亚洲成年人黄色一级片,日本香港三级亚洲三级,黄色成人小视频,国产青草视频,国产一区二区久久精品,91在线免费公开视频,成年轻人网站色直接看

一種煙草根結(jié)線蟲病的生物防治方法及其生防制劑的制作方法

文檔序號(hào):9894331閱讀:1267來源:國(guó)知局
一種煙草根結(jié)線蟲病的生物防治方法及其生防制劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
:
[0001]本發(fā)明屬于煙草病害防治領(lǐng)域,具體涉及一種煙草根結(jié)線蟲病的生物防治方法及其生防制劑。
技術(shù)背景:
[0002]煙草根結(jié)線蟲病是由根結(jié)線蟲侵入煙株根部而引起的。此線蟲屬線形動(dòng)物門,線蟲綱、墊刃目,墊刃總科、異皮科,根結(jié)線蟲屬。我國(guó)以南方根結(jié)線蟲(Meloidogyneincongnita Chitwood)為害為主。
[0003]煙草根結(jié)線蟲病在苗期和大田期均可發(fā)生,多在大田成株期發(fā)病。染病煙株首先是根部形成大小不等的根瘤,須根上初生根瘤為白色。嚴(yán)重時(shí)整個(gè)根系腫脹變粗呈雞爪狀,病根后期中空腐爛,僅存留根皮和木質(zhì)部,其中包含大量不同發(fā)育時(shí)期的病原線蟲。病株葉片從葉尖和邊緣開始干枯內(nèi)卷,葉色變淡,生長(zhǎng)不良似缺肥狀。須根上長(zhǎng)出形狀、大小不等的根瘤,主根、駐叉根粗腫呈雞爪狀。高溫干旱癥狀明顯,重病株葉片發(fā)黃下垂甚至枯死。
[0004]煙草根結(jié)線蟲病在云南各煙區(qū)均有為害,上世紀(jì)90年代末“雙控”以前,因輪作困難等因素,發(fā)病面積較大,“雙控”后煙草種植面積減少,發(fā)病面積在減少。近年來發(fā)生面積有增加的趨勢(shì),已成為為害煙草生產(chǎn)的主要病害之一。根結(jié)線蟲除直接為害煙株外,還會(huì)因線蟲在煙株根部造成傷口而誘發(fā)其他根莖部病害發(fā)生,如煙草黑脛病、根黑腐病、青枯病等,使為害加重。
[0005]目前,煙草根結(jié)線蟲病的防治主要依靠化學(xué)農(nóng)藥、抗病品種和農(nóng)業(yè)防治措施。化學(xué)農(nóng)藥防治往往造成環(huán)境污染并降低煙草品質(zhì)和食用安全性;抗病品種選育難度大、成本高,且大多只能抗根結(jié)線蟲病單個(gè)生理小種,在其他生理小種入侵時(shí)存在大面積爆發(fā)的危險(xiǎn);農(nóng)業(yè)防治措施費(fèi)工費(fèi)時(shí),防治效果普遍不理想。生物防治方法不僅能夠有效防治煙草根結(jié)線蟲病,還能有效保護(hù)生態(tài)環(huán)境,提高煙草品質(zhì)和食用安全性。開發(fā)煙草根結(jié)線蟲病生物防治方法前景廣闊,對(duì)煙農(nóng)和煙草種植產(chǎn)業(yè)良性發(fā)展具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

:
[0006]本發(fā)明的目的在于提供一種煙草根結(jié)線蟲病的生物防治方法及其生防制劑。
[0007]本發(fā)明的煙草根結(jié)線蟲病的生物防治方法包括:煙草育苗時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌定殖、煙苗大田移栽時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌定殖、煙草植株生長(zhǎng)期根結(jié)線蟲拮抗菌定殖,具體為:
[0008]A:煙草育苗時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌定殖:在煙草育苗時(shí)將根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑拌入市購的漂浮育苗基質(zhì)中進(jìn)行育苗,煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑拌入育苗基質(zhì)的量為每10kg基質(zhì)中加入0.5-5kg;或者在煙草出苗后按每畝0.2-1.0kg噴施根結(jié)線蟲拮抗菌劑200-1000倍稀釋液,每隔7-10天噴施I次,噴2-3次。
