一種山枝仁的薄層檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥材檢測(cè)領(lǐng)域，尤其涉及一種山枝仁的薄層檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]山枝仁，本品為海桐花科海桐花屬植物海金子Pittosporum illic1ides Mak.或皺葉海桐Pittosporumcrispulum Gagnep.的干燥種，具有清熱利咽、濕腸固精、收斂止灣等功效，可用于咽痛、痢疾、腸炎、白帶、滑精等疾病的治療。
[0003]張俊等人(張俊等，山枝仁質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究，中藥與臨床，2011年01期，第15-19頁(yè))中公開(kāi)了一種山枝仁的薄層鑒別方法。該方法以沸程30-60°C的石油醚超聲提取兩次待檢藥材，制備得到供試品溶液；薄層色譜檢測(cè)，以甲苯為展開(kāi)劑展開(kāi)，碘蒸汽顯色，日光下檢視，以山枝仁對(duì)照藥材進(jìn)行對(duì)比薄層鑒別。
[0004]但是該方法在需要快速檢測(cè)時(shí)，較為繁瑣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明提供了一種山枝仁的薄層檢測(cè)方法，包括以下步驟:(I)供試品溶液的制備:取待檢藥材，粉碎，加入石油醚超聲提取，過(guò)濾，取濾渣，加入乙酸乙酯回流，過(guò)濾，蒸干濾液，殘?jiān)尤爰状紡?fù)溶，作為供試品溶液；(2)薄層檢測(cè):以槲皮素為對(duì)照，分別將供試品溶液和槲皮素對(duì)照品在薄層板上點(diǎn)樣，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸=5:4:1為展開(kāi)劑展開(kāi)，三氯化鋁顯色，檢視即可。
[0006]優(yōu)選地，所述石油醚為沸程60_90°C的石油醚。
[0007]優(yōu)選地，步驟(I)中，所述石油醚與待檢藥材的體積質(zhì)量比為20: lmL/g。
[0008]優(yōu)選地，步驟(I)中，所述乙酸乙酯與待檢藥材的體積質(zhì)量比為25: lmL/g。
[0009]優(yōu)選地，步驟(I)中，所述甲醇與待檢藥材的體積質(zhì)量比為1: lmL/g。
[0010]優(yōu)選地，步驟⑴中，所述超聲提取的時(shí)間為15分鐘。
[0011]優(yōu)選地，步驟(I)中，所述回流的時(shí)間為50分鐘。
[0012]優(yōu)選地，步驟⑵中，所述薄層板為硅膠G板。
[0013]優(yōu)選地，步驟(2)中，所述三氯化鋁的濃度為3%。
[0014]優(yōu)選地，步驟⑵中，所述檢視的波長(zhǎng)為365nm。
[0015]現(xiàn)有的方法(《山枝仁質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究》)以經(jīng)鑒定的山枝仁藥材進(jìn)行對(duì)照，在檢測(cè)時(shí)需要制備對(duì)照品溶液。同時(shí)，由于以標(biāo)準(zhǔn)藥材進(jìn)行對(duì)照，并沒(méi)有明確需要對(duì)比的指標(biāo)性成分，必須要對(duì)藥材進(jìn)行兩次提取，才能提取和分離出較多的斑點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。可以看出，由于沒(méi)有發(fā)現(xiàn)山枝仁中的指標(biāo)性成分，使方法整體較為繁瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)。
[0016]而本發(fā)明的薄層色譜方法，公開(kāi)了山枝仁中新的指標(biāo)性成分槲皮素，并以其為定性對(duì)照的斑點(diǎn)，用于山枝仁的檢測(cè)，為監(jiān)控山枝仁藥材的質(zhì)量提供了有效保障。與現(xiàn)有報(bào)道的薄層色譜檢測(cè)方法相比，本發(fā)明的方法不需制備對(duì)照品溶液，同時(shí)僅需一次提取，更為簡(jiǎn)單快速，更適合于實(shí)際的應(yīng)用。
[0017]顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識(shí)和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0018]以下通過(guò)實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【附圖說(shuō)明】
[0019]圖1為槲皮素對(duì)照品的高效液相檢測(cè)結(jié)果。出峰時(shí)間10.842min
[0020]圖2為山枝仁的高效液相檢測(cè)結(jié)果，峰時(shí)間:10.765min。
[0021]圖3為山枝仁和槲皮素的薄層檢測(cè)結(jié)果，編號(hào)為空白對(duì)照，編號(hào)1-10為10批山枝仁，編號(hào)11為槲皮素對(duì)照品
【具體實(shí)施方式】
[0022]所用試劑和儀器均來(lái)自于市售的商品，具體如下:
[0023]硅膠板G:青島海洋化工分廠，批號(hào)20150108。
[0024]槲皮素對(duì)照品:中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100081-201408。
[0025]石油醚:成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)014111401。
[0026]乙酸乙酯:成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)2015031801。
[0027]甲醇:成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)2015020501。
[0028]甲酸:成都市科龍化工試劑廠，批號(hào)2014031301。
[0029]紫外分析儀:上海嘉鵬科技有限公司型號(hào):ZF1-1I。
