一種止咳糖漿的檢測方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種止咳糖漿的檢測方法，涉及一種中藥成方制劑的檢測方法，該方法用以監(jiān)測不法廠商少投或不投相應(yīng)藥材，甚至混入不可有的藥材成分，使藥品不能達到應(yīng)有的臨床效果，本發(fā)明中的止咳糖漿的處方包括麻黃、苦杏仁、石膏、甘草(炙)，通過對止咳糖漿中麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別、苦杏仁的薄層鑒別、甘草的薄層鑒別、鹽酸麻黃堿的含量測定，可有效檢測中藥止咳糖漿的成分和含量，即能夠保證藥品中含有麻黃、苦杏仁、甘草等必須的藥材成分，同時又能防止混入不可有的麻黃根的藥材成分，本方法科學(xué)合理、切實可行，使該藥品更加安全、更加有效，從而保證了該顆粒制劑的臨床療效，維護了患者的利益。
【專利說明】
一種止咳糖漿的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及一種中藥成方制劑的檢測方法，特別涉及一種中藥止咳糖漿的成分鑒別和含量測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]中藥止咳糖漿是《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二十冊收載的品種，標準編號為WS3—B—4010—98，處方為麻黃、苦杏仁、石膏、甘草(炙)，是純中藥制成的糖漿劑，它具有鎮(zhèn)咳，祛痰，平喘的作用，臨床上用于急、慢性支氣管炎及喘息等疾病，中藥止咳糖漿是目前市場上用于治療急、慢性支氣管炎及喘息的常用藥品，但是原標準中除了用鹽酸麻黃堿作對照對麻黃進行了定性鑒別外，沒有對其中的其它任何藥材和任何成分進行定性定量的質(zhì)量檢測，既沒有質(zhì)量指標，也沒有這些質(zhì)量指標的鑒別和檢測方法，不法廠商在生產(chǎn)藥品時不嚴格按照處方的劑量配料，肆意減少原料，致使藥品的療效明顯下降，影響藥品的安全有效，嚴重損害患者的利益。
[0003]另一方面，處方中用到麻黃，是方中的君藥，列在第一位，用量在藥材中是最大的，起解表發(fā)汗的作用，但是，麻黃植物的地上部分(即麻黃)與其地下部分(即麻黃根)的作用完全不同，甚至是相反的，麻黃有發(fā)汗作用，而麻黃根有止汗作用，《本草綱目》記載:麻黃發(fā)汗之氣，駛不能御，而根節(jié)止汗，效如影響，《現(xiàn)代中藥志》記載:麻黃、麻黃根雖出同株，但因藥用部分不同，所含化學(xué)成分不同，因而性味、功效、藥理、臨床運用各異，麻黃的主要成分麻黃堿引起收縮壓和舒張壓上升，脈壓增大，而麻黃根的主要成分麻黃根素等物質(zhì)具有降壓作用，使脈壓降低，但現(xiàn)在麻黃是緊缺和控制藥材，人們在采收時往往連根拔起，沒有將麻黃植物的地上部分即麻黃與其地下部份即麻黃根完全分開，使制成的藥品療效下降甚至不治病反而致病，所以控制麻黃根，不讓其混入麻黃中，對保證中藥止咳糖漿的療效是十分必要的。
[0004]處方中用到苦杏仁，其含有的苦杏仁苷，有鎮(zhèn)咳、平喘作用，主要原理是苦杏仁苷能被苦杏仁本身所含的苦杏仁酶水解，或者被人體腸道微生物酶水解，產(chǎn)生微量的氫氰酸與苯甲醛，對呼吸中樞有抑制作用，達到鎮(zhèn)咳、平喘的目的，如果藥品生產(chǎn)過程控制不好，其鎮(zhèn)咳、平喘的有效成分早已經(jīng)產(chǎn)生并且揮發(fā)，起不到鎮(zhèn)咳、平喘的作用，如果苦杏仁苷在前期沒有水解而過多在人體腸道內(nèi)被微生物酶水解，產(chǎn)生的氫氰酸與苯甲醛過多，就對人體有害，所以不好控制，有的廠家為了安全可能就不使用苦杏仁，致使藥品沒有療效，因此質(zhì)量監(jiān)測中加強對苦杏仁的檢查十分重要。但是苦杏仁成分復(fù)雜，雖然《中國藥典》有苦杏仁的鑒別方法，但是效果不好，而且只是用苦杏仁苷對照品鑒別，成分單一，這種方法用到成分更加復(fù)雜的中藥成方制劑中就更不容易實現(xiàn)，《中國醫(yī)藥導(dǎo)刊》的《宣肺止咳合劑質(zhì)量標準研究》一文有用苦杏仁對照藥材進行薄層色譜鑒別的探索，但某些處理方法明顯是借鑒《中國藥典》，如“取合劑20ml，用石油醚萃取兩次，每次20ml，棄取石油醚萃取液”并不合理，另外，其處理方法太繁瑣且最后的展開效果也不好，對于鑒別中藥止咳糖漿中的苦杏仁根本不行，所以必須進行大量研究，另尋好的方法來監(jiān)測苦杏仁。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的，是提供一種止咳糖漿的檢測方法，用以監(jiān)測控制不法廠商少投或不投相應(yīng)藥材，有效地檢測中藥止咳糖漿的成分和含量，特別是用薄層色譜法檢測其中的麻黃和麻黃根、苦杏仁、甘草等主要藥材，還對麻黃中的鹽酸麻黃堿測定了含量，使該藥品更加安全、更加有效，進而保證該中藥止咳糖漿的臨床療效，維護了患者的利益。
[0006]中藥止咳糖漿的處方:麻黃120g、苦杏仁80g、石膏240g、甘草(炙)60g。[〇〇〇7]制法:以上四味，苦杏仁壓榨去油，其余三味，加水煮沸后加入苦杏仁，煎煮二次， 第一次4小時，第二次3小時，合并煎液，濾過，靜置，取上清液濃縮至420ml，加蔗糖625g，煮沸，濾過，再加苯甲酸1.15g(用乙醇100 ml溶解)，調(diào)整總量至1000ml，攪勻，濾過，即得。本發(fā)明提供的止咳糖漿的檢測方法，該檢測方法包括成分鑒別及含量測定項目，其中: 成分鑒別是對止咳糖漿中麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別、苦杏仁的薄層鑒別、甘草的薄層鑒別，含量測定是對止咳糖漿中鹽酸麻黃堿的含量測定；成分鑒別包括:(1)麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別:取本品10ml，用按體積比計的石油醚:甲醇=2?5:0.5?1.5混合液振搖提取2次，每次 10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液，另取麻黃對照藥材 2g，加水20ml，加熱回流提取20分鐘，濾過，濾液用按體積比計的石油醚:甲醇=2?5:0.5? 