測定布帕伐醌注射液中布帕伐醌含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及定量測定制劑中布帕伐醌含量的方法，具體地說 是一種測定布帕伐醌注射液中布帕伐醌含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 布帕伐醌化學(xué)名稱為2-[ (4-叔丁基環(huán)己基）甲基]-3-羥基-1，4-萘二酮，是一 種新型的抗梨漿蟲藥物，對家畜均有治療作用。布帕伐醌注射液為一種新型的藥物，但目前 文獻對布帕伐醌注射液中布帕伐醌的檢測方法鮮有報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題，是要提供一種測定布帕伐醌注射液中布帕伐醌含量的 方法，該方法屬于高效液相色譜法即HPLC法，具有操作簡單、快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好、穩(wěn)定性 好、專屬性強等優(yōu)點。
[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是： 一種測定布帕伐醌注射液中布帕伐醌含量的方法，它屬于高效液相色譜法，色譜條件 為： ⑴十八烷基鍵合硅膠為填充劑250mmX4.6 的熱電HypersilBDS(：18色譜柱； ⑵流動相體積比為乙腈：水：甲醇：磷酸=125:40:35:1 ; ⑶紫外檢測器的檢測波長為251nm。
[0005] 作為本發(fā)明的一種限定，所述磷酸溶液濃度為85%。
[0006] 作為本發(fā)明的另一種限定，所述流動相的流速為1.OmL/min;進樣體積為10iiL， 柱溫35°C。
[0007] 本發(fā)明通過建立的上述方法，來測定布帕伐醌注射液中布帕伐醌的含量，能夠達 到分析準(zhǔn)確的目的。
[0008] 由于采用了上述的技術(shù)方案，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，所取得的技術(shù)進步在于：本 發(fā)明采用HPLC法檢測布帕伐醌注射液中布帕伐醌的含量，操作簡單，快速、重復(fù)性好、穩(wěn)定 性好、專屬性強，具有較高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確度。
[0009] 本發(fā)明適用于對布帕伐醌注射液中布帕伐醌的含量進行HPLC法測定。
【附圖說明】
[0010] 圖1為本發(fā)明實施例溶劑干擾性試驗的HPLC圖； 圖2為本發(fā)明實施例空白輔料干擾性試驗的HPLC圖； 圖3為本發(fā)明實施例布帕伐醌對照品HPLC圖； 圖4為本發(fā)明實施例布帕伐醌樣品HPLC圖； 圖5為本發(fā)明實施例對照品進樣量為2yL線性測定的HPLC圖； 圖6為本發(fā)明實施例對照品進樣量為5yL線性測定的HPLC圖； 圖7為本發(fā)明實施例對照品進樣量為10yL線性測定的HPLC圖； 圖8為本發(fā)明實施例對照品進樣量為20yL線性測定的HPLC圖； 圖9為本發(fā)明實施例對照品進樣量為40yL線性測定的HPLC圖。
[0011] 本發(fā)明下面將結(jié)合說明書附體及具體的實施例作進一步詳細(xì)說明。
【具體實施方式】
[0012] 下述實施例中所使用的試驗方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0013] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)渠道得到。
[0014] 實施例一種測定布帕伐醌注射液中布帕伐醌含量的方法 本實施例屬于高效液相色譜法，其色譜條件為： ⑴十八烷基鍵合硅膠為填充劑熱電HypersilBDSC18色譜柱（250mmX4. 6 ⑵流動相由乙腈、水、甲醇與質(zhì)量濃度為85%的磷酸組成，它們之間的體積比為乙腈： 水：甲醇：磷酸=125:40:35:1，流動相的流速為1.0mL/min;進樣體積為10iiL，柱溫35°C; ⑶紫外檢測器的檢測波長為251nm。
[0015] 一、本發(fā)明方法的建立過程 1、儀器與試劑 1. 1、儀器：島津LC-2010A高效液相色譜儀（LC-2010型號紫外檢測器，LC-2010型號 泵，LC-2010柱溫箱，LC-2010自動進樣器），LCsolution色譜工作站； 1. 2、試劑： 甲醇(色譜純)，乙腈(色譜純)，磷酸(優(yōu)級純，需要配置為質(zhì)量濃度為85%的溶液)，水 (二次去離子水)，布帕伐醌注射液(樣品，河北科星藥業(yè)有限公司生產(chǎn))，布帕伐醌對照品(批 號：1402081，Sigma生產(chǎn)，含量為 99. 5%)。
