從冰箱內(nèi)或水中取出，用濾紙沾干枝條和針葉上的水分，采用單面刀片從側(cè)枝中部將針葉 從根部完整切下數(shù)枚，要求切下的針葉根部不帶葉柄。
[0057] 2、針葉長度L的測定
[0058] 切下的針葉選擇完整、無損傷的，平鋪在桌面或者固定白紙上，采用電子游標(biāo)卡尺 測定云杉針葉長度。測量精度0.01cm，3次重復(fù)。量取針葉長度的時候要用力適度，切不可 使針葉彎曲、變形，影響測量準(zhǔn)確度。測定青海云杉針葉長度的時候，用肉眼觀察，不可量取 針葉根部葉柄和針葉前端透明針尖。
[0059] 3、針葉切片的制作
[0060] 將測定了針葉長度L的相應(yīng)針葉制作切片，用單面刀片從針葉中部橫切，動作迅 速連貫地連續(xù)切下數(shù)個薄片，要求切下的薄片薄而均勻。將切下的薄片以毛筆帶入裝有純 水的培養(yǎng)皿中，用毛筆輕輕攪動，使每個薄片彼此分離，用肉眼選取薄而完整的薄片，用毛 筆蘸取，輕輕放在載玻片上，每個載玻片上放置4-5個薄片，用膠皮滴管滴一滴純水在載玻 片上，用尖嘴鑷子夾取蓋玻片，蓋玻片一端先放在載玻片上，后慢慢向下放直至完全蓋上， 保證蓋玻片下無空氣泡，而且薄片要彼此分離開，用吸水紙輕輕在蓋玻片周圍蘸干多余水 分，完成青海云杉針葉橫切面切片的制作。
[0061] 4、針葉周長的測定
[0062] 將LEICADM6000B電子顯微鏡和電腦相連，在電腦里安裝LASV4. 2軟件。將切片 放置于觀察臺面，將物鏡調(diào)節(jié)至5倍，觀察切片，找到目標(biāo)后，調(diào)節(jié)物鏡至10倍，調(diào)節(jié)微距， 使目標(biāo)清晰可見。挑選此切片上最好的1-2個針葉橫切面在采集工具欄下采集圖像，得到 橫切面電子顯微鏡照片。如果一張照片中放不下整個針葉橫切面，可以采集兩張重復(fù)度在 1/3以上的照片，利用合并照片工具，合成一個完整的橫切面電子顯微鏡照片。
[0063] 以LASV4. 2軟件按保存路徑瀏覽橫切面電子顯微鏡照片，在處理工具欄中可以設(shè) 置比例尺是否在圖片中顯示；在分析工具欄下的測量工具-區(qū)域-自由手繪的區(qū)域線工具 下，沿針葉橫切面的邊沿畫出閉合的曲線，曲線周長即顯示在照片上，點(diǎn)擊創(chuàng)建報表按鈕， 即導(dǎo)出一個此照片的excel報表和針葉橫切面周長，即得到針葉周長C。
[0064] 5、針葉表面積S的計算
[0065] 計算針葉長度L和針葉周長C的乘積，即得到針葉表面積S。
[0066] 表2為采用上述方法測得的青海云杉10個單株100枚針葉的表面積測定值。
[0067] 表2青海云杉10個單株100枚針葉表面積測定值
[0068]
[0069]
[0070]
[0071]
[0072] 實(shí)施例3本發(fā)明的方法測定云杉屬植物一紅皮云杉的針葉表面積
[0073] 1、針葉取樣
[0074] (1)選取10棵正常生長的紅皮云杉健康植株，正常生長指的是樹高、胸徑等生長 指標(biāo)在群體平均值左右，針葉完整，是指針葉顏色正常、生長發(fā)育正常，沒有損傷。
[0075] (2)從選取的云杉植株的南向頂層輪生枝，選擇針葉正常的一級側(cè)枝用修枝剪剪 下，為防止針葉失水變形，需立即保存在〇°C以下的冰箱內(nèi)，送入實(shí)驗(yàn)室。選擇南向側(cè)枝的原 因是南向枝條一般較北向枝條生長好。針葉正常是指針葉顏色正常、生長發(fā)育正常，沒有損 傷等。
[0076] (3)在每棵植株采集的側(cè)枝上選擇10枚針葉作為測定樣本，具體為：將所采側(cè)枝 從冰箱內(nèi)或水中取出，用濾紙沾干枝條和針葉上的水分，采用單面刀片從側(cè)枝中部將針葉 從根部完整切下數(shù)枚，要求切下的針葉根部不帶葉柄。
[0077] 2、針葉長度L的測定
[0078] 切下的針葉選擇完整、無損傷的，平鋪在桌面或者固定白紙上，采用電子游標(biāo)卡尺 測定云杉針葉長度，測量精度〇. 〇lcm，3次重復(fù)。量取針葉長度的時候要用力適度，切不可 使針葉彎曲、變形，影響測量準(zhǔn)確度。測定青海云杉針葉長度的時候，用肉眼觀察，不可量取 針葉根部葉柄和針葉前端透明針尖。
[0079] 3、針葉切片的制作
[0080] 將測定了針葉長度L的相應(yīng)針葉制作切片，用單面刀片從針葉中部橫切，動作迅 速連貫地連續(xù)切下數(shù)個薄片，要求切下的薄片薄而均勻。將切下的薄片以毛筆帶入裝有純 水的培養(yǎng)皿中，用毛筆輕輕攪動，使每個薄片彼此分離，用肉眼選取薄而完整的薄片，用毛 筆蘸取，輕輕放在載玻片上，每個載玻片上放置4-5個薄片，用膠皮滴管滴一滴純水在載玻 片上，用尖嘴鑷子夾取蓋玻片，蓋玻片一端先放在載玻片上，后慢慢向下放直至完全蓋上， 保證蓋玻片下無空氣泡，而且薄片要彼此分離開，用吸水紙輕輕在蓋玻片周圍蘸干多余水 分，完成紅皮云杉針葉橫切面切片的制作。
[0081] 4、針葉周長的測定
[0082] 將LEICADM6000B電子顯微鏡和電腦相連，在電腦里安裝LASV4. 2軟件。將切片 放置于觀察臺面，將物鏡調(diào)節(jié)至5倍，觀察切片，找到目標(biāo)后，調(diào)節(jié)物鏡至10倍，調(diào)節(jié)微距， 使目標(biāo)清晰可見。挑選此切片上最好的1-2個針葉橫切面在采集工具欄下采集圖像，得到 橫切面電子顯微鏡照片。如果一張照片中放不下整個針葉橫切面，可以采集兩張重復(fù)度在 1/3以上的照片，利用合并照片工具，合成一個完整的橫切面電子顯微鏡照片。
