專利名稱：用于活化和/或穩(wěn)定化微生物的組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明屬于生產(chǎn)發(fā)酵制品的領域。更特別地，本發(fā)明涉及經(jīng)改進的用于制造乳制品的組合物，特別是經(jīng)改進的批量(bulk)發(fā)酵劑(starter)接種組合物和經(jīng)改進的批量發(fā)酵劑。
背景技術：
微生物涉及許多食物和飼料制品的生產(chǎn)，所述食物和飼料制品包括經(jīng)發(fā)酵的乳制品如奶酪、酸奶、酸奶油、酸奶酒(kefir)、黃油和酸馬奶酒(koumiss)。選擇用于起始和進行上述制品生產(chǎn)中想要的關鍵性發(fā)酵的菌株通常被稱作發(fā)酵劑培養(yǎng)物(starter culture)。特別地，乳酸細菌的培養(yǎng)物被廣泛地用作發(fā)酵劑培養(yǎng)物。食品工業(yè)中普遍使用的乳酸細菌可以被分為嗜溫乳酸細菌(包括Lactococcus、 Leuconostoc禾口 Pediococcus屬)以及嗜熱乳酸細菌(包括Streptococcus禾口 Lactobacillus屬)。嗜溫乳酸細菌具有約30°C的最適生長溫度，嗜熱乳酸細菌具有約40°C 到約45°C的最適生長溫度。發(fā)酵劑培養(yǎng)物通?？梢砸詢龈?、冷凍或液體形式得自制造商。它們可僅包含單一的乳酸細菌物種，但是也可以是包含兩種或更多不同乳酸細菌物種的混合培養(yǎng)物。混合的發(fā)酵劑培養(yǎng)物通常被用于使得噬菌體感染的負面后果最小化。發(fā)酵劑培養(yǎng)物可以直接接種進奶中，而務須中間產(chǎn)物轉移和/或繁殖 (propagation)。此類發(fā)酵劑培養(yǎng)物一般被稱作直投式(direct vat set，DVS或direct to vat inoculation，DVI)培養(yǎng)物。盡管能夠獲得DVS和DVI培養(yǎng)物，但是牛奶店生產(chǎn)內部批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物并不罕見。批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物如下制造用小量發(fā)酵劑培養(yǎng)物接種生長培養(yǎng)基，之后在允許細菌繁殖的條件下將生長培養(yǎng)基孵育足夠提供想要的細胞數(shù)量和活性的時間。然后使用獲得的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物接種奶，以制造乳制品。酸度是乳酪和其他乳制品制造中主要的控制因素之一，其通過對奶添加乳酸細菌發(fā)酵劑培養(yǎng)物而產(chǎn)生。酸的生產(chǎn)是這些發(fā)酵劑細菌的主要功能。細菌將奶中存在的乳糖發(fā)酵，以生產(chǎn)乳酸。奶和發(fā)酵劑培養(yǎng)物不能以足夠的速率產(chǎn)生酸度可導致允許有害的或不想要的微生物生長。這還可導致乳酪中的風味污染、高含水量和脆弱的凝乳。另外，酸的產(chǎn)生有助于乳酪中的蛋白酶解和風味生產(chǎn)，并且影響乳酪的流變學特性。過快地生產(chǎn)過多的酸度可導致具有較差本體和質地的乳酪。因此，正確地產(chǎn)生受控的酸度對乳酪的良好制造以及抑制有害微生物和酸敗微生物的增殖是關鍵性的。已觀察到發(fā)酵劑培養(yǎng)物在收集、包裝和儲存期間遭受應激(即便是短時間的應激)時具有降低的存活力并因此迅速喪失其代謝活性，例如它們的酸化活性。應激可例如由低溫存儲導致(冷應激)。已知發(fā)酵劑培養(yǎng)物的存活力可通過例如添加防凍劑而被保護 (見例如 US 3，897，307 和 EP 0259 739)。WO 2006/067136描述了包含20%到80% (干物質)刺激劑和8(^丨％到酵劑培養(yǎng)物的發(fā)酵劑培養(yǎng)物組合物，優(yōu)選地所述刺激劑是酵母提取物或蛋白質水解產(chǎn)物。 發(fā)酵劑培養(yǎng)物組合物可還包含培養(yǎng)物生長因子，優(yōu)選地所述生長因子是礦物質或維生素。組合物也可以包含穩(wěn)定劑和/或緩沖劑?？紤]到發(fā)酵劑培養(yǎng)物性能的重要性，尤其是與它們代謝活性有關的表現(xiàn)的重要性，本領域持續(xù)需要提供具有經(jīng)改進的儲存穩(wěn)定性的發(fā)酵劑培養(yǎng)物。本發(fā)明致力于這一需要。


圖1 在-70°C冰箱中的冷卻/冷凍過程研究中，在含32%甘油的組合物或根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的培養(yǎng)物濃縮物的溫度比時間的圖。較低的線是在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的培養(yǎng)物濃縮物，較高的線是在包含32%甘油的組合物中配制的培養(yǎng)物濃縮物。發(fā)明概述本發(fā)明人驚訝地確定酵母提取物、多糖和防凍劑的組合存在對乳制品生產(chǎn)中使用的微生物的穩(wěn)定性和/或活性具有非常積極的影響。根據(jù)本發(fā)明的組合物中的化合物增強彼此的作用，從而使組合提供下述制品，所述制品中微生物在嚴酷的冷卻過程期間和儲存后顯示良好的細胞存活力。發(fā)明詳述本發(fā)明提供了包含以下的微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物-酵母提取物，-多糖，和-防凍劑。在本文中使用時，術語“微生物”典型地是指經(jīng)發(fā)酵的乳制品的生產(chǎn)中使用的微生物，例如但不限于乳酸細菌。在本文中使用時，“乳酸細菌”是指革蘭氏陽性的、低GC含量的、 耐酸的、通常不產(chǎn)生芽孢的、不呼吸的(non-respiring)桿菌或球菌，所述桿菌或球菌通過它們共同的代謝和生理特性相關聯(lián)。它們發(fā)酵碳水化合物，產(chǎn)生酸(包括乳酸)作為主要生產(chǎn)的代謝終產(chǎn)物。它們組成異種的組，該組包括但不限于Aerococcus、CarncAacterium、 Enterococcus、Lactobacillus、Lactococcus、Leuconostoc、Oenococcus、Pediococcus、 SporolactobacilIus> Streptococcus、Tetragenococcus> Vagococcus 禾口 Weisella 的屬?；蛘撸景l(fā)明提供了下述發(fā)酵劑培養(yǎng)物活化和/或發(fā)酵劑培養(yǎng)物穩(wěn)定化組合物， 所述組合物包含-酵母提取物，-多糖，和-防凍劑。在本文中使用時，“發(fā)酵劑培養(yǎng)物”是指含有下述微生物細胞的制劑，所述微生物細胞旨在用于接種要發(fā)酵的培養(yǎng)基。