一種檢測(cè)阿莫西林的試紙的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于食品安全診斷領(lǐng)域，具體涉及一種用于檢測(cè)阿莫西林的試紙。
【背景技術(shù)】
[0002]牛奶中阿莫西林(amoxicillin，AMX)的殘留，既導(dǎo)致敏感人群的過敏反應(yīng)和細(xì)菌耐藥性的增強(qiáng)，也會(huì)影響奶制品的品質(zhì)和產(chǎn)量，給乳品加工業(yè)帶來重大經(jīng)濟(jì)損失。阿莫西林殘留是當(dāng)前歐盟和北美等國(guó)家對(duì)進(jìn)口動(dòng)物性食品的必檢項(xiàng)目之一。歐盟要求在牛奶中阿莫西林的最高限量為4yg/kg。國(guó)內(nèi)常用的方法是微生物法、高效液相色譜法、色/質(zhì)聯(lián)用法、ELISA法等。但這些方法測(cè)定的時(shí)間、程序復(fù)雜且費(fèi)用較高。
[0003]鑒于目前尚無快速的檢測(cè)方法，本實(shí)用新型的目的是提供一種可用于快速檢測(cè)阿莫西林的試紙以及一種可用于快速檢測(cè)阿莫西林的試紙盒，所述試紙和試紙盒具有方便快捷、操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0004]本實(shí)用新型的一個(gè)目的是提供一種快速檢測(cè)阿莫西林的試紙，本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)阿莫西林的試紙具有方便快捷、操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，適于臨床快速診斷。
[0005]本實(shí)用新型的技術(shù)方案是:
[0006]—種用于檢測(cè)阿莫西林的試紙，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片I上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接吸水墊3，另一端上方層疊連接樣本墊片4，其特征在于，所述硝酸纖維素膜2中間部位設(shè)有檢測(cè)線5，所述檢測(cè)線5包被有阿莫西林抗原，檢測(cè)線5的一邊設(shè)有控制線6，所述控制線6包被有羊抗鼠抗體。
[0007]進(jìn)一步地，上述試紙外還包括一外殼10，只露出樣本墊片4、硝酸纖維素膜2上的檢測(cè)線5和控制線6。
[0008]進(jìn)一步地，所述檢測(cè)線5和控制線6為平行設(shè)置。
[0009]本實(shí)用新型所述試紙結(jié)合一酶標(biāo)板微孔使用，所述微孔含有金標(biāo)記的阿莫西林抗體，檢驗(yàn)時(shí)將所述試紙的樣本墊片一端插入到所述微孔中，樣本中的阿莫西林抗原首先與微孔中的阿莫西林抗體發(fā)生免疫反應(yīng)，形成免疫復(fù)合物。
[0010]本實(shí)用新型所述的試紙條具有高靈敏度和方便檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。
[0011]本實(shí)用新型所述的快速檢測(cè)阿莫西林的試紙條的工作原理是:
[0012]采用免疫反應(yīng)原理，通過間接競(jìng)爭(zhēng)法制備而成。本實(shí)用新型所述試紙結(jié)合酶標(biāo)板微孔使用，所述微孔含有金標(biāo)記的阿莫西林抗體，檢驗(yàn)時(shí)將試紙插入到所述微孔中，樣本中的阿莫西林抗原首先與微孔中的阿莫西林抗體發(fā)生免疫反應(yīng)，形成免疫復(fù)合物。其后免疫復(fù)合物隨著樣本在硝基纖維素膜上層析流動(dòng)，當(dāng)免疫復(fù)合物層析至硝基纖維素膜上的檢測(cè)線(T檢測(cè)線)時(shí)，與預(yù)先包被在硝基纖維素膜上的抗阿莫西林抗原發(fā)生反應(yīng)，如果牛奶中的阿莫西林越多，檢測(cè)線上的復(fù)合物越少，在能檢到的靈敏度范圍內(nèi)檢測(cè)線不顯色，相反，如果牛奶中沒有阿莫西林，則抗體與檢測(cè)線反應(yīng)，T線顯色。因控制線(C線)包被有羊抗鼠抗體，均會(huì)顯色。
[0013]當(dāng)反應(yīng)結(jié)束后，利用膠體金免疫分析儀(深圳華英生物技術(shù)有限公司)將控制線和檢測(cè)線的光密度進(jìn)行分析，并將所分析得到的結(jié)果進(jìn)行運(yùn)算，從而得到相對(duì)光密度值(RI)。然后檢測(cè)儀根據(jù)已預(yù)先設(shè)置在檢測(cè)儀內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)阿莫西林的濃度進(jìn)行計(jì)算并顯示結(jié)果，以ng/mL為單位表示。
【附圖說明】
[0014]圖1是本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)阿莫西林的試紙的一種優(yōu)選實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0015]其中，1:支撐墊片，2:硝酸纖維素膜，3:吸水墊，4:樣本墊片，5:檢測(cè)線，6:控制線。
[0016]圖2是本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)阿莫西林的試紙盒的一種優(yōu)選實(shí)施方式的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0017]其中，10:外殼，4:樣本墊片，5:檢測(cè)線，6:控制線。
【具體實(shí)施方式】
[0018]以下結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型所述快速檢測(cè)阿莫西林的試紙進(jìn)行詳細(xì)說明，不能理解為是對(duì)本實(shí)用新型的限制。以下實(shí)施例中所使用的材料和試劑除特別說明外，均為普通市售。