[0083] 以LASV4. 2軟件按保存路徑瀏覽橫切面電子顯微鏡照片，在處理工具欄中可以設(shè) 置比例尺是否在圖片中顯示；在分析工具欄下的測量工具-區(qū)域-自由手繪的區(qū)域線工具 下，沿針葉橫切面的邊沿畫出閉合的曲線，曲線周長即顯示在照片上，點(diǎn)擊創(chuàng)建報表按鈕， 即導(dǎo)出一個此照片的excel報表和針葉橫切面周長，即得到針葉周長C。
[0084] 5、針葉表面積S的計算
[0085] 計算針葉長度L和針葉周長C的乘積，即得到針葉表面積S。
[0086] 表3為采用上述方法測得的紅皮云杉10個單株100枚針葉的表面積測定值。
[0087] 表3紅皮云杉10個單株100枚針葉表面積測定值
[0088]
[0089]
[0090」
[0091] 以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾 也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種測定針葉表面積的方法，其特征在于，包括如下步驟： 1) 測定針葉長度L ; 2) 制作針葉中部的橫切面切片，以之測定針葉周長C ; 3) 計算針葉長度L和針葉周長C的乘積，即得到針葉表面積S。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述針葉指云杉屬植物的針葉。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述測定針葉長度L，測量精度為 0. 01cm〇4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，步驟1)所述測定針葉長度L，以游標(biāo)卡尺 或電子游標(biāo)卡尺測定。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)所述測定針葉周長C，其為： 拍攝切片上的橫切面電子顯微鏡照片，以LAS V4. 2軟件處理橫切面電子顯微鏡照片得 到橫切面周長，即為針葉周長C。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的拍攝切片上橫切面電子顯微鏡照 片，具體步驟如下： 將電子顯微鏡和裝有LAS V4. 2軟件的電腦相連，觀察切片，5倍物鏡下找到目標(biāo)后調(diào) 節(jié)物鏡至10倍，調(diào)節(jié)微距使目標(biāo)清晰可見，挑選切片上最完整的橫切面，采集圖像得到橫 切面電子顯微鏡照片。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的以LAS V4. 2軟件處理橫切面電子 顯微鏡照片，具體步驟如下： 在安裝有LAS V4. 2軟件的計算機(jī)上瀏覽橫切面電子顯微鏡照片，點(diǎn)擊處理工具欄設(shè)置 比例尺，在分析工具欄中的測量工具-區(qū)域-自由手繪的區(qū)域線工具下，沿著橫切面的邊沿 畫出閉合的曲線，曲線周長即顯示在照片上，導(dǎo)出為橫切面周長，即得到針葉周長C。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，還包括針葉的取樣，具體步驟如下：選取 健康植株上的南向一級側(cè)枝剪下，〇°C以下低溫保存或浸入水中保存，測定時從側(cè)枝中部將 完整的針葉從根部切下，切下的針葉根部不帶葉柄。9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，還包括測定多枚針葉表面積，求平均值作 為整個枝條或全株的針葉表面積的常數(shù)。10. 權(quán)利要求1-9任一項所述方法在林業(yè)數(shù)據(jù)采集中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種測定針葉表面積的方法，包括如下步驟：1)測定針葉長度；2)制作針葉中部的橫切面切片，以之測定針葉周長；3)計算針葉長度和針葉周長的乘積，即得到針葉表面積用本發(fā)明的方法測定植物針葉表面積，尤其是云杉屬植物針葉表面積，具有方便、快速、比較精確的優(yōu)點(diǎn)，為生產(chǎn)和科學(xué)研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)收集的一種方法。
【IPC分類】G01B21/28
【公開號】CN104990530
【申請?zhí)枴緾N201510362793
【發(fā)明人】馬建偉, 王軍輝, 王麗芳, 安三平, 宋璐
【申請人】甘肅省小隴山林業(yè)實(shí)驗(yàn)局林業(yè)科學(xué)研究所, 中國林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所
【公開日】2015年10月21日
【申請日】2015年6月25日