滲透性的裝置包括:卵細(xì)胞微灌流單元I。卵子是球形的,人成熟卵細(xì)胞直徑大約為120微米,其尺寸(100微米?150微米)遠(yuǎn)大于一般的細(xì)胞尺寸(10微米?20微米);并且,整個卵細(xì)胞最外層包裹有一層透明帶狀物(簡稱透明帶)一一糖蛋白,這種物質(zhì)既具有保護(hù)卵細(xì)胞的作用,又能捕獲和限制精子,也使得卵細(xì)胞不貼壁。因此,本申請所述卵細(xì)胞微灌流單元I在尺寸上可以容納卵細(xì)胞,也能在流動過程中固定卵細(xì)胞,從而測定其滲透性參數(shù)等。
[0041]在本申請中,卵細(xì)胞微灌流單元I包括第一蓋板11和第二蓋板12,用于固定微灌流單元;也可以分別稱為上壁11和下壁12。在本申請實(shí)施例中,所述第一蓋板和第二蓋板平行設(shè)置,兩端可以封閉,也可以不封閉;尺寸優(yōu)選相同,本申請沒有其他特殊限制。所述第一蓋板和第二蓋板的制作材料優(yōu)選獨(dú)立地選自娃玻璃,導(dǎo)熱良好,易于觀察。在本申請的一個實(shí)施例中,所述第一蓋板和第二蓋板為平行的兩層硅玻璃,通過夾持固定兩層薄膜。
[0042]在第一蓋板11和第二蓋板12之間,本申請依次設(shè)置第一薄膜13和第二薄膜14。作為優(yōu)選,所述第一薄膜和第二薄膜的制作材料均為硅膠。在本申請中,所述薄膜為兩個刻有凹槽的薄膜,通過其上的刻槽配合形成一個封閉空腔,也就是微灌流腔。即所述第一薄膜上設(shè)置有第一刻槽,所述第二薄膜上設(shè)置有第二刻槽,所述第二刻槽與第一刻槽形成微灌流腔。
[0043]在本申請中,所述微灌流腔設(shè)置有入口導(dǎo)管15和出口導(dǎo)管16,可采用本領(lǐng)域常用的毛細(xì)管作為導(dǎo)管。作為優(yōu)選,所述入口導(dǎo)管和出口導(dǎo)管均為內(nèi)徑為0.3毫米?I毫米的毛細(xì)管。本申請對所述導(dǎo)管的設(shè)置沒有特殊限制,能用來裝入、卸載卵細(xì)胞和注入、抽出溶液,實(shí)現(xiàn)灌流卵細(xì)胞溶液即可。在本申請的一個實(shí)施例中,入口導(dǎo)管15用來裝入、卸載卵細(xì)胞及注入溶液;出口導(dǎo)管16用來抽出、注入溶液。本申請實(shí)施例灌流卵細(xì)胞時,從入口導(dǎo)管15裝載卵細(xì)胞至微灌流腔,再從入口導(dǎo)管15注入本領(lǐng)域常用的低溫保護(hù)劑至微灌流腔,從出口導(dǎo)管16抽出低溫保護(hù)劑;卸載卵細(xì)胞時,從出口導(dǎo)管16注入低溫保護(hù)劑,從入口導(dǎo)管15抽取低溫保護(hù)劑,卵細(xì)胞將會隨著低溫保護(hù)劑被抽出。
[0044]所述微灌流腔內(nèi)設(shè)置有溫度傳感設(shè)備,如圖1中示出的熱電偶17,以監(jiān)測微灌流腔的溫度。本申請對所述溫度傳感設(shè)備沒有特殊限制,如在本申請的一個實(shí)施例中,熱電偶17貼近出口導(dǎo)管16 ;熱電偶17可通過彎折的形式完全置入微灌流腔內(nèi),能實(shí)時地、直接地監(jiān)測卵細(xì)胞所處溶液環(huán)境的溫度。
[0045]參見圖2,圖2為本申請實(shí)施例提供的卵細(xì)胞微灌流單元的結(jié)構(gòu)示意圖。圖2中,11為第一蓋板,12為第二蓋板,13為第一薄膜,14為第二薄膜,15為入口導(dǎo)管,16為出口導(dǎo)管,17為熱電偶,18為微灌流腔,19為固定擋板。
[0046]在本申請實(shí)施例的入口導(dǎo)管15和出口導(dǎo)管16之間,微灌流腔18內(nèi)設(shè)置有固定擋板19。所述固定擋板用于固定卵細(xì)胞位置,且允許溶液通過。
[0047]本申請實(shí)施例從入口導(dǎo)管15裝載卵細(xì)胞至微灌流腔18,再從入口導(dǎo)管15注入低溫保護(hù)劑至微灌流腔18 ;從出口導(dǎo)管16抽出低溫保護(hù)劑,卵細(xì)胞將會卡在固定擋板19處而被固定,由于卵細(xì)胞透明帶的保護(hù),固定擋板19不會對卵細(xì)胞的形態(tài)產(chǎn)生影響,而溶液會繼續(xù)流動。卸載卵細(xì)胞時,從出口導(dǎo)管16注入低溫保護(hù)劑,從入口導(dǎo)管15抽取低溫保護(hù)劑,卵細(xì)胞將會隨著低溫保護(hù)劑被抽出。本申請利用卵細(xì)胞透明帶將卵細(xì)胞卡在微灌流腔的固定位置,而不會影響卵細(xì)胞的形態(tài)特征,從而為研宄卵細(xì)胞的性質(zhì)提供穩(wěn)定的環(huán)境。