在本文中使用時，“批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物”表示在乳品廠繁殖用于接種進底物(例如奶)中的發(fā)酵劑培養(yǎng)物。發(fā)酵劑培養(yǎng)物(例如批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物)可包含一種乳酸細菌菌株或若干不同的乳酸細菌菌株。除此以外，(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物可包含其他細菌菌株，包括但不限于 Bifidobacterium、Brevibacterium 禾口 Propionibacterium 屬白勺菌株。除上述細菌菌株以外，(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物中可包含其他微生物菌株，例如霉菌、真菌和/或酵母，包括但不限于 Penicillium、Geotrichum、Saccharomyces 禾口 Kluyveromyces 的屬。
乳酸細菌可以被分為嗜溫乳酸細菌和嗜熱乳酸細菌。Lactococcus、Leuconostoc 和Pediococcus是屬于嗜溫乳酸細菌的屬的例子。屬于嗜熱乳酸細菌的屬的例子是 Streptococcus 禾口 Lactobacillus。Lactococcus物種的一個例子是Lactococcus Iactis0該物種可以被進一步再分為亞禾中，包括但不限于 Lactococcus lactis cremoris、Lactococcus lactis lactis、 Lactococcus lactis lactis biovar· Diacetylactis 禾口 Lactococcus lactis hordniae0 Leuconostoc 物禾中的例子是 Leuconostoc mesenteroides cremoris 禾口 Leuconostoc paramesenteroides。Pediococcus 物禾中的例子是Pediococcus adidilacti 禾口 Pediococcus pentosaceus0 Streptococcus 的例子是 Streptococcus thermophilus 禾口 Streptococcus salivarius thermophilus。Lactobacillus 物禾中的例子是 Lactobacillus helveticus、 Lactobacillus delbruekii ssp· Bulgaricus、Lactobacillus casei 禾口 Lactobacillus acidophilus。術語“活化”是指合適培養(yǎng)基中使用的微生物的活性，其典型地指所述微生物的酸化活性或生長速率。合適的培養(yǎng)基的一個例子是奶，在這種情況下，在本文中使用的“酸化活性”表示在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的培養(yǎng)物接種時，例如與具有大致相同的細胞數(shù)但是不在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的培養(yǎng)物相比而言，奶的pH隨時間的改變(即降低)。 如果與對照組合物的PH降低(Δ pH/時間段)相比時pH降低(Δ pH/時間段)更大，則組合物被認為是微生物活化組合物。對照組合物包含相同類型的微生物，優(yōu)選地具有相同的細胞數(shù)，但是所述微生物不在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制。在對照組合物中，微生物不在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制，或者在與根據(jù)本發(fā)明的組合物不同的組合物中配制。術語“穩(wěn)定化”是指儲存對在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的微生物活性的影響。 更特定地，在根據(jù)本發(fā)明的組合物中儲存的微生物的穩(wěn)定性不改變或幾乎不改變，即在接種(在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的)微生物后，存在與未經(jīng)儲存的、剛剛配制的微生物相同或幾乎相同的活性(ΔρΗ/時間段)。在一個實施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的組合物中儲存的微生物與新鮮制備的微生物之間活性的改變是0. 50 (ΔρΗ/時間段)或更少，優(yōu)選地 0.25(ΔρΗ/時間段)或更少，更優(yōu)選地0. 10 (ΔρΗ/時間段)或更少。在一個實施方案中， 所述改變在0-0. 5，優(yōu)選地0-0. 25，更優(yōu)選地0-0. 10 (ΔρΗ/時間段)的范圍內。在另一個實施方案中，所述改變在0. 05-0. 5，優(yōu)選地0. 05-0. 25，更優(yōu)選地0. 05-0. 10 (ΔρΗ/時間段) 的范圍內。在一個優(yōu)選的實施方案中，活性沒有改變或幾乎沒有任何改變。在一個實施方案中，微生物的儲存(例如以發(fā)酵劑培養(yǎng)物的形式)進行1到12個月，例如1、2、3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、18或對個月。在一個實施方案中，在根據(jù)本發(fā)明的組合物中儲存了至少 1個月、2個月、3個月、4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月、10個月、11個月、12個月、18個月和優(yōu)選地至少M個月的微生物仍然具有新鮮制備的微生物的酸化活性的至少 80%、優(yōu)選地至少85%、更優(yōu)選地至少90%、進一步更優(yōu)選地至少95%、特別是至少97%、 更特別是至少98%和最特別是至少99%。在一個實施方案中，使用的儲存條件是從-80 到_20°C或-60到-20°C或-50到_20°C或-40到_20°C或-30到-20°C。在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物至少能夠活化微生物。還在另一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物穩(wěn)定化微生物，還在另一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物能夠活化和穩(wěn)定化微生物(例如以發(fā)酵劑培養(yǎng)物的形式)。
