分離測定丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種分離測定丁酸氯倍他松及其制劑中工藝 雜質(zhì)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 丁酸氯倍他松是由英國的葛蘭素史克公司開發(fā)，用于短期治療和控制濕疹和皮 炎，包括特應(yīng)性濕疹、原發(fā)刺激性和過敏性皮炎。最早于1975年在英國上市，后陸續(xù)在愛爾 蘭、加拿大、比利時、德國、意大利、瑞士、荷蘭、日本等國家上市，但未在美國上市。2011年5 月5日，GLAXO WELLCOME制藥公司在國內(nèi)獲得進口注冊批件，原料藥未在國內(nèi)上市，丁酸氯 倍他松化學(xué)名21-氯-9α-氟-17α-羥基-16β_甲基孕留-1,4-二烯-3,11，20_三酮丁酸酯，分 子式為C26H32CIFO5。丁酸氯倍他松結(jié)構(gòu)式為：
[0003]
[0004] 通常來說，一種藥物雜質(zhì)總含量應(yīng)小于1.0%，單個雜質(zhì)含量要小于0.1 % ;對于制 備丁酸氯倍他松過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)或引入的有關(guān)物質(zhì)，不論是在原料藥還是制劑中均需要 進行嚴格控制。目前公開的分離測定丁酸氯倍他松及其相關(guān)雜質(zhì)的方法中，其中公開的雜 質(zhì)Α與本申請中雜質(zhì)列表中的雜質(zhì)Α、公開的雜質(zhì)F與本發(fā)明雜質(zhì)列表中的雜質(zhì)D結(jié)構(gòu)相同， 其余均不同，且方法中雜質(zhì)A與雜質(zhì)F、雜質(zhì)C與雜質(zhì)D完全不能分離、丁酸氯倍他松主峰與相 鄰雜質(zhì)也不能很好的分離。
[0005] 因此到目前為止，還沒有公開的方法報道可同時分離本申請中A-G和I的雜質(zhì)。因 此開發(fā)一種有效分離丁酸氯倍他松及其制劑中8種工藝雜質(zhì)的方法，對于藥物的質(zhì)量控制 及降解途徑研究都十分有意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種分離測定丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜 質(zhì)，用高效液相色譜法分離測定丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜質(zhì)A-G和I，可同時實現(xiàn)丁 酸氯倍他松及A-G和I的分離和檢測，該方法分離度好，專屬性強，靈敏度高;且操作簡單，具 有簡便、快速的優(yōu)點。
[0007] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案為：
[0008] 分離測定丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜質(zhì)的方法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為 固定相，以流動相A和流動相B為流動相梯度洗脫進行固液分離，所述制劑中工藝雜質(zhì)為A-G 和I的一種或多種，具體結(jié)構(gòu)式如下所示：
[or…
[0010] 所述流動相A為無機相，所述的流動相B為有機溶劑。
[0011] 目前公開的分離測定丁酸氯倍他松及其相關(guān)雜質(zhì)的方法中，其中公開的雜質(zhì)A與 本申請中雜質(zhì)列表中的雜質(zhì)A、公開的雜質(zhì)F與本發(fā)明雜質(zhì)列表中的雜質(zhì)D結(jié)構(gòu)相同，其余均 不同，且方法中雜質(zhì)A與雜質(zhì)F、雜質(zhì)C與雜質(zhì)D完全不能分離、丁酸氯倍他松主峰與相鄰雜質(zhì) 也不能很好的分離。本申請中的方法成功解決了丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜質(zhì)A-G和I 的有效分離問題，進而實現(xiàn)了雜質(zhì)有效控制，從根本上保證了產(chǎn)品質(zhì)量。
[0012] 進一步，所述梯度洗脫設(shè)置如下：
[0013]
[0014] 所述流動相A為水，所述流動相B為乙腈。
[0015]作為一種優(yōu)選，所述梯度洗脫設(shè)置如下：
[0016]
[0017] 本發(fā)明的目的之二在于提供一種利用高效液相色譜法分離測定丁酸氯倍他松及 其制劑中工藝雜質(zhì)的方法，采用的色譜柱是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，以流動相A和 流動相B為流動相進行梯度洗脫，進入檢測器進行檢測;所述的流動相A為水，所述的流動相 B為乙腈;所述制劑中工藝雜質(zhì)包括A-G和I的一種或多種。
[0018] 進一步，所述制劑中工藝雜質(zhì)為A-G和I，具體方法包括以下步驟：
[0019] 1)分別取待測樣品丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜質(zhì)A-G和I的對照品，用稀釋劑 溶解制成待測樣品及所述各雜質(zhì)的對照品溶液，分別取待測樣品丁酸氯倍他松及其各工藝 雜質(zhì)對照品溶液進樣，進行高效液相色譜分析，確定待測樣品丁酸氯倍他松及其各雜質(zhì)的 保留時間；
