專利名稱：鑒別普通急性淋巴母細(xì)胞白血病使用的對(duì)照細(xì)胞的制作方法
本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為1993年9月14日、申請(qǐng)?zhí)枮?3117510.0、申請(qǐng)人為庫爾特公司、發(fā)明名稱為“血液測(cè)試鑒別愛滋病使用的保藏非傳染性對(duì)照細(xì)胞”的中國(guó)專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
本申請(qǐng)與1991年10月22日申請(qǐng)的美國(guó)專利US5,059,518相關(guān)。本申請(qǐng)和US,5,059,518歸共同的受讓人，CoulterCorporation,Hialeah,Florida所有。
本發(fā)明涉及對(duì)照細(xì)胞和生產(chǎn)用于免疫檢測(cè)的該細(xì)胞的方法。尤其是，本發(fā)明涉及具有至少一種特定細(xì)胞類型的種群或數(shù)量的保藏非傳染性對(duì)照細(xì)胞，所述特定細(xì)胞類型種群或數(shù)量是患病哺乳動(dòng)物血液或組織樣品中所述細(xì)胞種群或數(shù)量的指示特征，與正常血液或組織樣品的其數(shù)量相比，所述疾病可導(dǎo)致上述細(xì)胞數(shù)量改變。具體地說，非傳染性對(duì)照細(xì)胞通過減少或擴(kuò)增在正常血液中發(fā)現(xiàn)的反映特定的疾病狀態(tài)的一種或多種細(xì)胞類型，從正常、非傳染性、非疾病變化的血液中產(chǎn)生的。然后將這種減少或擴(kuò)增的正常血液樣品保藏，例如，凍干，以便延長(zhǎng)其保存期，隨后將其用于臨床和免疫分析方法中。
對(duì)照細(xì)胞是準(zhǔn)確無誤的臨床和免疫檢測(cè)中所必需的。需要對(duì)照細(xì)胞來確保測(cè)試設(shè)備和測(cè)試方法的可靠性和準(zhǔn)確性，并保證在不同的時(shí)間和不同的實(shí)驗(yàn)室的可重復(fù)性。管理這些檢測(cè)的美國(guó)州和聯(lián)邦法規(guī)通常要求使用多級(jí)對(duì)照以證實(shí)設(shè)備在一定值內(nèi)性能運(yùn)行正常。免疫檢測(cè)中，新鮮的正常細(xì)胞為這種設(shè)備檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照細(xì)胞。為了免除獲得和保持新鮮細(xì)胞所需的費(fèi)用和開支，已評(píng)估了各種保藏新鮮細(xì)胞的方法。例如，US.5,059,518(’518專利)描述了使用凍干的正常哺乳動(dòng)物細(xì)胞作對(duì)照細(xì)胞。
也曾經(jīng)采用異常血細(xì)胞樣品作為對(duì)照細(xì)胞來證實(shí)疾病的存在并確定其階段，但是已將它們的使用限制在從患者抽取的新鮮或鮮凍樣品。因此這些樣品的供應(yīng)受到內(nèi)在的限制。再者，由于許多這樣的血樣與傳染性疾病有關(guān)，由于健康和社會(huì)以及有時(shí)技術(shù)上的原因，這些血樣不能大規(guī)范生產(chǎn)和銷售，并且這些血樣需要特別的處理方法。
本發(fā)明描述通過使用經(jīng)修飾的正常對(duì)照細(xì)胞樣品作為上述異常對(duì)照細(xì)胞的替代物而反映人血中存在于表現(xiàn)出特定疾病的人血液中的一種或多種特定細(xì)胞類型的種群或數(shù)量。
本發(fā)明提供反映表現(xiàn)出疾病的，以及血液中存在的細(xì)胞類型、數(shù)量或生理化學(xué)性質(zhì)上有改變的哺乳動(dòng)物血樣中特定細(xì)胞種群的對(duì)照細(xì)胞，以及生產(chǎn)與保藏這些對(duì)照細(xì)胞的方法。對(duì)照細(xì)胞反映以下兩個(gè)方面的血細(xì)胞種群的異?