根據(jù)本發(fā)明的組合物中使用的酵母提取物可以得自所有種類的不同酵母物種。優(yōu)選地使用 Saccharomyces spp.、Kluyvermomycesa spp.或 Torula spp.的酵母提取物。不受其限制，本發(fā)明的發(fā)明人相信酵母提取物通過對使用的微生物酸化活性的積極影響而發(fā)揮刺激劑的作用。更優(yōu)選地，使用Saccharomyces spp.(例如S. cerevisiae)的提取物。合適的酵母提取物的例子是液體Gistex 、Amberferm 5001 酵母提取物粉末或HiYest⑧。酵母提取物可以是液體或固體酵母提取物(即粉末)或其組合。液體酵母提取物可以是水性酵母提取物。因此，本發(fā)明提供了微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物，所述組合物包含_酵母提取物，-多糖，和-防凍劑，其中所述酵母提取物是液體酵母提取物、固體酵母提取物或其組合。在一個實施方案中，使用的酵母提取物是基本為固體的酵母提取物(即不存在液體酵母提取物)，如酵母提取物粉末。酵母提取物粉末不僅對微生物的活性具有積極影響， 而且由于其結合水的能力，也有助于水活性的降低。根據(jù)本發(fā)明的組合物的另一成分是多糖。多糖的功能是提高根據(jù)本發(fā)明的組合物的粘度。因此，本發(fā)明的組合物在低溫例如-60到-20°C的溫度下不冷凍或僅部分冷凍。合適多糖的例子是纖維素、淀粉、(阿拉伯)膠、微晶纖維素(MCC)、改性淀粉、瓜爾膠或黃原膠。另外，可以組合任何這些多糖。優(yōu)選地，使用的多糖是纖維素，例如但不限于 Solka-Floc (例如Solka-Floc 300 FCC)。代替多糖或除多糖以外，根據(jù)本發(fā)明的組合物也可包含多肽。多糖可作為液體(例如包含多糖的溶液)或固體存在于根據(jù)本發(fā)明的組合物中。根據(jù)本發(fā)明的組合物的另一成分是防凍劑。防凍劑的合適例子是多元醇如甘油、 甘露醇、山梨糖醇和聚丙二醇；糖如蔗糖、果糖、乳糖、葡萄糖和海藻糖；聚醚如聚丙二醇或聚乙二醇；蛋白質水解產(chǎn)物；氨基酸如谷氨酸單鈉或其任何組合。防凍劑可作為固體或液體(例如水性防凍劑溶液)存在于根據(jù)本發(fā)明的組合物中。本文所述本發(fā)明的發(fā)明人注意到，上述組合物減少冰晶形成。因此在較低的溫度下根據(jù)本發(fā)明的組合物中的微生物不被破壞(或破壞較少)，因此提高了微生物的存活力。另外，根據(jù)本發(fā)明的添加了微生物(例如包含根據(jù)本發(fā)明的組合物和微生物的發(fā)酵劑培養(yǎng)物組合物)的組合物在-20到-45°C下具有5分鐘或更少從3-5升袋中流出的流量(flow-out)。此類微生物(例如以發(fā)酵劑培養(yǎng)物的形式)因此可以以非常便利和迅速的方式被添加至例如乳酪桶或批量發(fā)酵劑管中。如上文所述，本發(fā)明提供了微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物，所述組合物包含_酵母提取物，-多糖，和-防凍劑。技術人員應當明白，可以對根據(jù)本發(fā)明的組合物有利地添加多種其他組分，即根據(jù)本發(fā)明的組合物典型地還包含至少一種額外的化合物。
在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物還包含鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合。 任何這些金屬(或其任何組合)的存在可通過對使用的微生物的酸化活性具有積極影響而發(fā)揮刺激劑的作用。鐵鹽可以是Fe2+(亞鐵)或Fe3+(三價鐵)鹽。通常，三價鐵鹽趨向于具有非常低的溶解度。因此，優(yōu)選地，使用的鐵鹽是亞鐵鹽。如本文所公開的，鐵鹽的合適例子是硫酸亞鐵(即Fe為Fe2+)、焦磷酸鐵(即Fe為Fe3+)、葡萄糖酸亞鐵(即Fe為Fe2+) 或檸檬酸亞鐵(即Fe為Fe2+)。如本文所示，鐵鹽的添加導致經(jīng)改進的酸化活性。然而，本發(fā)明人注意到尤其是在大規(guī)模制備后，硫酸亞鐵趨向于沉淀?？梢栽诟鶕?jù)本發(fā)明的組合物中替代性地使用葡萄糖酸亞鐵(其不具有沉淀的問題)。因此，本發(fā)明提供了微生物活化和 /或微生物穩(wěn)定化組合物，所述組合物包含-酵母提取物； -鐵(例如葡萄糖酸亞鐵)、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合，-多糖，和-防凍劑。錳可以作為硫酸錳、氯化錳或任何其他鹽來提供。在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含鐵鹽和錳鹽。所述鐵鹽可以是亞鐵鹽。鉬可以例如作為Na2MoO4. H2O被提供。 如本文在實驗部分所公開的，鉬自身以及與酵母提取物和/或鐵和錳組合在一起，提供了對酸化活性的刺激。鋅可以例如作為硫酸鋅而被提供。額外的化合物的又一個例子是消泡劑。因此本發(fā)明還提供了包含消泡劑的根據(jù)本發(fā)明的微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物。消泡劑的合適例子是硅消泡劑懸浮液，Magrabal Silicone, SAG, Basildon或其他消泡劑如Clerol，Structol和/或與植物油(例如大豆油)的混合物。當然，也可以使用合適的消泡劑的組合。額外的化合物的另一個例子是pH調節(jié)劑或pH(滴定劑)控制劑。因此本發(fā)明還提供了包含PH調節(jié)劑或pH (滴定劑)控制劑的根據(jù)本發(fā)明的微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物。優(yōu)選地，所述pH調節(jié)劑或pH(滴定劑)控制劑是用于設置pH的化合物或試劑。合適的PH調節(jié)劑是氫氧化銨溶液、氫氧化鉀溶液或氫氧化鈉溶液，以及其他。其他合適的額外化合物包括但不限于生長刺激劑或穩(wěn)定劑或其任何組合。生長刺激劑包括但不限于碳水化合物如糖、維生素、蛋白質水解產(chǎn)物、礦物質、蛋白質、肽、核苷、核堿基、氨基酸、核苷酸、嚇啉及其混合物。穩(wěn)定化試劑包括但不限于甲酸、甲酸鹽、肌苷酸鹽、肌苷、天然和/或化學抗氧化齊IJ、核苷、核堿基、氨基酸、核苷酸、表面活性劑如Tween化合物、次黃嘌呤、黃嘌呤及其混合物。根據(jù)本發(fā)明的組合物可包含至少一種、至少兩種或甚至多于兩種額外的化合物。 在一個優(yōu)選的實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含兩種額外的化合物，例如消泡劑和PH 調節(jié)劑，即本發(fā)明還提供了包含以下的微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物_酵母提取物，_ 多糖，-防凍劑，
