一種康定鼠尾草中制備丹參酮iia化學(xué)對照品的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種丹參酮IIA(Tanshinone IIA)化學(xué)對照品的制備方法，尤其涉及一種康
[0002]定鼠尾草中制備丹參酮IIA化學(xué)對照品的方法。
【背景技術(shù)】
[0003]康定鼠尾草(Salvia prattii)系屬鼠尾草屬(Salvia L.)、唇形科(Labiatae)植物。現(xiàn)代研究表明鼠尾草植物中的化學(xué)成分主要包括酚酸類及萜類。丹參酮IIA是康定鼠尾草中含量較高的丹參酮類化合物，由于丹參酮類化合物極性相近、加之化合物結(jié)構(gòu)差異及其細(xì)微，從康定鼠尾草藥材中獲取高純度丹參酮IIA對照品較為困難。為了加快康定鼠尾草的生產(chǎn)銷售和相關(guān)新藥的研發(fā)步伐，發(fā)展高純度丹參酮IIA的高效制備方法，尤其規(guī)?；苽浼夹g(shù)顯得尤為重要。
[0004]目前，從康定鼠尾草屬植物制備丹參酮類化合物的文獻(xiàn)未見報(bào)道，中國專利(CN102146114B)報(bào)道采用提取、萃取、硅膠柱層析、結(jié)晶等4?6步生產(chǎn)出純度95%以上的丹參酮IIA，過程較繁瑣且結(jié)晶過程損失量較大，而從康定鼠尾草中規(guī)?；焖佾@取丹參酮IIA的制備研究未見文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種工藝簡單、易規(guī)模化的一種康定鼠尾草中制備丹參酮IIA化學(xué)對照品的方法。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
[0007]一種康定鼠尾草中制備丹參酮IIA化學(xué)對照品的方法，其特征在于，包括以下步驟:
[0008]⑴硅膠柱富集:
[0009]將按常規(guī)方法制得的棕紅色浸膏狀的康定鼠尾草中的醇提物經(jīng)硅膠柱色譜分離:用5?10倍柱體積的氯仿溶劑洗脫，收集氯仿洗脫液經(jīng)減壓干燥即得紅色粉末狀的富含丹參酮IIA的粗樣；
[0010]⑵微孔樹脂除雜:
[0011]將富含丹參酮IIA的粗樣用90%?100%甲醇溶解，過濾得到濾液A，該濾液A上微孔樹脂柱分離，以3?5倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為90?100%的甲醇溶液進(jìn)行洗脫，收集該洗脫物并經(jīng)減壓干燥得丹參酮IIA類組分；富含丹參酮IIA的粗樣與所述微孔樹脂比例為Ig:20mL
[0012]⑶反相液相制備色譜精制:
[0013]所述丹參酮IIA類組分用其質(zhì)量5?10倍的體積分?jǐn)?shù)為65%?80%的甲醇溶液溶解，經(jīng)0.45 μ m微孔濾膜過濾，得到濾液B，該濾液B經(jīng)反相液相制備色譜分離，經(jīng)檢測波長為254nm的紫外檢測器檢測，收集制備色譜圖中主要的色譜峰餾分，該色譜峰餾分經(jīng)減壓干燥即得純度大于98%的紅色粉末狀的丹參酮IIA對照品。
[0014]進(jìn)一步，所述步驟⑴和所述步驟⑵及所述步驟⑶中的減壓干燥的條件均是指真空度為0.06?0.09MPa，溫度為50?70°C。
[0015]進(jìn)一步，所述步驟⑴中硅膠柱是指裝有100?200目的柱層析硅膠。
[0016]進(jìn)一步，所述步驟⑵中微孔樹脂柱是指裝有MCI或HP20SS填料的層析柱。
[0017]進(jìn)一步，所述步驟⑶中反相液相制備色譜分離的工作參數(shù)是指色譜柱柱長250_、直徑50mm，反相液相制備柱固定相為10 μ m Megress C18，流動(dòng)相為體積分?jǐn)?shù)75%?85%的甲醇-水溶液，進(jìn)樣體積為10?15mL，流速為80mL/min。
