一種用于測定茶葉中農(nóng)藥殘留量的方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于分析檢測技術領域，尤其涉及一種利用氣相色譜-質(zhì)譜對茶葉中三唑 類農(nóng)藥殘留量進行檢查的方法。
【背景技術】
[0002] 三唑類農(nóng)藥為有機雜環(huán)類化合物，兼有殺菌和調(diào)節(jié)植物生長的作用。有些三唑類 化合物能強力抑制病原菌體內(nèi)麥角留醇的形成，表現(xiàn)出強的殺菌作用，并具有植物生長調(diào) 節(jié)作用；有些三唑類化合物能阻止植物體內(nèi)生長素和赤霉素的形成，表現(xiàn)出強的植物生長 抑制作用，可以控制作物生長，達到防病抗倒伏效果，同時兼有殺菌作用。70年代中期，首個 三唑類殺菌劑三唑酮的問世，開創(chuàng)了殺菌劑的新類目。由于其對作物的多種病原菌具有高 效、內(nèi)吸、廣譜作用，而成為目前應用范圍廣、使用方法靈活、防治效果好、最具開發(fā)應用潛 力的一類高效殺菌劑。但其不合理使用會對人類造成潛在的健康威脅并污染生態(tài)環(huán)境，其 在食品中的殘留問題受到越來越多的關注。
[0003] 由于茶葉中三唑類農(nóng)藥殘留量低，提取通常采用傳統(tǒng)的液液萃取或spe小柱進行 萃取，整個過程中需要用到多種溶劑，操作步驟繁瑣，造成待測成分的大量損失，提取效率 不高，影響了最終的檢測精度和準確性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對現(xiàn)有技術中的上述技術問題，本發(fā)明提供了一種高效、簡便的分析茶葉中三 唑類農(nóng)藥殘留量的方法。
[0005] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術方案為：用于測定茶葉中農(nóng)藥殘留量的方 法，該方法包括如下步驟：
[0006] (1)樣品前處理：將茶葉粉碎后，用水溶解后，用乙腈-丙酮溶液超聲萃取，離心后 得到萃取液；
[0007] (2)攪拌棒固相萃取：將涂覆有聚合物-石墨烯涂層的攪拌棒浸入至上述萃取液 中進行固相萃?。?br>[0008] (3)氣相色譜-質(zhì)譜檢測，
[0009] 其中，農(nóng)藥殘留為三唑類農(nóng)藥殘留；攪拌棒上的聚合物-石墨烯涂層具體為殼聚 糖-石墨稀涂層。
[0010] 進一步，所述三唑類農(nóng)藥殘留為多效唑、抑芽唑、己唑醇、烯效唑、腈菌唑、氟硅唑、 丙環(huán)唑、三唑酮、戊唑醇、糠菌唑、苯醚甲環(huán)唑、烯唑醇、硅氟唑和卞氯三唑醇。
[0011] 進一步，所述步驟⑴具體為：取l_2g茶葉粉碎后，用80-100ml去離子水溶解，用 5_10ml體積比為2 : 3的乙臆-丙酬溶液進彳丁超聲萃取，超聲時間為10_15min，隨后進行 離心5-10min，離心轉速控制在8000-10000r/mmin，得萃取液。
[0012] 進一步，所述步驟（2)具體為：將涂覆有聚合物-石墨烯涂層的攪拌棒浸入至上述 萃取液中，在封閉的環(huán)境下通過磁力攪拌方式攪拌15_25min，進行固相萃取。
[0013] 進一步，所述步驟（3)具體為：本方法選用DB-5MS，30mX0. 25_Χ0. 25μπι，石 英毛細管柱，色譜柱程序升溫為：50°C，保持lmin，以15°C/min升至120°C，保持lmin，以 10°C/min升至 180°C，保持 2min，以 5°C/min升至 280°C，保持 2min，以 20°C/min升至 320°C，保持lOmin;載氣為高純氮氣，流速1. 5mL/min，電子轟擊源EI，進樣口溫度300°C， 色譜-質(zhì)譜接口溫度280°C，離子源溫度250°C，電離能量：70eV，采用不分流進樣，進樣量： 1μL，溶劑延遲：5min，選擇離職模式SHL