-消泡劑，和_pH 調節(jié)劑。 任選地，根據(jù)本發(fā)明的組合物也包含鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合。本發(fā)明在一個方面中提供了如上文所述的包含以下的組合物-5_45wt%酵母提取物，-0. 5-2. 5wt% 多糖，-20_80wt%K凍劑，其中這些化合物的總百分比是100。除非另有說明，使用的百分比是重量百分比(wt%)。在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含5-45wt%，優(yōu)選10-40wt% 以及最優(yōu)選15_35襯％的酵母提取物。在又一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含 0. 5-2. 5wt%，優(yōu)選0. 7-2. Owt %以及更優(yōu)選1. 0-1. 5襯％的多糖。還在又一個實施方案中， 根據(jù)本發(fā)明的組合物包含20-80wt%，優(yōu)選30-78wt%以及更優(yōu)選50_75wt%的防凍劑。本領域技術人員明白，如果在根據(jù)本發(fā)明的組合物中使用額外的化合物，則它們的用量也包括在內，例如本發(fā)明還提供了包含以下的組合物-5_45襯％的酵母提取物，-0. I-IOwt %的鐵、猛、鉬或鋅鹽或其任何組合，-0. 5-2.多糖，-20_80wt% 的防凍劑，和-0. 05_2wt% 的消泡劑，其中這些化合物的總百分比為100。在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物還包含0. I-IOwt %，優(yōu)選0. 3-8wt%以及更優(yōu)選0. 5-5wt%的鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合。 在又一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含0. 05-2wt %，優(yōu)選0. 1-1. 5wt %以及更優(yōu)選0. 2-1襯％的消泡劑。當還使用pH調節(jié)劑時，百分比例如是-5_45襯％的酵母提取物，-0. I-IOwt %的鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合，-0. 5-2.多糖，-20-80wt %的防凍劑或多元醇或其組合，-0. 05_2wt% 的消泡劑，-0. 05-3wt % 的 pH 調節(jié)劑，其中這些化合物的總百分比是100。在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的組合物還包含0. 05-3wt %，優(yōu)選0. 1-2. 5wt %以及更優(yōu)選0. 5_2wt %的pH調節(jié)劑。實驗部分描述了合適的組合物的多個例子。一個具體的有用的例子是包含以下的組合物-液體酵母提取物(50%)22.5 wt%
-葡萄糖酸亞鐵粉末1.0 wt%
-10% Si消泡劑懸浮液0.3 wt%
-酵母提取物粉末7.0 wt%
-纖維素(Solka-Floc 300 FCC)1.2 wt%
-氫氧化鋁溶液(29%)1.0 wt%
-甘油67.0 wt%滅菌前，將根據(jù)本發(fā)明的組合物的組分混合并中和至PH 6. O士0. 1個PH單位。優(yōu)選地在添加微生物之前冷卻獲得的組合物。優(yōu)選地，添加至培養(yǎng)物濃縮物(即微生物的濃縮物)中時組合物盡可能的冷(但是高于o°c)。在攪拌下，冷卻的組合物被逐漸添加進 (例如泵入)冷的培養(yǎng)物濃縮物中。將總混合物(即包括培養(yǎng)物濃縮物的根據(jù)本發(fā)明的組合物)充分但是柔和地混合，以避免向混合物中引入空氣。隨后允許混合物靜置(age) — 段時間(優(yōu)選地約30分鐘)，使得水分平衡。最后，將混合物分散進包裝材料例如袋中，并儲存在例如-80到_20°C之間的溫度下。根據(jù)本發(fā)明的組合物(添加或不添加細胞培養(yǎng)物濃縮物)的一個優(yōu)點是其在低溫 (例如-40到-60°C )下保持為液體(或大部分為液體)。例如，按上文所述將上文實驗性描述的組合物與細胞培養(yǎng)物濃縮物混合，并隨后儲存于_45°C下。將經(jīng)配制的細胞培養(yǎng)物濃縮物轉移至-20°C并在該溫度下儲存8小時。接著，將包括所述經(jīng)配制的細胞培養(yǎng)物濃縮物的袋子定量添加進發(fā)酵劑罐中。令人驚訝的是，所述定量添加僅耗時約3到5分鐘，這相當迅速。因此，本發(fā)明還提供了包含以下物質的微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物_酵母提取物，_ 多糖，-防凍劑，所述組合物在-60到_20°C的溫度下是液體或半液體的。更優(yōu)選地，所述組合物在-60到-30，-60到-40, -50到-20, -40到-20,或-30 到_20°C的溫度下是液體。組合物當然還可包含如上文所述的一種或多種額外的組分。根 據(jù)本發(fā)明的組合物典型地被用于配制微生物，優(yōu)選地配制乳酸細菌。組合物和微生物一起添加，需要時被處理以獲得同質的混合物?？梢栽诎b材料中直接制備混合物，或者可以首先制備混合物，之后再包裝。包裝后得到的混合物典型地被儲存在低于-20，-30，-40，-50，-60或低于-70°C，例如但不限于_80°C的溫度下。通常，儲存溫度在-80到-20°C之間。優(yōu)選的儲存條件是-60到-30,-60到-40，-50到-20,-45到-20,-40 到-20，-35到-20，或-30到-20°C。這些種類的溫度同樣被用于運輸。然而，如果運輸在干冰上進行，則溫度可甚至降低至-80°C。因此，本發(fā)明另一方面提供了制備經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物的方法，所述方法包括將上文所述的組合物與培養(yǎng)物濃縮物組合，任選地混合化合物和/或包裝經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物和/或將溫度降低至-80°C或到-20°C。