1.5混合液振搖提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為麻黃對照藥材溶液，另取麻黃根素對照品和麻黃新堿A對照品，加甲醇制成每lml含麻黃根素對照品和麻黃新堿A對照品各lmg的混合溶液，作為麻黃根素和麻黃新堿A對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各l〇yl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比計的甲苯:甲醇:氨水=12?15:1?4:0.5?1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與麻黃對照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點，在與麻黃根素對照品和麻黃新堿A對照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)不得顯相同顏色的斑點；(2)苦杏仁的薄層鑒別:取本品10ml，加水10ml，搖勻，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液，另取苦杏仁對照藥材lg，研細，加石油醚 20 ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，殘渣加水30 ml，煮沸10分鐘，濾過，濾液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各l〇yl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的甲苯:乙酸乙酯=2?5:0.5?1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸溶液，在105 °C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點；(3)甘草的薄層鑒別取本品20ml，加水稀釋至40ml，離心，取上清液，通過已處理好的D101型大孔吸附樹脂柱，用水洗脫至洗脫液無色，棄去水液，再用80%乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為供試品溶液，另取甘草對照藥材lg，加乙醇20ml，加熱回流20分鐘，濾過，取濾液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5?10μ1，分別點于同一以1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以按體積比計的乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=11?17:0.5?1.5:0.5?1.5:1?4為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1 %硫酸乙醇溶液，105 °C加熱至斑點顯色清晰；
供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的主斑點；
含量測定包括:
(4)鹽酸麻黃堿的含量測定:
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
以體積比計的乙腈:0.1%磷酸溶液=7?11: 85?94為流動相；
檢測波長為207nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于3000;
取鹽酸麻黃堿對照品1mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液，精密量取本品10ml，置10ml量瓶中，加甲醇60ml，超聲處理20分鐘，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液Iml，置1ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定，即得本樣品中鹽酸麻黃堿的含量；
本品每Iml含麻黃以鹽酸麻黃堿計應(yīng)不得少于0.5mg。
[0008]其中:步驟(I)中的用于制備供試品溶液的石油醚與甲醇的混合液按體積比計優(yōu)選石油醚:甲醇=3:1。
[0009]步驟(I)中的用于制備麻黃對照藥材溶液的石油醚與甲醇的混合液按體積比計優(yōu)選石油醚:甲醇=3:1。
[0010]步驟(I)中的展開劑以體積比計優(yōu)選甲苯:甲醇:氨水=10:3:1。
[0011]步驟(2)中的展開劑以體積比計優(yōu)選甲苯:乙酸乙酯=3:1。
[0012]步驟(3)中的DlOl型大孔吸附樹脂柱的內(nèi)徑優(yōu)選15mm，高優(yōu)選12cm。
[0013]步驟(3)中的展開劑按體積比計優(yōu)選乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=15:1:1: 2。
[0014]步驟(4)中的流動相以體積比計優(yōu)選乙腈:0.1%磷酸溶液=10:89。
[0015]本發(fā)明的技術(shù)效果:
本發(fā)明提供的止咳糖漿的檢測方法，通過對制劑中的麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別，苦杏仁的薄層鑒別，甘草的薄層鑒別，鹽酸麻黃堿的含量測定，有了明確的成分檢測措施和含量指標，有效地監(jiān)測中藥止咳糖漿的成分和含量，即能夠保證藥品中含有麻黃、苦杏仁、甘草等必須的藥材成分，同時又能防止混入不可有的麻黃根的藥材成分，本方法科學(xué)合理、切實可行，使該藥品更加安全、更加有效，從而保證了該顆粒制劑的臨床療效，維護了患者的利益。
【具體實施方式】
[0016]實施例1【處方】麻黃120g苦杏仁80g石膏240g甘草(炙)60g【制法】以上四味，苦杏仁壓榨去油;其余三味，加水煮沸后加入苦杏仁，煎煮二次，第一次4小時，第二次3小時，合并煎液，濾過，靜置，取上清液濃縮至420ml，加蔗糖625g，煮沸， 濾過，再加苯甲酸1.15g(用乙醇100 ml溶解)，調(diào)整總量至1000ml，攪勻，濾過，即得。
