一種用于蛋白跑膠的多v形管上樣器的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，特別涉及一種SDS-PAGE (聚丙烯酰胺凝膠電泳)跑膠操作過(guò)程中蛋白樣品的加樣器械。
【背景技術(shù)】
[0002]在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，最常見(jiàn)的是Western blot實(shí)驗(yàn)(免疫印跡試驗(yàn))，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程包括——制做SDS-PAGE膠片、上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、加抗體、發(fā)光等。在制膠上樣過(guò)程中，膠的濃度取決于目的蛋白樣品分子量大小，上樣量的大小取決于蛋白定量的結(jié)果，樣品蛋白所跑的速度是由電解液的PH值，電壓和重力共同決定的。當(dāng)使用特定電解液，并且維持相對(duì)恒定電壓時(shí)，樣品蛋白下降的速度主要取決于蛋白分子的大小和重量(即分子量越大跑的越慢)，上樣量的準(zhǔn)確程度直接影響電泳效果，因此，制膠和上樣在電泳過(guò)程中至關(guān)重要。目前制膠技術(shù)是成熟技術(shù)，而上樣過(guò)程是采用加樣槍將不同蛋白的樣品一格一格注射到梳狀SDS-PAGE膠片4的齒槽中(圖1中的加樣腔)。然而，在使用時(shí)常出現(xiàn)以下問(wèn)題:①槍頭或針頭容易刺破凝膠，直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量；?加樣太快可使樣品沖出加樣腔2，若有氣泡也可能使樣品溢出；③不同加樣腔之間不同樣品之間容易相混，無(wú)法避免交叉污染。對(duì)樣品試驗(yàn)結(jié)果造成不必要的誤差。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、上樣準(zhǔn)確、方便省時(shí)、可基本滿足Westernblot實(shí)驗(yàn)各種蛋白樣品需求的跑膠加樣器具。
[0004]為達(dá)到以上目的，本發(fā)明是采取如下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的:
[0005]—種用于蛋白跑膠的多V形管上樣器，其特征在于，包括與SDS-PAGE膠片梳狀齒槽數(shù)量配套的多個(gè)V形管，該多個(gè)V形管之間由水平連管連通，每個(gè)V形管的V形底均設(shè)有一個(gè)注樣孔；每個(gè)V形管的V形開(kāi)口一側(cè)與水平連管連通處均設(shè)有一個(gè)加樣口，加樣時(shí)，將各個(gè)V形管分別對(duì)準(zhǔn)SDS-PAGE膠片相應(yīng)梳狀齒槽，將每個(gè)V形管V形底均伸進(jìn)一個(gè)梳狀齒槽中并被定位。
[0006]上述方案中，所述多個(gè)V形管中，最左端和最右端的V形管分別連接一個(gè)羊角鉤，該兩個(gè)羊角鉤呈左右對(duì)稱分布，當(dāng)兩個(gè)羊角鉤左右對(duì)稱固定于跑膠上樣裝置左右側(cè)龍門(mén)柱上時(shí)，即將每個(gè)V形管V形底均伸進(jìn)一個(gè)梳狀齒槽中并被定位。
[0007]所述V形管和水平連管由不銹鋼或有機(jī)材料制成，外徑不大于0.75_。
[0008]所述加樣口為一漏斗。該漏斗能與10微升加樣槍頭對(duì)接。
[0009]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明移動(dòng)方便、定位準(zhǔn)確、結(jié)構(gòu)合理，并且，方便、省時(shí)、經(jīng)濟(jì)、科學(xué)，滿足目前各種跑膠上樣的需求。
【附圖說(shuō)明】
[0010]圖1為現(xiàn)有跑膠上樣裝置中SDS-PAGE膠片結(jié)構(gòu)圖。
[0011]圖2為本發(fā)明羊角形上樣器結(jié)構(gòu)示意圖。
[0012]圖3為圖2中的I部放大圖。
[0013]圖4為將圖2上樣器置于圖1裝置的SDS-PAGE膠片梳狀齒槽中的示意圖。
[0014]圖1?圖4中:1、電極接線柱；2、加樣腔；3、后夾板平面；4、SDS-PAGE膠片；5、前夾板平面；6、龍門(mén)柱；7、水平連管；8、V形管；9、加樣口 ；10、羊角鉤；11、漏斗；12、注樣孔。
【具體實(shí)施方式】