[0014] 通過上述方法，本發(fā)明具備如下優(yōu)點：
[0015] 1、首次將具有殼聚糖-石墨烯涂層的攪拌棒引入到三唑類農(nóng)藥殘留領域，由于殼 聚糖-石墨烯優(yōu)異的分散性能和凈化萃取特性，大大簡化傳統(tǒng)固相萃取洗脫過程的同時， 極大降低了樣品損失，提高了萃取效率以及檢測精度。進一步，基于三唑類農(nóng)藥的選擇特 性，通過大量試驗發(fā)現(xiàn)，通過優(yōu)化萃取參數(shù)，采用具有殼聚糖-改性的石墨烯涂層的攪拌棒 可以快速有效地將茶葉中三唑類農(nóng)藥充分萃取出來，實現(xiàn)了多種三唑類農(nóng)藥殘留同時檢測 的技術效果。
[0016] 2、利用體積比為2 : 3的乙腈-丙酮對茶葉中的三唑類農(nóng)藥進行初提，可有效將 非農(nóng)藥殘留物質(zhì)分離出去，通過與傳統(tǒng)的單一萃取劑丙酮、乙腈、乙酸乙酯進行對比，本申 請采用的乙腈-丙酮混合液提取效率高，雜質(zhì)成分的去除能力強，能夠在保留茶葉中大部 分三唑類農(nóng)藥殘留的同時，盡可能降低有機磷、有機磷等干擾成分的含量。
[0017] 3、氣相色譜過程中，經(jīng)過大量試驗優(yōu)化，針對本申請中特定的萃取條件下獲得的 待測溶液，通過采用本申請中的程序升溫過程可以實現(xiàn)14種三唑類物質(zhì)的有效分離和定 性定量檢測，通過內(nèi)標法定量過程中，14中三唑類農(nóng)藥的檢出限達到9μg/kg，相對標準偏 為 1. 9-6. 8%，線性范圍為 0. 010-0. 5mg/kg。
【具體實施方式】
[0018] 為進一步闡釋采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術對茶葉中三唑類農(nóng)藥殘留量進行檢測， 下面結合實例作更詳盡的說明。
[0019] 1、試驗部分
[0020] (1)樣品前處理：取2g茶葉粉碎后，用100ml去離子水溶解，用6ml體積比為2 : 3 的乙腈-丙酮溶液進行超聲萃取，超聲時間為15min，隨后進行離心8min，離心轉速控制在 lOOOOr/mmin,得萃取液。
[0021] (2)攪拌棒固相萃取：將涂覆有殼聚糖-石墨烯涂層的攪拌棒浸入至上述萃取液 中，在封閉的環(huán)境下通過磁力攪拌方式攪拌20min，進行固相萃取。
[0022] 其中，殼聚糖-石墨烯涂層的制備方法為：通過酯化反應，利用殼聚糖對石墨烯進 行表面改性后得到，制備得到的殼聚糖改性石墨烯材料通過原位聚合方式接枝至攪拌棒表 面，并在攪拌棒上形成納米級殼聚糖-石墨烯涂層，制備好的攪拌棒保存于乙腈溶劑中，備 用。
[0023] (3)攪拌棒在氮氣中揮干后，用1ml乙腈浸泡溶解攪拌棒上提取物質(zhì)，隨 后進行，氣相色譜-質(zhì)譜檢測。其中，氣相色譜-質(zhì)譜檢測條件為：色譜柱DB-5MS， 30mX0. 25mmX0· 25μπι，石英毛細管柱，色譜柱程序升溫為：50°C，保持lmin，以15°C/min 升至 120°C，保持lmin，以 10°C/min升至 180°C，保持 2min，以 5°C/min升至 280°C，保持 2min，以20°C/min升至320°C，保持lOmin;載氣為高純氮氣，流速1. 5mL/min，電子轟擊源EI，進樣口溫度300°C，色譜-質(zhì)譜接口溫度280°C，離子源溫度250°C，電離能量：70eV，采 用不分流進樣，進樣量：1yL，溶劑延遲：5min，選擇離職模式SIM。
[0024] 2、檢測結果
[0025] 檢測結果見表1:
[0028]^最后應說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明， 盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，對于本領域的技術人員來說，其依然可 以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分技術特征進行等同替換。 凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的 保護范圍之內(nèi)。