[0048]在本申請的一個實(shí)施例中,所述固定擋板的數(shù)量為I個,可以設(shè)置在任一薄膜上。如圖2所示,在微灌流腔18內(nèi),固定擋板19設(shè)置在第一薄膜13上,且其下端與第二薄膜14之間有間隙。相應(yīng)的,所述固定擋板也可以設(shè)置在第二薄膜上,且其下端與第一薄膜之間有間隙。此外,所述固定擋板的數(shù)量還可以為2個,分別設(shè)置在第一薄膜和第二薄膜的相同位置,且兩個固定擋板之間有間隙。本申請實(shí)施例對所述間隙的尺寸沒有特殊限制,能允許溶液通過而不允許卵細(xì)胞通過即可,其尺寸優(yōu)選為卵細(xì)胞直徑的1/2?1/3。
[0049]在本申請中,所述固定擋板可以垂直于薄膜設(shè)置,也可以傾斜設(shè)置;本申請對所述固定擋板的形狀也沒有特殊限制。所述固定擋板的制作材料優(yōu)選為硅膠;并且,本申請實(shí)施例所述固定擋板可與第一薄膜一體成型。
[0050]參見圖3,圖3為本申請實(shí)施例提供的卵細(xì)胞微灌流單元中第一薄膜和第二薄膜的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3中,13為第一薄膜,14為第二薄膜,19為固定擋板;131為第一短槽,132為第二短槽,141為第二刻槽。
[0051]在本申請的一個實(shí)施例中,固定擋板19設(shè)置在第一薄膜13上,將第一薄膜13上的第一刻槽劃分為兩個短槽,即第一短槽131和第二短槽132 ;或者說是第一短槽131和第二短槽132之間的部分構(gòu)成固定擋板19。而第二薄膜14上刻有長槽,即第二刻槽141 ;長槽和短槽的外側(cè)邊緣對齊,寬度相同,位置重合,形成微灌流腔。在本申請實(shí)施例中,固定擋板19設(shè)置在第一薄膜13上,固定檔板19下端與第二薄膜14之間有間隙,也將微灌流腔劃分為兩部分:入口導(dǎo)管處的第一短槽131和第二刻槽141構(gòu)成裝載卵細(xì)胞的材料腔;出口導(dǎo)管處的第二短槽132和第二刻槽141構(gòu)成的腔便于放置溫度傳感設(shè)備,能實(shí)時直接地監(jiān)測溫度。
[0052]考慮卵細(xì)胞直徑為100微米?150微米以及固定擋板的設(shè)置等因素,在本申請中,所述第一薄膜可為刻有兩個短槽的薄膜,其厚度優(yōu)選為10微米?400微米,更優(yōu)選為20微米?300微米;所述第二薄膜可為刻有長槽的薄膜,其厚度優(yōu)選為5微米?140微米,更優(yōu)選為8微米?120微米。所述微灌流腔的寬度優(yōu)選為110微米?5毫米,更優(yōu)選為120微米?4毫米;所述微灌流腔除固定擋板處的高度優(yōu)選為100微米?I毫米。在本申請的一個實(shí)施例中,第一短槽131的長度可為110微米?20毫米;第二短槽132的長度可大于O且小于20毫米;第二刻槽141的長度可為I毫米?60毫米,優(yōu)選為5毫米?50毫米。
[0053]如圖1所示,除了卵細(xì)胞微灌流單元1,本申請公開的可用于研宄卵細(xì)胞滲透性的裝置包括:循環(huán)制冷單元2。所述循環(huán)制冷單元緊貼于第一蓋板,用來使微灌流腔中液體達(dá)到特定溫度。
[0054]具體的,本申請對所述循環(huán)制冷單元沒有特殊限制,優(yōu)選包括:
[0055]具有制冷液循環(huán)腔的腔體21 ;所述腔體兩端分別設(shè)置有制冷液進(jìn)口和制冷液出口,如圖1示出的制冷液進(jìn)口 22和制冷液出口 23 ;
[0056]所述腔體上設(shè)置有入口導(dǎo)管通孔和出口導(dǎo)管通孔,分別用于放置所述入口導(dǎo)管和出口導(dǎo)管。
[0057]參見圖4和圖5,圖4為本申請實(shí)施例提供的循環(huán)制冷單元的結(jié)構(gòu)示意圖,圖5為本申請實(shí)施例提供的循環(huán)制冷單元的剖面示意圖。圖4和圖5中,21為腔體,22為制冷液進(jìn)口,23為制冷液出口,24為入口導(dǎo)管通孔,25為出口導(dǎo)管通孔,26為制冷液循環(huán)腔。
[0058]本申請實(shí)施例提供的循環(huán)制冷單元包括腔體21,其具有制冷液循環(huán)腔26,且兩端分別設(shè)置有制冷液進(jìn)口 22和制冷液出口 23。在本申請實(shí)施例中,腔體21上設(shè)置有入口導(dǎo)管通孔24和出口導(dǎo)管通孔25,分別用于放置微灌流腔入口導(dǎo)管15和出口導(dǎo)管16。
[0059]所述循環(huán)制冷單元可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的設(shè)備;作為優(yōu)選,所述腔體的制作材料為聚二甲基硅氧烷。在本申請實(shí)施例中,制冷液進(jìn)口 22和制冷液出口 23可分別連接到低溫浴等液體制冷控溫設(shè)備的入口和出口,通過熱電偶17的反饋溫度,控制微灌流腔的液體達(dá)到特定溫度。因此,具有微灌流腔的微灌流單