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一種用于免疫印跡的自動(dòng)檢測器的制作方法

文檔序號:12842960閱讀:252來源:國知局
一種用于免疫印跡的自動(dòng)檢測器的制作方法與工藝

本實(shí)用新型屬于蛋白質(zhì)分析領(lǐng)域,更具體地,涉及一種用于免疫印跡的自動(dòng)檢測器。



背景技術(shù):

免疫印跡(Western Blot)技術(shù)是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上,然后利用抗體進(jìn)行檢測的技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測,可以同時(shí)比較多個(gè)樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。由于免疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。

為了實(shí)現(xiàn)高效率的自動(dòng)化分析,各種各樣的免疫印跡分析儀應(yīng)需而生(專利文獻(xiàn)CN103616526A)。然而,上述免疫印跡分析儀通常利用多個(gè)試劑瓶或反應(yīng)槽進(jìn)行多個(gè)待測樣本的平行檢測,同時(shí)利用搖床將試劑瓶進(jìn)行振蕩,以加快反應(yīng)速度。因此使用該薄膜具有以下缺點(diǎn):1、由于集成了用于振蕩試劑瓶的搖床和電機(jī),使得整個(gè)分析儀結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜,進(jìn)而提高了制造成本;2、不同試劑瓶的反應(yīng)條件略有差異,從而影響免疫印跡的準(zhǔn)確性;3、薄膜需要從試劑瓶中取出后進(jìn)行干燥才可進(jìn)行檢測,從而無法實(shí)現(xiàn)原位檢測,導(dǎo)致了存在著反應(yīng)不足或反應(yīng)過度的情況,造成了檢測誤差。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

針對現(xiàn)有技術(shù)的以上缺陷或改進(jìn)需求,本實(shí)用新型提供了一種用于免疫印跡的自動(dòng)檢測器,其目的在于簡化自動(dòng)檢測裝置的結(jié)構(gòu)、同時(shí)實(shí)現(xiàn)原位檢測。

為實(shí)現(xiàn)上述目的,按照本實(shí)用新型的一個(gè)方面,提供了一種用于免疫印跡的自動(dòng)檢測器,包括底座、免疫印跡薄膜、加液裝置以及廢液收集裝置;

所述免疫印跡薄膜設(shè)置于底座上方,所述免疫印跡薄膜表面具有以疏水區(qū)域間隔的多個(gè)平行的條狀親水區(qū)域,所述條狀親水區(qū)域具有一個(gè)或多個(gè)結(jié)合區(qū),所述加液裝置具有與條狀親水區(qū)域一一對應(yīng)的多個(gè)加液通道,所述加液通道的出水口與對應(yīng)的條狀親水區(qū)域相對設(shè)置,所述條狀親水區(qū)域的一端連接廢液收集裝置的進(jìn)水口;

其中,所述結(jié)合區(qū)上具有目標(biāo)抗原,用于與待測溶液中的目標(biāo)抗體結(jié)合;每個(gè)所述條狀親水區(qū)域分別用于結(jié)合不同的待測溶液,從而獨(dú)立地進(jìn)行不同的待測溶液中的目標(biāo)抗體的免疫印跡檢測;所述加液裝置用于向條狀親水區(qū)域添加反應(yīng)液,所述廢液收集裝置用于收集多余的反應(yīng)液;所述反應(yīng)液包括待測溶液、緩沖液、二抗溶液或顯色溶液。

優(yōu)選地,所述加液通道的出水口與對應(yīng)的條狀親水區(qū)域的距離為0.1mm~2mm。

優(yōu)選地,所述自動(dòng)檢測器還包括干燥裝置。

作為進(jìn)一步優(yōu)選地,所述干燥裝置為風(fēng)扇或抽風(fēng)機(jī),其風(fēng)量為2m3/min~5m3/min。

優(yōu)選地,所述加液裝置包括加液管以及加液泵,所述加液管以及加液泵相連通,形成與條狀親水區(qū)域一一對應(yīng)的多個(gè)加液通道,所述加液泵的進(jìn)水口作為所述加液裝置的進(jìn)水口,所述加液管的出水口作為所述加液裝置的出水口。

優(yōu)選地,所述自動(dòng)檢測器還包括操縱桿,所述加液裝置固定于所述操縱桿上,所述操縱桿用于移動(dòng)加液裝置,使所述加液通道的出水口沿條狀親水區(qū)域往復(fù)運(yùn)動(dòng),以促進(jìn)反應(yīng)液與條狀親水區(qū)域的相對運(yùn)動(dòng)。