[0019]【實(shí)施例1】制備快速檢測(cè)阿莫西林的試紙
[0020]如圖1所示的試紙結(jié)構(gòu)，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測(cè)線5包被有阿莫西林抗原，檢測(cè)線一邊設(shè)有控制線6，控制線包被有羊抗鼠抗體。
[0021]其中，硝酸纖維素膜2在試紙中用于固定包被抗原，同時(shí)也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處；檢測(cè)線5是將阿莫西林抗原使用0.01M*PBS、甲醇等緩沖液稀釋到lmg/ml的濃度，取0.7ul/cm劃線于所述硝酸纖維素膜2上，干燥即得；控制線6是將羊抗鼠抗體使用0.01M*PBS、甲醇等緩沖液稀釋到1.2mg/ml的濃度，取0.7ul/cm劃線于所述硝酸纖維素膜2上，干燥即得。
[0022]其中，所述樣品墊片4的原材料為濾血膜，不需要處理直接使用。
[0023]將上述各組成部件按圖1所示結(jié)構(gòu)粘貼在支撐墊片I上，獲得快速檢測(cè)阿莫西林的試紙。
[0024]金標(biāo)微孔的制作方法:
[0025]標(biāo)記阿莫西林抗體:用0.0lM pH7.4PBS稀釋，將阿莫西林抗體稀釋到lmg/mL，同時(shí)加入0.2M碳酸鉀溶液調(diào)PH值，10% BSA標(biāo)記膠體金，制成金標(biāo)抗體。
[0026]金標(biāo)微孔:上述取標(biāo)記好的金標(biāo)抗體Sul/孔，加入酶標(biāo)微孔中，干燥即得。
[0027]【實(shí)施例2】用本實(shí)用新型所述試紙快速檢測(cè)阿莫西林
[0028]取本實(shí)用新型優(yōu)選的一種快速檢測(cè)阿莫西林的試紙，如圖1所示，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜2的另一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測(cè)線5包被有阿莫西林抗原，檢測(cè)線一邊設(shè)有控制線6，控制線包被有羊抗鼠抗體。按以下步驟進(jìn)行檢測(cè):
[0029]I)取出如實(shí)施例1中所述的金標(biāo)微孔，將微孔放置于干凈桌面上，吸取待測(cè)樣品于微孔中充分混勻。
[0030]2)將試紙條(樣品墊一端)插入混勻后的微孔中反應(yīng)。
[0031]3)判讀，將所述試紙置于膠體金免疫分析儀，(型號(hào)HYYQ-OOI，深圳華英生物技術(shù)有限公司)中判定結(jié)果
[0032]【實(shí)施例3】用本實(shí)用新型所述試紙盒快速檢測(cè)阿莫西林
[0033]取本實(shí)用新型優(yōu)選的一種快速檢測(cè)阿莫西林的試紙，如圖1所示，包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜2的另一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測(cè)線5包被有阿莫西林抗原，檢測(cè)線一邊設(shè)有控制線6，控制線包被有羊抗鼠抗體；如圖2所示所述試紙外還包括一外殼10，只露出樣本墊片4、硝酸纖維素膜2上的檢測(cè)線5和控制線6。按以下步驟進(jìn)行檢測(cè):
[0034]I)取出如實(shí)施例1中所述的金標(biāo)微孔，將微孔放置于干凈桌面上，吸取待測(cè)樣品于微孔中充分混勻。
[0035]2)將步驟I獲得的混合液吸到樣品墊上，反應(yīng)。
[0036]3)判讀，將所述試紙置于膠體金免疫分析儀，(型號(hào)HYYQ-OOI，深圳華英生物技術(shù)有限公司)中判定結(jié)果。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于檢測(cè)阿莫西林的試紙，包括支撐墊片(I)，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜(2)，所述硝酸纖維素膜(2)的一端上方層疊連接吸水墊(3)，另一端上方層疊連接樣本墊片(4)，其特征在于，所述硝酸纖維素膜(2)中間部位設(shè)有檢測(cè)線(5)，所述檢測(cè)線(5)包被有阿莫西林抗原，檢測(cè)線(5)的一邊設(shè)有控制線(6)，所述控制線(6)包被有羊抗鼠抗體。2.如權(quán)利要求1所述的試紙，其特征在于，所述試紙外還包括一外殼(10)，只露出樣本墊片(4)、硝酸纖維素膜(2)上的檢測(cè)線(5)和控制線(6)。3.如權(quán)利要求2所述的試紙，其特征在于，所述檢測(cè)線(5)與控制線(6)為平行設(shè)置。
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種用于檢測(cè)阿莫西林的試紙，所述試紙包括支撐墊片1，位于所述支撐墊片上的硝酸纖維素膜2，所述硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接吸水墊3，硝酸纖維素膜2的一端上方層疊連接樣本墊片4，所述硝酸纖維素膜2中間部位檢測(cè)線5包被有阿莫西林抗原，檢測(cè)線5一邊設(shè)有控制線6，所述控制線6包被有羊抗鼠抗體。
【IPC分類】G01N33/558
【公開號(hào)】CN204882565
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201520459045
【發(fā)明人】漆傳鳳, 何詢, 張金超, 石代澤, 楊宏, 趙宇
【申請(qǐng)人】深圳華英生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年12月16日
【申請(qǐng)日】2015年6月30日