[0017]【性狀】本品為棕色粘稠的液體;味甜。
[0018]【鑒別】(1)鹽酸麻黃堿的薄層鑒別取本品10ml，加濃氨試液lml，用按體積比計的乙醚:乙醇=8: 2混合液提取2次，每次 10ml，合并提取液，用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液，另取鹽酸麻黃堿對照品，用甲醇制成每lml含5mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5yl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的正丁醇:冰醋酸:水=8:2:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.5%茚三酮的丙酮溶液，于105 °C烘約 10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0019](2)麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別取本品10ml，用按體積比計的石油醚:甲醇=2:0.5混合液振搖提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液，另取麻黃對照藥材2g，加水 20ml，加熱回流提取20分鐘，濾過，濾液用按體積比計的石油醚:甲醇=2:0.5混合液振搖提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為麻黃對照藥材溶液， 另取麻黃根素和麻黃新堿A對照品，加甲醇制成每lml含麻黃根素和麻黃新堿A對照品各lmg 的混合溶液，作為麻黃根素和麻黃新堿A對照品，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各 l〇yl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比計的甲苯:甲醇:氨水=12:1:0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10 %硫酸乙醇溶液，在105 °C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與麻黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，在與麻黃根素和麻黃新堿A對照品色譜相應(yīng)的位置上，不顯相同顏色的斑點。
[0020](3)苦杏仁的薄層鑒別:取本品10ml，加水10ml，搖勻，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液，另取苦杏仁對照藥材lg，研細，加石油醚 20 ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，殘渣加水30 ml，煮沸10分鐘，濾過，濾液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各l〇yl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的甲苯:乙酸乙酯=2:0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸溶液，在105°C 加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0021](4)甘草的薄層鑒別取本品20ml，加水稀釋至40ml，離心，取上清液，通過已處理好的D101型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑為15mm，高為12cm)，用水洗脫至洗脫液無色，棄去水液，再用80%乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml 使溶解，取上清液作為供試品溶液，另取甘草對照藥材lg，加乙醇20ml，加熱回流20分鐘，濾過，取濾液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml 使溶解，取上清液作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5?10yl，分別點于同一以1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以按體積比計的乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=11: 〇.5:0.5:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105 °C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點。[〇〇22]【檢查】相對密度不低于1.235。
[0023]【含量測定】(5)鹽酸麻黃堿的含量測定:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比計的乙腈:0.1%磷酸溶液=7:85為流動相；檢測波長為207nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于3000;取鹽酸麻黃堿對照品l〇mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液，精密量取本品 10ml，置100ml量瓶中，加甲醇60ml，超聲處理20分鐘，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液lml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液， 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各l〇yl，注入液相色譜儀，測定，即得本樣品中鹽酸麻黃堿的含量；本品每lml含麻黃以鹽酸麻黃堿計為0.57mg。