組合物與培養(yǎng)物濃縮物的比例可以從1 1到6 1變化，這取決于例如細菌的類型和培養(yǎng)物濃度(例如所述培養(yǎng)物濃縮物中微生物的量)。在一個優(yōu)選的實施方案中， 本發(fā)明提供了制備經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物的方法，所述方法包括將如上文所述的組合物與培養(yǎng)物濃縮物組合，任選地混合化合物和/或包裝經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物和/或將溫度降至-60到_20°C，其中使用1到6份如上文所述的組合物和1份培養(yǎng)物濃縮物，或者換句話說，其中組合物和培養(yǎng)物濃縮物的比例是1 1到6 1。典型的比例是3 1，即3份根據(jù)本發(fā)明的組合物和1份微生物(典型地為細胞培養(yǎng)物濃縮物)。獲得的根據(jù)本發(fā)明的組合物和培養(yǎng)物濃縮物的混合物典型地包含至少Ixio7Cfu/ ml，優(yōu)選地至少lxl08cfu/ml，更優(yōu)選地至少lxl09cfu/ml，進一步更優(yōu)選地至少lX101(lCfu/ ml，還進一步更優(yōu)選地至少IxIollCfuAil，特別是至少lxl012Cfu/ml和更特別是至少 lxl013cfu/ml的存活細胞含量。優(yōu)選地，存活細胞是例如乳酸細菌的細胞。如前文所述，獲得的根據(jù)本發(fā)明的組合物和培養(yǎng)物濃縮物的混合物被(優(yōu)選無菌地)包裝在合適的袋子(層壓材料)中。獲得的根據(jù)本發(fā)明的組合物和培養(yǎng)物濃縮物的混合物優(yōu)選地在-60到-20°C的溫度下是液體。該液體特性可基于來自例如袋子的流動而被定義。在_78°C或-60到-30°C 下儲存某時間量后，袋子被轉移至_20°C。典型地，在_20°C下儲存8小時后，4-5kg的袋子在3-5分鐘內被排空。本發(fā)明因此提供了制備經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物的方法，所述方法包括將如上文所述的組合物與培養(yǎng)物濃縮物組合，任選地混合化合物和/或包裝經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物和/或將溫度降低至-60到_20°C，其中經(jīng)配制的培養(yǎng)物在-60到_20°C下是液體。其他優(yōu)選的溫度是-50、-45、-40、-35和_30°C。進一步更優(yōu)選地，本發(fā)明提供了制備經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物的方法，所述方法包括將如上文所述的組合物與培養(yǎng)物濃縮物組合，任選地混合化合物和/或包裝經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物和/或將溫度降低至-80到-20°C，其中所述培養(yǎng)物濃縮物包含乳酸細菌。乳酸細菌的合適的例子已在前文中描述。本發(fā)明還提供了通過制備經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物的方法獲得的經(jīng)配制的微生物， 所述方法包括將如上文所述的組合物與培養(yǎng)物濃縮物組合，任選地混合化合物和/或包裝經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物和/或將溫度降低至-80到-20°C。此類微生物的特征是良好的活化和/或良好的穩(wěn)定性和/或良好的流動能力。換句話說，本發(fā)明提供了包含上文所述組合物和(發(fā)酵劑)培養(yǎng)物濃縮物的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物。本發(fā)明還提供了經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物，其包含-2. 5-39wt %的酵母提取物，-0. 25-2.多糖，-10_70wt% 的防凍劑，和-15_70wt%的培養(yǎng)物濃縮物，其中這些化合物的總百分比是100。在一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物包含2. 5_39wt%，優(yōu)選地5-35wt%以及更優(yōu)選地10-30襯％的酵母提取物。在又一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物包含0. 25-2. 2wt%，優(yōu)選地0. 4-2wt%以及更優(yōu)選地0. 5-1. 5wt%的多糖。還在又一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物包含10-70wt%，優(yōu)選地20-65wt%和更優(yōu)選地30-60wt%的防凍劑。還在又一個實施方案中，根據(jù)本發(fā)明的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物包含15-70wt%，優(yōu)選地20-65wt%和更優(yōu)選地25_60wt%。本文提到的范圍取決于用于混合根據(jù)本發(fā)明的組合物比使用的培養(yǎng)物濃縮物用量的比例當根據(jù)本發(fā)明的組合物還包含鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合時，其最終用量是0. 05-8. 5wt %，優(yōu)選地0. l-6wt %和更優(yōu)選地0. 2-4wt %。根據(jù)本發(fā)明的組合物還包含消泡劑時，經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物中消泡劑的總量典型地為0. 025-1. Swt%，優(yōu)選地為 0. 03-1. 4wt%和更優(yōu)選地為0. 05-lwt%。對于任選的pH調節(jié)劑而言，最終用量典型地為 0. 025-2. 6wt%，優(yōu)選地為 0. 1-1. 5wt%和更優(yōu)選地為 0. 3_lwt%。獲得的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物典型地在-60到-20°C、例如-60和_30°C下是液體。結果，此類經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物可以被非常迅速地添加至例如乳酪桶或批量發(fā)酵劑管中。如本文實驗部分中更詳細描述的，本文公開的組合物能夠活化和/或穩(wěn)定化微生物，所述組合物即包含以下的組合物_酵母提取物，-多糖，和-防凍劑。組合物可包含上文所述的一種或多種額外的成分。因此，本發(fā)明還提供了包含以下的組合物用于活化和/或穩(wěn)定化微生物的用途_酵母提取物，-多糖，和-防凍劑。或者，本發(fā)明提供了用于活化和/或穩(wěn)定化微生物的方法，所述方法包括對所述微生物添加包含以下的組合物_酵母提取物，-多糖，和-防凍劑。優(yōu)選地，所述微生物是乳酸細菌。乳酸細菌的合適例子已在本文中描述。進一步更優(yōu)選地，所述微生物是發(fā)酵劑培養(yǎng)物。使用的微生物可以是嗜熱乳酸細菌或嗜溫乳酸細菌。然而，也可以組合不同的微生物，例如2或3種不同的嗜熱乳酸細菌可以被配制在一個袋子中。嗜溫乳酸細菌典型地保持分離，即一個袋子包含嗜溫乳酸細菌，另一個袋子包含不同的嗜溫乳酸細菌。