[0018]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn):
[0019]1、本發(fā)明工藝簡單、回收率高。
[0020]第一步采用硅膠柱富集，可將樣品中丹參酮IIA得到高效富集；第二步采用微孔樹脂除雜，可獲取純度約50%的丹參酮IIA類組分，同時(shí)，微孔樹脂具有良好的脫色效果；第三步采用反相液相制備色譜制備，可獲取高純度對照品，且收率較高(>85% )。
[0021]2、本發(fā)明采用的技術(shù)手段非常適宜規(guī)模化生產(chǎn)。
[0022]原料要求不高，一般野生或種植的康定鼠尾草醇提物即可，易于批量備料；第一步采用硅膠柱富集，填料便宜易得；第二步微孔樹脂柱除雜，該樹脂柱可以再生循環(huán)使用，平均價(jià)格低廉，易于規(guī)?；坏谌骄浦胁捎梅聪嘁合嘀苽渖V制備，為快速的等度方法，也非常適宜規(guī)模生產(chǎn)。
【附圖說明】
[0023]下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0024]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1丹參酮IIA類組分的HPLC分析圖譜(254nm)。
[0025]圖2為本發(fā)明實(shí)施例1丹參酮IIA類組分的液相制備圖譜(254nm)。
[0026]圖3為本發(fā)明實(shí)施例1丹參酮IIA的反相液相色譜純度分析(254nm)。
【具體實(shí)施方式】
[0027]實(shí)施例1
[0028]一種康定鼠尾草中制備丹參酮IIA化學(xué)對照品的方法，包括以下步驟:
[0029]⑴硅膠柱富集:
[0030]將按常規(guī)方法制得的棕紅色浸膏狀的康定鼠尾草中的醇提物1.0Kg經(jīng)硅膠柱色譜分離:用5倍柱體積的氯仿溶劑洗脫，收集氯仿洗脫液經(jīng)減壓干燥即得紅色粉末狀的富含丹參酮IIA的粗樣26.4g ；
[0031]其中:
[0032]減壓干燥的條件是指真空度為0.06MPa，溫度為70°C ;
[0033]硅膠柱是指裝有100?200目的柱層析硅膠。
[0034]⑵微孔樹脂除雜:
[0035]將富含丹參酮IIA的粗樣用100%甲醇溶解，過濾得到濾液A，該濾液A上微孔樹脂柱分離，以5倍柱體積的體積分?jǐn)?shù)為100%的甲醇溶液進(jìn)行洗脫，收集該洗脫物并經(jīng)減壓干燥得丹參酮IIA類組分18.8g ；
[0036]其中:
[0037]減壓干燥的條件是指真空度為0.06MPa，溫度為70°C ;
[0038]富含丹參酮IIA的粗樣與所述微孔樹脂比例為Ig:20mL ；
[0039]微孔樹脂柱是指裝有MCI填料的層析柱。
[0040]⑶反相液相制備色譜精制:
[0041]所述丹參酮IIA類組分用其質(zhì)量10倍的體積分?jǐn)?shù)為65%的甲醇溶液溶解，經(jīng)0.45 μ m微孔濾膜過濾，得到濾液B，該濾液B經(jīng)反相液相制備色譜分離，經(jīng)檢測波長為254nm的紫外檢測器檢測，收集制備色譜圖中主要的色譜峰餾分，該色譜峰餾分經(jīng)減壓干燥即得純度大于98%的紅色粉末狀的丹參酮IIA對照品9.lg。
[0042]其中:
[0043]減壓干燥的條件是指真空度為0.06MPa，溫度為70°C ;
[0044]反相液相制備色譜分離的工作參數(shù)是指色譜柱柱長250mm、直徑50mm，反相液相制備柱固定相為10 μ m Megress C18，流動(dòng)相為體積分?jǐn)?shù)75%的甲醇-水溶液，進(jìn)樣體積為15mL，流速為 80mL/mino
[0045]實(shí)施例2
[0046]一種康定鼠尾草中制備丹參酮IIA化學(xué)對照品的方法，包括以下步驟:
[0047]⑴硅膠柱富集:
[0048]將按