[0009]B:煙苗大田移栽時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌定殖:在煙苗大田移栽前塘施煙草根結(jié)線蟲拮抗生物有機(jī)肥或移栽后灌施煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑;煙草根結(jié)線蟲拮抗生物有機(jī)肥在煙草移栽前按每畝20-100kg施入塘內(nèi);煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑按每畝2-1kg在煙苗移栽后稀釋200-1000倍液灌施。
[0010]C:煙草大田生長(zhǎng)期根結(jié)線蟲拮抗菌定殖:在煙草大田生長(zhǎng)期追施煙草根結(jié)線蟲拮抗生物有機(jī)肥和/或煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑;煙草根結(jié)線蟲拮抗生物有機(jī)肥在煙株周圍開塘穴施,每畝20-100kg,團(tuán)棵期和旺長(zhǎng)期按每畝20-100kg各追施I次煙草根結(jié)線蟲拮抗生物有機(jī)肥;或者將煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑按每畝2-10kg稀釋200-1000倍后灌施煙草根部,團(tuán)棵期和旺長(zhǎng)期按每畝2-10kg稀釋200-1000倍后各追施I次煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑。
[0011 ]上述A步驟所述的煙草育苗時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌的兩種定殖方式能單獨(dú)采用一種,亦能兩種同時(shí)米用;
[0012]上述B步驟所述的煙苗大田移栽時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌的定殖,能單獨(dú)采用煙草根結(jié)線蟲拮抗生物有機(jī)肥或煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑進(jìn)行定殖,亦能兩者同時(shí)采用進(jìn)行定殖;
[0013]上述C步驟所述的煙草大田生長(zhǎng)期根結(jié)線蟲措抗菌定殖,能單獨(dú)追施含煙草根結(jié)線蟲拮抗菌劑的生物有機(jī)肥或煙草根結(jié)線蟲拮抗菌劑,亦能兩者同時(shí)追施。
[0014]所述的煙草根結(jié)線蟲的生物防治方法,在煙草苗育苗時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌定殖、煙苗大田移栽時(shí)根結(jié)線蟲拮抗菌定殖、煙草植株生長(zhǎng)期根結(jié)線蟲拮抗菌定殖三個(gè)過程能單獨(dú)采用其中一部分措施,亦能全部措施一同采用。
[0015]用于本發(fā)明的煙草根結(jié)線蟲病的生物防治方法中的生防制劑包括:煙草根結(jié)線蟲拮抗復(fù)合微生物菌劑和煙草根結(jié)線蟲拮抗生物有機(jī)肥;該生防制劑經(jīng)由如下步驟得到:
[0016]—、分別將保藏在北京市海淀區(qū)中關(guān)村北一條13號(hào)、中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的保藏號(hào)為CGMCC N0.1213、保藏日為2004年8月30日的巨大芽孢桿菌(BaciIIus megaterium)Ap25株;保藏號(hào)為CGMCC N0.1211、保藏日為2004年8月30日的褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)YKT41 株;保藏號(hào)為CGMCC N0.1212、保藏日為2004 年8月30日的越南伯克霍爾德氏菌(Burkholderia vietnamiensis)P418株;以及保藏在北京市朝陽區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)、中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的保藏號(hào)為CGMCC N0.5938、保藏日為2012年3月27日的綠色木霉(Trichoderma viride)L_10株;保藏號(hào)為CGMCC N0.7938、保藏日 2013年7月 19 日為的哈茨木霉(Trichoderma harzianum)Tll-ff株五種菌種分別按常規(guī)方法進(jìn)行液體或固體發(fā)酵;具體如下:
[0017]1、巨大芽孢桿菌Ap25的液體發(fā)酵
[0018]巨大芽孢桿菌Ap25的液體發(fā)酵按以下步驟進(jìn)行:
[0019](I)斜面菌種:采用固體無氮培養(yǎng)基(K2HP04 0.5g、MgS04.7H20 0.2g、NaCl
0.02g、CaC12 0.2g、Fe_EDTA 0.066g、Na2Mo04 0.002g、L_谷氨酸(或味精)0.05g、葡萄糖5g、瓊脂15g、pH7.2-7.4)將菌種接種在試管培養(yǎng)基中,28-32°C培養(yǎng)18-24小時(shí)。
[0020](2)搖瓶菌種:稱取蛋白胨1g、酵母浸出物Ig、氯化鈣0.2g配制成pH7.0的液體培養(yǎng)基,將斜面菌種的單菌落接種在液體無氮培養(yǎng)基中置搖床上28-32Γ培養(yǎng)18-24小時(shí)。
[0021](3)液體發(fā)酵:采用含蔗糖I %、玉米粉4%、黃豆餅粉I %、硫酸銨0.2%、硫酸鎂
0.02%、磷酸二氫鉀0.1 %、磷酸氫二鉀0.1 % (前述物料均按質(zhì)量百分比添加)、pH7.2-7.4培養(yǎng)基,121°C滅菌20min,將搖瓶液體培養(yǎng)的菌種接種到發(fā)酵罐內(nèi)(接種量為2-10% ),28-32°C條件下培養(yǎng),每分鐘通發(fā)酵罐容積1-1.5倍的氣量,攪拌速度為150-250r/min,培養(yǎng)時(shí)間36-48小時(shí)。在接種量為10%,30°C恒溫培養(yǎng)的情況下,32小時(shí)進(jìn)入穩(wěn)定期,此時(shí)可結(jié)束發(fā)酵,獲得巨大芽孢桿菌Ap25的孢子發(fā)酵液,留作配制復(fù)合微生物菌劑用。
[0022]2、褐球固氮菌YKT41的液體發(fā)酵
[0023]褐球固氮菌YKT41的液體發(fā)酵按以下步驟進(jìn)行:
[0024](I)斜面菌種:采用固體無氮培養(yǎng)基(K2HP04 0.64g,KH2PO4 0.16g,MgS04.7H200.2g、NaCl 0.2g、CaS04.2H20 0.05g^Na2MoO4 O-OOlg^FeSO4 0.03g、蔗糖20g、瓊脂 15g、水
1000ml、pH7.0-7.2),將菌種接種在試管培養(yǎng)基中,28-32 °C培養(yǎng)18-24小時(shí)。
[0025](2)搖瓶菌種:采用液體無氮培養(yǎng)基(K2HP04 0.64g,KH2PO4 0.16g,MgS04.7H200.2g、NaCl 0.2g、CaS04.2H20 0.05g^Na2MoO4 O-OOlg^FeSO4 0.03g、蔗糖20g、水 1000ml、pH7.0-7.2),將斜面菌種的單菌落接種在液體無氮培養(yǎng)基中置搖床上28-32°C培養(yǎng)18-24小時(shí)。
[0026](3)液體發(fā)酵:采用含蔗糖I %、玉米粉4%、黃豆餅粉I %、硫酸銨0.2%、硫酸鎂
0.02%、磷酸二氫鉀0.1 %、磷酸氫二鉀0.1 % (前述物料均按質(zhì)量百分比添加),pH7.0-7.2的培養(yǎng)基,121°C滅菌20min,將搖瓶液體培養(yǎng)的菌種接種到發(fā)酵罐內(nèi)(接種量為2-10%),28-32 0C條件下培養(yǎng),每分鐘通發(fā)酵罐容積1-1.5倍的氣量,攪拌速度為150-250r/min,培養(yǎng)時(shí)間36-48小時(shí)。在接種量為10 %,300C恒溫培養(yǎng)的情況下,32小時(shí)進(jìn)入穩(wěn)定期,此時(shí)作為發(fā)酵終點(diǎn),獲得褐球固氮菌YKT41的孢子發(fā)酵液,留作配制復(fù)合微生物菌劑用。
[0027]3、越南伯克霍爾德氏菌P418的液體發(fā)酵
[0028]越南伯克霍爾德氏菌P418的液體發(fā)酵按以下步驟進(jìn)行:
[0029](I)斜面菌種:采用固體無氮培養(yǎng)基(K2HP04 0.5g、MgS04.7H20 0.2g、NaCl 0.02g、CaCl2 0.2g、Fe-EDTA 0.066g,Na2MoO4 0.002g、L_谷
當(dāng)前第1頁1 2 3 4 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評(píng)論。精彩留言會(huì)獲得點(diǎn)贊!
1