，F(xiàn)狀；(1)由于疾病的存在而使特定類型細(xì)胞在數(shù)量上的增加或減少，增加或減少的量與正常血樣中這些細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)；或(2)存在在正常血樣中不應(yīng)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞，這些細(xì)胞在大小、形狀或其它物理特性上有差異，或具有未在正常細(xì)胞發(fā)現(xiàn)的分子和/或抗原位點(diǎn)。第一種類型的對(duì)照細(xì)胞通過減少正常存在于血液中的特定細(xì)胞的血樣至正常水平以下或通過添加這些細(xì)胞至存在于血液中的正常水平之上來制備，且隨后保藏該樣品。第二種類型的對(duì)照細(xì)胞通過將不是正常存在于血液中的細(xì)胞加到正常血樣中并隨后保藏該樣品。


圖1(a)-(d)表示正常血樣的流動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析，其中白細(xì)胞已與PE(藻紅蛋白)標(biāo)記的抗CD-19單克隆抗體和FITC(異硫氰酸熒光素)標(biāo)記的抗CD-10單克隆抗體結(jié)合。
圖2(a)-(d)表示含有添加的CD10陽性細(xì)胞的正常血樣的流動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析。
圖3(a)-(d)表示患有普通急性淋巴白血病患者血樣的流動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析。
圖4(a)-(d)表示正常白樣的淋巴細(xì)胞流動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析。
圖5(a)-(d)表示AIDS患者血樣淋巴細(xì)胞的細(xì)胞計(jì)數(shù)分析。
圖6(a)-(d)表示按本發(fā)明已減少了CD4細(xì)胞的淋巴細(xì)胞的細(xì)胞計(jì)數(shù)分析。
圖7圖示當(dāng)正常細(xì)胞樣品用增加體積的減少了CD4細(xì)胞的樣品稀釋時(shí)，CD4細(xì)胞百分率的降低。
圖8圖示當(dāng)正常細(xì)胞樣品用增加體積的減少了CD4的樣品稀釋時(shí)，每立方毫米樣品體積中CD4細(xì)胞數(shù)量上的變化。
本文中采用的術(shù)語“異常對(duì)照細(xì)胞樣品”是指細(xì)胞的種群或數(shù)量或者所有或特定類型不同于正常血樣的細(xì)胞樣品；或存在著不存在于正常血樣中的異常血樣細(xì)胞。例如，全部白細(xì)胞(白血細(xì)胞或WBC)總數(shù)的正常值為4,300至10,800每立方毫米。示差白細(xì)胞計(jì)數(shù)中各種細(xì)胞類型的正常值為分節(jié)核中性白細(xì)胞(segmented neutrophil)=34-75％，帶狀核中性白細(xì)胞(band neutrophis)=0-8％，淋巴細(xì)胞=12-50％；單核細(xì)胞=3-15％。嗜曙紅細(xì)胞=0-5％和嗜堿性粒細(xì)胞=0-3％(The Merck Manual,14th Ed.R.Berkow,ed(Merck Sharp & Dohme,Rahway,New Jersey 1982),p2182)。異常血樣中，這些值有所不同。例如，(1)慢性粒細(xì)胞白血病患者的樣品中，WBC數(shù)量可升至15,000至500,000或更高(文獻(xiàn)同上，p1142)；(2)血友病者會(huì)患有輕微至嚴(yán)重的Ⅷ因子缺陷，該因子鑒別為一種抗原(文獻(xiàn)同上，p1127-1129)；和(3)普通急性淋巴母細(xì)胞白血病(CALL)患者的樣品中，細(xì)胞會(huì)含有不正常出現(xiàn)的CD10抗原，該抗原可由抗CD10單克隆抗體如J5(Coulter Corporation,Hialeah,Florida)特殊地鑒別。
術(shù)語“生理化學(xué)性質(zhì)”包括細(xì)胞的抗原特性，不論這些特性是正常存在的還是由于疾病導(dǎo)致未存在的。