作為進(jìn)一步優(yōu)選地,所述自動(dòng)檢測器還包括設(shè)置于免疫印跡薄膜兩側(cè)的直線電機(jī),所述直線電機(jī)的控制端連接操縱桿。

作為更進(jìn)一步優(yōu)選地,所述自動(dòng)檢測器的兩側(cè)具有與條狀親水區(qū)域平行的滑軌。

優(yōu)選地,所述廢液收集裝置包括集液管以及真空泵;所述集液管的進(jìn)水口作為所述廢液收集裝置的進(jìn)水口,出水口連接真空泵,所述集液管用于收集多余的反應(yīng)液,所述真空泵用于將反應(yīng)液泵出。

優(yōu)選地,所述廢液收集裝置包括倒L型引流槽以及集液池;所述倒L型引流槽的進(jìn)水口作為所述廢液收集裝置的進(jìn)水口,出水口設(shè)置于進(jìn)水口的下方,所述集液池設(shè)置于所述倒L型引流槽的出水口的下方,所述倒L型引流槽用于將多余的反應(yīng)液引出,所述集液池用于收集多余的反應(yīng)液。

優(yōu)選地,所述自動(dòng)檢測器包括信號分析裝置,所述信號分析裝置設(shè)置于所述免疫印跡薄膜上方,所述信號分析裝置用于獲取免疫印跡的檢測信號。

作為進(jìn)一步優(yōu)選地,所述信號分析裝置包括光源以及圖像傳感器;所述光源用于向免疫印跡薄膜方向發(fā)出可見光或激光,在免疫印跡薄膜表面形成免疫印跡的檢測信號,所述圖像傳感器用于獲取免疫印跡的檢測信號。

作為更進(jìn)一步優(yōu)選地,所述信號分析裝置還包括數(shù)據(jù)處理器,所述圖像傳感器的輸出端連接所述數(shù)據(jù)處理器的輸入端,所述數(shù)據(jù)處理器用于根據(jù)所述圖像檢測信號,獲得免疫印跡的檢測結(jié)果。

作為進(jìn)一步優(yōu)選地,所述自動(dòng)檢測器還包括警報(bào)裝置,所述信號分析裝置的輸出端連接所述警報(bào)裝置的輸入端,所述警報(bào)裝置用于根據(jù)所述檢測結(jié)果,獲取免疫印跡的結(jié)束警報(bào)或失敗警報(bào)。

優(yōu)選地,所述自動(dòng)檢測器還包括對照液,所述對照液用于通過任意一條加液通道,添加至該加液通道對應(yīng)的條狀親水區(qū)域,并與該條狀親水區(qū)域的結(jié)合區(qū)上的目標(biāo)抗原結(jié)合,以指示免疫印跡的反應(yīng)結(jié)束或反應(yīng)失敗。

總體而言,通過本實(shí)用新型所構(gòu)思的以上技術(shù)方案與現(xiàn)有技術(shù)相比,由于在同一張免疫印跡薄膜上集成多個(gè)條狀親水區(qū)域,能夠取得下列有益效果:

1、免疫印跡薄膜具有以疏水區(qū)域間隔的多個(gè)平行的條狀親水區(qū)域,通過條狀親水區(qū)域的吸附力以及水本身具有的表面張力與待測溶液中的目標(biāo)抗體結(jié)合,通過疏水區(qū)域的隔離防止反應(yīng)液漏出,僅需要毫升級以下的反應(yīng)液即可完成免疫印跡檢測,從而更加節(jié)省試劑,適用于痕量檢測;

2、多種待測溶液中的不同目標(biāo)抗體可結(jié)合于同一張免疫印跡薄膜的不同條狀親水區(qū)域的結(jié)合區(qū)上,從而更適于在完全相同的條件下進(jìn)行反應(yīng),易于進(jìn)行平行對照,提高了檢測的準(zhǔn)確率;同時(shí)簡化了自動(dòng)檢測器的結(jié)構(gòu),降低了生產(chǎn)成本;

3、操縱桿可用于移動(dòng)加液裝置,使所述加液通道的出水口沿條狀親水區(qū)域往復(fù)運(yùn)動(dòng),以促進(jìn)反應(yīng)液與條狀親水區(qū)域的相對運(yùn)動(dòng),從而提高反應(yīng)效率,節(jié)省了免疫印跡檢測的時(shí)間;

4、由于僅需要毫升級以下的反應(yīng)液,通過廢液收集裝置的簡單抽吸即可實(shí)現(xiàn)初步干燥,或僅需集成簡單的干燥裝置就能快速干燥免疫印跡薄膜,更易于進(jìn)行原位檢測,且進(jìn)一步節(jié)省了反應(yīng)時(shí)間;

