一種預(yù)防污染的平板培養(yǎng)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及植物病理學(xué)和微生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體是一種預(yù)防污染的平板培養(yǎng)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]在植物病理學(xué)和微生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域中，利用培養(yǎng)基培養(yǎng)植物病原菌/微生物是相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究和產(chǎn)品研發(fā)的基本技術(shù)工作，培養(yǎng)病原菌/微生物的培養(yǎng)基形態(tài)，主要有平板培養(yǎng)基、斜面培養(yǎng)基、及液體培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基是指將已滅菌的培養(yǎng)基熔化后倒入普通培養(yǎng)皿，冷卻凝固后形成整齊的培養(yǎng)基平板;斜面培養(yǎng)基是指將培養(yǎng)基裝入試管，滅菌后擺成的培養(yǎng)基斜面;液體培養(yǎng)基是指培養(yǎng)基中不含凝固物而處于液體狀態(tài)的培養(yǎng)基。通常將利用平板培養(yǎng)基培養(yǎng)病原菌/微生物的培養(yǎng)方式稱為平板培養(yǎng);同理稱，利用斜面培養(yǎng)基的斜面培養(yǎng);利用液體培養(yǎng)基的液體培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)室的日常工作，往往以平板培養(yǎng)最為常用。
[0003]病原菌/微生物培養(yǎng)的設(shè)備主要是培養(yǎng)箱，當(dāng)前的培養(yǎng)箱各式各樣，大小容量差別也大，但按維持恒溫功能的方式可將其分為兩大類，一類是隔水式培養(yǎng)箱，其培養(yǎng)作業(yè)空間處在一個(gè)恒溫的水箱內(nèi)，該類培養(yǎng)箱一般沒有降溫功能。另一類是循環(huán)空氣式培養(yǎng)箱，在培養(yǎng)箱的作業(yè)空間內(nèi)，增溫/降溫空氣處于流動(dòng)循環(huán)狀態(tài)，該類培養(yǎng)箱能實(shí)現(xiàn)升溫/降溫功能，四季可用，因而成為普通實(shí)驗(yàn)室的主要培養(yǎng)設(shè)備。
[0004]當(dāng)前的常規(guī)平板培養(yǎng)方法，是用紗布把培養(yǎng)皿捆包、或用實(shí)驗(yàn)室常用的方盤、籃框類器具載裝培養(yǎng)皿后，再放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，或者將培養(yǎng)皿直接放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。在培養(yǎng)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，利用循環(huán)空氣式培養(yǎng)箱進(jìn)行常規(guī)平板培養(yǎng)，容易出現(xiàn)雜菌污染;一些需要較長時(shí)間的培養(yǎng)工作，不僅污染率高，還導(dǎo)致培養(yǎng)基干燥化;尤其是，連續(xù)長期培養(yǎng)作業(yè)的培養(yǎng)箱，容易繁殖積累螨類實(shí)驗(yàn)室小昆蟲，這些螨蟲的蟲體微小，能自由進(jìn)出普通培養(yǎng)皿，其周身攜帶的細(xì)菌和霉菌，能快速導(dǎo)致培養(yǎng)基污染雜菌，嚴(yán)重者可在2?3天內(nèi)造成整批培養(yǎng)工作作廢。顯然，在當(dāng)前的培養(yǎng)技術(shù)條件下，平板培養(yǎng)的雜菌污染問題突出。
[0005]當(dāng)前的解決方法通常是用Parafilm封口膜封貼培養(yǎng)皿的方法，用該方法進(jìn)行平板培養(yǎng)，能有效地降低污染率，但在培養(yǎng)量較大時(shí)，封口程序工作效率低，實(shí)踐操作非常不便；而且，在循環(huán)空氣式培養(yǎng)箱中Parafilm封口膜容易開裂形成缺口，因此預(yù)防材料污染和干燥的效果仍不理想。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的提供一種預(yù)防污染的平板培養(yǎng)方法，用一套簡單的配套工具和技術(shù)操作，大幅度降低植物病原菌/微生物日常培養(yǎng)的污染可能性，提高平板培養(yǎng)的效率與效果O
[0007]本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下:
[0008]—種預(yù)防污染的平板培養(yǎng)方法，用一套簡單的配套工具和技術(shù)操作，大幅度降低植物病原菌/微生物日常培養(yǎng)的污染可能性，操作步驟如下:
[0009]1.配套工具準(zhǔn)備:取潔凈的密封式塑料保鮮盒和未啟用過的普通塑料袋備用。
[0010]2.培養(yǎng)平板植入生物:按常規(guī)的無菌操作方式，在超凈工作臺(tái)上用培養(yǎng)皿將培養(yǎng)基倒成培養(yǎng)平板，并在平板上植入培養(yǎng)對(duì)象生物。
[0011]3.培養(yǎng)平板置入配套工具:將步驟I備用的保鮮盒與塑料袋置入超凈工作臺(tái)，在無菌條件下，先將步驟2操作完畢的培養(yǎng)平板置入塑料袋內(nèi)，再將塑料袋及袋內(nèi)培養(yǎng)平板整體置入保鮮盒內(nèi)，蓋上并扣緊保鮮盒的密封蓋，形成盒內(nèi)裝載培養(yǎng)平板的保鮮盒。
[0012]4)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱培養(yǎng):將步驟3)操作完畢的、內(nèi)裝培養(yǎng)平板的保鮮盒，從超凈工作臺(tái)轉(zhuǎn)到常規(guī)恒溫培養(yǎng)箱，在需要的溫度下培養(yǎng)。
[0013]5)培養(yǎng)結(jié)果調(diào)查:到達(dá)計(jì)劃設(shè)定的培養(yǎng)時(shí)間后，將步驟4)的培養(yǎng)材料從培養(yǎng)箱取出，進(jìn)行結(jié)果的調(diào)查和檢測(cè)。
[0014]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):
[0015]本發(fā)明的最大特色是預(yù)防污染的功效高，尤其是防止螨蟲污染非常突出，同時(shí)還具有如下優(yōu)點(diǎn):
[0016]1.由于保鮮盒的密封性能好，培養(yǎng)基不容易干燥，很適合于長時(shí)間培養(yǎng)的需要。
[0017]2.保鮮盒可疊加放置，使得培養(yǎng)箱內(nèi)的有效作業(yè)空間能充分利用，而且由于保鮮盒的保護(hù)，能有效減少培養(yǎng)皿的碰翻跌摔意外。
[0018]3.批量培養(yǎng)時(shí)，便于培養(yǎng)平板的轉(zhuǎn)移操作，如從工作臺(tái)轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱;或由培養(yǎng)箱轉(zhuǎn)移到結(jié)果檢驗(yàn)平臺(tái)。
【附圖說明】
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[0019]圖1是采用不同培養(yǎng)方法在循環(huán)空氣式培養(yǎng)箱培養(yǎng)稻曲病菌10天后的表現(xiàn)；圖中A圖與B圖是采用常規(guī)培養(yǎng)方法的結(jié)果，A呈現(xiàn)雜菌污染和培養(yǎng)基干燥開裂，B未出現(xiàn)雜菌污染，但培養(yǎng)基呈現(xiàn)干燥開裂;C圖是采用本發(fā)明培養(yǎng)方法的結(jié)果，未出現(xiàn)任何污染和干燥現(xiàn)象。a是稻曲病菌，b是污染雜菌，c是培養(yǎng)基干縮形成的裂縫。
[0020]圖2是空白培養(yǎng)基在螨蟲滋生的培養(yǎng)箱培養(yǎng)3天后的表現(xiàn)圖。
[0021]圖中，A圖是采用常規(guī)方法的平板培養(yǎng)，培養(yǎng)平板被雜菌污染，并呈現(xiàn)螨蟲爬行的軌跡;B圖是采用本發(fā)明方法的平板培養(yǎng)，培養(yǎng)平板未出現(xiàn)污染和異常。
[0022 ]圖3是本發(fā)明配套用的塑料保鮮盒。
[0023]圖中a是合蓋后的完整保鮮盒;b是保鮮盒的裝載主體;c是保鮮盒蓋;d是保鮮盒蓋上的密封膠。
[0024]圖4是本發(fā)明配套用的保鮮盒裝載培養(yǎng)皿后的形態(tài)圖。
[0025]圖中，a是保鮮盒直接裝入培養(yǎng)皿后封蓋狀態(tài);b是保鮮盒直接裝入培養(yǎng)皿后開蓋狀態(tài);c是先將培養(yǎng)皿裝入塑料袋，再將塑料袋與培養(yǎng)皿一起放入保鮮盒內(nèi)，封蓋狀態(tài);d是先將培養(yǎng)皿裝入塑料袋，再將塑料袋與培養(yǎng)皿一起放入保鮮盒內(nèi)，開蓋狀態(tài)。
【具體實(shí)施方式】
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[0026]下面結(jié)合附圖與實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述。
[0027]當(dāng)前植物病理學(xué)/微生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)設(shè)備主要是循環(huán)空氣式培養(yǎng)箱，雖然箱內(nèi)的循環(huán)空氣可以實(shí)現(xiàn)快速增溫/降溫的功能，但對(duì)于常規(guī)的平板培養(yǎng)來說，由于培養(yǎng)皿不具備有效的無菌化阻隔條件，培養(yǎng)皿內(nèi)外空氣直通無阻，而且培養(yǎng)皿外環(huán)境空