本發(fā)明可由許多不同形式和與不同哺乳動(dòng)物種類有關(guān)的實(shí)施方案來實(shí)現(xiàn)。雖然本文描述的詳細(xì)實(shí)施例涉及人及與AIDS和CALL關(guān)的分析，這些實(shí)施例將被看作本發(fā)明原理的舉證，而并非旨在將本發(fā)明的范圍限定至這些特定的實(shí)施方案。再者，雖然用來鑒別細(xì)胞類型的分子結(jié)構(gòu)是人獨(dú)有的且在其它哺乳動(dòng)物中一般是沒有的，但本發(fā)明的實(shí)施不限于人對(duì)照細(xì)胞樣品和制備該樣品的方法。例如可制備用于診斷貓白血病病毒或猿猴T細(xì)胞親淋巴病毒1(STLV-1)，以及其它對(duì)照細(xì)胞樣品。
異常對(duì)照細(xì)胞通常與兩種情況之一有關(guān)。首先，特定類型細(xì)胞種群或數(shù)量的增加或降低。例如，從HIV(AIDS)感染的病人定期抽取的血樣將顯示CD4′陽性淋巴細(xì)胞隨疾病發(fā)展而降低。其次，出現(xiàn)正常血樣中未發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞。例如，普通急性淋巴母細(xì)胞白血病患者的外周血樣中出現(xiàn)CD10陽性細(xì)胞[CALL；K.A.Foon et al.,“Immunologic Classification of Leukemia and Lymphoma”,Blood 68:1-31(1986)]。通常用儀器，加上將特異的單克隆抗體與特定細(xì)胞類型其上或其中的特異分子結(jié)構(gòu)結(jié)合，完成有關(guān)各種細(xì)胞種群血樣的免疫分析。例如，通過將抗CD4單克隆抗體結(jié)合到CD4分子的抗原位點(diǎn)上，鑒別CD4陽性淋巴細(xì)胞?？梢栽趩我坏募?xì)胞上鑒別幾種不同分子結(jié)構(gòu)，以便鑒別特定的細(xì)胞類型或是與特定疾病有關(guān)的特定細(xì)胞類型?？梢詫⒋箢惖?broad class)細(xì)胞增分成更小和更具體的亞型。為了從幾大類中區(qū)分一大類細(xì)胞并從選出的大類中進(jìn)一步區(qū)分所選大類亞型，可將不同的標(biāo)記結(jié)合到不同的單克隆抗體上。例如，可以使用單獨(dú)或組合的、含有分子、酶和染料(特別是熒光染料)的放射成分作為這樣的標(biāo)記物。優(yōu)選的是熒光染料，且此染料的例子包括熒光素，異硫氰酸熒光素(FITC)，異硫氰酸四甲基若丹明(TRITC)，藻紅蛋白(PE或RD)，藻紅蛋白-得克薩其紅結(jié)合物和別藻藍(lán)蛋白等等。
降低特異細(xì)胞的數(shù)量對(duì)于對(duì)照細(xì)胞來說是重要的，通常，制備此對(duì)照細(xì)胞的方法包括采集正常的、白血球富集的、抗凝固的血樣；將其中的紅細(xì)胞(RBCs)溶胞并洗滌樣品以去除溶胞碎片或由任何其它適宜的方法，例如US4,752,863中描述的方法除去紅細(xì)胞，使用與可剝離底物諸如玻璃、陶瓷或聚合物珠，優(yōu)選磁珠結(jié)合的單克隆抗體從樣品中去除特異細(xì)胞類型；并將去除的細(xì)胞重新加至可以表示疾病發(fā)展的不同階段的特定水平。然后將樣品長(zhǎng)期保藏，例如，根據(jù)US5,059,518中描述的方法凍干樣品(其方法引入本文中作為參考)，或通過其它適合的細(xì)胞保藏技術(shù)。除了那些特異的與疾病相關(guān)的其數(shù)目已增加或降低的細(xì)胞，或已加入那些特異的與疾病有關(guān)的細(xì)胞之外，由此生產(chǎn)的對(duì)照細(xì)胞顯示正常的白血球細(xì)胞譜。
給出以下實(shí)施例是作說明之用，而不應(yīng)看作限定本發(fā)明。
HIV患者的血液中表現(xiàn)出CD4(T4)細(xì)胞的含量降低。由于CD4細(xì)胞在抵抗許多直接導(dǎo)致AIDS患者死亡的繼發(fā)性疾病中起著重要作用，進(jìn)行CD4數(shù)量測(cè)定可以指示HIV感染的程度和患者避免繼發(fā)性感染的能力。由于患者的血樣分析是絕對(duì)必要的，因此人們希望用于分析的對(duì)照細(xì)胞是非傳染性的，這樣便可將任何疾病的偶然傳播降至最低限度。實(shí)施例1制備用作AIDS對(duì)照細(xì)胞的CD4減少的正常血細(xì)胞將若干ACD(檸檬酸葡萄糖)或CPD(檸檬酸，磷酸葡萄糖)抗凝固的、白細(xì)胞富集的、正常血集合物在容器中合并，得到大量白細(xì)胞富集的血樣。