5、該自動(dòng)檢測器還集成了信號分析裝置,無需移動(dòng)免疫印跡薄膜即可獲得免疫印跡的檢測信號,簡化了操作;

6、通過警報(bào)裝置可以通過免疫印跡的檢測信號,直接獲得免疫印跡的反應(yīng)結(jié)束警報(bào)或反應(yīng)失敗警報(bào),避免了人為觀察的誤差,同時(shí),由于警報(bào)裝置能自動(dòng)提示反應(yīng)結(jié)束,避免了過度反應(yīng)而造成的檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。

附圖說明

圖1是本實(shí)用新型自動(dòng)檢測器中的免疫印跡薄膜俯視圖;

圖2是本實(shí)用新型自動(dòng)檢測器側(cè)面剖視圖;

圖3是本實(shí)用新型自動(dòng)檢測器正視圖;

在所有附圖中,相同的附圖標(biāo)記用來表示相同的元件或結(jié)構(gòu),其中:1-免疫印跡薄膜,11-疏水區(qū)域,12-條狀親水區(qū)域,13-結(jié)合區(qū),2-加液裝置,3-底座,4-信號分析裝置,5-操縱桿,6-直線電機(jī),71-倒L型引流槽,72-集液池。

具體實(shí)施方式

為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,以下結(jié)合附圖及實(shí)施例,對本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解,此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本實(shí)用新型,并不用于限定本實(shí)用新型。此外,下面所描述的本實(shí)用新型各個(gè)實(shí)施方式中所涉及到的技術(shù)特征只要彼此之間未構(gòu)成沖突就可以相互組合。

本實(shí)用新型提供了一種用于免疫印跡的自動(dòng)檢測器,包括底座3、免疫印跡薄膜1、加液裝置2以及廢液收集裝置等;

所述免疫印跡薄膜1設(shè)置于底座3上方,所述免疫印跡薄膜1表面具有以疏水區(qū)域11間隔的多個(gè)平行的條狀親水區(qū)域12,每個(gè)條狀親水區(qū)域12具有一個(gè)或多個(gè)結(jié)合區(qū)13,所述結(jié)合區(qū)13上具有目標(biāo)抗原,用于與待測溶液中的目標(biāo)抗體結(jié)合,如圖1所示,每個(gè)所述條狀親水區(qū)域12分別用于結(jié)合不同的待測溶液,從而獨(dú)立地進(jìn)行不同的待測溶液中的目標(biāo)抗體的免疫印跡檢測;

所述加液裝置2具有與條狀親水區(qū)域12一一對應(yīng)的多個(gè)加液通道,所述加液通道的出水口與對應(yīng)的條狀親水區(qū)域12相對設(shè)置,距離為0.1mm~2mm,用于向條狀親水區(qū)域12添加反應(yīng)液,所述條狀親水區(qū)域12的一端連接廢液收集裝置的進(jìn)水口,所述廢液收集裝置用于收集多余的反應(yīng)液,所述反應(yīng)液包括待測溶液、緩沖液、二抗溶液或顯色溶液;

加液裝置2可以使用單獨(dú)的一次性加液管,加液管的進(jìn)水口位于上方,出水口位于下方,從上方的進(jìn)水口,即可向與出水口相對的條狀親水區(qū)域12添加反應(yīng)液;加液裝置2也可以由加液管以及加液泵組成,所述加液管以及加液泵相連通,形成與條狀親水區(qū)域12一一對應(yīng)的多個(gè)加液通道,所述加液泵的進(jìn)水口作為所述加液裝置2的進(jìn)水口,所述加液管的出水口作為所述加液裝置2的出水口,加液泵可以使用注射泵,也可以使用蠕動(dòng)泵,流量型蠕動(dòng)泵由于可以一次向多個(gè)加液管輸入反應(yīng)液,且流量最小為1μL/min,比較節(jié)省反應(yīng)液,而最大可達(dá)1000mL/min,可用于利用緩沖液沖洗條狀條狀親水區(qū)域12,從而尤其適用于本實(shí)用新型。

廢液收集裝置可以包括集液管以及真空泵;所述集液管的進(jìn)水口作為所述廢液收集裝置的進(jìn)水口,出水口連接真空泵,所述集液管用于收集多余的反應(yīng)液,所述真空泵用于將反應(yīng)液泵出,這種情況下,由于反應(yīng)液的高度僅為0.1mm~1mm,多余的反應(yīng)液可以幾乎完全泵走;