[〇〇24]【功能與主治】鎮(zhèn)咳，祛痰，平喘。用于急、慢性支氣管炎及喘息等。[〇〇25]【用法與用量】口服，一次15ml，一日3次。[〇〇26]【貯藏】密封，置陰涼處。[〇〇27] 實施例2(1)鹽酸麻黃堿的薄層鑒別取本品10ml，加濃氨試液lml，用按體積比計的乙醚:乙醇=8: 2混合液提取2次，每次 10ml，合并提取液，用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液，另取鹽酸麻黃堿對照品，用甲醇制成每lml含5mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5yl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的正丁醇:冰醋酸:水=8:2:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.5%茚三酮的丙酮溶液，于105 °C烘約 10分鐘；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。[〇〇28](2)麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別取本品10ml，用按體積比計的石油醚:甲醇=5:1.5混合液振搖提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液，另取麻黃對照藥材2g，加水 20ml，加熱回流提取20分鐘，濾過，濾液用按體積比計的石油醚:甲醇=5:1.5混合液振搖提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為麻黃對照藥材溶液，另取麻黃根素和麻黃新堿A對照品，加甲醇制成每Iml含麻黃根素和麻黃新堿A對照品各Img的混合溶液，作為麻黃根素和麻黃新堿A對照品，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各ΙΟμΙ，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比計的甲苯:甲醇:氨水=15:4:1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1 %硫酸乙醇溶液，在105 °C加熱至斑點顯色清晰；
供試品色譜中，在與麻黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，在與麻黃根素和麻黃新堿A對照品色譜相應(yīng)的位置上，不顯相同顏色的斑點。
[0029](3)苦杏仁的薄層鑒別:
取本品1ml，加水1ml，搖勻，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取苦杏仁對照藥材lg，研細，加石油醚20 ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，殘渣加水30 ml，煮沸10分鐘，濾過，濾液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的甲苯:乙酸乙酯=5:1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；
供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0030](4)甘草的薄層鑒別
取本品20ml，加水稀釋至40ml，離心，取上清液，通過已處理好的DlOl型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑為15mm，高為12cm)，用水洗脫至洗脫液無色，棄去水液，再用80%乙醇10ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為供試品溶液，另取甘草對照藥材Ig，加乙醇20ml，加熱回流20分鐘，濾過，取濾液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5?ΙΟμΙ，分別點于同一以1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以按體積比計的乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=17:1.5:1.5:4為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點顯色清晰；
供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點。
[0031](5)鹽酸麻黃堿的含量測定:
以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；
以體積比計的乙腈:0.1%磷酸溶液=11: 94為流動相；
檢測波長為207nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于3000;
取鹽酸麻黃堿對照品1mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液，精密量取本品10ml，置10ml量瓶中，加甲醇60ml，超聲處理20分鐘，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液Iml，置1ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ1，注入液相色譜儀，測定，即得本樣品中鹽酸麻黃堿的含量；
本品每Iml含麻黃以鹽酸麻黃堿計為0.61mg。
[0032]實施例3
(I)鹽酸麻黃堿的薄層鑒別
