:艾沙康唑0.1~0.3份、增溶劑2~6份、聚乙二醇400 5~7份、水93~96份。
[0006] 所述增溶劑為15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯;或15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯和吐溫80 的組合，15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯和吐溫80的質量比為（1.5-5.5):1;或15-羥基硬脂酸聚 乙二醇酯和泊洛沙姆407的組合，15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆407的質量比為 (2.5-6.5):1〇
[0007] 所述納米膠束平均粒徑小于20 nm。
[0008] 如上所述的含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，它還包括0.003-0.05份的 抑菌劑。
[0009] 所述抑菌劑為苯扎氯銨、苯扎溴銨和羥苯乙酯中的任一種。
[0010] 根據上述的含有艾沙康唑的，不含抑菌劑眼用納米膠束抗真菌溶液的制備方法， 包括以下步驟： ① 按配方稱取各原料； ② 將艾沙康唑加入至聚乙二醇400，加熱至80-120°C使完全溶解； ③ 將增溶劑加入至溶有艾沙康唑的聚乙二醇400中，攪拌均勻； ④ 將水加入到上述攪拌均勻的增溶劑和聚乙二醇400中，并攪拌，直至制得穩(wěn)定、均 勻、透明的膠束溶液； ⑤ 將上述制得的膠束溶液以無菌濾膜過濾，即得含有艾沙康唑的眼用抗真菌納米膠束 溶液。
[0011] 上述含有艾沙康唑和抑菌劑的眼用納米膠束抗真菌溶液的制備方法，包括以下步 驟： ① 按配方稱取各原料； ② 將艾沙康唑加入至聚乙二醇400，加熱至80-120°C使完全溶解； ③ 將增溶劑加入至溶有艾沙康唑的聚乙二醇400中，攪拌均勻； ④ 將抑菌劑溶于40-60 °C的熱水； ⑤ 將溶有抑菌劑的熱水加入到上述攪拌均勻的增溶劑和聚乙二醇400中，并攪拌，直 至制得穩(wěn)定、均勻、透明的膠束溶液； ⑥ 將上述制得的膠束溶液以無菌濾膜過濾，即得含有艾沙康唑的眼用抗真菌納米膠束 溶液。
[0012] 本發(fā)明提供的眼用艾沙康唑納米膠束溶液，其通過艾沙康唑與聚乙二醇400、增 溶劑及水簡單地混合，由增溶劑自聚集形成艾沙康唑納米膠束;艾沙康唑納米膠束的平均 粒徑小于20nm，物理化學性質穩(wěn)定，可顯著促進艾沙康唑納米膠束的在角膜的吸收，由于其 眼角膜吸收更好，抗真菌效果更好。本發(fā)明使用聚乙二醇400作為助溶劑，不涉及其他有機 溶劑，納米膠束制備完成后不需要特殊的處理，即可直接的使用，大大簡化了膠束制備的步 驟。
【附圖說明】
[0013] 圖1是本發(fā)明實施例2制備的艾沙康唑納米膠束的粒徑分布圖； 圖2是艾沙康挫納米膠束的zeta電位分布圖； 圖3是0.2%艾沙康唑納米膠束和0.2%艾沙康唑混懸劑單次滴眼后兔眼角膜中藥物濃度 隨時間的變化曲線(n=6)。
【具體實施方式】
[0014] 實施例1 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下重量份的原料組成:艾沙康唑 0.01~0.5份、增溶劑0.1~10份、聚乙二醇400 2~10份、水90~99.8份，優(yōu)選的：由以下重 量份的原料組成:艾沙康唑0.1~0.3份、增溶劑2~6份、聚乙二醇400 5~7份、水93~96份。 [0015] 所述增溶劑為15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯(Kolliphor ? HS 15，HS 15);或15-羥 基硬脂酸聚乙二醇酯和吐溫80的組合，15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯(HS-15)和吐溫80的質量 比為（1.5-5.5) : 1;或15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆407的組合，15-羥基硬脂酸聚 乙二醇酯和泊洛沙姆407(Pluronic F127)的質量比為(2.5-6.5) : 1。