[0016] 2、含量測定方法的建立 2. 1、溶液的配制 ①稀釋液為體積比為80 ::20的乙腈和水。
[0017] ②對照品溶液的配制：精密稱取布帕伐醌對照品25mg，置于100mL容量瓶中，用稀 釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻后制得對照品溶液N。
[0018] ③樣品溶液的配制：精密量取樣品5. 00mL(相當(dāng)于布帕伐醌250mg)置于50mL的 容量瓶中，用稀釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻，再精密量取稀釋后的溶液5mL，置于100mL的 容量瓶中，用稀釋液稀釋至刻度，搖勻后制得樣品溶液M。
[0019] 2. 2、波長的選擇 根據(jù)布帕伐醌的紫外光吸收特性，測定了其水溶液在紫外光下的吸收圖譜，布帕伐醌 在波長為251nm有很好的吸收，因此確定251nm作為其檢測波長。
[0020] 2. 3、溶劑和空白輔料的干擾性試驗 為了排除色譜圖中有溶劑和空白輔料干擾布帕伐醌峰的出現(xiàn)，現(xiàn)對單獨的溶劑和空白 輔料進行專屬性試驗，以增加檢測的準(zhǔn)確性。
[0021] ①溶劑的影響：稀釋液過〇.45i!m濾膜，得樣品1。
[0022] ②空白輔料的影響：按照制劑配方中規(guī)定的比例，除布帕伐醌外，加入其它輔料制 成樣品，精密量取此樣品5mL置于50mL的容量瓶中，用稀釋液溶解并稀釋至刻度，搖勻，再 精密量取稀釋后的溶液5mL，置于lOOmL的容量瓶中，用稀釋液稀釋至刻度，搖勻后制得樣 品2。
[0023] 按照上述的色譜條件進樣，分別量取樣品1和樣品2各10yL進樣，記錄色譜圖， 如圖1和圖2所示。
[0024] 從圖1中可以看出，溶劑的色譜曲線接近于基線，并且沒有干擾峰出現(xiàn)，表明溶劑 對布帕伐醌的測定沒有影響。
[0025] 從圖2中可以看出，沒有干擾峰出現(xiàn)，表明空白輔料對布帕伐醌的測定沒有影響。
[0026] ③布帕伐醌的定性試驗：取2. 1項中的溶液N和溶液M各10iiL，按照上述色譜條 件進樣，記錄色譜圖(如圖3和圖4所示)，從圖中可以看出樣品中布帕伐醌的主峰保留時間 和對照品圖中布帕伐醌的主峰保留時間一致。
[0027] 2. 4、樣品含量的測定 將2. 1項中配置好的對照品溶液N，取10yL進樣，另取三批配置好的樣品溶液M，每 批樣品做兩個平行，各取10UL按上述色譜條件進樣，記錄各主峰面積并按外標(biāo)法計算布 帕伐醌的含量，結(jié)果見表1所示，根據(jù)試驗測定結(jié)果，布帕伐醌均在標(biāo)示量的90. 0%-110. 0% 范圍內(nèi)，說明此檢測方法可靠。
[0028] 表1樣品測定結(jié)果
【主權(quán)項】
1. 一種測定布帕伐釀注射液中布帕伐釀含量的方法，其特征在于它為高效液相色譜 法，該方法的色譜條件為： (1)十八焼基鍵合娃膠為填充劑250mmX4. 6 mm，5ym的熱電Hypersil BDS C18色譜 柱； 口)流動相體積比為己膳：水；甲醇；磯酸=125:40:35:1 ; 樹紫外檢測器的檢測波長為251nm。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定布帕伐釀注射液中布帕伐釀含量的方法，其特征在于： 所述磯酸溶液的濃度為85%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的測定布帕伐釀注射液中布帕伐釀含量的方法，其特征在 于所述流動相的流速為1. OmL/min ;進樣體積為10 y L，柱溫35C。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定布帕伐醌注射液中布帕伐醌含量的方法，它屬于高效液相色譜法，該方法的色譜條件為：⑴ 用十八烷基鍵合硅膠為填充劑（250mm×4.6 mm，5μm）的熱電Hypersil BDS C18色譜柱；⑵流動相乙腈、水、甲醇、磷酸體積比為125:40:35:1；流動相的流速為流速1.0mL/min；進樣體積為10μL，柱溫35℃；⑶紫外檢測器的檢測波長為251nm。本發(fā)明的測定方法操作簡單，具有快速、準(zhǔn)確、重復(fù)性好、穩(wěn)定性好、專屬性強等優(yōu)點。本發(fā)明適用于布帕伐醌注射液中布帕伐醌含量的測定。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號】CN104535680
【申請?zhí)枴緾N201410819685
【發(fā)明人】魏桂香, 楊廣平, 牛明
【申請人】河北科星藥業(yè)有限公司
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月25日