甲醚，混勻后，在液 體閃爍計數(shù)器上測定5min計數(shù)。
[0038] 2. 1. 2RNA測定小白鼠50只，分組、造模和用藥方法同上。造模后36h和5天每 組各取半數(shù)動物處死，取樣部位和方法同上，取樣后稱濕重，用3mll5%三氯醋酸（TCA) 脫鈣2次，每次24h，棄去脫鈣液，殘留物用3ml15%TCA勻漿，轉(zhuǎn)入離心管，離心，棄去 上清。沉淀用95%乙醇洗滌，離心，棄去上清。沉淀再用5ml3:1的醇：醚混合液煮沸 3min，離心，棄去上清，向離心管中加入7ml5%TCA，90°C水浴加熱15min，冷卻后用5%TCA 補(bǔ)充到10ml刻度，過濾，濾液則為測試液，用5-甲基間苯二酚法測定RNA含量。
[0039] 2. 1. 3統(tǒng)計方法各組數(shù)據(jù)表達(dá)為x±s，采用SPSS1110統(tǒng)計軟件進(jìn)行t檢驗。
[0040] 3?結(jié)果 3. 1. 1 3H-TdR摻入實驗對照組創(chuàng)傷骨折后36h，對照組3H-TdR摻入率受到抑制，健側(cè) 更為明顯。到第5天這種抑制作用得到緩解，折側(cè)的摻入率明顯高于空白組；實驗組的摻 入率有明顯的促進(jìn)，骨折后36h折側(cè)的摻入率便明顯高于空白組，到第5天，進(jìn)一步得到 促進(jìn)，實驗組健側(cè)的摻入率也都略高于正常。對照組和實驗組在折后第5天折側(cè)的摻入率 均明顯高于健側(cè)的摻入率。骨折后36h和骨折后第5天，不論是骨折側(cè)還是健側(cè)實驗組的 3H-TdR摻入率都明顯高于對照組，說明藥物組合物不只是促進(jìn)骨折部位DNA的合成，對健 側(cè)DNA合成也有促進(jìn)作用，這說明藥物組合物的作用是全身性的（見表1)。
[0041] 表1創(chuàng)傷骨折后不同時期折側(cè)和健側(cè)3H-TdR[摻入率（CPM/10mg)]
注：與空白組比較'卞〈〇. 05 ;折側(cè)與健側(cè)比較，VP〈0. 05 ;骨折后5天與骨折后36h同側(cè) 比較，XP〈0. 05 ;實驗組與對照組傷后相同時段同側(cè)比較，SP〈0. 05 (下同）。
[0042] 3. 1. 2 3H_UR摻入實驗對照組創(chuàng)傷骨折后健側(cè)3H_UR摻入率受到抑制，到第5天 明顯低于空白組。而折側(cè)的摻入率到第5天明顯高于空白組，說明骨折部位RNA的合成受 到刺激。實驗組不論折側(cè)和健側(cè)都明顯高于空白組，也明顯高于對照組。折側(cè)摻入率明顯 高于健側(cè)。說明藥物組合物刺激全身RNA的合成，骨折部位尤其明顯。骨折第5天對照組 和實驗組折側(cè)的摻入率均明顯高于健側(cè)，說明骨折部位由于骨折愈合需要具有較活躍的 蛋白質(zhì)合成功能（見表2)。
[0043] 表2骨折后36h和第5天折側(cè)和健側(cè)3H-UR[摻入率（CPM/10mg)]
3. 1. 3RNA含量測定對照組骨折后36h骨中RNA含量有減少的趨勢，健側(cè)比較明顯， 到骨折后第5天，開始有所增加；實驗組RNA含量在骨折后36h就有明顯增加，到第5天 折側(cè)RNA含量進(jìn)一步增加，明顯高于骨折后36h折側(cè)的含量。說明藥物組合物明顯促進(jìn)骨 折端RNA的合成，對于健側(cè)的RNA含量也有促進(jìn)作用（見表3)。
[0044] 表3骨折后36h和第5天折側(cè)和健側(cè)RNA含量（yg/mg)
結(jié)果表明：藥物組合物能夠改善創(chuàng)傷骨折后整體機(jī)能，促進(jìn)骨折局部細(xì)胞分化增殖能 力，并提高其合成功能，能夠明顯促進(jìn)骨折修復(fù)。
[0045] 實驗例2 :典型病例 病例1 :周某，男，50歲。受傷住院，臨床診斷為左下肢骨折，采用的治療方案如下：服用 本發(fā)明上述實施例1制備藥物組合物，每次3g，每天3次，連服7周后痊愈出院。
[0046] 病例2 :吳某，女，43歲。受傷住院，臨床診斷為左尺橈骨骨折，采用的治療方案如 下：服用本發(fā)明上述實施例1制備藥物組合物，每次3g，每天3次，連服75天后痊愈出院。
【主權(quán)項】