[0016]使用聚乙二醇400作為助溶劑，不涉及其他有機溶劑，納米膠束制備完成后不需 要特殊的處理，即可直接使用，大大簡化了膠束制備的步驟；15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯是 一種具有很高生物相容性的新型增溶劑，具有很強地增溶能力和促進上皮細胞吸收藥物的 能力，實驗證明，將15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯用于艾沙康唑的納米膠束制備中，能夠在水 中形成的10-20nm的納米膠束，低于人角膜基質內親水性網狀屏障結構的臨界尺寸(20-40 nm)，非常適合作為難溶性艾沙康唑的角膜傳遞載體;而加入一定的比例的吐溫80和泊洛沙 姆可改善15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯的增溶能力，使其載藥能力進一步地提高。
[0017] 采用上述配方制取的艾沙康唑的眼用納米膠束平均粒徑小于20nm，由于其粒徑較 小，很容易被眼角膜吸收。采用高效液相法(HPLC)測定艾沙康唑的眼用納米膠束的中藥物 的含量，測得艾沙康唑的包封率為98.7%。
[0018] 根據需求，還可以在配方中加入0.003-0.05份的抑菌劑，抑菌劑可選自苯扎氯銨、 苯扎溴銨和輕苯乙酯中的任一種。
[0019] 上述艾沙康唑的眼用納米膠束優(yōu)選采用下述方法制備： ① 按配方稱取各原料； ② 將艾沙康唑加入至聚乙二醇400，加熱至80-120°C使完全溶解； ③ 將增溶劑加入至溶有艾沙康唑的聚乙二醇400中，攪拌均勻； ④ 將抑菌劑溶于40-60 °C的熱水； ⑤ 將溶有抑菌劑的熱水加入到上述攪拌均勻的增溶劑和聚乙二醇400中，并攪拌，直 至制得穩(wěn)定、均勻、透明的膠束溶液； ⑥ 將上述制得的膠束溶液以無菌濾膜過濾，即得含有艾沙康唑的眼用抗真菌納米膠束 溶液，其平均粒徑小于20nm〇
[0020] 實施例2 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下原料組成:艾沙康唑〇.2g、HS-15 5g、聚乙二醇400 5g、水99.8g，按照以下步驟進行制備： ① 按配方稱取各原料； ② 將艾沙康唑加入至聚乙二醇400,加熱至KKTC使完全溶解； ③ 將增溶劑HS-15加入至溶有艾沙康唑的聚乙二醇400中，攪拌均勻； ④ 將水加入到上述攪拌均勻的增溶劑和聚乙二醇400中，并攪拌，直至制得穩(wěn)定、均 勻、透明的膠束溶液； ⑤ 將上述制得的膠束溶液以無菌濾膜過濾，即得含有艾沙康唑的眼用抗真菌納米膠束 溶液，無色透明，pH為5.86。
[0021] 實施例3 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下原料組成:艾沙康唑〇.2g、HS-15 5g、吐溫80 2.5g、聚乙二醇400 5g、水99.8g，制備方法同實施例2。
[0022] 實施例4 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下原料組成:艾沙康唑〇. 5g、HS-15 10g、聚乙二醇400 9g、水99g，制備方法同實施例2。
[0023] 實施例5 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下原料組成:艾沙康唑〇. 5g、HS-15 6g、吐溫80 4g、聚乙二醇400 9g、水99g，制備方法同實施例2。
[0024] 實施例6 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下原料組成:艾沙康唑〇.〇5g、HS-15 2g、聚乙二醇400 4g、水95g，制備方法同實施例2。
