一種腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿含量測定及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] -種腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿含量測定及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 腦脈利顆粒為郝子林主任醫(yī)師臨床科研經(jīng)驗(yàn)方，1981年被衛(wèi)生局批準(zhǔn)為醫(yī)院制劑 并臨床上大量應(yīng)用，用于中風(fēng)病血瘀氣虛證，曾在北京市8家醫(yī)院擴(kuò)大臨床驗(yàn)證，約計(jì)觀察 了2000多例，療效比較滿意。它是中藥復(fù)方制劑，由益母草、三七、黃芪、姜黃、川考、紅花、丹 參、赤芍、當(dāng)歸、白芍、川牛膝等11味中藥提取加工而成。功能主治為活血化瘀，益氣通脈。用 于氣虛血瘀型中風(fēng)病(腦梗塞）中經(jīng)絡(luò)急性期，癥見半身不遂、偏身麻木、口舌歪斜、語言蹇 澀等。
[0003] 方中益母草為君藥，具有抗血栓形成和溶栓作用，能明顯降低血液粘度，在20多種 活血化瘀藥物中作用最強(qiáng)。因此有必要對成藥中益母草的主要有效成分鹽酸水蘇堿進(jìn)行質(zhì) 量控制。腦脈利顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(YBZ02942003-2009Z)中采用薄層掃描法(TLCS法)檢測鹽酸 水蘇堿的含量。該方法在薄層板上點(diǎn)樣、展開、噴顯色劑、掃描，操作環(huán)節(jié)較多。多批檢測的 情況及本品的方法學(xué)研究表明，其重復(fù)性、精密度及準(zhǔn)確度相對較差，導(dǎo)致同一批均一的樣 品，實(shí)驗(yàn)結(jié)果高低不一，偏差較大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的是開發(fā)一種重復(fù)性、精密度及準(zhǔn)確度更 好的含量測定方法，檢測腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿。
[0005] 本發(fā)明通過如下步驟實(shí)現(xiàn)： 本發(fā)明公開了一種腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿含量測定的方法，是由以下 步驟組成： 1) 采用高效液相色譜法，用丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-冰醋酸溶液為流動 相，流動相中乙腈的體積百分比為〇%~99%; 2) 將處理過的樣品注入高效液相色譜儀中，進(jìn)行色譜分離，蒸發(fā)光散射檢測器檢測。
[0006 ]上述的測定方法，所述的乙腈的體積百分比為40%~96%。
[0007] 上述的測定方法，所述的冰醋酸溶液的濃度為0.05%~2%，冰醋酸溶液的濃度最好 是0.2%。
[0008] 本發(fā)明的方法(HPLC-ELSD法)樣品經(jīng)處理后直接進(jìn)樣檢測，采用對照品外標(biāo)兩點(diǎn) 法對數(shù)方程計(jì)算。峰面積、濃度分別取對數(shù)后呈良好的線性關(guān)系，缺益母草陰性對照無干 擾，各峰分離度良好。該方法的重復(fù)性、中間精密度、準(zhǔn)確度較原先的薄層掃描法好。
【附圖說明】
[0009] 圖1缺益母草陰性溶液HPLC-ELSD圖譜 圖2鹽酸水蘇堿對照品溶液HPLC-ELSD圖譜 圖3 11 -121201批供試液HPLC-ELSD圖譜 圖4實(shí)施例2的HPLC-ELSD圖譜 圖5實(shí)施例3的HPLC-ELSD圖譜 圖6實(shí)施例4的HPLC-ELSD圖譜 圖7實(shí)施例5的HPLC-ELSD圖譜 圖8實(shí)施例6的HPLC-ELSD圖譜。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對方法進(jìn)行進(jìn)一步說明。
[0011] 實(shí)施例1 取腦脈利顆粒約4.0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加 lm〇L/L鹽酸溶液40mL，密 塞，搖勻，稱定重量，超聲處理（功率250w，頻率33KHz)30分鐘，取出，放冷，稱定重量，用 lm〇L/L鹽酸溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液20mL，置已處理 好的732型氫型陽離子交換樹脂柱（內(nèi)徑約0.9cm，柱高18cm)上，收集流出液重新通過樹脂 柱，如上再重復(fù)二次，加水200mL分次洗滌至中性，棄去水洗液，再用濃氨試液-甲醇(20:80) 混合液l〇〇ml，分次洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)?0%乙醇使溶解，定量轉(zhuǎn)移至25mL量瓶 中，并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。
[0012] 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.2%冰醋酸溶液(80:20)為流動相；用蒸 發(fā)光散射檢測器檢測。
