本發(fā)明屬于中藥材鑒別，特別涉及一種陳皮陳化年份鑒定方法。

背景技術(shù)：

1、陳皮（樟頭紅）為蕓香科柑橘屬植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，陳皮以廣中來(lái)者勝，質(zhì)量以廣陳皮為優(yōu)，有理氣健脾、燥濕化痰功效。

2、陳化年份是其品質(zhì)評(píng)價(jià)重要指標(biāo)，市場(chǎng)上常出現(xiàn)以次充好、以假充真等現(xiàn)象。陳皮不同年份的鑒別方法常有藥材性外表鑒別、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(gc-ms)、氣相-離子遷移譜(gc-ims)、高效液相色譜(hplc)、超高效液相色譜-四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜法(uplc-q-tof-ms)、靶向質(zhì)譜的代謝組學(xué)、近紅外光譜(nirs)、高光譜成像技術(shù)（hsi）、多光譜成像技術(shù)(msi)等。陳皮中揮發(fā)性成分不僅能客觀反映風(fēng)味特點(diǎn)，而且也是其品質(zhì)重要指標(biāo)之一。

3、目前對(duì)陳皮的品質(zhì)分析主要通過(guò)提取揮發(fā)油進(jìn)行檢測(cè)鑒定，但是，揮發(fā)油提取過(guò)程中易受外界條件影響、耗時(shí)長(zhǎng)，導(dǎo)致檢測(cè)精度較低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、基于此，本發(fā)明實(shí)施例當(dāng)中提供了一種陳皮陳化年份鑒定方法，旨在無(wú)損快捷、簡(jiǎn)單靈敏地鑒定陳皮陳化年份。

2、本發(fā)明實(shí)施例提供了一種陳皮陳化年份鑒定方法，所述方法包括：

3、將不同陳化年份的陳皮在室溫下采用電子鼻進(jìn)行檢測(cè)，得到不同陳化年份的陳皮的氣味信息，所述氣味信息用于為后續(xù)的hs-gc-ms分析提供方向；

4、將不同陳化年份的陳皮在預(yù)設(shè)條件下采用hs-gc-ms進(jìn)行檢測(cè)，得到各總離子流圖，并根據(jù)各總離子流圖，計(jì)算各組分相對(duì)百分含量；

5、將各組分相對(duì)百分含量積分，將積分結(jié)果按各峰的質(zhì)譜圖經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)質(zhì)譜定性，并篩選出匹配度大于預(yù)設(shè)值的揮發(fā)性成分；

6、將所述揮發(fā)性成分作為因變量，不同年份作為自變量，進(jìn)行無(wú)監(jiān)督pca分析以及opls-da分析，以篩選不同陳化年份陳皮的差異化揮發(fā)性成分；

7、判斷差異化揮發(fā)性成分是否與所述氣味信息一致；

8、若判斷差異化揮發(fā)性成分與所述氣味信息一致，則將所述差異化揮發(fā)性成分進(jìn)行聚類分析，并判斷聚類分析的結(jié)果是否與無(wú)監(jiān)督pca分析以及opls-da分析的結(jié)果一致；

9、若判斷聚類分析的結(jié)果與無(wú)監(jiān)督pca分析以及opls-da分析的結(jié)果一致，則計(jì)算各差異化揮發(fā)性成分的香氣活性值，并根據(jù)香氣活性值，確定差異化揮發(fā)性成分中的目標(biāo)成分；

10、根據(jù)不同陳化年份以及隨不同陳化年份變化的目標(biāo)成分的含量，建立判別模型；

11、獲取陳皮的目標(biāo)成分的含量，并輸入所述判別模型，得到陳皮的陳化年份。

12、進(jìn)一步的，所述將不同陳化年份的陳皮在室溫下采用電子鼻進(jìn)行檢測(cè)的步驟中，分別稱取不同陳化年份的陳皮樣品粉末0.5g，陳皮樣品粉末過(guò)50目篩得到，置于40?ml電子鼻樣品瓶中，靜置，使頂空瓶中充盈樣品氣體，在室溫下用電子鼻檢測(cè)，其中，清洗時(shí)間為180?s，進(jìn)氣速度為0.6?l/min，檢測(cè)時(shí)間為120s，進(jìn)樣量為10ml，平行測(cè)定3次。

13、進(jìn)一步的，所述氣味信息包括芳香族化合物類信息、氮氧化物信息、硫化物類信息、萜類信息、酯類信息、甾醇類信息、三萜類信息、脂肪烴含氧衍生物類信息、胺類信息、氫氣類信息、呋喃類信息、揮發(fā)性有機(jī)化合物信息、乙烯信息、內(nèi)酯類信息以及吡嗪類信息。

14、進(jìn)一步的，所述將不同陳化年份的陳皮在預(yù)設(shè)條件下采用hs-gc-ms進(jìn)行檢測(cè)的步驟中，分別稱取不同陳化年份的陳皮樣品粉末0.5g，陳皮樣品粉末過(guò)50目篩得到，置于20ml頂空瓶中，鋁蓋密封，平行測(cè)定3次，其中，密封后放于樣品盤中，樣品瓶加熱溫度為110℃，定量環(huán)溫度為120℃，傳輸線溫度為130℃，樣品瓶平衡時(shí)間為10?min。