[0015]參考圖1，在現(xiàn)有跑膠上樣裝置中，采用前、后夾板(透明玻璃片，圖中未畫(huà)出)在其平行的縫隙中先制備SDS-PAGE膠片4，凝固前在前、后夾板上端插入一個(gè)梳狀的模具至膠片中，待膠片凝固后，拔出梳狀模具，從而使得膠片上端與前、后夾板平面5、3之間形成多個(gè)齒槽，也即加樣腔2?，F(xiàn)有加樣方法是采用加樣槍(注射針)將不同蛋白的樣品分別注射到不同的加樣腔中，如【背景技術(shù)】已描述的那樣，存在許多缺陷。
[0016]參考圖2、圖4，本發(fā)明設(shè)計(jì)了一種多V形管上樣器，包括與SDS-PAGE膠片4齒槽配套的多個(gè)V形管8，多個(gè)V形管之間由水平連管7連通，每個(gè)V形管V形開(kāi)口一側(cè)與水平連管連通處均設(shè)有一個(gè)加樣口 9，V形管和水平連管由不銹鋼或有機(jī)材料制成，外徑不大于
0.75_。在多個(gè)通過(guò)水平連管連通的V形管8的結(jié)構(gòu)中，最左端的V形管連接一個(gè)羊角鉤10，最右端的V形管連接另一個(gè)羊角鉤10，該兩個(gè)羊角鉤呈左右對(duì)稱分布。加樣時(shí)，將圖2羊角形上樣器的各個(gè)V形管分別對(duì)準(zhǔn)SDS-PAGE膠片4相應(yīng)梳狀齒槽(圖4)，兩個(gè)羊角鉤分別掛于圖1跑膠上樣裝置對(duì)應(yīng)龍門(mén)柱6的上端，從而使上樣器每個(gè)V形管均伸入一個(gè)加樣腔2并被定位。
[0017]參考圖3，加樣口 9為一個(gè)漏斗11，該漏斗能與10微升加樣槍頭對(duì)接，可避免加樣時(shí)樣品外漏。每個(gè)V形管V形底均設(shè)有一個(gè)注樣孔12，它能準(zhǔn)確的將樣品加入相應(yīng)加樣腔(電泳泳道)中，克服了以往無(wú)法清晰辨別泳道的誤操作。
[0018]該注樣孔與本V形管的加樣口 9連通外，還與相鄰V形管的加樣口連通，這樣，一方面可防止樣品回流，另一方面能將加入加樣腔樣品中的氣泡排出，防止對(duì)相鄰加樣腔樣品的污染。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于蛋白跑膠的多V形管上樣器，其特征在于，包括與SDS-PAGE膠片梳狀齒槽數(shù)量配套的多個(gè)V形管，該多個(gè)V形管之間由水平連管連通，每個(gè)V形管的V形底均設(shè)有一個(gè)注樣孔；每個(gè)V形管的V形開(kāi)口一側(cè)與水平連管連通處均設(shè)有一個(gè)加樣口，加樣時(shí)，將各個(gè)V形管分別對(duì)準(zhǔn)SDS-PAGE膠片相應(yīng)梳狀齒槽，將每個(gè)V形管V形底均伸進(jìn)一個(gè)梳狀齒槽中并被定位。2.如權(quán)利要求1所述的用于蛋白跑膠的多V形管上樣器，其特征在于，所述多個(gè)V形管中，最左端和最右端的V形管分別連接一個(gè)羊角鉤，該兩個(gè)羊角鉤呈左右對(duì)稱分布，當(dāng)兩個(gè)羊角鉤左右對(duì)稱固定于跑膠上樣裝置左右側(cè)龍門(mén)柱上時(shí)，即將每個(gè)V形管V形底均伸進(jìn)一個(gè)梳狀齒槽中并被定位。3.如權(quán)利要求1所述的用于蛋白跑膠的多V形管上樣器，其特征在于，所述V形管和水平連管由不銹鋼或有機(jī)材料制成，外徑不大于0.75mm。4.如權(quán)利要求1所述的用于蛋白跑膠的多V形管上樣器，其特征在于，所述加樣口為一漏斗，該漏斗能與10微升加樣槍頭對(duì)接。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種用于蛋白跑膠的多V形管上樣器，其特征在于，包括與SDS-PAGE膠片梳狀齒槽數(shù)量配套的多個(gè)V形管，該多個(gè)V形管之間由水平連管連通，每個(gè)V形管的V形底均設(shè)有一個(gè)注樣孔；每個(gè)V形管的V形開(kāi)口一側(cè)與水平連管連通處均設(shè)有一個(gè)加樣口，加樣時(shí)，將各個(gè)V形管分別對(duì)準(zhǔn)SDS-PAGE膠片相應(yīng)梳狀齒槽，將每個(gè)V形管V形底均伸進(jìn)一個(gè)梳狀齒槽中并被定位。
【IPC分類】G01N27/447
【公開(kāi)號(hào)】CN105259241
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510737574
【發(fā)明人】陳寶瑩, 顏林楓, 南海燕, 崔光彬, 王文, 趙欣, 方偉, 周程沛, 胡玉川, 賀延莉, 李燕燕, 楊洋, 于軍, 張學(xué)策
【申請(qǐng)人】中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
【公開(kāi)日】2016年1月20日
【申請(qǐng)日】2015年11月2日