[0025] 實施例7 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下原料組成:艾沙康唑〇.〇5g、HS-15 2g、吐溫80 lg、聚乙二醇400 4g、水95g，制備方法同實施例2。
[0026] 實施例8 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，由以下原料組成:艾沙康唑〇.2g、HS-15 5g、泊洛沙姆407 1.25g、聚乙二醇400 5g、水99.8g，制備方法同實施例2。
[0027] 試驗例 一、 納米膠束粒徑的測量 采用Zetasizer Nano ZS-90型納米粒度儀測定實施例2-8制備的艾沙康唑納米膠束的 粒徑及zeta電位，粒徑分布及zeta電位分布圖如圖1、圖2和表1所示：
二、 包封率的測量 采用高效液相法(HPLC)測定實施例2-8制備的艾沙康唑納米膠束中的藥物包封率，結 果見表2。
[0028] 三、 兔眼藥動學研究 采用0.2%的艾沙康唑混懸液作為對照制劑，對比研究0.2%的艾沙康唑混懸液和實施例 2制備的0.2%艾沙康唑納米膠束滴眼后在兔眼角膜中的藥動學。如圖3所示艾沙康唑納米膠 束極大地促進了艾沙康唑在兔眼角膜的吸收。
[0029] 四、藥物刺激性實驗 1. 試驗藥物:實施例7(0.05%)、實施例3(0.2 %)、實施例4(0.5%)和實施例8(0.2 %)制 備的納米膠束溶液； 2. 對照藥物:生理鹽水； 3. 給藥方法:健康新西蘭白兔，左眼給予試驗藥物，右眼給予生理鹽水； 4. 給藥方案:每2小時1次，每日給藥8:30開始，19:30結束，每次50uL，持續(xù)給藥2周； 5 .動物編號及分組：1-6號動物:給予"實施例7"藥物;7-12號動物:給予"實施例3"藥 物;12-18號動物:給予"實施例4"藥物;19-24號動物:給予"實施例8"藥物； 6.檢查方法:參照"HGPT4-1《化學藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則》" 眼刺激性試驗項下"眼刺激反應分值標準"和"眼刺激性評價標準"（表3和表4)規(guī)定的評分 細則及評價標準對兔眼進行給藥前和給藥后的檢查評分及刺激性評價。末次給藥后1、2、4、 8、12、24、48、72小時后進行刺激評分檢查和熒光染色檢查。
在整個試驗過程中給予試驗藥物和對照藥物的各眼各時間點的刺激反應平均總積分 均小于2分。整個試驗過程中也未發(fā)現明顯的角膜、結膜及其他眼部組織損傷或動物死亡。
[0031] 8.結論： 本發(fā)明試驗藥物無刺激性。
[0032] 五、藥效學試驗 1.接種孢子：接種前，耳緣靜脈注射1%戊巴比妥鈉溶液(40mg/kg /只）麻醉;鹽酸丁卡 因滴眼液滴眼1次，左氧氟沙星滴眼液滴眼1次(間隔5min)。右眼）角膜中央基質內注射曲霉 菌(艾沙康唑敏感的臨床分離菌株)孢子懸液1〇〇μ1 (1.0 XIO8個/ml)。接種完成后，結膜下 注射曲安奈德注射液(40mg/ml，0.3ml): 12mg/右眼。
[0033] 模型鑒定:真菌孢子接種后3天，病灶刮片檢查，培養(yǎng)真菌陽性，細菌陰性，模型建 立成功。
[0034] 分組及給藥:模型建立成功后，動物模型進行隨機分為3組，每組10只動物，分別給 予本發(fā)明實施例3艾沙康唑膠束溶液(試驗組）、那特真(5%那他霉素滴眼液，愛爾康公司，陽 性對照組)生理鹽水(空白對照組），給藥方法:每日8:30-19:30，每2h給藥1次，每次50uL;比 較兩者的治愈率和平均治愈時間（自給藥之日起至治愈當天的自然天數）。
[0035] 試驗結果： 試驗組：10只動物穿孔1例，治愈率90%，平均治愈時間為11.2 ±4.46天(/3=9); 陽性對照組：10只動物，穿孔2例，治愈率80%，平均治愈時間：為10.8 ± 3.11天(/3=8); 空白對照組：10只動物穿孔6例，治愈率40%，平均治愈時間為13.2 ± 3.89天(/3=5)。 [0036] 6.實驗結論： 試驗組的治愈率略高于陽性對照組，二者均遠高于空白對照組，各組之間的治愈時間 沒有顯著性差異，但是試驗組和陽性對照組的平均治愈時間比空白對照組少2天左右。初步 認為，0.2%的艾沙康唑納米膠束對敏感曲霉菌真菌引起的真菌性角膜炎模型有很好的治療 作用。