用0.83％(重量比)的氯化銨溶液將樣品中的紅血球溶胞。溶胞后，用Hepes-鹽水-牛血清白蛋白溶液(HSB)將白血細(xì)胞洗滌幾次。然后將白血細(xì)胞從最終洗滌液中分離出來并置于含有作為保藏介質(zhì)的等滲10％海藻糖溶液容器中。保留部分白血細(xì)胞備用。另外，通過例如由US4,752,563描述的那些方法，以及其它方法，將抗CD4單克隆抗體如T4(Coulter Corporation,Hialeah)結(jié)合到磁珠上。將抗CD4結(jié)合的磁珠加到洗滌的白細(xì)胞樣品中并混合30分鐘。采用磁性裝置例如手持磁分離器或市售磁分離器將珠和結(jié)合于其上的細(xì)胞從容器中除去。將留在容器中的細(xì)胞離心分離，去除上層的清液并將細(xì)胞重懸浮于等滲海藻糖溶液中，最好是作為保藏介質(zhì)的等滲10％海藻糖溶液。然后將CD4減少的樣品與不同數(shù)量保留白細(xì)胞或來自其它帶已知數(shù)量CD4細(xì)胞的樣品中的正常、無白細(xì)胞紅血球混合，制備含不同數(shù)量CD4細(xì)胞的樣品。例如1級(jí)CD4細(xì)胞等體積的保留白細(xì)胞和CD4減少的白細(xì)胞混合，得到在原正常采集的血樣中有50％CD4細(xì)胞的樣品。
2級(jí)CD4細(xì)胞三個(gè)體積的保留白細(xì)胞和一個(gè)體積CD4減少的白細(xì)胞混合，得到在原采集的血樣中有25％CD4細(xì)胞的樣品。
3級(jí)CD4細(xì)胞九個(gè)體積的保留白細(xì)胞和一個(gè)體積CD4減少的白細(xì)胞混合，得到在原采集的血樣中有10％CD4細(xì)胞的樣品。
圖7和8以圖表示按所述方法制備的CD4對(duì)照細(xì)胞。圖7描述當(dāng)含正常CD4的樣品用增加量的CD4減少的血稀釋時(shí)，陽性細(xì)胞百分率的變化。圖8描述當(dāng)稀釋度增加時(shí)，每立方毫米CD4陽性細(xì)胞絕對(duì)數(shù)量的變化。
此外，采集其它的正常的ACD或CPD抗凝固的、富集白細(xì)胞血集合物，將紅血細(xì)胞溶胞且如本文前面所述的方法洗滌白細(xì)胞。采集樣品中存在的CD4細(xì)胞數(shù)量可由使用熒光標(biāo)記的T4單克隆抗體的流動(dòng)血白細(xì)胞計(jì)數(shù)法確定。然后將該采集含CD4的樣品的等分物與各種量的CD4減少的白細(xì)胞混合而制備具有不同濃度的CD4細(xì)胞的對(duì)照細(xì)胞樣品。實(shí)施例2制備添加CD10(CALLA)的對(duì)照細(xì)胞采集大量的正常ACD或PCD抗凝固的、富集白細(xì)胞的紅血細(xì)胞集合物，并用0.83％(重量比)的氯化銨溶液將紅血細(xì)胞溶胞。溶胞后，用HSB洗滌白細(xì)胞幾次。然后將白細(xì)胞從最終洗滌液分離并置于含有作為保藏介質(zhì)的等滲10％海藻糖溶液的容器中。另外使用市售CALLA陽性細(xì)胞(一種美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)的CALLA樣品)或其它來源的細(xì)胞制備培養(yǎng)的CALLA(CD10陽性，普通急性淋巴母細(xì)胞白血病抗原)陽性細(xì)胞。在這里使用的細(xì)胞來自ATCC，保藏號(hào)CRL1596。然后將培養(yǎng)的CD10+細(xì)胞以不同的量加入到各等份保藏溶液中的正常白細(xì)胞中。實(shí)施例3凍干用作非傳染疾病細(xì)胞對(duì)照的穩(wěn)定正常細(xì)胞將由實(shí)施例1和2所示描述的方法制備的對(duì)照細(xì)胞根據(jù)US5,059,518(其方法人本文作為參考)凍干。具體地，將懸浮在等滲10％海藻糖溶液中的1、2或3級(jí)CD4對(duì)照細(xì)胞或CALLA對(duì)照細(xì)胞置于300μl凍干管形瓶中，蓋上管形瓶并冷卻至4℃，然后攪拌以保證使細(xì)胞分布均勻，之后將管形瓶置于約-70℃冰箱中至少一小時(shí)。冷凍完之后，立刻將管形瓶置于凍干器中約15小時(shí)。15小時(shí)結(jié)束后將凍干的管形瓶從凍干器中移出并貯藏在溫度為2-8℃的冰箱中。