所述廢液收集裝置也可以包括倒L型引流槽71以及集液池72,如圖2所示;所述倒L型引流槽71的進(jìn)水口作為所述廢液收集裝置的進(jìn)水口,出水口設(shè)置于進(jìn)水口的下方,所述集液池72設(shè)置于所述倒L型引流槽71的出水口的下方,所述倒L型引流槽71用于將多余的反應(yīng)液引出,所述集液池72用于收集多余的反應(yīng)液;用這種方法的話,反應(yīng)液很難完全被引入集液池72,一般需要另外設(shè)置干燥裝置輔助干燥免疫印跡薄膜1;干燥裝置可使用風(fēng)扇或抽風(fēng)機(jī),設(shè)置于免疫印跡薄膜1的上方,風(fēng)量設(shè)置為2m3/min~5m3/min,在均勻干燥免疫印跡薄膜1的同時(shí),避免免疫印跡薄膜1上的抗原或抗體變性。

為了促進(jìn)反應(yīng)液與條狀親水區(qū)域12的相對運(yùn)動(dòng),可以移動(dòng)加液裝置2,使所述加液通道的出水口沿條狀親水區(qū)域12往復(fù)運(yùn)動(dòng),可以設(shè)置一操縱桿5,用于固定加液裝置2(為了簡化說明,圖3中僅示出了一個(gè)加液裝置2的一個(gè)加液通道,實(shí)際每個(gè)條狀親水區(qū)域12都具有對應(yīng)的加液通道),并移動(dòng)加液裝置2使所述加液通道的出水口沿條狀親水區(qū)域12往復(fù)運(yùn)動(dòng);在自動(dòng)檢測器的兩側(cè),還可以分別設(shè)置直線電機(jī)6,如圖3所示,直線電機(jī)6的控制端連接操縱桿5,直線電機(jī)6的速度一般設(shè)置為15cm/s以下,兩側(cè)的直線電機(jī)6同步;在操縱桿5移動(dòng)加液裝置2運(yùn)動(dòng)的同時(shí),仍可以將待測溶液通過加液管緩慢添加于條狀親水區(qū)域12表面,以防液體蒸發(fā),以保持條狀親水區(qū)域12上的液面高度為0.1mm~1mm。

由于該自動(dòng)檢測器能實(shí)現(xiàn)原位反應(yīng)與干燥,因此,也可直接在免疫印跡薄膜1上方設(shè)置信號分析裝置4,用于獲取免疫印跡的檢測信號;通常該信號分析裝置4包括光源以及圖像傳感器;所述光源用于向免疫印跡薄膜1方向發(fā)出可見光或激光(根據(jù)二抗溶液的標(biāo)記選擇光源的種類),在免疫印跡薄膜1表面形成免疫印跡的檢測信號,所述圖像傳感器可以使用照相機(jī),用于獲取免疫印跡的檢測信號;無論是可見光或激光,光源需要光線均勻,以可見光為例,光源可以選取LED燈管,燈管的形狀優(yōu)選為長形,其與條狀親水區(qū)域12的方向垂直,但與免疫印跡薄膜1平行,可以保證投射到每個(gè)條狀親水區(qū)域12同一位置的光線均勻,以免出現(xiàn)對比誤差;圖像傳感器獲取的檢測信號的圖像可以直接輸入數(shù)據(jù)處理器,數(shù)據(jù)處理器中儲存了一些標(biāo)準(zhǔn)樣本的檢測信號,通過將待測溶液的檢測信號與標(biāo)準(zhǔn)樣本的檢測信號進(jìn)行比對,可獲得待測溶液中目標(biāo)蛋白的種類、濃度等檢測結(jié)果。

在免疫印跡薄膜1上,可以設(shè)置對照區(qū),或者將其中一個(gè)條狀親水區(qū)域12對應(yīng)的加液裝置2中加入對照液,用于指示免疫印跡的反應(yīng)結(jié)束或者反應(yīng)失??;此時(shí),可另外設(shè)置一警報(bào)裝置,其輸入端連接信號分析裝置4的輸出端,通過對照區(qū)或加入對照液的條狀親水區(qū)域12的檢測結(jié)果,直接獲得免疫印跡的反應(yīng)結(jié)束警報(bào)或反應(yīng)失敗警報(bào),避免了人為觀察的誤差,同時(shí),由于警報(bào)裝置能自動(dòng)提示反應(yīng)結(jié)束,避免了過度反應(yīng)而造成的檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。

本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解,以上所述僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施方式而已,并不用以限制本實(shí)用新型,凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。

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