1. 一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于制成該藥物組合物的原料藥的組成和 重量份為： 毛蓮菜65-75重量份蕁麻40-50重量份巴旦仁30-40重量份齒緣草10-20重量 份萌蘆素E5-6重量份爵床脂素A3-5重量份。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于制成該藥物組合 物的原料藥的組成和重量份為： 毛蓮菜70重量份蕁麻45重量份巴旦仁35重量份齒緣草15重量份萌蘆素E5. 5 重量份爵床脂素A4重量份。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于藥物組合物可以 采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑、膠囊劑、滴丸。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于藥物組合物與化 學(xué)藥或中藥組成的促進(jìn)骨折修復(fù)藥物。5. -種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于按如下方法制備： 原料藥的組成和重量份為：毛蓮菜65-75重量份蕁麻40-50重量份巴旦仁30-40 重量份齒緣草1〇_20重量份萌蘆素E5-6重量份爵床脂素A3-5重量份； 制備方法： (1) 按原料藥配比取蕁麻、巴旦仁，混勻，先用重量百分比濃度60%乙醇作為溶劑，在 50°C溫浸提取，提取次數(shù)為4次，每次提取時間為4小時，每次溶劑用量為蕁麻、巴旦仁藥材 總重量的20倍，濾過，得藥渣A和提取液，提取液回收乙醇，濃縮，干燥，即得提取物A; (2) 按原料藥配比取毛蓮菜、齒緣草，并與步驟（1)得到藥渣A混勻，用重量百分比濃度 35%乙醇為溶劑，在70°C溫浸提取，提取次數(shù)為3次，每次提取時間為3小時，每次溶劑用量 為上述藥材總重量的15倍，濾過，提取液回收乙醇，濃縮至相對密度1. 12,濾過，藥液通過 NKA-9大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度75%的乙醇溶液洗脫NKA-9大孔 吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度75%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B; (3) 按原料藥配比取萌蘆素E、爵床脂素A，混勻，依次加入提取物A、提取物B，混勻，即 得藥物組合物。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于按如下方法制 備： 原料藥的組成和重量份為：毛蓮菜70重量份蕁麻45重量份巴旦仁35重量份齒 緣草15重量份萌蘆素E5. 5重量份爵床脂素A4重量份； 制備方法： (1) 按原料藥配比取蕁麻、巴旦仁，混勻，先用重量百分比濃度60%乙醇作為溶劑，在 50°C溫浸提取，提取次數(shù)為4次，每次提取時間為4小時，每次溶劑用量為蕁麻、巴旦仁藥材 總重量的20倍，濾過，得藥渣A和提取液，提取液回收乙醇，濃縮，干燥，即得提取物A; (2) 按原料藥配比取毛蓮菜、齒緣草，并與步驟（1)得到藥渣A混勻，用重量百分比濃度 35%乙醇為溶劑，在70°C溫浸提取，提取次數(shù)為3次，每次提取時間為3小時，每次溶劑用量 為上述藥材總重量的15倍，濾過，提取液回收乙醇，濃縮至相對密度1. 12,濾過，藥液通過 NKA-9大孔吸附樹脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度75%的乙醇溶液洗脫NKA-9大孔 吸附樹脂柱，收集重量百分比濃度75%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B; (3)按原料藥配比取萌蘆素E、爵床脂素A，混勻，依次加入提取物A、提取物B，混勻，即 得藥物組合物。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于藥物組合物可以 采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑、膠囊劑、滴丸。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，其特征在于藥物組合物與化 學(xué)藥或中藥組成的促進(jìn)骨折修復(fù)藥物。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種促進(jìn)骨折修復(fù)的藥物組合物，本發(fā)明藥物組合物是以毛蓮菜、蕁麻、巴旦仁、齒緣草、葫蘆素E、爵床脂素A為原料藥，配比而成，可按常規(guī)制劑工藝制成各種劑型，促進(jìn)骨折修復(fù)療效顯著。
【IPC分類】A61P19/08, A61K31/365, A61K31/575, A61K36/73
【公開號】CN105168432
【申請?zhí)枴?br>【發(fā)明人】張秀華
【申請人】濟(jì)南星懿醫(yī)藥技術(shù)有限公司
【公開日】2015年12月23日
【申請日】2015年9月9日