經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物可以作為發(fā)酵劑培養(yǎng)物被直接用于合適的底物(例如奶) 中，用于生產(chǎn)經(jīng)發(fā)酵的乳制品而不經(jīng)過中間轉移和/或繁殖。此類培養(yǎng)物一般被稱作直投式(DVS或DVI)培養(yǎng)物。然而，牛奶店生產(chǎn)內部批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物并不罕見。批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物如下制造用小量發(fā)酵劑培養(yǎng)物接種生長培養(yǎng)基，之后在允許細菌繁殖的條件下將生長培養(yǎng)基孵育足夠提供想要的細胞數(shù)量和活性的時間段。然后使用獲得的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物接種合適的底物(例如奶)，以制造經(jīng)發(fā)酵的乳制品(例如乳酪)。還在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了制備批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物的方法，所述方法包括對合適的培養(yǎng)基添加經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物，并將培養(yǎng)物繁殖至想要的密度。制備的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物可以是包含嗜溫和/或嗜熱乳酸細菌的混合的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物?？梢匀缦轮圃旎旌系呐囵B(yǎng)物向批量發(fā)酵劑罐或管中引入若干袋子，每個袋子包含不同的菌株，或者向批量發(fā)酵劑罐或管中引入包含不同乳酸細菌菌株的一個袋子。例如，可以通過向批量發(fā)酵劑罐或管中引入包含Lactococcus lactis subsp. cremoris菌株的袋子的內容物和包含Lactococcus lactis subsp. Iactis菌株的袋子的內容物，來制造混合的批量發(fā)酵劑。任選地，也可以向批量發(fā)酵劑罐或管中引入包含Str印tococcus salivarius thermophilus菌株的袋子的內容物。在有助于微生物發(fā)酵劑生物生長的溫度下進行一段時間的孵育，直至批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物達到想要的細胞濃度和活性?？梢酝ㄟ^冷卻至例如低于10°c，來減緩孵育。在引入步驟中，用根據(jù)本發(fā)明的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物接種生長培養(yǎng)基，在孵育步驟中，所述經(jīng)配制的培養(yǎng)基濃縮物中的微生物在生長培養(yǎng)基中生長/繁殖。換句話說，在引入步驟中，生產(chǎn)了經(jīng)接種的培養(yǎng)基，在接種步驟中，經(jīng)接種的培養(yǎng)基被熟化，以生產(chǎn)批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物。在一個實施方案中，將生長培養(yǎng)基孵育少于10小時，優(yōu)選地少于9小時，更優(yōu)選地少于8小時，特別是少于7小時。優(yōu)選地，孵育時間在1和10小時之間，更優(yōu)選地在2和9 小時之間，進一步更優(yōu)選地在3和8小時之間，最優(yōu)選地在4和7小時之間。任選地，在孵育步驟之后，可以從生長培養(yǎng)基中回收/收集/分離/隔離獲得的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物中的細胞。從生長培養(yǎng)基中回收/收集/分離/隔離微生物細胞的方法是本領域技術人員公知的，并且包括離心、(超)過濾或其組合以及其他。通過離心和/或 (超)過濾回收/收集/分離/隔離細胞后，可以將其包裝用于隨后的使用或儲存。也可以將獲得的混合批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物中的細胞分成小份試樣，用于隨后使用或或儲存，而不經(jīng)過先前的回收/收集/分離/隔離。生長培養(yǎng)基可以是適合要繁殖的菌株的任何生長培養(yǎng)基。其可以是合成的生長培養(yǎng)基(即用型液體或必須首先重建的粉末狀培養(yǎng)基)、乳清或奶，以及其他。在一個優(yōu)選的實施方案中，生長培養(yǎng)基是奶。本文使用的“奶”包括但不限于牛奶、人奶、水牛奶、牦牛奶、馬奶、斑馬奶、駱駝奶、驢奶、馴鹿奶、山羊奶和綿羊奶。在一個優(yōu)選的實施方案中，奶是牛奶。本文使用的“奶”可以是全奶(約3. 5% (w/w)乳脂)、脫脂奶(少于0.5% (w/w)乳脂)、半脫脂奶(1.5-1.8% (w/w)乳脂)、低脂奶(約(w/w)乳脂)、減脂奶(約2% (w/ w)乳脂)、包含6-17% (w/w)干奶固體的奶蛋白質濃縮物，或任何其他種類的奶。其可以是經(jīng)巴氏消毒或非巴氏消毒的和/或濃縮的(例如通過UF濃縮的奶)或非濃縮的奶和/或天然或重建的奶?？稍谙蚺囵B(yǎng)基中引入微生物細胞之前對生長培養(yǎng)基進行熱處理。合適的熱處理包括但不限于 巴氏消毒方法，如高溫/短時間(HTST)巴氏消毒(將培養(yǎng)基例如奶加熱至71°C 到75°C的溫度，保持例如約15到30秒)；超高溫(UHT)巴氏消毒(將培養(yǎng)基例如奶加熱至約135°C或更高的溫度，保持例如約1-2秒)；分批或大桶巴氏消毒(將大批培養(yǎng)基例如奶加熱至典型地63°C的溫度保持30秒，之后迅速冷卻至約4°C)；更高加熱/更短時間(HHST) 的巴氏消毒(培養(yǎng)基例如奶的巴氏消毒，其在時間和溫度方面位于HTST和UHT之間)。熱處理后應當將生長培養(yǎng)基的溫度調節(jié)至適合細胞增殖的溫度。在一個實施方案中，在溫度和/或PH控制下進行孵育步驟?？梢詢炔亢?或外部進行PH控制，優(yōu)選外部pH控制。內部pH控制包括但不限于緩沖劑的使用。外部pH控制包括但不限于水性氨、氫氧化鈉或其他食品級苛性堿的添加。PH被控制在約5或更高，優(yōu)選地在5. O和6. 5之間的pH下。更優(yōu)選地，pH被控制在5. 5和6. 5之間，最優(yōu)選地在5. 8和 6. O之間。 在發(fā)酵劑接種罐或管中完成批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物的制備。優(yōu)選地，對罐或管消毒，即清潔并用殺菌消毒劑溶液例如次氯酸鈉處理。