取本品1ml，加濃氨試液Iml，用按體積比計的乙醚:乙醇=8: 2混合液提取2次，每次10ml，合并提取液，用無水硫酸鈉脫水，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取鹽酸麻黃堿對照品，用甲醇制成每Iml含5mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的正丁醇:冰醋酸:水=8: 2: I為展開劑，展開，取出，晾干，噴以0.5%茚三酮的丙酮溶液，于105 °C烘約1分鐘；
供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0033](2)麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別
取本品10ml，用按體積比計的石油醚:甲醇=3:1混合液振搖提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取麻黃對照藥材2g，加水20ml，加熱回流提取20分鐘，濾過，濾液用按體積比計的石油醚:甲醇=3: I混合液振搖提取2次，每次1ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為麻黃對照藥材溶液，另取麻黃根素和麻黃新堿A對照品，加甲醇制成每Iml含麻黃根素和麻黃新堿A對照品各Img的混合溶液，作為麻黃根素和麻黃新堿A對照品，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各ΙΟμΙ，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比計的甲苯:甲醇:氨水=10:3:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1 %硫酸乙醇溶液，在105 °C加熱至斑點顯色清晰；
供試品色譜中，在與麻黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，在與麻黃根素和麻黃新堿A對照品色譜相應(yīng)的位置上，不顯相同顏色的斑點。
[0034](3)苦杏仁的薄層鑒別:
取本品1ml，加水1ml，搖勻，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取苦杏仁對照藥材lg，研細，加石油醚
20ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，殘渣加水30 ml，煮沸10分鐘，濾過，濾液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各ΙΟμΙ，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的甲苯:乙酸乙酯=3:1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰；
供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
[0035](4)甘草的薄層鑒別
取本品20ml，加水稀釋至40ml，離心，取上清液，通過已處理好的DlOl型大孔吸附樹脂柱(內(nèi)徑為15mm，高為12cm)，用水洗脫至洗脫液無色，棄去水液，再用80%乙醇10ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為供試品溶液，另取甘草對照藥材Ig，加乙醇20ml，加熱回流20分鐘，濾過，取濾液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5?ΙΟμΙ，分別點于同一以1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以按體積比計的乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=15:1:1:2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點。[〇〇36](5)鹽酸麻黃堿的含量測定:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比計的乙腈:0.1%磷酸溶液=10:89為流動相；檢測波長為207nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于3000;取鹽酸麻黃堿對照品l〇mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液，精密量取本品 10ml，置100ml量瓶中，加甲醇60ml，超聲處理20分鐘，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液lml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液， 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各l〇yl，注入液相色譜儀，測定，即得本樣品中鹽酸麻黃堿的含量；本品每lml含麻黃以鹽酸麻黃堿計為0.69mg。
【主權(quán)項】
1.一種止咳糖漿的檢測方法，該檢測方法包括成分鑒別及含量測定項目，其特征在于:所述成分鑒別是對止咳糖漿中麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別、苦杏仁的薄層鑒另丨」、甘草的薄層鑒別，所述含量測定是對止咳糖漿中鹽酸麻黃堿的含量測定； 所述成分鑒別包括: (1)麻黃、麻黃根素和麻黃新堿A的薄層鑒別: 