[0037]本發(fā)明實施例9-24含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液的配方見表5-6,其 余同實施例2。

以上所述的僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本領域的技術人員來說，在不 脫離本發(fā)明整體構思前提下，還可以作出若干改變和改進，這些也應該視為本發(fā)明的保護 范圍。
【主權項】
1. 一種含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，其特征在于由以下重量份的原料組 成:艾沙康唑0.01~0.5份、增溶劑0.1~IO份、聚乙二醇400 2~IO份、水90~99.8份。2. 根據權利要求1所述的含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，其特征在于由以 下重量份的原料組成:艾沙康唑〇. 1~〇. 3份、增溶劑2~6份、聚乙二醇400 5~7份、水93~ 96份。3. 根據權利要求1-2任一項所述的含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，其特征 在于所述增溶劑為15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯;或15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯和吐溫80的組 合，15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯和吐溫80的質量比為（1.5-5.5):1;或15-羥基硬脂酸聚乙二 醇酯和泊洛沙姆407的組合，15-羥基硬脂酸聚乙二醇酯和泊洛沙姆407的質量比為（2.5-6.5):1〇4. 根據權利要求1-2任一項所述的含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，其特征 在于:它還包括0.003-0.05份的抑菌劑。5. 根據權利要求4所述的含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液，其特征在于所述 抑菌劑為苯扎氯銨、苯扎溴銨和羥苯乙酯中的任一種。6. 根據權利要求1-3任一項所述的含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液的制備方 法，其特征在于包括以下步驟： ① 按配方稱取各原料； ② 將艾沙康唑加入至聚乙二醇400，加熱至80°C_120°C使其完全溶解； ③ 將增溶劑加入至溶有艾沙康唑的聚乙二醇400中，攪拌均勻； ④ 將水加入到上述攪拌均勻的增溶劑和聚乙二醇400中，并攪拌，直至制得穩(wěn)定、均 勻、透明的膠束溶液； ⑤ 將上述制得的膠束溶液以無菌濾膜過濾，即得含有艾沙康唑的眼用抗真菌納米膠束 溶液。7. 根據權利要求4-5任一項所述的含有艾沙康唑的眼用納米膠束抗真菌溶液的制備方 法，其特征在于包括以下步驟： ① 按配方稱取各原料； ② 將艾沙康唑加入至聚乙二醇400，加熱至80°C_120°C使完全溶解； ③ 將增溶劑加入至溶有艾沙康唑的聚乙二醇400中，攪拌均勻； ④ 將抑菌劑溶于40-60 °C的熱水； ⑤ 將溶有抑菌劑的熱水加入到上述攪拌均勻的增溶劑和聚乙二醇400中，并攪拌，直 至制得穩(wěn)定、均勻、透明的膠束溶液； ⑥ 將上述制得的膠束溶液以無菌濾膜過濾，即得含有艾沙康唑的眼用抗真菌納米膠束 溶液。
【文檔編號】A61K47/34GK105943500SQ201610535420
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年7月8日
【發(fā)明人】周天洋, 張俊杰, 王麗婭
【申請人】河南省立眼科醫(yī)院