[0013] 測定法:分別精密量取缺益母草陰性溶液20ul、鹽酸水蘇堿對照品溶液5ul、10ul 和供試品溶液20ul，注入液相色譜儀。用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算并考察陰性缺味溶液的 出峰情況。圖譜見圖1、圖2、圖3。
[0014] 實(shí)施例2 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-〇. 1%冰醋酸溶液(90:10)為流動相；用蒸發(fā)光 散射檢測器檢測。
[0015] 測定法:精密吸取對照品溶液5ul、10ul，供試品溶液10~20ul，注入液相色譜儀， 測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，即得。供試品溶液圖譜見圖4。
[0016] 實(shí)施例3 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-〇. 8%冰醋酸溶液(70:30)為流動相；用蒸發(fā)光 散射檢測器檢測。
[0017] 測定法:精密吸取對照品溶液5ul、10ul，供試品溶液10~20ul，注入液相色譜儀， 測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，即得。供試品溶液圖譜見圖5。
[0018] 實(shí)施例4 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-1.5%冰醋酸溶液(96:4)為流動相;用蒸發(fā)光散 射檢測器檢測。
[0019] 測定法:精密吸取對照品溶液5ul、10ul，供試品溶液10~20ul，注入液相色譜儀， 測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，即得。供試品溶液圖譜見圖6。
[0020] 實(shí)施例5 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-ο.05%冰醋酸溶液(50:50)為流動相;用蒸發(fā)光 散射檢測器檢測。
[0021] 測定法:精密吸取對照品溶液5ul、10ul，供試品溶液10~20ul，注入液相色譜儀， 測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，即得。供試品溶液圖譜見圖7。
[0022] 實(shí)施例6 以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-〇. 2%冰醋酸溶液(92:8)為流動相;用蒸發(fā)光散 射檢測器檢測。
[0023] 測定法:精密吸取對照品溶液5ul、10ul，供試品溶液10~20ul，注入液相色譜儀， 測定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算，即得。供試品溶液圖譜見圖8。
[0024] HPLC-ELSD方法學(xué)研究總結(jié)見下表1，峰面積、濃度分別取對數(shù)后呈良好的線性關(guān) 系，缺益母草陰性對照無干擾，各峰分離度良好。該方法的重復(fù)性、中間精密度、準(zhǔn)確度較原 先的薄層掃描法好，詳見下表2。
[0025]

【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿含量測定的方法，其特征在于：是由以 下步驟組成， 1) 采用高效液相色譜法，用丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-冰醋酸溶液為流動 相，流動相中乙腈的體積百分比為0%~99%; 2) 將處理過的樣品注入高效液相色譜儀中，進(jìn)行色譜分離，蒸發(fā)光散射檢測器檢測。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿含量測定的方法，其 特征在于:所述的乙腈的體積百分比為40%~96%。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿含量測定的方法，其 特征在于:所述的冰醋酸溶液的濃度為0.05%~2%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿含量測定的方法，其 特征在于:所述的冰醋酸溶液的濃度為0.2%。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種腦脈利顆粒中主要有效成分鹽酸水蘇堿的含量測定方法及其應(yīng)用，鹽酸水蘇堿的含量控制是腦脈利顆粒質(zhì)量控制的關(guān)鍵指標(biāo)。本發(fā)明的方法（HPLC-ELSD法）樣品經(jīng)處理后直接進(jìn)樣檢測，采用對照品外標(biāo)兩點(diǎn)法對數(shù)方程計(jì)算。峰面積、濃度分別取對數(shù)后呈良好的線性關(guān)系，缺益母草陰性對照無干擾，各峰分離度良好。該方法的溶液穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性、準(zhǔn)確度、耐用性較原先的薄層掃描法（TLCS）好。
【IPC分類】G01N30/74
【公開號】CN105548424
【申請?zhí)枴緾N201610058048
【發(fā)明人】秦引林, 謝吉元
【申請人】南京柯菲平盛輝制藥有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2016年1月28日