NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于免疫檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種ΝΤ-ρι.οΒΝΡ全血檢測(cè)試紙條。
【背景技術(shù)】
[0002]當(dāng)今隨著老齡化的發(fā)展以及各種心臟疾病的增多，導(dǎo)致心力衰竭病人逐年增加。心力衰竭(Heart Failure)是一種由于心臟功能障礙而產(chǎn)生的體征和癥狀的臨床綜合征。雖然現(xiàn)在的一些藥物可延緩病情惡化，但除非進(jìn)行心臟移植，否則心力衰竭是無(wú)法治愈。心力衰竭早期診斷和避免病情惡化是當(dāng)今醫(yī)療保健面臨的關(guān)鍵問(wèn)題，越早開(kāi)始治療，對(duì)病人就越有益。
[0003]研宄表明腦鈉肽(Brain natriuretic peptide，BNP)和氨基末端腦鈉肽前體(N-terminal pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP)濃度的升高對(duì)于心衰的診斷具有很高敏感性，并能評(píng)估心功能損害嚴(yán)重程度，是診斷和鑒別診斷心力衰竭非常有效的生物標(biāo)記物。NT-proBNP的生物半衰期是60-120分鐘，相比BNP20分鐘的生物半衰期要長(zhǎng)的多。同時(shí)，心衰時(shí)NT-proBNP的升高幅度要明顯大于BNP，更利于檢測(cè)。此外，NT-proBNP在血清和血漿中非常穩(wěn)定，可以采用常規(guī)血液樣本的傳送及處理方法，無(wú)需對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理。一般情況下ΝΤ-ρι.οΒΝΡ含量幾乎沒(méi)有日間變異，這意味著隨時(shí)可以取樣檢測(cè)；而且還不受患者體位及運(yùn)動(dòng)狀況的影響，在抽取血液樣品時(shí)，患者無(wú)需休息或平躺。
[0004]通過(guò)與紐約心臟學(xué)會(huì)(New York heart associat1n，NYHA)心功能分級(jí)比較，NT-proBNP更能真實(shí)反映心功能的變化。NT-proBNP水平與心衰的嚴(yán)重程度相關(guān)，水平越高病變?cè)絿?yán)重，預(yù)后也越差。同時(shí)，NT-proBNP有利于在早期階段或病變輕微階段發(fā)現(xiàn)心衰。
[0005]POCT中的膠體金免疫層析檢測(cè)法具有檢測(cè)迅速、操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和成本低等特點(diǎn)，且不需要低溫保存，適合于檢測(cè)NT-proBNP。在使用金標(biāo)免疫層析法快速檢測(cè)NT-proBNP時(shí)，通常需要采用全血作為檢測(cè)樣本，血清或血漿樣本因制備需要靜置一段時(shí)間或者需離心而使獲得檢測(cè)結(jié)果的時(shí)間延長(zhǎng)，故往往不適于作為快速檢測(cè)的標(biāo)本。目前市場(chǎng)上免疫層析試紙條的樣品墊僅為一層或兩層且為條形結(jié)構(gòu)，在滴加全血檢測(cè)時(shí)，紅細(xì)胞不能得到有效阻攔，影響樣品中抗原與結(jié)合墊上抗體特異性結(jié)合，使得最終檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確、誤差大。并且全血樣本用于免疫層析檢測(cè)時(shí)容易出現(xiàn)紅細(xì)胞過(guò)濾不完全或者溶血現(xiàn)象，導(dǎo)致紅細(xì)胞以及紅細(xì)胞釋放的血紅蛋白與分析物一起層析至檢測(cè)區(qū)，使檢測(cè)窗口的背景顏色增加，故而會(huì)對(duì)檢測(cè)線的定性、半定量及定量檢測(cè)產(chǎn)生干擾。因此，提供一種可充分過(guò)濾紅細(xì)胞并解決溶血干擾問(wèn)題的NT-proBNP全血免疫層析裝置對(duì)NT-proBNP臨床快速檢測(cè)有著重要意義。。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決現(xiàn)有膠體金全血檢測(cè)存在干擾的問(wèn)題，本實(shí)用新型提出一種NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條，該試紙條能夠有效將全血樣品中紅細(xì)胞與血清分離，并除去血清中殘存的紅細(xì)胞，并過(guò)濾了紅細(xì)胞釋放的血紅蛋白，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
