技術(shù)編號:454535
提示:您尚未登錄,請點 登 陸 后下載,如果您還沒有賬戶請點 注 冊 ,登陸完成后,請刷新本頁查看技術(shù)詳細信息。技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及在絲狀真菌細胞內(nèi)構(gòu)建和篩選目的多核苷酸序列文庫的方法。背景技術(shù)絲狀真菌已經(jīng)被廣泛用作多肽商業(yè)生產(chǎn)的宿主細胞。然而,當(dāng)想要生產(chǎn)具有特殊變化特征例如,熱穩(wěn)定性,pH活性變化范圍,比活性,底物特異性,Km,Vmax等等的多肽變異體時,由于在獨立轉(zhuǎn)化的絲狀真菌細胞內(nèi)轉(zhuǎn)化頻率低和拷貝數(shù)目的差異,變異體編碼序列文庫的構(gòu)建和篩選通常需要使用中介宿主,例如,細菌細胞或酵母。在酵母中構(gòu)建目的多核苷酸序列文庫的幾種方法已經(jīng)被公開,其中于轉(zhuǎn)化相應(yīng)生產(chǎn)宿主,如具有目的多核苷酸序列潛在變異體的絲狀真菌前先在酵母中篩選文庫。...
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