【主權項】
1. 一種用于測定茶葉中農(nóng)藥殘留量的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟： (1) 樣品前處理：將茶葉粉碎后，用水溶解后，用乙腈-丙酮溶液超聲萃取，離心后得到 萃取液； (2) 攪拌棒固相萃?。簩⑼扛灿芯酆衔?石墨烯涂層的攪拌棒浸入至上述萃取液中進 行固相萃取； (3) 氣相色譜-質(zhì)譜檢測， 其中，農(nóng)藥殘留為三唑類農(nóng)藥殘留；攪拌棒上的聚合物-石墨烯涂層具體為殼聚糖-石 墨烯涂層。2. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述三唑類農(nóng)藥殘留為多效唑、抑芽唑、 己唑醇、烯效唑、腈菌唑、氟硅唑、丙環(huán)唑、三唑酮、戊唑醇、糠菌唑、苯醚甲環(huán)唑、烯唑醇、硅 氟唑和卞氯三唑醇。3. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1)具體為：取l_2g茶葉粉碎后，用 80_100ml去尚子水溶解，用5-10ml體積比為2 : 3的乙臆-丙酮溶液進行超聲萃取，超聲 時間為l〇_15min，隨后進行離心5-10min，離心轉速控制在8000-10000r/min，得萃取液。4. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2)具體為：將涂覆有聚合物-石墨 稀涂層的攪拌棒浸入至上述萃取液中，在封閉的環(huán)境下通過磁力攪拌方式攪拌15-25min， 進行固相萃取。5. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，所述殼聚糖_石墨烯涂層的制備方法為： 通過酯化反應，利用殼聚糖對石墨烯進行表面改性后得到，制備得到的殼聚糖改性石墨烯 材料通過原位聚合方式接枝至攪拌棒表面，并在攪拌棒上形成納米級殼聚糖-石墨烯涂 層，制備好的攪拌棒保存于乙腈溶劑中，備用。6. 根據(jù)權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟⑶具體為：本方法選用DB-5MS， 30mX0. 25mmX0. 25ym，石英毛細管柱，色譜柱程序升溫為：50°C，保持lmin，以15°C /min 升至 120°C，保持 lmin，以 10°C /min 升至 180°C，保持 2min，以 5°C /min 升至 280°C，保持 2min，以20°C /min升至320°C，保持IOmin ;載氣為高純氮氣，流速I. 5mL/min，電子轟擊源 EI，進樣口溫度300°C，色譜-質(zhì)譜接口溫度280°C，離子源溫度250°C，電離能量：70eV，采 用不分流進樣，進樣量：1 y L，溶劑延遲：5min，選擇離職模式SIM。
【專利摘要】一種用于測定茶葉中農(nóng)藥殘留量的方法，包括如下步驟：(1)樣品前處理：將茶葉粉碎后，用水溶解后，用乙腈-丙酮溶液超聲萃取，離心后得到萃取液；(2)攪拌棒固相萃?。簩⑼扛灿芯酆衔?石墨烯涂層的攪拌棒浸入至上述萃取液中進行固相萃?。?3)氣相色譜-質(zhì)譜檢測，其中，農(nóng)藥殘留為三唑類農(nóng)藥殘留；攪拌棒上的聚合物-石墨烯涂層具體為殼聚糖-石墨烯涂層。本申請可以實現(xiàn)高效、簡便地對茶葉中農(nóng)藥殘留量進行檢測。
【IPC分類】G01N30/02
【公開號】CN105241981
【申請?zhí)枴緾N201510822373
【發(fā)明人】袁曉林
【申請人】袁曉林
【公開日】2016年1月13日
【申請日】2015年11月23日