L-丙氨酰-l-丙氨酸的定量檢測方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] L-丙氨酰-L-丙氨酸是重要的生化試劑和化工中間體，同時也是一種正在開發(fā)的 氨基酸類藥物，為了能夠利用L-丙氨酰氨基丙酸，就需要對其含量進(jìn)行檢測，從而判斷產(chǎn)品 質(zhì)量情況。但是，目前為止，現(xiàn)有技術(shù)中還沒有一種檢測L-丙氨酰-L-丙氨酸含量的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，采用 高效液相色譜外標(biāo)法，能夠快速、準(zhǔn)確的測定化工生產(chǎn)產(chǎn)物中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量， 適于工業(yè)生產(chǎn)中使用。
[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢 測方法，使用高效液相色譜法檢測，所用色譜柱為氨基鍵合硅膠柱，柱溫為30°C;以乙腈_ 0.05mol/L磷酸二氫鉀緩沖溶液645:350為流動相，其磷酸二氫鉀緩沖鹽用磷酸調(diào)PH=4.0， 流速為0.7 ml/min;檢測波長為215nm; 檢測步驟為： 1) 將待測樣品用流動相稀釋制備成為樣品待測液，將L-丙氨酰-L-丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)品溶于 流動相制備成為標(biāo)準(zhǔn)溶液； 2) 將樣品待測液、標(biāo)準(zhǔn)溶液分別采用相同的檢測條件用高效液相色譜儀檢測，得到樣 品待測液色譜圖、標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，通過外標(biāo)法測算出待測樣品中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含 量。
[0005] 所述外標(biāo)法測算待測樣品中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量方法為： X = C樣X待測樣品的稀釋倍數(shù)=(CkXAft/AW X待測樣品的稀釋倍數(shù)， 式中:C*t為標(biāo)準(zhǔn)溶液中L-丙氨酰-L-丙氨酸的濃度，單位為mg/ml; A*t為標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖的峰面積或峰高； A#為樣品待測液色譜圖的峰面積或峰高； C樣為樣品待測液中待測溶液的濃度，單位為mg/ml。
[0006] 進(jìn)一步地，樣品待測液和標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜柱進(jìn)樣量均為20 μL。
[0007] 進(jìn)一步地，樣品待測液和標(biāo)準(zhǔn)溶液均經(jīng)過0.45 μπι的有機(jī)濾膜過濾 采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于:本發(fā)明能夠簡便、快速、準(zhǔn)確的測定化工生 產(chǎn)產(chǎn)物中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，可以檢測化工生產(chǎn)中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，從 而有針對性的對L-丙氨酰-L-丙氨酸進(jìn)行回收，從而起到提高收益的積極效果，具有顯著的 社會效益，適于工業(yè)生產(chǎn)中使用。
【具體實施方式】
[0008] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)化工生產(chǎn)中沒有一種快速、準(zhǔn)確檢測L-丙氨酰-L-丙氨酸含量 的方法，導(dǎo)致不能對化工產(chǎn)品或中間產(chǎn)物中L-丙氨酰-L-丙氨酸含量的有效檢測和控制，本 發(fā)明提供了一種L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，采用高效液相色譜外標(biāo)法，能夠快 速、準(zhǔn)確的測定化工生產(chǎn)產(chǎn)物中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，適于工業(yè)生產(chǎn)中使用，便于對 化工產(chǎn)品或中間產(chǎn)物中L-丙氨酰-L-丙氨酸進(jìn)行監(jiān)測，從而調(diào)整生產(chǎn)工藝，提高生產(chǎn)效益。
[0009] 下面對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明。
[0010] -種L-丙氨酰-L-丙氨酸的檢測方法，其步驟如下： 1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備:稱取標(biāo)品L-丙氨酰-L-丙氨酸固體25 mg至25 ml容量瓶中，用流動 相定容；將溶液用0.45 μπι的有機(jī)濾膜過濾，取1 ml濾液至100 ml容量瓶中并用流動相定 容，即得標(biāo)準(zhǔn)溶液。
