一種人體對日照反應的檢測試劑盒和方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及基因檢測，具體涉及人體日照反應基因檢測試劑盒。
【背景技術】
[0002] 日光對皮膚造成的損害有很多種。首先是光老化，使得皮膚變粗糙，導致色素沉 著、毛細血管擴張。其次是引起光線性皮膚病，如多形日光疹、慢性光化性皮炎、類網(wǎng)織細 胞增生癥等。最后，光線會加劇很多皮膚病的病情，這些疾病包括色素性皮膚病（如雀斑、 黃褐斑）、脂溢出性皮膚?。ㄈ琊畀彛?、結締組織病（如紅斑狼瘡、皮肌炎）、皮膚癌（基底細 胞癌、鱗狀細胞癌等）。 在我國，皮膚癌作為一種惡性腫瘤占全部惡性腫瘤發(fā)病的1. 5%，南方地區(qū)高于北方地 區(qū)。不適量的日光照射是皮膚健康的主要原發(fā)因素。人體本身對日光，尤其是其中的紫外 線敏感程度不同，也導致皮膚患病風險不同。
[0003] 隨著我國人民群眾生活水平的日益提高，越來越多的人熱衷各種戶外運動和旅 游，這也無形中加劇了皮膚病的隱患。同時，越來越多的人，尤其是女士對自身皮膚的美容 美白要求越來越高。這都需要我們從更根本的角度來對自身皮膚對抗日照的機理有清晰的 了解。

【發(fā)明內容】

[0004] 有鑒于此，本發(fā)明提供了一種人體對日照反應的基因檢測試劑盒，該試劑盒對受 測者的相關基因進行檢測，分析得到其對日照的敏感程度，評估皮膚健康風險，且PCR擴增 反應在同一臺PCR儀上同步進行并具備檢測的高效性、特異性。
[0005] -種日照反應基因檢測試劑盒，包括盒體及盒體內單獨存放的試劑，存放的試劑 包括： (1)針對3個基因 SNP多態(tài)位點的PCR反應引物組： 針對SNP RS12203592的引物組在： 5, -GGTGGGTAAAAGAAGGC-3， 5' -CCACAGGGGAATTTA-3' 5' -GATTTTAAGTTGGGGA-3' 5, -TAAGAAGCACTGGCAT-3， 針對SNP RS12896399的引物組： 5' -GTCAGTATATTTTGGGG-3' 5, -GCTGTGACAAAGAGAA-3' 5' -GAATGAATTCAAATATTGC-3' 5' -ATCCAGTTAAGAGAAC-3' 針對SNP RS1393350的引物組： 5' -AGTCCCTTCTCTGCAACA-3' 5' -AAAAGACCACACAGATTTC-3' 5, -TACCTGGCCCCTCAG-3' 5, -TCAAGGAGCAAATAGCTC-3， (2) PCR擴增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0006] 本發(fā)明提供的日照反應基因檢測試劑盒的有益效果是：通過PCR引物的設計使多 個PCR擴增反應在同一臺PCR儀上同步進行，對受測者的相關基因進行檢測，并實現(xiàn)檢測的 高效性、特異性，分析得到其對日光照射的反應，皮膚癌風險評估，從而為受測者提供一個 保護皮膚健康，降低皮膚癌風險和合理戶外活動的有效方案。
【附圖說明】
[0007] 圖1是反應產物瓊脂糖凝膠電泳圖。
【具體實施方式】
[0008] 日照反應基因檢測試劑盒，包括盒體及盒體內單獨存放的試劑，存放的試劑包 括： (1) 針對3個基因 SNP多態(tài)位點的PCR反應引物組： 針對SNP RS12203592的引物組在： 5, -GGTGGGTAAAAGAAGGC-3， 5' -CCACAGGGGAATTTA-3' 5' -GATTTTAAGTTGGGGA-3' 5, -TAAGAAGCACTGGCAT-3， 針對SNP RS12896399的引物組： 5' -GTCAGTATATTTTGGGG-3' 5, -GCTGTGACAAAGAGAA-3' 5' -GAATGAATTCAAATATTGC-3' 5' -ATCCAGTTAAGAGAAC-3' 針對SNP RS1393350的引物組： 5' -AGTCCCTTCTCTGCAACA-3' 5' -AAAAGACCACACAGATTTC-3' 5, -TACCTGGCCCCTCAG-3' 5, -TCAAGGAGCAAATAGCTC-3， (2) PCR擴增試劑； (3) 瓊脂糖凝膠電泳分析試劑。
[0009] 下面將結合實施例對本發(fā)明提供的方法予以進一步的說明。
[0010] 本實施例對測試者采用日照反應基因檢測試劑盒同時檢測3個基因的SNP多態(tài) 位點，并根據(jù)基因分型結果，分析其對日光照射的反應，皮膚癌風險評估，從而為受測者提 供一個保護皮膚健康，降低皮膚癌風險和合理戶外活動的有效方案。
[0011] 使用到的日照反應基因檢測試劑盒內試劑由以下組成： (1) 針對3個基因 SNP多態(tài)位點的PCR反應引物組： 針對SNP RS12203592的引物組在： 5, -GGTGGGTAAAAGAAGGC-3， 5' -CCACAGGGGAATTTA-3' 5' -GATTTTAAGTTGGGGA-3' 5, -TAAGAAGCACTGGCAT-3， 針對SNP RS12896399的引物組： 5' -GTCAGTATATTTTGGGG-3' 5, -GCTGTGACAAAGAGAA-3' 5' -GAATGAATTCAAATATTGC-3' 5' -ATCCAGTTAAGAGAAC-3' 針對SNP RS1393350的引物組： 5' -AGTCCCTTCTCTGCAACA-3' 5' -AAAAGACCACACAGATTTC-3' 5, -TACCTGGCCCCTCAG-3' 5, -TCAAGGAGCAAATAGCTC-3， (2) PCR 擴增試劑：10XPCR 緩沖液，該 PCR 緩沖液為 100mM Tris-HCl pH8. 3,500mM KC1，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，該dNTPs混合物為三磷酸鳥嘌呤脫氧核苷酸dGTP，三磷 酸腺嘌呤脫氧核苷酸dATP，三磷酸胸腺嘧啶脫氧核苷酸dTTP，三磷酸胞嘧啶脫氧核苷酸 dCTP四種核苷酸，各組分濃度為2. 5mM ;5υ/μ 1熱啟動Taq酶。
[0012] (3)瓊脂糖凝膠電泳分析試劑：瓊脂糖、TAE緩沖液、DNA分子量標準、Goldview 染色液和DNA上樣緩沖液，該緩沖液以溴酚藍為指示劑稀釋至IX后使用。
[0013] 使用上述日照反應基因檢測試劑盒按如下步驟進行檢測： (1)提取樣本基因組DNA。
[0014] 采集該測試者唾液，向l_2ml唾液樣品中加入500ul提取緩沖溶液，該DNA提取 緩沖溶液溶劑為50mM的Tris-HCl pH7. 4、0. 5mM的EDTA和50mM的NaCl，反復吹打混勻 后，8000Xg離心5分鐘，棄去上清，此步驟重復一次；得到的沉淀中加入500ul裂解液， 該裂解液溶劑為 50mM Tris-HCl pH7.4,50mM Tris-HCl ρΗ7· 4,150mM NaCl，lmM EDTA，1% Triton x_100，l% Sodium deoxycholate，0.1% S