[0007]本實(shí)用新型的技術(shù)方案是這樣實(shí)現(xiàn)的:
[0008]一種NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條，包括底板和吸水紙，所述底板上從左到右依次相互搭接有長(zhǎng)條形樣品墊、圓形樣品墊、紅細(xì)胞過(guò)濾膜、血紅蛋白吸附墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜以及所述吸水紙，所述圓形樣品墊位于所述長(zhǎng)條形樣品墊下方，所述紅細(xì)胞過(guò)濾膜位于所述圓形樣品墊下方，所述血紅蛋白吸附墊被所述紅細(xì)胞過(guò)濾膜完全覆蓋，所述血紅蛋白吸附墊內(nèi)包含血紅蛋白抗體包被微球，所述金標(biāo)墊位于所述血紅蛋白吸附墊下方，所述金標(biāo)墊內(nèi)包含膠體金標(biāo)記的ΝΤ-ρι.οΒΝΡ抗體，所述硝酸纖維素膜上面包被有相互平行的檢測(cè)線與質(zhì)控線，所述吸水紙位于所述硝酸纖維素膜的上面。
[0009]進(jìn)一步，所述金標(biāo)墊中包含膠體金標(biāo)記的NT-proBNP抗體的位置靠近所述血紅蛋白吸附墊一端，有利于血清中的NT-proBNP第一時(shí)間與所述NT-proBNP抗體接合，降低非特異性干擾，所述金標(biāo)墊可由玻璃纖維素膜或聚酯膜組成。
[0010]進(jìn)一步，所述血紅蛋白抗體包被的微球?yàn)槟z體金。
[0011]進(jìn)一步，所述檢測(cè)線靠近金標(biāo)墊的一側(cè)，所述質(zhì)控線靠近吸水紙的一側(cè)，所述檢測(cè)線包被有NT-proBNP捕獲單克隆抗體或多克隆抗體，所述質(zhì)控線包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體。
[0012]進(jìn)一步，所述吸水紙可用纖維素、玻璃纖維、多孔聚乙烯或多孔聚丙烯等材料制成。
[0013]本實(shí)用新型的有益效果:
[0014]1、本實(shí)用新型通過(guò)采用圓形樣品墊和長(zhǎng)條形樣品墊組合，實(shí)現(xiàn)全血樣品中紅細(xì)胞與血清分離；在這兩個(gè)樣品墊下面加一層紅細(xì)胞過(guò)濾膜，進(jìn)一步除去分離得到血清中殘余的紅細(xì)胞。
[0015]2、可消除全血檢測(cè)發(fā)生溶血現(xiàn)象時(shí)對(duì)ΝΤ-ρι.οΒΝΡ檢測(cè)結(jié)果造成的影響，血紅蛋白吸附墊可吸附因紅細(xì)胞破裂產(chǎn)生的血紅蛋白，避免其展層至硝酸纖維素膜增加背景顏色。
【附圖說(shuō)明】
[0016]為了更清楚地說(shuō)明本實(shí)用新型實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見(jiàn)地，下面描述中的附圖僅僅是本實(shí)用新型的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0017]圖1為本實(shí)用新型NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018]圖2為本實(shí)用新型NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條的俯視圖。
[0019]附圖標(biāo)示:1、底板，2、長(zhǎng)條形樣品墊，3、圓形樣品墊，4、紅細(xì)胞過(guò)濾膜，5、血紅蛋白吸附墊，6、金標(biāo)墊，7、硝酸纖維素膜，8、吸水紙，9、檢測(cè)線，10、質(zhì)控線。
【具體實(shí)施方式】
[0020]下面將結(jié)合本實(shí)用新型實(shí)施例中的附圖，對(duì)本實(shí)用新型實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒緦?shí)用新型中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。[0021 ] 如圖1和2所示，一種NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條，包括底板I以及位于底板I上從左到右依次相互搭接有長(zhǎng)條形樣品墊2、圓形樣品墊3、紅細(xì)胞過(guò)濾膜4、血紅蛋白吸附墊5、金標(biāo)墊6、硝酸纖維素膜7以及吸水紙8。圓形樣品墊3位于長(zhǎng)條形樣品墊2下方，實(shí)現(xiàn)全血樣品中紅細(xì)胞與血清分離。紅細(xì)胞過(guò)濾膜4位于圓形樣品墊3下方，血紅蛋白吸附墊5被紅細(xì)胞過(guò)濾膜4完全覆蓋。血紅蛋白吸附墊5內(nèi)包含血紅蛋白抗體包被膠體金。