[0011] 2)樣品待測溶液的制備:將液相待測樣品用0.45 μπι的有機(jī)濾膜過濾，然后用流動 相稀釋為樣品待測溶液。
[0012] 3)將標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品待測溶液分別用高效液相色譜法檢測，檢測條件為： 用氨基鍵合硅膠柱為填充劑，以乙腈-〇. 〇5mol/L磷酸二氫鉀溶液(645:350)為流動相， 檢測波長為215nm，其磷酸二氫鉀緩沖鹽用磷酸調(diào)PH=4.0，柱溫為30°C，流速為0.7 ml/min; 4)含量計算:待測樣品液中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量為： X = C#X待測樣品的稀釋倍數(shù)=(Q^XA#/Ast) X待測樣品的稀釋倍數(shù)， 式中:C*t為標(biāo)準(zhǔn)溶液中L-丙氨酰-L-丙氨酸的濃度，單位為mg/ml; A*t為標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖的峰面積或峰高； A#為樣品待測液色譜圖的峰面積或峰高； C樣為樣品待測液中待測溶液的濃度，單位為mg/ml。
[0013] 實施例1-3 實施例1-3分別取不同的L-丙氨酰-L-丙氨酸樣品，按上述方法測量，測量數(shù)據(jù)見下表。
[0014]
【主權(quán)項】
1. L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，其特征在于:使用高效液相色譜法檢測。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，其特征在于，所用色譜 柱為氨基鍵合硅膠柱，柱溫為30°C;以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀緩沖溶液645:350為流動 相，其磷酸二氫鉀緩沖鹽用磷酸調(diào)PH=4.0，流速為0.7 ml/min;檢測波長為215nm; 檢測步驟為： 1) 將待測樣品用流動相稀釋制備成為樣品待測液，將L-丙氨酰-L-丙氨酸標(biāo)準(zhǔn)品溶于 流動相制備成為標(biāo)準(zhǔn)溶液； 2) 將樣品待測液、標(biāo)準(zhǔn)溶液分別采用相同的檢測條件用高效液相色譜儀檢測，得到樣 品待測液色譜圖、標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，通過外標(biāo)法測算出待測樣品中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含 量。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，其特征在于所述外標(biāo)法 測算待測樣品中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量方法為： X = C#X待測樣品的稀釋倍數(shù)=(Q^XA#/A*t) X待測樣品的稀釋倍數(shù) 式中:C*t為標(biāo)準(zhǔn)溶液中L-丙氨酰-L-丙氨酸的濃度，單位為mg/ml; A*t為標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖的峰面積或峰高； A#為樣品待測液色譜圖的峰面積或峰高； C樣為樣品待測液中待測溶液的濃度，單位為mg/ml。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，其特征在于樣品待測液 和標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜柱進(jìn)樣量均為20 μL。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，其特征在于樣品待測液 和標(biāo)準(zhǔn)溶液均經(jīng)過0.45 μπι的有機(jī)濾膜過濾。
【專利摘要】本發(fā)明涉及L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種L-丙氨酰-L-丙氨酸的定量檢測方法，使用高效液相色譜法檢測，所用色譜柱為氨基鍵合硅膠柱，柱溫為30℃；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀緩沖溶液645:350為流動相，其磷酸二氫鉀緩沖鹽用磷酸調(diào)PH=4.0，流速為0.7？ml/min；檢測波長為215nm；通過外標(biāo)法測算出待測樣品中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量。本發(fā)明能夠簡便、快速、準(zhǔn)確的測定化工生產(chǎn)產(chǎn)物中L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，能夠用于化工生產(chǎn)中檢測L-丙氨酰-L-丙氨酸的含量，適于工業(yè)生產(chǎn)中使用。
【IPC分類】G01N30/88
【公開號】CN105510497
【申請?zhí)枴緾N201510851390
【發(fā)明人】李斌水, 何連順
【申請人】精晶藥業(yè)股份有限公司
【公開日】2016年4月20日
【申請日】2015年11月30日