一種快速鑒定茶褐素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及化學鑒定領(lǐng)域，特別是一種快速鑒定茶褐素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]現(xiàn)有的茶褐素(茶色素)鑒定方法分為定性和定量兩種，傳統(tǒng)的紫外吸收定性方法采用普通分光光度計，茶褐素吸收峰為273nm±20nm，傳統(tǒng)的基于標準曲線的比色法定量需要標準品，鑒于茶褐素(茶色素)是一個混合多聚物，所以沒有真正意義的標準品，并且操作時間比較長(I小時以上)，每次的標準曲線都需要重新做，用此方法測定的值誤差比較大，甚至會出現(xiàn)含量超過100%的情況。
[0003]現(xiàn)在新出現(xiàn)了一種采用高效液相色譜或質(zhì)譜或液-質(zhì)聯(lián)用的方法進行茶褐素的檢測方法，所得數(shù)據(jù)精確，但也具有一些缺陷，如機器貴，速度慢，對操作人員技能要求高，高效液相色譜太精密，所測結(jié)果差異很大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了解決如上技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種快速鑒定茶褐素的方法，該方法具有檢測快速準確，受人為因素影響小，工作量小的特點。
[0005]本發(fā)明的一種快速鑒定茶褐素的方法，包括如下步驟:
[0006]I)定性檢測:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度計檢測茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及特征峰型；
[0007]2)定量檢測:配制已知濃度茶褐素溶液，使用毛細管電泳儀檢測茶褐素溶液的吸收峰，并通過吸收峰峰面積或峰高繪制標準曲線及公式；然后檢測待測茶褐素溶液，對照標準曲線計算得到待測茶褐素含量。
[0008]進一步的，所述步驟I)具體為配制茶褐素濃度為0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在此波長范圍中出現(xiàn)特征吸收峰及確定的峰型。
[0009]進一步的，所述步驟2)具體為配制5-20個不同濃度且濃度為0.5-8g/L的含量為90%的茶褐素溶液后，每個濃度的溶液中取2-10ml茶褐素溶液在毛細管電泳儀上檢測茶褐素的吸收峰，通過吸收峰的峰面積或峰高，計算茶褐素含量，并擬合濃度-峰面積標準曲線:
[0010]y = 0.000003679 ?0.000011037x±0.093063315 ；
[0011 ] 或濃度-峰高標準曲線:
[0012]y = 0.000126115 ?0.000378345x±0.039633517 ；
[0013]其中毛細管電泳儀的檢測條件為:緩沖溶液為硼砂，毛細管長度為30_60cm，電泳時間為700-1200S，進樣壓力為0.5-2kpa，沖洗壓力為20_50kpa，紫外檢測器檢測波長273nm ；
[0014]以同樣電泳條件將濃度為0.5-8g/L的待測茶褐素樣品進行毛細管電泳獲得峰面積或峰高，根據(jù)濃度-峰面積或濃度-峰高標準曲線計算出相對濃度，最終得到待測茶褐素樣品的含量。
[0015]上述快速鑒定茶褐素的方法由定性檢測先檢測溶液中是否含有茶褐素，再對含有茶褐素的溶液進行定量檢測，通過計算得到茶褐素的相對濃度，進而得到該茶褐素樣品的含量；該定性檢測和定量檢測相結(jié)合對茶褐素溶液進行檢測的方法可在30min內(nèi)精確測量茶褐素含量，誤差僅為5% _10%，大大低于以往對茶褐素的檢測方法的誤差率。
[0016]進一步的，一種快速鑒定茶褐素的方法，該方法為:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度計檢測茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及特征峰型。
[0017]進一步的，所述方法具體為配制茶褐素濃度為0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在此波長范圍中出現(xiàn)特征吸收峰及確定的峰型。
[0018]當僅需對溶液進行茶褐素的定性檢測，不需定量檢測時，可采用本發(fā)明的上述方法，該方法為定性檢測，該定性檢測由超微量紫外分光光度計進行檢測，測得的茶褐素特征峰在273nm±2nm處并且全波長峰型獨特。通過該方法對不確定是否含茶褐素的溶液進行檢測，若在273nm±2nm處出現(xiàn)特征峰，則說明該溶液中含有茶褐素，若無該特征峰，則說明該溶液中不含茶褐素。如果峰型圖形狀不一致，說明樣品中可能含有其他物質(zhì)。
[0019]上述快速鑒定茶褐素的方法僅為定性檢測，可在5min內(nèi)判斷溶液內(nèi)是否含有茶褐素，檢測時間短，檢測結(jié)果準確。
[0020]綜上，本發(fā)明的一種快速鑒定茶褐素的方法具有的有益效果有:檢測結(jié)果準確，檢測時間短；受人為因素影響小，測定的批間差?。粰z測工作量??；檢測步驟標準化。
【附圖說明】
[0021]圖1為實施例1中超微量紫外分光光度計吸光度峰型圖；
[0022]圖2為實施例1中毛細管電泳儀檢測的電泳圖；
[0023]圖3為實施例2中超微量紫外分光光度計吸光度峰型圖；
[0024]圖4為實施例3中超微量紫外分光光度計吸光度峰型圖；
[0025]圖5為實施例3中毛細管電泳儀檢測的電泳圖；
【具體實施方式】
[0026]為了使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體圖示，進一步闡述本發(fā)明。
[0027]實施例1
[0028]本發(fā)明的一種快速鑒定茶褐素的方法，包括如下步驟:
[0029]I)定性檢測:配制茶褐素濃度為lg/L的茶褐素溶液后，取3 UL茶褐素溶液在k5600型超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在273nm±2nm處出現(xiàn)特征吸收峰，UV-VIS全波長掃描峰型見圖1 ;
