] S3 :氯化鋒和氯化巧混合溶于適量蒸饋水中，制得溶質(zhì)質(zhì)量濃度為2%交聯(lián)劑C，其 中氯化鋒與氯化巧的質(zhì)量比為1:1。
[0024] S4 :將步驟Sl制得的混合溶液A加入步驟S2制得的油相溶液B中，攬拌5~IOmin 或至均勻后，加入80ml步驟S3制得的交聯(lián)劑C充分?jǐn)埌?0~45min，交聯(lián)形成水凝膠微球 D，靜置沉淀，過(guò)濾。
[002引 S5 :將步驟S4制得的水凝膠微球D用150ml石油酸洗涂3次，之后用100mL1%稀 堿浸泡，再用30%、50%、70%及無(wú)水乙醇脫水4次，最后用蒸饋水沖洗3次，冷凍干燥后得海 藻酸鋒巧鹽/殼聚糖復(fù)合止血粉，即多聚糖止血粉。
[0026] 實(shí)施例= Sl:將3g的G/M=27:3的高古羅糖醒酸海藻酸鋼加入100mL的蒸饋水中配制成0. 03g/ml的海藻酸鋼溶液，將3g的N-脫乙酷度為96%，粘度為2.OPa?S的高粘度高脫乙酷度殼 聚糖加入100mL2%稀醋酸溶液中配制成O.Olg/ml的殼聚糖溶液。將上述殼聚糖溶液加入 海藻酸鋼溶液中，均勻攬拌形成穩(wěn)定的膠狀溶液，即混合溶液A。
[0027] S2 :300ml液體石蠟與20ml聚山梨醋-80混合得油相溶液B。
[0028] S3 :氯化鋒和氯化巧混合溶于適量蒸饋水中，制得溶質(zhì)質(zhì)量濃度為2%交聯(lián)劑C，其 中氯化鋒與氯化巧的質(zhì)量比為1:1。
[002引 S4 :將步驟Sl制得的混合溶液A加入步驟S2制得的油相溶液B中，攬拌5~IOmin 或至均勻后，加入80ml步驟S3制得的交聯(lián)劑C充分?jǐn)埌?0~45min，交聯(lián)形成水凝膠微球D，靜置沉淀，過(guò)濾。
[0030] S5 :將步驟S4制得的水凝膠微球D用150ml石油酸洗涂3次，之后用100mL1%稀 堿浸泡，再用30%、50%、70%及無(wú)水乙醇脫水4次，最后用蒸饋水沖洗3次，冷凍干燥后得海 藻酸鋒巧鹽/殼聚糖復(fù)合止血粉，即多聚糖止血粉。
[0031] 實(shí)施例四 Sl:將2. 4g的G/M=17:3的高古羅糖醒酸海藻酸鋼加入100mL的蒸饋水中配制成 0. 03g/ml的海藻酸鋼溶液，將1. 2g的N-脫乙酷度為98%，粘度為2.OPa?S的高粘度高脫 乙酷度殼聚糖加入100mL2%稀醋酸溶液中配制成O.Olg/ml的殼聚糖溶液。將上述殼聚糖 溶液加入海藻酸鋼溶液中，均勻攬拌形成穩(wěn)定的膠狀溶液，即混合溶液A。
[0032] S2 :300ml液體石蠟與20ml聚山梨醋-80混合得油相溶液B。
[0033] S3 :氯化鋒和氯化巧混合溶于適量蒸饋水中，制得溶質(zhì)質(zhì)量濃度為2%交聯(lián)劑C，其 中氯化鋒與氯化巧的質(zhì)量比為0. 75:1。
[0034] S4 :將步驟Sl制得的混合溶液A加入步驟S2制得的油相溶液B中，攬拌5~IOmin 或至均勻后，加入80ml步驟S3制得的交聯(lián)劑C充分?jǐn)埌?0~45min，交聯(lián)形成水凝膠微球 D，靜置沉淀，過(guò)濾。
[003引S5 :將步驟S4制得的水凝膠微球D用150ml石油酸洗涂3次，之后用100mL1%稀 堿浸泡，再用30%、50%、70%及無(wú)水乙醇脫水4次，最后用蒸饋水沖洗3次，冷凍干燥后得海 藻酸鋒巧鹽/殼聚糖復(fù)合止血粉，即多聚糖止血粉。
[0036] 為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明所制備的多聚糖止血粉具有更優(yōu)異的止血活性，進(jìn)行W下兩 個(gè)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，具體操作如下： 1、自制多聚糖止血粉樣品C與Cleox止血粉做小鼠斷尾止血效果對(duì)比實(shí)驗(yàn)，具體操作 如下： ① 分別稱(chēng)取0.Ig實(shí)施例制得的多聚糖止血粉樣品和0.IgCleox止血粉，分別置于展 示瓶中，滅菌備用； ② 取五只同批次的巧7BL/6小鼠，稱(chēng)重，量尾長(zhǎng)； ③ 用手術(shù)剪去小鼠尾長(zhǎng)的=分之一后，立即將斷尾傷口插入展示瓶中，同時(shí)計(jì)時(shí)。計(jì)算 血流停止時(shí)的小鼠出血量。