在一個實施方案中，批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物的制備在包含10到100，000升生長培養(yǎng)基，優(yōu)選地100到10，000升生長培養(yǎng)基的大規(guī)模發(fā)酵罐中進行。本發(fā)明的另一方面涉及制造經(jīng)發(fā)酵的制品的方法，所述方法包括以下步驟使用經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物或從中獲得的批量發(fā)酵劑，將它們中的一種添加至底物，并允許其將底物發(fā)酵，以生產(chǎn)經(jīng)發(fā)酵的制品。當?shù)孜锸侨槔夷虝r，(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物可以以下述用量被添加至底物，所述用量的范圍從0. (w/w)到5% (w/w)，優(yōu)選地從0.2% (w/w)到 2.0% (w/w) 0添加的量取決于應用，即要制造的乳酪類型。對底物添加(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物可以在其制備后立即完成；然而，添加至底物之前，(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物也可以被儲存例如1到72小時。儲存優(yōu)選地在冷卻至例如4°C下完成。在添加步驟中，在有利于(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物中微生物細胞(例如乳酸細菌細胞)代謝活性的條件下孵育底物，從而獲得預期的和想要的經(jīng)發(fā)酵的制品。本發(fā)明還涉及制造食物或飼料制品的方法，所述方法包括對食物或飼料制品起始材料添加根據(jù)本發(fā)明的(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物，并將由此接種的起始材料保持在下述條件下，所述條件下(批量)發(fā)酵劑培養(yǎng)物中微生物細胞(例如乳酸細菌)是有代謝活性的，即具有酸化活性。底物可以是食物底物例如大豆底物，肉底物，面包房、酒、飲料、果汁或蔬菜制品的底物或乳品店底物，例如奶。典型地，經(jīng)發(fā)酵的制品是乳類食品或乳類食品衍生的制品，例如乳酪、酸奶、黃油、凝乳(quark)、酸奶油、熟奶油(matured cream)、嬰兒奶、奶油甜點、冰激凌、經(jīng)接種的甜奶(inoculated sweet milk)、酪乳(buttermilk)、酸奶酒、酸馬奶酒、奶飲料、經(jīng)發(fā)酵的基于乳清的飲料、經(jīng)發(fā)酵的奶或飲用型酸奶。還在另一實施方案中，本發(fā)明因而提供了本文所述的經(jīng)發(fā)酵的培養(yǎng)物濃縮物或可如本文所述獲得的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物用于生產(chǎn)經(jīng)發(fā)酵的乳制品的用途。在一個優(yōu)選的實施方案中，經(jīng)發(fā)酵的乳制品是乳酪或酸奶。本發(fā)明還提供了用于制備經(jīng)發(fā)酵的乳制品的方法，包括對奶添加本發(fā)明的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物或可如本文所述獲得的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物，并對奶施加條件，從而生產(chǎn)經(jīng)發(fā)酵的乳制品。在一個優(yōu)選的實施方案中，經(jīng)發(fā)酵的乳制品是奶酪或酸奶。還在另一實施方案中，本發(fā)明提供了甘油和纖維素用于預防/避免/消除低于-40°C的溫度下液體組合物例如包含微生物(如乳酸細菌)的液體組合物冷凍的用途。
實施例為了闡述本發(fā)明，提供了以下的實施例。這些實施例不旨在限制本發(fā)明的范圍。實施例1根據(jù)本發(fā)明的組合物的冷凍模式該實施例展示了處于-70°C的溫度下時，用包含甘油的標準組合物配制的培養(yǎng)物濃縮物和用根據(jù)本發(fā)明的組合物配制的培養(yǎng)物濃縮物的冷凍模式。
標準組合物包含約64wt%的甘油，約33wt%的酵母提取物，約0. 8wt%的硫酸亞鐵，并且補充水至100的百分比。根據(jù)本發(fā)明的組合物包含約63wt%的甘油，約29襯％的酵母提取物，約0. 9wt%的硫酸亞鐵，約1. 2wt%的纖維素，約4. 2wt%的果糖，約0. 2wt%的谷氨酸單鈉，并且用氫氧化銨溶液(約29% w/v)補充至100的百分比。在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)嗜溫乳酸細菌，將其離心，并用上清液將獲得的濃縮物重構，獲得包含約IxIO11CfuAil的濃縮的培養(yǎng)物濃縮物。將每種組合物與一部分培養(yǎng)物濃縮物以2 1的比例(即2份組合物比1份培養(yǎng)物濃縮物)混合。配制物的pH為6. 0。
接著，用在標準組合物中配制的4kg培養(yǎng)物濃縮物填充一個袋子，用在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的4kg培養(yǎng)物濃縮物填充一個袋子，并將兩個袋子均置于-70°C冰箱中。 冷卻過程期間測量組合物的溫度。結果展示于圖1中。在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的培養(yǎng)物濃縮物證實連續(xù)的溫度降低，而在標準組合物中配制的培養(yǎng)物濃縮物顯示在約_23°C下的平臺，表明其在這一溫度下經(jīng)歷了相位改變(例如冷凍/形成冰)。圖1清楚地顯示，在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的培養(yǎng)物濃縮物在冷卻至約-70°C的溫度期間不經(jīng)歷相位改變。圖1還顯示對在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制的培養(yǎng)物濃縮物而言，總體冷卻速率更快。當組合物含有48wt% (代替約64wt%)甘油時，獲得了相同的結果。實施例2溫度波動時用根據(jù)本發(fā)明的組合物或用標準組合物配制的培養(yǎng)物濃縮物的穩(wěn)定性和酸化活性該實施例展示了用包含甘油的標準組合物配制培養(yǎng)物濃縮物的酸化活性，和用根據(jù)本發(fā)明的組合物配制的培養(yǎng)物濃縮物的酸化活性。標準組合物包含約64wt%的甘油，約33wt%的酵母提取物，約0. 8wt%的硫酸亞鐵并用水補充至100的百分比。根據(jù)本發(fā)明的組合物包含約63wt%的甘油，約29wt%的酵母提取物，約0. 9wt%的硫酸亞鐵，約1. 2wt%的纖維素，約4. 2wt%的果糖，約0. 2wt%的谷氨酸單鈉，約0. 2襯％的硅酮消泡劑，并且用氫氧化銨溶液(約29% w/v)補充至100的百分比。