金標(biāo)墊6位于血紅蛋白吸附墊5下方。金標(biāo)墊6內(nèi)包含膠體金標(biāo)記的NT-proBNP抗體，其位置靠近血紅蛋白吸附墊5 —端，有利于血清中的NT-proBNP第一時(shí)間與NT-proBNP抗體接合，降低非特異性干擾。硝酸纖維素膜7上面包被有相互平行的檢測(cè)線9與質(zhì)控線10。檢測(cè)線9靠近金標(biāo)墊6的一側(cè)，質(zhì)控線10靠近吸水紙8的一側(cè)。檢測(cè)線9包被有NT-proBNP捕獲單克隆抗體(當(dāng)然也可以為NT-proBNP捕獲多克隆抗體)，質(zhì)控線10包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體。吸水紙8位于硝酸纖維素膜7的上面。
[0022]本實(shí)施例中，金標(biāo)墊可由玻璃纖維素膜或聚酯膜組成。吸水紙可用纖維素、玻璃纖維、多孔聚乙烯或多孔聚丙烯等材料制成。
[0023]以上所述僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種NT-P1X)BNP全血檢測(cè)試紙條，包括底板和吸水紙，其特征在于，所述底板上從左到右依次相互搭接有長(zhǎng)條形樣品墊、圓形樣品墊、紅細(xì)胞過(guò)濾膜、血紅蛋白吸附墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜以及所述吸水紙，所述圓形樣品墊位于所述長(zhǎng)條形樣品墊下方，所述紅細(xì)胞過(guò)濾膜位于所述圓形樣品墊下方，所述血紅蛋白吸附墊被所述紅細(xì)胞過(guò)濾膜完全覆蓋，所述血紅蛋白吸附墊內(nèi)包含血紅蛋白抗體包被微球，所述金標(biāo)墊位于所述血紅蛋白吸附墊下方，所述金標(biāo)墊內(nèi)包含膠體金標(biāo)記的ΝΤ-ρι.οΒΝΡ抗體，所述硝酸纖維素膜上面包被有相互平行的檢測(cè)線與質(zhì)控線，所述吸水紙位于所述硝酸纖維素膜的上面。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述金標(biāo)墊中包含膠體金標(biāo)記的NT-proBNP抗體的位置靠近所述血紅蛋白吸附墊一端。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ΝΤ-ρι.οΒΝΡ全血檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述血紅蛋白抗體包被的微球?yàn)槟z體金。4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ΝΤ-ρι.οΒΝΡ全血檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述檢測(cè)線靠近金標(biāo)墊的一側(cè)，所述質(zhì)控線靠近吸水紙的一側(cè)，所述檢測(cè)線包被有NT-proBNP捕獲單克隆抗體或多克隆抗體，所述質(zhì)控線包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體。
【專(zhuān)利摘要】本實(shí)用新型公開(kāi)了一種NT-proBNP全血檢測(cè)試紙條，包括底板，底板上從左到右依次相互搭接有長(zhǎng)條形樣品墊、圓形樣品墊、紅細(xì)胞過(guò)濾膜、血紅蛋白吸附墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜以及吸水紙，圓形樣品墊位于長(zhǎng)條形樣品墊下方，紅細(xì)胞過(guò)濾膜位于圓形樣品墊下方，血紅蛋白吸附墊被紅細(xì)胞過(guò)濾膜完全覆蓋，血紅蛋白吸附墊內(nèi)包含血紅蛋白抗體包被微球，金標(biāo)墊位于血紅蛋白吸附墊下方，金標(biāo)墊內(nèi)包含膠體金標(biāo)記的NT-proBNP抗體，硝酸纖維素膜上面包被有相互平行的檢測(cè)線與質(zhì)控線。該試紙條能夠有效將全血樣品中紅細(xì)胞與血清分離，并除去血清中殘存的紅細(xì)胞，并過(guò)濾了紅細(xì)胞釋放的血紅蛋白，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
【IPC分類(lèi)】G01N33/68
【公開(kāi)號(hào)】CN204631050
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201520373364
【發(fā)明人】孫亦陽(yáng)
【申請(qǐng)人】安徽大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年9月9日
【申請(qǐng)日】2015年5月28日