取本品1ml，用按體積比計的石油醚:甲醇=2?5:0.5?1.5混合液振搖提取2次，每次1ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取麻黃對照藥材2g，加水20ml，加熱回流提取20分鐘，濾過，濾液用按體積比計的石油醚:甲醇=2?5:0.5?1.5混合液振搖提取2次，每次10ml，合并提取液，水浴蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為麻黃對照藥材溶液，另取麻黃根素對照品和麻黃新堿A對照品，加甲醇制成每Iml含麻黃根素對照品和麻黃新堿A對照品各Img的混合溶液，作為麻黃根素和麻黃新堿A對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各10μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以體積比計的甲苯:甲醇:氨水=12?15:1?4:0.5?1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點顯色清晰； (2)苦杏仁的薄層鑒別: 取本品1ml，加水1ml，搖勻，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液，另取苦杏仁對照藥材lg，研細，加石油醚20 ml，超聲處理10分鐘，棄去石油醚，殘渣加水30 ml，煮沸10分鐘，濾過，濾液用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液，照薄層色譜法，試驗，吸取上述兩種溶液各10μ1，分別點于同一硅膠G薄層板上，以按體積比計的甲苯:乙酸乙酯=2?5:0.5?1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以磷鉬酸硫酸溶液，在105 °C加熱至斑點顯色清晰； (3)甘草的薄層鑒別 取本品20ml，加水稀釋至40ml，離心，取上清液，通過已處理好的DlOl型大孔吸附樹脂柱，用水洗脫至洗脫液無色，棄去水液，再用80%乙醇10ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為供試品溶液，另取甘草對照藥材lg，加乙醇20ml，加熱回流20分鐘，濾過，取濾液，蒸干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次15ml，棄去水液，分取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇Iml使溶解，取上清液作為對照藥材溶液，照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5?10μ1，分別點于同一以1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以按體積比計的乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=11?17:0.5?1.5:0.5?1.5:1?4為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1 %硫酸乙醇溶液，105 °C加熱至斑點顯色清晰； 所述含量測定包括: (4)鹽酸麻黃堿的含量測定: 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑； 以體積比計的乙腈:0.1%磷酸溶液=7?11: 85?94為流動相； 檢測波長為207nm，理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于3000;取鹽酸麻黃堿對照品lOmg，精密稱定，置100ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密 量取5ml，置100ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液，精密量取本品 10ml，置100ml量瓶中，加甲醇60ml，超聲處理20分鐘，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去 初濾液，精密量取續(xù)濾液lml，置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液， 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各l〇yl，注入液相色譜儀，測定，即得本樣品中鹽酸 麻黃堿的含量。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的止咳糖漿的檢測方法，其特征在于:步驟(1)所述的用于制備 供試品溶液的石油醚與甲醇的混合液按體積比計石油醚:甲醇=3:1。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的止咳糖漿的檢測方法，其特征在于:步驟(1)所述的用于制備 麻黃對照藥材溶液的石油醚與甲醇的混合液按體積比計石油醚:甲醇=3:1。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的止咳糖漿的檢測方法，其特征在于:步驟(1)所述的展開劑以 體積比計甲苯:甲醇:氨水=10:3:1。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的止咳糖漿的檢測方法，其特征在于:步驟(2)所述的展開劑以 體積比計甲苯:乙酸乙酯=3:1。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的止咳糖漿的檢測方法，其特征在于:步驟(3)所述的D101型大 孔吸附樹脂柱的內(nèi)徑為15mm，尚為12cm。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的止咳糖漿的檢測方法，其特征在于:步驟(3)所述的展開劑按 體積比計乙酸乙酯:甲酸:冰醋酸:水=15:1:1:2。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的止咳糖漿的檢測方法，其特征在于:步驟(4)所述的流動相以 體積比計乙腈:0.1%磷酸溶液=10:89。
【文檔編號】G01N30/02GK106018603SQ201610347833
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月24日
【發(fā)明人】鐘茂團, 溫國梁, 古莉, 何德中, 林劍
【申請人】四川逢春制藥有限公司