一種測(cè)定鹽酸多巴胺的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及鹽酸多己胺的測(cè)定方法，特別是巧光桃紅巧光巧滅法測(cè)定鹽酸多己胺 的方法。
【背景技術(shù)】
[000引多己胺（Dopamine,DA)是一種最重要的兒茶酪胺，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)及腎臟系統(tǒng) 中起著關(guān)鍵的作用。體內(nèi)的多己胺分泌失調(diào)將導(dǎo)致屯、臟病、精神分裂癥和帕金森氏癥等疾 病。鹽酸多己胺水溶性好、可增強(qiáng)屯、肌收縮力，增加排血量，并大量用于屯、肌梗塞、創(chuàng)傷、內(nèi) 毒素?cái)⊙Y、屯、臟手術(shù)、腎功能衰竭、充血性屯、力衰竭等引起的休克綜合征。因此，建立一種 靈敏、快速、簡(jiǎn)單的多己胺檢測(cè)方法，對(duì)生物分析、生理學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)W及相關(guān)藥物的質(zhì)量控 制研究具有十分重要的意義。目前，測(cè)定多己胺的方法有電化學(xué)法、色譜法、化學(xué)發(fā)光法等。 而巧光法具有分析靈敏度高、方法簡(jiǎn)便、儀器價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn)，常應(yīng)用于藥物分析檢測(cè)。巧光桃 紅（RA)是一種性能優(yōu)異的強(qiáng)巧光物質(zhì)，常作為巧光試劑用于定量分析，但目前應(yīng)用巧光桃 紅測(cè)定鹽酸多己胺的方法尚未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一種巧光桃紅巧光巧滅法測(cè)定鹽酸多己胺的方法。
[0004] 具體步驟為； 在 7 支 10血比色管中分別加入 0. 00、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5、0. 9、1. 3血 7. 0X10- 4~ 9. 0X10"4mol/L的鹽酸多己胺值A(chǔ))溶液，再在每支比色管中都分別加入0.5~3.0血 P化2. 0~13. 0的氯化鐘-氨氧化鋼緩沖溶液和0. 2~0. 9血1. 0X10"5mol/L的巧光桃 紅（RA)溶液；W不加鹽酸多己胺的溶液為試劑空白，二次蒸饋水定容至刻度，搖勻，靜置20 分鐘后，于巧光光度計(jì)上，設(shè)置激發(fā)波長(zhǎng)為536nm，發(fā)射波長(zhǎng)為551nm，激發(fā)和發(fā)射狹縫均為 2. 5nm，電壓為600V，用1cm巧光比色皿，分別測(cè)定含鹽酸多己胺溶液的巧光強(qiáng)度值F和試劑 空白的巧光強(qiáng)度值F。，計(jì)算巧光強(qiáng)度差值A(chǔ)F=F"-F;其巧光強(qiáng)度差值A(chǔ)F與鹽酸多己胺濃 度0在4.03~105 4111〇1/1范圍內(nèi)成線性關(guān)系，線性回歸方程為；么尸=2.532〔+19.04((：為 鹽酸多己胺的濃度，單位為ymol/L),相關(guān)系數(shù)0.9992，檢出限為1.26^111〇1/1;另取鹽酸 多己胺注射液1支，全部轉(zhuǎn)移至100血容量瓶中，用二次蒸饋水定容至刻度，取0. 1~0. 3血 溶液同法測(cè)定巧光強(qiáng)度值，計(jì)算出鹽酸多己胺注射液中鹽酸多己胺的含量。
[0005] 本發(fā)明測(cè)定方法靈敏度高、線性范圍寬、操作簡(jiǎn)便。
【附圖說明】
[0006] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例空白與1.05X1(T4mol/L鹽酸多己胺的巧光光譜圖。
[0007] 圖中標(biāo)記a;pH13. 0KCl-NaOH- 0. 7ymol/LRA的激發(fā)光譜；b;pH13. 0 KCl-NaOH- 0. 7ymol/LRA的發(fā)射光譜；c;pH13.0KCl-NaOH- 0. 7ymol/L RA-1. 05Xl〇-4mol/LDA的發(fā)射光譜。