此對(duì)照細(xì)胞可貯藏6個(gè)月或更長(zhǎng)。向凍干管形瓶中加入去離子水或蒸餾水至300μl體積可重配凍干細(xì)胞。為在流動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)器中進(jìn)行對(duì)照檢測(cè)，將再懸浮的重配細(xì)胞染色，或作其它方式的標(biāo)記，然后用標(biāo)準(zhǔn)流動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)方法分析。也可在其它類型的測(cè)定或其它適合的診斷方法中使用再懸浮細(xì)胞。
圖1、2和3(a)-(d)將正常細(xì)胞(圖1)與患者細(xì)胞(圖3)以及根據(jù)本發(fā)明方法制備的對(duì)照細(xì)胞(圖2)相比。這些數(shù)字表明，使用對(duì)照細(xì)胞，該檢測(cè)手段能檢測(cè)出可能存在于得病的患者血樣中的異常CD10+和CD19+細(xì)胞。
圖4、5和6(a)-(d)，表示該檢測(cè)手段能檢測(cè)出在AIDS患者中能見到的少量的CD4+細(xì)胞。圖4中四邊形1表示正常血樣中出現(xiàn)的CD4+細(xì)胞。圖5中，四邊形1表示AIDS患者中見到的減少的CD4+細(xì)胞數(shù)量。圖6中四邊形1表示該儀器能檢測(cè)由本發(fā)明減少的對(duì)照細(xì)胞表示的減少的CD4+。
圖4中的(b)、(c)、(d)分析數(shù)據(jù)分別如表Ⅰ、表Ⅱ、表Ⅲ所示表Ⅰ最小最大計(jì)數(shù)百分率平均 SD％HPCV1x 0 2 1562 44.6 0.0 0.2y 7 63 23.93.711.62x 3 63 124 3.5 24.09.010.6y 7 63 14.78.19.713x 0 2 689 19.7 0.0 0.2y 0 61.0 1.84x 3 63 1126 32.2 26.66.48.26y 0 60.8 1.6表Ⅱ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD％HPCV1 20255 1231 35.2 108.3 24.6 4.44表Ⅲ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD ％HPCV31255 1654 47.3 95.5 17.1 9.66圖5中的(a)-(d)分析數(shù)據(jù)分別如表Ⅳ-表Ⅶ所示
表Ⅳ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD ％HPCV1x1 1 0 0.0y7 72x0 0 1 0.0y0 03x13 13 3 0.0y16 164x3 3 4 0.0y16 16表Ⅴ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD％HPCV1x 0.102 2.426 -2454.90.192 0.140y 2.103 1023. 20.99 9.4424.42x 2.428 1023.2 0.05.359 0.386 12.2y 2.103 1023. 7.146 1.546 6.113x 0.102 2.426 110922.2 0.193 0.164y 0.102 2.101 0.149 0.0854x 2.428 1023. 364372.9 21.07 10.48 24.9y 0.102 2.101 0.108 0.023
表Ⅵ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD ％HPCV1x 575.8 1023. 3553 23.5 814.0 58.9y 29 57 42.8 1.8 3.742x 8.367 76.72 3872.6 20.97 8.34 30.5y 18 41 28.1 5.5 19.23x 13.66 15.75 0 0.0y 0 04x 0.102 0.118 1 0.0y 0 0表Ⅶ最小 最大計(jì)數(shù) 百分率平均 SD ％HPCV1x 0.102 2.101 -259 77.30.197 0.140y 7.679 1023. 22.39 6.7228.02x 2.103 1023. 7622.718.73 13.96 32.2y 7.679 1023. 18.73 6.0129.13x 0.102 2.101 0 0.0y 0.102 7.6724x 2.103 1023. 0.0.0y 0.102 7.672