[0020] 2)取供試品加稀釋劑制成供試品溶液，再取稀釋劑作為空白溶液，分別取供試品 溶液及空白溶液進樣，進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，按限度法根據(jù)供試品溶液與對 照品溶液中雜質(zhì)的峰面積比較雜質(zhì)A-G和I的含量。
[0021] 判定結(jié)果:若供試品溶液記錄色譜圖中有與對照品溶液記錄色譜圖中保留時間一 致的色譜峰，其峰面積不得大于對照品溶液中相應(yīng)雜質(zhì)的峰面積，則判為符合規(guī)定。
[0022] 作為一種優(yōu)選，具體可按照以下步驟實現(xiàn)：
[0023] (1)取丁酸氯倍他松適量，用乙腈溶解樣品，配制成每lml含丁酸氯倍他松1.0-3.0mg的樣品溶液；
[0024] (2)選用型號為島津LC-2010AHT的色譜儀，色譜柱型號為YMC-Pack 0DS-A(150X 4.6mm，3μπι)，流動相A為水;流動相B為乙腈;取步驟(1)的樣品溶液10μ1注入液相色譜儀中， 設(shè)置流動相流速為1.5ml/min，檢測波長為241nm，色譜柱柱箱溫度為40°C，按下表1所示的 數(shù)據(jù)進行線性梯度洗脫，完成丁酸氯倍他松有關(guān)物質(zhì)的分離及測定。
[0025] 表1進行線性梯度洗脫流動相A和流動相B的體積
[0026]
[0027] 作為一種優(yōu)選，所述色譜柱選擇的是YMC-Pack 0DS-A色譜柱。
[0028]進一步，在分離測定之前，采用乙腈溶解待測樣品，配制的待測樣品濃度為： 1·Omg/ml-3·Omg/ml〇
[0029] 進一步，其特征在于，所述色譜柱的規(guī)格為150 X 4.6mm，3μηι。
[0030] 進一步，所述流動相流速為0 · 5-2 · Oml/min。
[0031] 進一步，所述檢測器為紫外檢測器，所述檢測器的檢測波長為210-280nm。
[0032] 進一步，所述色譜柱柱箱溫度為25-45°C。
[0033]進一步，所述稀釋劑為乙腈。
[0034] 本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明提供的分離測定丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜 質(zhì)的方法，采用高效液相色譜法對丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜質(zhì)A-G和I進行分離和檢 測，可在44分鐘內(nèi)將丁酸氯倍他松及其制劑中工藝雜質(zhì)A-G和I完全分離并進行檢測，該色 譜系統(tǒng)可將樣品所有雜質(zhì)和堿、光照的劇烈降解條件下產(chǎn)生的雜質(zhì)均能很好分離，表明本 方法的靈敏度及專屬性好。本發(fā)明解決了丁酸氯倍他松及其制劑的8種工藝雜質(zhì)的分離測 定問題，從而確保了丁酸氯倍他松及其制劑的質(zhì)量可控，并最終確定產(chǎn)品的安全有效，從根 本上保證了產(chǎn)品質(zhì)量。該方法分離度好，且準確度高;且操作簡單，具有簡便、快速的優(yōu)點。
【附圖說明】
[0035] 圖1為空白溶劑的高效液相色譜圖。
[0036] 圖2為丁酸氯倍他松及雜質(zhì)A-G和I的混合溶液高效液相色譜圖。
[0037] 圖3為丁酸氯倍他松對比試驗的高效液相色譜圖。
[0038] 圖4為丁酸氯倍他松乳膏空白輔料的高效液相色譜圖。
[0039] 圖5為丁酸氯倍他松乳膏的高效液相色譜圖。
[0040] 圖6為丁酸氯倍他松堿降解的高效液相色譜圖。
[0041 ]圖7為丁酸氯倍他松光降解的高效液相色譜圖。
【具體實施方式】
[0042] 以下將參照附圖，對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行詳細描述。優(yōu)選實施例中未注明具 體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，所舉實施例是為了更好地對本發(fā)明的內(nèi)容進行說 明，但并不是本發(fā)明的內(nèi)容僅限于所舉實施例。所以熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員根據(jù)上述發(fā)明 內(nèi)容對實施方案進行非本質(zhì)的改進和調(diào)整，仍屬于本發(fā)明的保護范圍。
[0043] 以下實施例中，采用的儀器及色譜條件如下：
[0044] 高效液相色譜儀:島津LC-2010AHT
[0045] 色譜柱：YMC-Pack ODS-A( 150X4.6mm，3μπι)
[0046] 流動相:流動相Α:水；
[0047] 流動相B:乙腈。
[0048] 流動相A和流動相B按下表進行線性梯度洗脫：
[0049]
[0050] 檢測器檢測波長:241nm [0051 ]流動相流速：1 · 5ml/min
[0052] 色譜柱柱箱柱溫:4(TC
[0053] 進樣量：10μ1
[0054] 稀釋劑(溶解對照品和待測樣品的溶劑）：乙腈。
[0055] 實施