[0030]山枝仁:經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)蔣桂華教授鑒定，為海桐花科海桐花屬植物海金子Pittosporum illic1ides Mak.的干燥種子
[0031 ] 實(shí)施例1本發(fā)明的山枝仁檢測(cè)方法
[0032]取待檢藥材粉末2g，加石油醚(60?90°C ) 50mL，超聲處理15分鐘，濾過(guò)，棄去濾液。殘?jiān)右宜嵋阴?0mL水浴回流50min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。
[0033]以槲皮素(1.5mg/mL)為對(duì)照品。
[0034]吸取供試品溶液10 μ L，對(duì)照品溶液5 μ L0以硅膠G為吸附劑，以甲苯_乙酸乙酯-甲酸=5:4:1 (體積比)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3%三氯化鋁試液顯色，紫外光燈365nm下檢視。
[0035]若供試品薄層板上有對(duì)照品槲皮素相應(yīng)斑點(diǎn)，即可判定為合格的山枝仁藥材。
[0036]為進(jìn)一步證明山枝仁中存在槲皮素，發(fā)明人進(jìn)行了高效液相色譜驗(yàn)證，
[0037]高效液相色譜的方法如下:
[0038]高效液相條件:水:甲醇(53:47);
[0039]Agilentl200高效液相色譜儀(美國(guó)Agilent公司);
[0040]色譜柱為DiamonsilC18 柱(250mmX4.6mm, 5um);流動(dòng)相水:甲醇(53:47)，時(shí)間50mino
[0041]結(jié)果如圖1和圖2所示。結(jié)果顯示，在保留時(shí)間10.8min附近，山枝仁存在與槲皮素對(duì)照品相應(yīng)的峰，證明槲皮素可以有效作為檢測(cè)山枝仁藥材質(zhì)量的指標(biāo)性成分。
[0042]實(shí)施例2
[0043]按照實(shí)施例1的方法對(duì)山枝仁藥材進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果圖3所示。
[0044]結(jié)果顯示，山枝仁均在薄層板上有對(duì)照品槲皮素相應(yīng)斑點(diǎn)，斑點(diǎn)清晰，Rf值適中(Rf = 0.6-0.7)，與其他斑點(diǎn)分離明顯，證明槲皮素適于作為山枝仁薄層檢測(cè)的對(duì)照品。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種山枝仁的薄層檢測(cè)方法，包括以下步驟: (1)供試品溶液的制備: 取待檢藥材，粉碎，加入石油醚超聲提取，過(guò)濾，取濾渣，加入乙酸乙酯回流，過(guò)濾，蒸干濾液，殘?jiān)尤爰状紡?fù)溶，作為供試品溶液； (2)薄層檢測(cè): 以槲皮素為對(duì)照，分別將供試品溶液和槲皮素對(duì)照品在薄層板上點(diǎn)樣，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸=5:4:1為展開(kāi)劑展開(kāi)，三氯化鋁顯色，檢視即可。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:所述石油醚為沸程60-90°C的石油醚。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟(I)中，所述石油醚與待檢藥材的體積質(zhì)量比為20: lmL/g。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟⑴中，所述乙酸乙酯與待檢藥材的體積質(zhì)量比為25: lmL/g。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟(I)中，所述甲醇與待檢藥材的體積質(zhì)量比為l:lmL/g。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟(I)中，所述超聲提取的時(shí)間為15分鐘。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟⑴中，所述回流的時(shí)間為50分鐘。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟(2)中，所述薄層板為硅膠G板。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟(2)中，所述三氯化鋁的濃度為10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于:步驟(2)中，所述檢視的波長(zhǎng)為365nm0
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種山枝仁的薄層檢測(cè)方法，包括以下步驟：(1)供試品溶液的制備：取待檢藥材，粉碎，加入石油醚超聲提取，過(guò)濾，取濾渣，加入乙酸乙酯回流，過(guò)濾，蒸干濾液，殘?jiān)尤爰状紡?fù)溶，作為供試品溶液；(2)薄層檢測(cè)：以槲皮素為對(duì)照，分別將供試品溶液和槲皮素對(duì)照品在薄層板上點(diǎn)樣，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸＝5:4:1為展開(kāi)劑展開(kāi)，三氯化鋁顯色，檢視即可。本發(fā)明的薄層色譜方法，公開(kāi)了山枝仁中新的指標(biāo)性成分槲皮素，并以其為定性對(duì)照的斑點(diǎn)，用于山枝仁的檢測(cè)，為監(jiān)控山枝仁藥材的質(zhì)量提供了有效保障。
【IPC分類(lèi)】G01N30/90
【公開(kāi)號(hào)】CN105203693
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510601446
【發(fā)明人】龔曉猛, 胡昌江
【申請(qǐng)人】成都中醫(yī)藥大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年12月30日
【申請(qǐng)日】2015年9月18日