圖6中的(b)-(d)分析數(shù)據(jù)如表Ⅷ-表Ⅹ所示表Ⅷ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD ％HPCV1x0 3 175 5.0 0.10.5y8 6324.9 7.5 3.492x4 6378 2.2 28.49 8.9 3.83y8 6312.1 6.8 7.333x0 3 115033.00.10.5y0 7 1.11.94x4 63209059.728.2 7.1 7.54y0 7 1.12.0表Ⅸ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD ％HPCV126 255213060.9115.9 26.1 5.41表Ⅹ最小 最大 計(jì)數(shù) 百分率 平均 SD ％HPCV1 34 249231 6.6 90.3 35.權(quán)利要求
1.反映患普通急性淋巴母細(xì)胞白血病的人類患者血樣中CD10陽性細(xì)胞的對(duì)照細(xì)胞，所述疾病在發(fā)作時(shí)，所述血樣中存在正常血樣中不存在的CD10陽性細(xì)胞，所述的對(duì)照細(xì)胞包含從正常血樣中獲得的正常白細(xì)胞種群，只是其中還包括不存在于正常白細(xì)胞樣品中的CD10陽性細(xì)胞。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的對(duì)照細(xì)胞，其中所述的細(xì)胞進(jìn)一步通過在等滲海藻糖溶液中凍干而保藏。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的對(duì)照細(xì)胞，其中所述細(xì)胞能通過去離子水或蒸餾水重配成用于免疫測(cè)定的生物學(xué)對(duì)照物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的對(duì)照細(xì)胞，其中所述細(xì)胞適合于替代在細(xì)胞流動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)分析中作為標(biāo)準(zhǔn)物的新鮮異常細(xì)胞。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2的對(duì)照細(xì)胞，其中所述的細(xì)胞從正常人外周血細(xì)胞中得到。
6.一種制備反映患普通急性淋巴母細(xì)胞白血病的人類患者血樣中CD10陽性細(xì)胞的保藏對(duì)照細(xì)胞的方法，所述疾病在發(fā)作時(shí)，所述血樣中存在正常血樣中不存在的CD10陽性細(xì)胞，所述的方法包括(a)去除正常血樣中的紅細(xì)胞，或者將正常血樣中的紅細(xì)胞溶胞并洗滌樣品中剩余的細(xì)胞以除去溶胞碎片；(b)將余下的細(xì)胞懸浮于保藏溶液中；(c)將不存在于正常血液中但存在于患普通急性淋巴母細(xì)胞白血病的人類患者血液中的CD10陽性細(xì)胞加到步驟(b)的細(xì)胞中；和(d)保藏步驟(c)中制備的細(xì)胞。
全文摘要
本發(fā)明描述從正常的、非傳染的、非病變的血液中,通過減少或擴(kuò)增一種或多種發(fā)現(xiàn)于正常血中反映特定疾病狀態(tài)的細(xì)胞類型,制備非傳染性對(duì)照細(xì)胞。將由此生產(chǎn)的對(duì)照細(xì)胞保藏并在此之后重配用于免疫檢測(cè)。
文檔編號(hào)G01N33/53GK1231822SQ9810138
公開日1999年10月20日 申請(qǐng)日期1998年4月16日 優(yōu)先權(quán)日1992年9月14日
發(fā)明者約翰·A·梅普爾斯, 羅伯特·H·雷納, 奧拉維·西伊曼, 梅利莎·J·施蒂格利茨, 斯蒂芬·F·希利 申請(qǐng)人:庫爾特公司