一種新的環(huán)金合歡烷型倍半萜類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術領域，具體涉及從金釵石斛的干燥莖中分離得到的一種具有 神經(jīng)保護作用的環(huán)金合歡烷型倍半萜類化合物及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 金釵石斛(Dendrobium nobile Lindl.)為我國傳統(tǒng)名貴中藥，為蘭科石斛屬植 物，又名金釵石、扁金釵、扁黃草等，其莖為傳統(tǒng)中藥石斛的來源之一，為歷版中國藥典所收 載。石斛早在《神農本草經(jīng)》中就有記載，《本草綱目》稱它有"強陰益精、厚腸胃、補內孢不 足、輕身延年"之功效。《本草衍義》、《本草綱目拾遺》及《本草從新》等歷代本草都備加推崇， 素有"千金草"之稱。金釵石斛，性微寒，味甘，用于熱病傷津、口干煩渴、病后虛熱、目暗不 明、萎縮性胃炎、淺表性胃炎、慢性結腸炎等，是石斛夜光丸、石斛明目丸、石斛浸膏溶液、石 斛清胃散等制劑的重要配伍。金釵石斛在中國藥典2010年版中列為藥用石斛的首要來源。
[0003] 近20年來，國內外學者對石斛屬植物的化學成分進行了探索和研究，發(fā)現(xiàn)這些植 物所含的化學成分類型多樣。金釵石斛的化學成分主要有生物堿類、多糖類、黃酮類、酚類、 倍半萜類、香豆素類及留體糖苷類化合物。生物堿類成分是最早從石斛屬植物中分離并進 行結構鑒定的化合物，也是蘭科植物的特征性成分。近些年來，國內外學者對金釵石斛中的 生物堿類成分進行了大量的研究，至今已鑒定出的生物堿主要為倍半萜類生物堿，其中石 斛堿是其特征性成分。
[0004] 金釵石斛的藥理作用主要表現(xiàn)在對心血管系統(tǒng)的作用、對神經(jīng)系統(tǒng)的作用、抗腫 瘤和抗誘變作用、抗氧化和抗衰老作用、抗白內障作用及免疫抑制、鈣通道抑制、抗炎作用 和對胃腸道的作用。

【發(fā)明內容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從金釵石斛的干燥莖中分離得到的一種具有神經(jīng)保護 作用的環(huán)金合歡烷型倍半萜類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結構式的化合物(I)，
[0009]所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將金釵石斛的干燥莖粉碎， 用80~90 %乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽 和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙醇洗脫10個柱 體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟(b)中75%乙醇洗脫 浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、55:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到5個組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為15:1、10:1 和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~10個柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)。
[0010]進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0011] 進一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為85%。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學上可接受的載 體。
[0013] 所述的化合物(I)在制備神經(jīng)保護的藥物中的應用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備神經(jīng)保護的藥物中的應用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學上可接受的、對 人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物(I)結構式；
[0019 ]圖2為化合物（I)理論ECD值與實驗ECD值比較。
【具體實施方式】
[0020]下面結合實施例進一步說明本發(fā)明的實質性內容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對 本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的實質和范圍。
[0021 ]實施例1:化合物(I)分離制備及結構確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化 學試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。
[0023] 制備方法：（a)將金釵石斛的干燥莖（8kg)粉碎，用85 %乙醇熱回流提取（25L X 3 次），合并提取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水飽 和的正丁醇(3LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(345g)和正丁醇萃取 物；（b)步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫6個柱體積， 再用75%乙醇洗脫10個柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏 (133g);(c)步驟(b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1(8個柱體 積）、55:1 (8個柱體積）、25:1 (6個柱體積）、10 :1 (8個柱體積)和1:1 (5個柱體積）的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟(c)中組分4(27g)用正相硅膠進一步分離，依次用 體積比為15:1(8個柱體積）、10:1(10個柱體積)和5:1(6個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2(13g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百 分濃度為70 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純 的化合物（I)(32mg)。
[0024] 結構確證:無色油狀物;冊43頂3顯示[1+似]+為111/2 269.1224，結合核磁特征可 得分子式為C15H18〇3，不飽和度為7。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δ Η(ΡΡπι，DMS〇-d6，500MHz): H-2 (2.48， m)，H-2(2.21，m)，H-4(3.19，m)，H-4(3.05，m)，H-6(2.48，br，d，J=10.0)，H-7(6.04，dd，J = 16.1，10.0)，H-8(6.37，d，J=16.1)，H-10(5.81，br，s)，H-12(0.82，s)，H-13(0.94，s)，H-14 (4.86，111)，!1-14(4.47，111)，!1-15(4.96,8,2!〇 ;核磁共振碳譜數(shù)據(jù)5。(？?111，〇13〇-(16，1251抱）： 27.9(Ca-C)，59.8(CH2,2-C)，204.6(C，3-C)，51.7(CH2,4-C)，145.5(C，5-C)，56.4(CH，6-C)，138·7(CH，7-C)，124.2(CH，8-C)，161·1(C，9-C)，114.5(CH，10-C)，173.6(C，11-C)，21.1 (01 3，12-〇,30.3(013，13-〇，111.2((：!12，14-〇,70.2((：!12，15-〇;碳原子標記參見圖1。紅 外光譜表明該化合物含有α，β-不飽和-γ -內酯和羰基（1760,1648CHT1) ,Η-NMR譜數(shù)據(jù)顯示 兩個甲基信號[δH0.82(s，Me-12)，0.94(s，Me-13)]，一個含氧亞甲基信號[δH4.96(2H，s，H-l5)]，一個烯屬亞甲基信號[δH4.47(m，H-14)和4.86(m，H-14)]，以及三個烯屬次甲基質子 [SH5.81(br，s，H-10)，6.04(dd，J=16.1，10.0Hz，H-7)，6.37(d，J=16.1Hz，H-8)]</ 3CNMR 譜 顯示了 15個碳信號，包括兩個甲基，四個亞甲基[一個含氧亞甲基SC70.2(C-15)，一個烯屬 亞甲基6(：111.2((：-14)]，四個次甲基[三個烯屬次甲基6(：114.5((：-10)，124.2((：-8)和138.7 (0-7)]，五個季碳[兩個烯屬季碳6(：145.5((：-5)和161.1((：-9)，兩個羰基碳6(：173.6((：-11) 和204.6(03)]。腿8<：譜中!1-2( 5!12.48)，!1-4(5!13.19)，!13-12，!13-13和!12-14與次甲基碳（(：-6)，H 2-2，H-6，H3-12和H3-13與C-1，以及H2-4，H-6和H 2-14與C-5的相關性表明該化合物含有 一個環(huán)己烷，且其連有羰基，偕二甲基基團，以及一個環(huán)外亞甲基。次甲基C-6與反式烯烴(J =16.1抱）相連，反式烯烴的另一側((：-8)與€^-不飽和-丫-內酯環(huán)相連。腿8(：譜中!1-7與(：-9，!1-8與09，(：-10和(：-15，!1-10與(：-11，以及!12-15與(：-8，(：-9，(：-10和(：-11