[0030]2)定量檢測:配制濃度為4g/L的待測茶褐素溶液后，取2ml茶褐素溶液在毛細管電泳儀上檢測茶褐素的吸收峰為496062uV.S，其中電泳條件為:緩沖溶液為硼砂，毛細管長度50cm，電泳時間900s，進樣壓力lkpa，沖洗壓力40kpa，紫外檢測器檢測波長為273nm，電泳圖見圖2。
[0031]通過濃度-峰面積標準曲線公式y(tǒng) = 0.000007358*x+0.06204221計算待測茶褐素的相對濃度為3.712g/L，最終得到待測茶褐素含量為90% *(3.712/4) = 83.5% ；
[0032]本實施例的一種快速鑒定茶褐素的方法具有的有益效果有:檢測結(jié)果準確，檢測時間短；受人為因素影響小，測定的批間差?。粰z測工作量?。粰z測步驟標準化。
[0033]實施例2
[0034]本發(fā)明的一種快速鑒定茶褐素的方法，該方法為:
[0035]配制茶褐素濃度為2g/L的茶褐素溶液后，取4 μ L茶褐素溶液在k5600型超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在273nm±2nm處出現(xiàn)特征吸收峰，UV-VIS全波長掃描峰型見圖3 ；
[0036]本實施例的一種快速鑒定茶褐素的方法具有的有益效果有:檢測結(jié)果準確，檢測時間短；受人為因素影響小，測定的批間差小；檢測工作量?。粰z測步驟標準化。
[0037]實施例3
[0038]本發(fā)明的一種快速鑒定茶褐素的方法，包括如下步驟:
[0039]I)定性檢測:配制茶褐素濃度為2g/L的茶褐素溶液后，取2 μ L茶褐素溶液在k5600型超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在273nm±2nm處出現(xiàn)特征吸收峰，UV-VIS全波長掃描峰型見圖4 ；
[0040]2)定量檢測:配制濃度為6g/L的待測茶褐素溶液后，取3ml茶褐素溶液在毛細管電泳儀上檢測茶褐素的峰高為20679mV，其中電泳條件為:緩沖溶液為硼砂，毛細管長度50cm，電泳時間900s，進樣壓力Ikp，沖洗壓力40kpa，紫外檢測器檢測波長為273nm，電泳圖見圖5。
[0041]通過濃度-峰高標準曲線公式y(tǒng) = 0.00025223*x+0.026422345計算待測茶褐素的相對濃度為5.242g/L，最終得到待測茶褐素含量為90% *(3.712/4) = 78.6% ；
[0042]本實施例的一種快速鑒定茶褐素的方法具有的有益效果有:檢測結(jié)果準確，檢測時間短；受人為因素影響小，測定的批間差小；檢測工作量小；檢測步驟標準化。
【主權(quán)項】
1.一種快速鑒定茶褐素的方法，其特征在于，包括如下步驟: 1)定性檢測:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度計檢測茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰型； 2)定量檢測:配制已知濃度茶褐素溶液，使用毛細管電泳儀檢測茶褐素溶液在特定波長273nm下的吸收峰，并通過吸收峰峰面積或峰高繪制標準曲線及公式；然后檢測待測茶褐素溶液，對照標準曲線計算得到待測茶褐素含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速鑒定茶褐素的方法，其特征在于:所述步驟I)具體為配制茶褐素濃度為0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在此波長范圍中出現(xiàn)特征吸收峰及確定的峰圖型。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種快速鑒定茶褐素的方法，其特征在于:所述步驟2)具體為配制5-20個不同濃度且濃度為0.5-8g/L的含量為90%的茶褐素溶液后，每個濃度的溶液中取2-10ml茶褐素溶液在毛細管電泳儀上檢測茶褐素在273nm處的吸收峰，通過吸收峰的峰面積或峰高，計算茶褐素含量；其中毛細管電泳儀的檢測條件為:緩沖溶液為硼砂，毛細管長度為30-60cm，電泳時間為700-1200s，進樣壓力為0.5_2kpa，沖洗壓力為20_50kp ； 采用以上述電泳條件將濃度為0.5-8g/L的待測茶褐素樣品進行毛細管電泳獲得峰面積或峰高，根據(jù)濃度-峰面積或濃度-峰高標準曲線計算出相對濃度，最終得到待測茶褐素樣品的含量。
4.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的快速鑒定茶褐素的方法，其特征在于，該方法為:配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度計檢測茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰及峰圖形。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種快速鑒定茶褐素的方法，其特征在于:所述方法具體為配制茶褐素濃度為0.5-8g/L的茶褐素溶液后，取2-5 μ L茶褐素溶液在超微量紫外分光光度計的200-850nm波長下檢測茶褐素的吸光度，茶褐素在此波長范圍中出現(xiàn)特征吸收峰及確定的峰型。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種快速鑒定茶褐素的方法，包括如下步驟：1)定性檢測：配制茶褐素溶液后，使用超微量紫外分光光度計檢測茶褐素溶液的吸光度，得到茶褐素的特征峰型；2)定量檢測：配制茶褐素溶液后，使用毛細管電泳儀檢測茶褐素溶液在特定波長273nm下的吸收峰，并通過吸收峰峰面積或峰高計算茶褐素含量。本發(fā)明的一種快速鑒定茶褐素的方法具有的有益效果有：檢測結(jié)果準確，檢測時間短；受人為因素影響小，測定的批間差小；檢測工作量小；檢測步驟標準化。
【IPC分類】G01N21-33, G01N27-447
【公開號】CN104614335
【申請?zhí)枴緾N201510074729
【發(fā)明人】張進
【申請人】張進
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年2月12日