【具體實(shí)施方式】[000引 實(shí)施例； 在 7支 10血比色管中分別加入0. 00、0. 05、0. 1、0. 2、0. 5、0. 9、1. 3mL8. 068Xl0-4mol/L的鹽酸多己胺溶液，再在每支比色管中都分別加入2. 5mLp化3. 0的氯化鐘-氨氧化鋼緩 沖溶液和0. 7血1. 0X10- 5mol/L的巧光桃紅溶液，W不加鹽酸多己胺的溶液為試劑空白， 二次蒸饋水定容至刻度，搖勻，靜置20分鐘。于巧光分光光度計(jì)上（CaryEclipse型，美國(guó) Varian公司），設(shè)置激發(fā)波長(zhǎng)為536nm，發(fā)射波長(zhǎng)為551nm，激發(fā)和發(fā)射狹縫均為2. 5nm，電壓 為600V，用1cm巧光比色皿，分別測(cè)定含鹽酸多己胺溶液的巧光強(qiáng)度值F和試劑空白的巧 光強(qiáng)度值F。，計(jì)算巧光強(qiáng)度差值A(chǔ)F=Fa-F;其巧光強(qiáng)度差值A(chǔ)F與鹽酸多己胺濃度C在 4.03~105ymol/L范圍內(nèi)成線性關(guān)系，線性回歸方程為；AF=2.532C+19.04(C為鹽酸多 己胺的濃度，單位為ymol/L),相關(guān)系數(shù)0.9992,檢出限為1.26ymol/L。另取兩個(gè)廠家 (廣東白云山明興制藥有限公司和上海禾豐制藥廠，規(guī)格：鹽酸多己胺含量20mg/2mL)生產(chǎn) 的鹽酸多己胺注射液各一支，分別全部轉(zhuǎn)移至lOOmL容量瓶中，用二次蒸饋水定容至刻度， 各取0.2mL溶液同法測(cè)定巧光強(qiáng)度值，計(jì)算出鹽酸多己胺注射液中鹽酸多己胺的含量，同 時(shí)做了加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見表1。
[0009] 表1;鹽酸多己胺注射液測(cè)定結(jié)果（n=5)
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種測(cè)定鹽酸多巴胺的方法，其特征在于具體步驟為： 在 7 支 IOmL 比色管中分別加入 0? 00、0? 05、0. 1、0. 2、0. 5、0. 9、1. 3mL 7. OXKT4~ 9. 0 X l(T4m〇l/L的鹽酸多巴胺溶液，再在每支比色管中都分別加入0. 5~3. OmL pH12. 0~ 13. 0的氯化鉀-氫氧化鈉緩沖溶液和0. 2~0. 9mL I. 0 X KT 5m〇l/L的熒光桃紅溶液；以 不加鹽酸多巴胺的溶液為試劑空白，二次蒸餾水定容至刻度，搖勻，靜置20分鐘后，于熒光 光度計(jì)上，設(shè)置激發(fā)波長(zhǎng)為536nm，發(fā)射波長(zhǎng)為551nm，激發(fā)和發(fā)射狹縫均為2. 5nm，電壓為 600V，用Icm熒光比色皿，分別測(cè)定含鹽酸多巴胺溶液的熒光強(qiáng)度值F和試劑空白的熒光強(qiáng) 度值F tl，計(jì)算熒光強(qiáng)度差值A(chǔ)F= Ftl-F ;其熒光強(qiáng)度差值A(chǔ) F與鹽酸多巴胺濃度C在4. 03~ 105 y mol/L范圍內(nèi)成線性關(guān)系，線性回歸方程為：AF=2. 532C+19. 04, C為鹽酸多巴胺的濃 度，單位為ymol/L，相關(guān)系數(shù)0.9992，檢出限為1.26 11111〇1/1;另取鹽酸多巴胺注射液1 支，全部轉(zhuǎn)移至IOOmL容量瓶中，用二次蒸餾水定容至刻度，取0. 1~0. 3mL溶液同法測(cè)定 熒光強(qiáng)度值，計(jì)算出鹽酸多巴胺注射液中鹽酸多巴胺的含量。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測(cè)定鹽酸多巴胺的方法。于7支10mL比色管中分別加入0.00、0.05、0.1、0.2、0.5、0.9、1.3mL 7.0×10－4～9.0×10－4mol/L的鹽酸多巴胺溶液，再在每支管中加入0.5～3.0mL pH12.0～13.0的氯化鉀-氫氧化鈉緩沖液和0.2～0.9mL 1.0×10－5mol/L的熒光桃紅溶液；以不加鹽酸多巴胺的溶液為試劑空白，用二次蒸餾水定容至刻度，靜置20分鐘后，于熒光光度計(jì)上，以536nm為激發(fā)波長(zhǎng)，551nm為發(fā)射波長(zhǎng)，用1cm熒光比色皿，分別測(cè)定含鹽酸多巴胺溶液的熒光值F和試劑空白的熒光值F0，計(jì)算差值ΔF= F0-F；另取鹽酸多巴胺注射液1支轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中并定容，同法測(cè)定熒光值，計(jì)算出注射液中鹽酸多巴胺的含量。本發(fā)明靈敏度高、線性范圍寬、操作簡(jiǎn)便。
【IPC分類】G01N21-64
【公開號(hào)】CN104880442
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510259375
【發(fā)明人】唐寧莉, 張容琿, 陳永寧, 單展, 陳明石
【申請(qǐng)人】桂林理工大學(xué)
【公開日】2015年9月2日
【申請(qǐng)日】2015年5月21日