在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)嗜溫乳酸細菌，將其離心，并用上清液將獲得的濃縮物重構，獲得包含約IxIO11CfuAil的濃縮的培養(yǎng)物濃縮物。將獲得的培養(yǎng)物濃縮物以1 1的比例與標準組合物混合，或者以2 1的比例與根據(jù)本發(fā)明的組合物混合(即2份根據(jù)本發(fā)明的組合物比1份培養(yǎng)物濃縮物)，置于塑料杯中并直接置于-70°C冰箱中。配制物的pH 為 6. 0。對乳酸細菌施加以下溫度波動3天_70°C ；2天_20°C ；2天_70°C ；2天_20°C ；和 1天-70°C。之后，將它們從冰箱中取出并檢驗活性。測量乳酸細菌的活性之前即刻用冷RSM培養(yǎng)基5x稀釋用標準組合物配制的培養(yǎng)物濃縮物，而用根據(jù)本發(fā)明的組合物配制的培養(yǎng)物濃縮物用冷RSM培養(yǎng)基3. 3x稀釋。這產(chǎn)生了 IOx稀釋的培養(yǎng)物濃縮物?；旌辖?jīng)稀釋的培養(yǎng)物濃縮物直至均勻，立即檢驗酸生產(chǎn)。按照下文所述測定酸化活性用1. 5% (ν/ν)或3. 0% (ν/ν)經(jīng)稀釋的培養(yǎng)物接種冷的2% -脂肪的UHT-巴氏消毒奶，將經(jīng)接種的奶在31°C下孵育2. 5小時，然后測量奶的 PH改變(與未經(jīng)接種的奶相比)。
表1中展示的活性數(shù)字代表由培養(yǎng)物的酸生產(chǎn)導致的，2. 5小時后奶pH的降低 (ΔρΗ/2. 5小時)。新鮮制備的培養(yǎng)物的酸化活性對1. 5% (ν/ν)接種而言為1. 47，對3% (ν/ν)接種而言為1.82。結果證實與用標準組合物配制相比，用根據(jù)本發(fā)明的組合物配制時，施加十天到若干溫度波動(_20°C和-70°C之間)的乳酸細菌的酸化活性更高。在根據(jù)本發(fā)明的組合物中配制時，與新鮮制備的乳酸細菌沒有差異。這顯示與根據(jù)本發(fā)明的組合物組合時微生物是穩(wěn)定的，即使在極端的溫度條件下也是穩(wěn)定的。用不同的菌株重復實驗。 菌株顯示相似的表現(xiàn)。表1 在10天的時間段期間施加溫度波動后，用標準組合物或根據(jù)本發(fā)明的組合
物配制的乳酸細菌培養(yǎng)物濃縮物的酸化活性。
權利要求
1.微生物活化和/或微生物穩(wěn)定化組合物，所述組合物包含 -酵母提取物，-多糖，和 -防凍劑。
2.根據(jù)權利要求1的組合物，還包含鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合。
3.根據(jù)權利要求1或2的組合物，特征是所述組合物包含 -5-45wt%酵母提取物，-0. 5-2.糖，和-20-80wt%K凍劑， 其中這些化合物的總百分比是100。
4.根據(jù)權利要求3的組合物，其還包含0.l-10wt%的鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合， 并且其中這些化合物的總百分比是100。
5.根據(jù)權利要求1到4中任一項的組合物，特征是所述組合物在_60°C到_20°C的溫度下是液體。
6.用于制備經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物的方法，所述方法包括將根據(jù)權利要求1到5中任一項的組合物與培養(yǎng)物濃縮物合并，任選地，混合所述化合物和/或包裝所述經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物和/或將溫度降低至-80°C或到-20°C。
7.根據(jù)權利要求6的方法，特征是所述培養(yǎng)物濃縮物包含乳酸細菌。
8.經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物，其包含根據(jù)權利要求1到5中任一項的組合物和(發(fā)酵劑) 培養(yǎng)物濃縮物。
9.包含以下的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物 -2. 5-39wt%的酵母提取物，-0. 25-2.多糖，-10-70wt%的防凍劑，和 -15-70Wt%的培養(yǎng)物濃縮物， 其中這些化合物的總百分比是100。
10.根據(jù)權利要求9的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物，其還包含0.l-10wt%的鐵、錳、鉬或鋅鹽或其任何組合，并且其中所述化合物的總百分比是100。
11.根據(jù)權利要求9或10的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物，特征是所述組合物在-60°C 到-20°C的溫度下是液體。
12.根據(jù)權利要求1到5中任一項的組合物用于活化和/或穩(wěn)定化微生物的用途。
13.用于制備批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物的方法，所述方法包括向合適的培養(yǎng)基中添加根據(jù)權利要求9到11中任一項的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物，并將所述培養(yǎng)物繁殖至想要的密度。
14.根據(jù)權利要求9到11中任一項的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物或能夠根據(jù)權利要求13 的方法獲得的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物用于生產(chǎn)經(jīng)發(fā)酵的奶制品的用途。
15.用于制備經(jīng)發(fā)酵的奶制品的方法，所述方法包括對奶添加根據(jù)權利要求9到11中任一項的經(jīng)配制的培養(yǎng)物濃縮物或能夠通過根據(jù)權利要求13的方法獲得的批量發(fā)酵劑培養(yǎng)物，并使所述奶經(jīng)歷以生產(chǎn)經(jīng)發(fā)酵的奶制品的條件。
全文摘要
本發(fā)明屬于生產(chǎn)發(fā)酵制品的領域。更特別地，本發(fā)明涉及經(jīng)改進的用于制造乳制品的組合物，特別是經(jīng)改進的批量發(fā)酵劑接種組合物和經(jīng)改進的批量發(fā)酵劑。
文檔編號A23C19/032GK102203236SQ200980143845
公開日2011年9月28日 申請日期2009年11月2日 優(yōu)先權日2008年10月31日
發(fā)明者亨德里克·路易斯·比杰爾, 蘭德爾·柯克·圖奈爾, 加里·K·伯寧罕, 布賴恩·J·奧姆 申請人:帝斯曼知識產(chǎn)權資產(chǎn)管理有限公司