[0037] 2、將自制多聚糖止血粉與Cleox止血粉做體外凝血效果對(duì)比實(shí)驗(yàn)： ①SD大鼠稱(chēng)取重量，根據(jù)重量計(jì)算所需麻醉劑的量，腹腔注射10%水合氯醒； ②SD大鼠麻醉之后，打開(kāi)胸腔，用注射器采集屯、臟血液，注入抗凝管中，備用； ③ 將稱(chēng)好的自制多聚糖止血粉和Cleox止血粉各4mg加入試管中，再向其中加入 1. 8ml抗凝全血溶液，最后向其中加入0. 18ml的化Clz溶液，開(kāi)始計(jì)時(shí)； ④ 觀察血液變化，直至血液出現(xiàn)明顯凝固狀態(tài)，停止計(jì)時(shí)，記錄下凝血時(shí)間，每個(gè)樣品 測(cè)=個(gè)平行樣。
[0039] 上述實(shí)施例僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并非W此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍，故：凡對(duì) 本發(fā)明做出的等效變換，均應(yīng)涵蓋于本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種多聚糖止血粉，其特征在于，由 ① 高粘度高脫乙酰度殼聚糖，所述的高粘度高脫乙酰度殼聚糖，其N(xiāo)-脫乙酰度為90~ 98%，粘度為L(zhǎng)0 ~2.OPa?s; ② 高古羅糖醛酸海藻酸鈉，所述的高古羅糖醛酸海藻酸鈉中古羅糖醛酸（G)與甘露糖 醛酸（M)之比為7~27:3; ③ 混合交聯(lián)劑，所述的混合交聯(lián)劑包含氯化鋅和氯化鈣；以及 ④ 液體石蠟和聚山梨酯-80制備而成；所述的止血粉組分如下： 高粘度高脫乙酰度殼聚糖1~3g; 高古羅糖醛酸海藻酸鈉1~3g; 混合交聯(lián)劑80ml; 液體石錯(cuò)100~300ml; 聚山梨酯-80 10~30ml。2. 制備如權(quán)利要求1所述多聚糖止血粉的方法，其特征在于，制備方法如下： 將高粘度高脫乙酰度殼聚糖溶于稀醋酸中制得殼聚糖溶液，將高古羅糖醛酸海藻酸鈉 溶于蒸餾水中制得海藻酸鈉溶液，將上述兩種溶液混合制得混合溶液A; 將液體石蠟與聚山梨酯-80混合獲得油相溶液B; 將氯化鋅和氯化鈣混合溶于蒸餾水中，制得交聯(lián)劑C; 將混合溶液A加入油相溶液B中，攪拌5~IOmin或至均勻后，加入交聯(lián)劑C充分?jǐn)嚢?30~45min，交聯(lián)形成水凝膠微球D，靜置沉淀，過(guò)濾； 將制得的水凝膠微球D用石油醚洗滌、稀堿浸泡、乙醇梯度脫水、洗凈、冷凍干燥制得 多聚糖止血粉。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述多聚糖止血粉的制備方法，其特征在于，所述制備方法步驟Sl 中，所述的高粘度高脫乙酰度殼聚糖，其N(xiāo)-脫乙酰度為90~98%，粘度為I. 0~2.OPa?s; 所述的高古羅糖醛酸海藻酸鈉中古羅糖醛酸（G)與甘露糖醛酸（M)之比為7~27:3。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述多聚糖止血粉的制備方法，其特征在于，所述步驟Sl中，高粘度 高脫乙酰度殼聚糖和海藻酸鈉的質(zhì)量比為1:1~3,所述的稀醋酸溶液濃度為2%。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述多聚糖止血粉的制備方法，其特征在于，所述的步驟S2中，液體 石蠟和聚山梨酯-80的體積比為10~15:1。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述多聚糖止血粉的制備方法，其特征在于，所述步驟S3中，氯化鋅 和氯化鈣的質(zhì)量比為0. 75~1. 5:1，所述的交聯(lián)劑C溶液濃度為2%。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種多聚糖止血粉及其制備方法，其包括如下步驟：將高粘度高脫乙酰度殼聚糖與高古羅醛酸（G）海藻酸鈉混合，之后加入氯化鋅和氯化鈣混合凝固浴進(jìn)行攪拌交聯(lián)，從而獲得一種多聚糖止血粉。本發(fā)明還提供這種止血粉的組分及其含量。本發(fā)明使用高黏度高脫乙酰度殼聚糖、高G含量海藻酸鹽作為止血粉的主要成分，獲得的高黏度高脫乙酰度殼聚糖/海藻酸鋅鈣鹽復(fù)合微球止血效果好。
【IPC分類(lèi)】A61L15/28, A61L15/26, A61L15/40, A61L26/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105169459
【申請(qǐng)?zhí)枴?br>【發(fā)明人】韋加娜, 陳錦濤, 吳帥, 何立彬
【申請(qǐng)人】廣東泰寶醫(yī)療科技股份有限公司
【公開(kāi)日】2015年12月23日
【申請(qǐng)日】2015年10月26日