15、進(jìn)一步的，所述預(yù)設(shè)值為80%。

16、進(jìn)一步的，所述計(jì)算各差異化揮發(fā)性成分的香氣活性值的步驟中，香氣活性值的計(jì)算公式為：

17、oav＝基質(zhì)中香氣物質(zhì)的濃度/該物質(zhì)在基質(zhì)中的覺(jué)察閾值；

18、其中，oav表示為香氣活性值。

19、進(jìn)一步的，所述根據(jù)香氣活性值，確定差異化揮發(fā)性成分中的目標(biāo)成分的步驟中，當(dāng)oav>1時(shí)，判定該揮發(fā)性成分對(duì)陳皮紅香氣起到修飾性作用，當(dāng)oav>10時(shí)，判定該揮發(fā)性成分是陳皮整體香氣關(guān)鍵成分，即所述目標(biāo)成分。

20、進(jìn)一步的，所述將所述揮發(fā)性成分作為因變量，不同年份作為自變量，進(jìn)行無(wú)監(jiān)督pca分析以及opls-da分析，以篩選不同陳化年份陳皮的差異化揮發(fā)性成分的步驟中，采用simca?14.1軟件進(jìn)行opls-da分析，根據(jù)spss?21.0單因素方差分析p<0.05和vip值>1，以篩選不同陳化年份陳皮的差異化揮發(fā)性成分。

21、本發(fā)明實(shí)施例當(dāng)中提供的一種陳皮陳化年份鑒定方法，該方法通過(guò)電子鼻結(jié)合hs-gc-ms技術(shù)對(duì)不同陳化年份的陳皮中揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè)，并結(jié)合主成分分析(pca)、正交偏最小二乘法-判別分析(opls-da)、聚類分析和香氣活性值(oav)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，篩選出陳皮陳化過(guò)程中的差異性成分和關(guān)鍵性香氣成分，探究其不同陳化年份間的差異性，最終確定目標(biāo)成分，隨后根據(jù)不同陳化年份以及隨不同陳化年份變化的目標(biāo)成分的含量，建立判別模型；獲取陳皮的目標(biāo)成分的含量，并輸入判別模型，得到陳皮的陳化年份，實(shí)現(xiàn)了陳皮陳化年份的無(wú)損、快速、精確鑒定。

技術(shù)特征：

1.一種陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述將不同陳化年份的陳皮在室溫下采用電子鼻進(jìn)行檢測(cè)的步驟中，分別稱取不同陳化年份的陳皮樣品粉末0.5g，陳皮樣品粉末過(guò)50目篩得到，置于40?ml電子鼻樣品瓶中，靜置，使頂空瓶中充盈樣品氣體，在室溫下用電子鼻檢測(cè)，其中，清洗時(shí)間為180?s，進(jìn)氣速度為0.6?l/min，檢測(cè)時(shí)間為120s，進(jìn)樣量為10ml，平行測(cè)定3次。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述氣味信息包括芳香族化合物類信息、氮氧化物信息、硫化物類信息、萜類信息、酯類信息、甾醇類信息、三萜類信息、脂肪烴含氧衍生物類信息、胺類信息、氫氣類信息、呋喃類信息、揮發(fā)性有機(jī)化合物信息、乙烯信息、內(nèi)酯類信息以及吡嗪類信息。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述將不同陳化年份的陳皮在預(yù)設(shè)條件下采用hs-gc-ms進(jìn)行檢測(cè)的步驟中，分別稱取不同陳化年份的陳皮樣品粉末0.5g，陳皮樣品粉末過(guò)50目篩得到，置于20?ml頂空瓶中，鋁蓋密封，平行測(cè)定3次，其中，密封后放于樣品盤中，樣品瓶加熱溫度為110℃，定量環(huán)溫度為120℃，傳輸線溫度為130℃，樣品瓶平衡時(shí)間為10?min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述預(yù)設(shè)值為80%。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述計(jì)算各差異化揮發(fā)性成分的香氣活性值的步驟中，香氣活性值的計(jì)算公式為：

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述根據(jù)香氣活性值，確定差異化揮發(fā)性成分中的目標(biāo)成分的步驟中，當(dāng)oav>1時(shí)，判定該揮發(fā)性成分對(duì)陳皮紅香氣起到修飾性作用，當(dāng)oav>10時(shí)，判定該揮發(fā)性成分是陳皮整體香氣關(guān)鍵成分，即所述目標(biāo)成分。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的陳皮陳化年份鑒定方法，其特征在于，所述將所述揮發(fā)性成分作為因變量，不同年份作為自變量，進(jìn)行無(wú)監(jiān)督pca分析以及opls-da分析，以篩選不同陳化年份陳皮的差異化揮發(fā)性成分的步驟中，采用simca?14.1軟件進(jìn)行opls-da分析，根據(jù)spss21.0單因素方差分析p<0.05和vip值>1，以篩選不同陳化年份陳皮的差異化揮發(fā)性成分。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種陳皮陳化年份鑒定方法，該方法通過(guò)電子鼻結(jié)合HS?GC?MS技術(shù)對(duì)不同陳化年份的陳皮中揮發(fā)性成分進(jìn)行檢測(cè)，并結(jié)合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法?判別分析(OPLS?DA)、聚類分析和香氣活性值(OAV)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，篩選出陳皮陳化過(guò)程中的差異性成分和關(guān)鍵性香氣成分，探究其不同陳化年份間的差異性，最終確定目標(biāo)成分，隨后根據(jù)不同陳化年份以及隨不同陳化年份變化的目標(biāo)成分的含量，建立判別模型；獲取陳皮的目標(biāo)成分的含量，并輸入判別模型，得到陳皮的陳化年份，實(shí)現(xiàn)了陳皮陳化年份的無(wú)損、快速、精確鑒定。

技術(shù)研發(fā)人員：孟曉偉,杜玲玲,秦倩,鐘凌云,朱衛(wèi)豐,劉榮華,張壽文,肖勇,謝璐欣,鄒海勇
受保護(hù)的技術(shù)使用者：江西中醫(yī)藥大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19